Medio de cultivo BHI CALDO BHI (INFUSION CEREBRO CORAZON)
El caldo BHI medio de cultivo líquido ha sido preparado principalmente principalmente para el cultivo de microorganismos de difícil crecimiento y microorganismos de crecimiento rápido entre los que se incluyen bacterias aerobias y/o microaerolos presentes en una amplia variedad de muestras clínicas. Es un medio muy rico en nutrientes que proporciona un adecuado desarrollo microbiano. !a infusi"n infusi"n de cerebro de ternera la infusi"n de cora#"n vacuno y la peptona son la fuente de carbono carbono nitr"geno nitr"geno y vitaminas. vitaminas. !a glucosa glucosa es el hidrato hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio mantiene el balance osm"tico y el fosfato dis"dico otorga capacidad bu$er. El agar es el agente solidicante. %e utili#a fosfato dis"dico como tamp"n en el medio. El agar cerebro cora#"n mantiene los mismos principios que el caldo para el cultivo de estreptococos y otras bacterias e&igentes. 'or tratarse de un medio que contiene glucosa no es un agar sangre apropiado para la observaci"n de reacciones de hem"lisis. Caracterítica del !edio
(edio preparado) ámbar claro claro sin precipitado.
La "arra de a#aero$ioi es un recipiente ideal para reali#ar incubaciones en
anaerobiosis ya que en su soporte de acero ino&idable se pueden instalar bolsas de generaci"n de atm"sfera libre de o&ígeno. Estas *arras constan de un soporte para placas incluido en una cubeta transparente con tapa herm+tica. !as placas y los tubos sembrados se colocan dentro del soporte en el interior de la *arra *unto al sobre comercial abierto. 'ara crear la atm"sfera anaerobia se utili#a el sobre comercial que contiene una tableta de borohidrato s"dico otra de bicarbonato s"dico y ácido cítrico y un catali#ador de paladio. ,uando se a-ade agua al sobre el borohidrato s"dico bicarbonato s"dico y ácido cítrico reaccionan para formar hidr"geno y di"&ido de carbono. El catali#ador de paladio catali#a la reacci"n entre el hidr"geno y el o&ígeno presente dentro de la *arra. Esta reacci"n produce agua que se condensa en las paredes de la *arra. 'ara conrmar conrmar que que la atm"sfera atm"sfera es anaerobia se coloca dentro de la *arra un papel indicador que contiene a#ul de metileno. ste es a#ul en presencia de o&ígeno y vira a blanco en un ambiente anaerobio. M%todo de "arra & vela' %e necesita un frasco con tap"n de rosca y una
vela. na ve# sembradas las placas y los tubos se colocan en el interior del frasco *unto con la vela encendida y se cierra el frasco herm+ticamente. ,uando la vela consume todo el 01 del frasco se apaga consiguiendo una atm"sfera de *+ O, (!icroaero-ílico)'
Stre.tococcu !uta# Es una bacteria 2ram positiva anaerobia facultativa que se encuentra normalmente normalmente en la cavidad bucal humana formando formando parte de la placa bacteriana o biolm dental. Es acid"lo porque vive en medio con pH ba*o acidog+nico por metaboli#ar los a#3cares a ácidos y acid3rico por sinteti#ar ácidos a pesar de encontrarse en un medio de tales condiciones. (etaboli#a la sacarosa para producir polisacáridos polisacáridos e&tracelulares e&tracelulares 4sustancia 4sustancia la&a que facilita su su adhesi"n a las caras libres de las pie#as dentarias5 e intracelulares intracelulares 4metabolismo energ+tico5.
Reultado /ARRA DE ANAEROBIOSIS
MEDIO O0I1ENADO O0I1ENADO
2
6
I#ter.retaci3#.6 en el medio de cultivo de la i#quierda se muestran resultados positivos
debido a que esta estuvo dentro de la *arra de anaerobiosis y como la cepa sembrada tiene dichas características características de ser anaerobia facultativa por lo tanto el crecimiento se da de manera adecuada. 7 diferencia que en la imagen de la derecha no hay crecimiento alguno debido a que esta placa con la cepa estuvo en condiciones de o&ígeno y esto hace que no haya un crecimiento por las mismas características características mencionadas anteriormente anteriormente sobre la cepa de %treptococcus mutans. mutans.
Medio de tio4licolato (edio de cultivo preparado de acuerdo con la 8armacopea 9orteamericana para el control de esterilidad de productos biol"gicos y farmac+uticos. 7demás es utili#ado para cultivar microorganismos anaerobios microaer"los y aerobios y tambi+n para detectar la presencia bacteriana en materiales normalmente normalmente est+riles. Fu#da!e#to
Este medio de cultivo tiene una composici"n bastante similar a la del medio :ioglicolato sin indicador. 'ermite el desarrollo de una amplia variedad de microorganismos incluidos los nutricionalmente nutricionalmente e&igentes y se observa que las bacterias estrictamente estrictamente aerobias crecen en la parte superior mientras que las anaerobias facultativas o anaerobias estrictas crecen en las profundidades del medio. !a presencia de grupos 6%H6 4aportados por cisteína tioglicolato glutati"n etc.5 en medios de cultivos con digestos proteicos facilita facilita el aislamiento aislamiento de diversas diversas bacterias bacterias anaerobias. anaerobias. El tioglicolato tioglicolato de sodio
disminuye el potencial redo& del medio de cultivo y neutrali#a el efecto antibacteriano antibacteriano de conservadores mercuriales. mercuriales. !a resa#urina act3a como un indicador de la "&ido6 reducci"n que es de color rosado fucsia en presencia de o&ígeno y la glucosa facilita el desarrollo microbiano al brindar una buena fuente de energía. !a presencia de una ba*a cantidad de agar retarda la dispersi"n de ,0 1 y 01.
Características del medio
Medio preparado: ámbar claro ligeramente opalescente.
Resultados
MEDIO DE 5I1LICOLA5O 5I1LICOLA5O
2 I#ter.retaci3#.6 los resultados salieron con un crecimiento en toda la línea donde fue
sembrado pero no se e&pandi" por todo el tubo debido a que la cepa sembrada no presenta movilidad; movilidad; aunque aunque hubo un me*or me*or crecimiento crecimiento en la parte parte superior que inicialmente se indic" como microaerola pero por las características características del microorganismo microorganismo sembrado que es el %treptococcus mutans esta interpretaci"n seria que por ser anaerobia anaerobia facultativa facultativa tambi+n crece crece en la parte superior como como en todo el medio medio pero de manera manera lineal.
Re-ere#cia Bi$lio4r67ca
(icrobiología de alimentos industrias agrarias y alimentarias 4curso 1<<=6 1<<>5. ?isponible en) http)//@@@.unavarra.es/genmic/micalm/ http)//@@@.unavarra.es/genmic/micalm/manual manual A1
odrígue# Calera Calera 8rancisco. 'ractica de microbiología. niversidad (iguel Hernánde#. ?isponible en) http)//es.scribd.com/doc/1DD=1F/G/E%:EI!I?7?66,09:7(I97,I09
(edio de cultivo. Bacteriología general. ,atalogo <=>. ?isponible en) http)//@@@.dibico.com/chast/<=>.pdf