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Ni el Ministerio de Salud y Deporte, ni ninguna persona que actúe en su nombre se responsabiliza del uso que pudiera darse a está información.
Ficha Bibliográfica R-BO WF200 M665m No. 215 2011
Bolivia. Saluddeylaboratorios Deportes. Programa NacionalBaciloscopía./Ministerio de Control de la Tuberculosis Manual Ministerio técnico de de la red de tuberculosis: de Salud y Deportes. La Paz : Print Artes Gráficas, 2011
Depósito legal: 4- 2 - 209 - 11 P.O. I. TUBERCULOSIS II. LABORATORIOS DE SALUD PÚBLICA III. RED DE LABORATORIO IV. ESTANDARES DE REFERENCIA V. BACILOSCOPÍA
114p. : ilus. (Serie: Documentos Técnico-Normativos No.215)
VI. MANUAL VII. BOLIVIA 1. t. 2. Serie.
Manuel Técnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis Puede obtenerse información en la siguiente dirección de Internet http://www.sns.gov.bo R. M: 580 del 30 de mayo de 2011 Depósito Legal: 4-2-209-11 P.O. Elaboración: Equipo Técnico Red Nacional de laboratorios de Tuberculosis La Paz, Programa Nacional de Control de Tuberculosis - Unidad de Epidemiología - Dirección General de Servicios de Salud - Comité de Identidad Institucional - Ministerio de Salud y Deportes - 2011 © Ministerio de Salud y Deportes, 2011 Esta publicación es propiedad del Ministerio de Salud y Deportes de Bolivia, se autoriza su reproducción total o parcial, a condición de citar la fuente y la propiedad. Impreso en Bolivia
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AUTORIDADES NACIONALES MINISTRA DE SALUD Y DEPORTES Dra. Nila Heredia Miranda VICEMINISTRO DE SALUD Y PROMOCIÓN Dr. Martín Maturano Trigo VICEMINISTRO DE MEDICINA TRADICIONAL E INTERCULTURALIDAD Alberto Camaqui Mendoza VICEMINISTRO DE DEPORTES Miguel Ángel Rimba Alviz DIRECTOR GENERAL DE SERVICIOS DE SALUD Dr. Johnny Vedía Rodríguez JEFE UNIDAD DE EPIDEMIOLOGÍA Dr. José Antonio Zambrana Torrico RESPONSABLE PROGRAMA NACIONAL DE CONTROL DE TUBERCULOSIS Lic. María Lourdes Carrasco Flores DIRECTOR INLASA Dr. Walter Agreda
RESPONSABLE LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Y RED DE LABORATORIOS DE TUBERCULOSIS Dra. Mirtha Camacho
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ÍNDICE RESOLUCIÓN MINISTERIAL
Capítulo 1 Estructura y Organización
Introducción ........................................................................................... 9 Estructura Orgánica .............................................................................. 9
Funciones............................................................................................... 10
Capítulo 2 Procedimientos Bacteriológicos
Condiciones para la realización de baciloscopía ..........................26 Material necesario ..............................................................................27 Obtención de la muestra de esputo ...............................................27 Conservación de la muestra ............................................................ 29 Transporte de las muestras .............................................................. 30 Recepción de la muestra ..................................................................31 Preparación del extendido ............................................................... 31 Fijación del extendido .......................................................................33 Coloración (Técnica Ziehl Neelsen) ..............................................33 Observación microscópica ............................................................... 36 Lectura ..................................................................................................36 Reporte de resultados ......................................................................38
Limpieza microscopio .................................................................. 38 Errores dedelresultado de baciloscopía.............................................. 39
Capítulo 3 Guía de control interno de baciloscopías
Introducción ......................................................................................... 41 Objetivo ................................................................................................. 42
Sistema de aseguramiento de la calidad .........................................42 Metodología .......................................................................................... 43
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Capítulo 4 Supervisión indirecta control de calidad externo
Supervisión indirecta administrativa................................................49 Supervisión directa de laminas .........................................................50
Control de calidad externo del Laboratorio Nacional a los laboratorios Departamentales..........................................................51 Preparación de paneles de frotis para control de calidad externo del laboratorio nacional a los laboratorios Departamentales .................................................................................53 Descentralización del control de calidad .......................................54 Evaluación de resultados....................................................................56
Conducta a seguir frente a discordancias ......................................57
Capítulo 5 Supervisión directa administrativa - técnica
Definición .............................................................................................. 59 Requisitos para realizar la supervisión ...........................................59 Objetivos ............................................................................................... 60
Métodos de supervisión .....................................................................60
Capítulo 6 Normas básicas para laboratorios de nivel I
Finalidad ................................................................................................. 65 Definición .............................................................................................. 65 Laboratorio de nivel I .........................................................................66 Estructura de laboratorio .................................................................. 66 Normas de bioseguridad para el laboratorio................................ 66 Normas para uso de vestimenta ......................................................68 Recepción conservación y transporte de muestras ....................68 Recepción de pacientes......................................................................68 Transporte............................................................................................. 69 Cuidados Específicos ..........................................................................72
Anexos. .......................................................................................................75 Bibliografía .............................................................................................113
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CAPÍTULO I ESTRUCTURA Y ORGANIZACIÓN 1. INTRODUCCIÓN La Red Nacional de Laboratorios de Tuberculosis es el conjunto de servicios de laboratorio dependientes del Estado, entidades de la Seguridad Social, de Organizaciones No Gubernamentales (ONG), Universidad, servicios de salud privados y otros que efectúan diagnóstico bacteriológico de Tuberculosis y que están establecidos en todos los Servicios de Salud del país, que ejecutan técnicas y procedimientos normalizados dirigidos a apoyar el diagnostico y control de la tuberculosis en todos los niveles de atención en salud.
2.
ESTRUCTURA ORGÁNICA
a) Estructura Administrativa Gerencial Para su funcionamiento la Red de Laboratorios de Tuberculosis desde el punto de gerencia y gestión tiene la siguiente estructura: 1 Laboratorio de Referencia Nacional de control de la Tuberculosis.
•
•
9 Laboratorios de Referencia Departamental de control de Tuberculosis ubicados en cada capital de Departamento. Laboratorios operativos
•
b) Estructura Técnico Operativa De acuerdo a la complejidad, equipamiento, material y disponibilidad de recursos humanos se tiene los siguientes niveles de organización. •
9
Laboratorio de Nivel III, Establecido en el Instituto Nacional de Laboratorios de Salud (INLASA).
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•
•
•
•
Laboratorios de Nivel II, laboratorios que tienen capacidad para realización de cultivo en Lowenstein Jensen, Stonebrink y realización de baciloscopías, establecidos en área urbana, periférica o área rural. Laboratorios de Nivel I, urbanos y rurales que efectúan baciloscopías, y/o siembra para aislamiento de micobacterias en medio de Ogawa. Puestos de Diagnóstico, que corresponden a servicios que efectúan solo baciloscopías. Puestos de extendido y fijación de muestras, que realizan extendido y/o coloración de muestras de esputo para baciloscopía.
c) Estructura Orgánica de la Red de Laboratorios de Tuberculosis 10 Cada nivel de gestión y gerencia cuenta: • •
Nivel Nacional Una Jefatura. Nivel Departamental: Jefatura de Laboratorio en cada Laboratorio Departamental. 3. FUNCIONES
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a) Funciones Técnico - Gerenciales del Laboratorio de Referencia Nacional Cumple las funciones de Dirección de la Red Nacional de Laboratorios de Tuberculosis, ejecutando funciones de normalización técnica y administrativa, que incluye consolidación y análisis de información generada por la Red de Laboratorios además de investigación básica y epidemiológica.
Funciones Técnico - Operativas FUNCIONES TÉCNICAS • •
Estandarización y validación de nuevas pruebas de diagnóstico Realización de Pruebas de sensibilidad y resistencia.
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• • • •
Tipificación de micobacterias. Pruebas bioquímicas. Pruebas enzimáticas. Investigación.
PERSONAL Deberá contar con: • • • • • •
3 Bioquímicos 2 Técnicos superiores 2 Técnicos medios 2 Auxiliares de laboratorio 1 Secretaria 1 Mensajero
11
Las funciones específicas del personal son: Bioquímicos: • • •
• •
• • • •
•
• •
• •
Organización la red y el servicio. Validación de de técnicas. Elaboración de normas técnicas y documentación del sistema de aseguramiento de la calidad. Elaboración de normas administrativas. Monitoreo de la Red departamental de Laboratorios de tuberculosis. Evaluación periódica interna. Análisis de la información de nivel nacional. Formulación de proyectos de investigación. Ejecución de sistemas de control de calidad interno y externo de baciloscopías. Ejecución de sistemas de control de calidad interno y externo de cultivos. Supervisión interna. Supervisión nacional a los Laboratorios Departamentales de Tuberculosis y Laboratorios de área urbana y rural. Planificación de revisiones bibliográficas. Revisión de avances y actualizaciones.
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• • • •
• •
Diseño de Programas de capacitación. Diseño de Sistemas de Evaluación Nacional. Formulación de recomendaciones. Elaboración de informes escritos para nivel nacional y departamental. Programación de actividades nacionales e internacionales. Programación gestión y distribución de requerimientos e insumos para la Red de Laboratorios y sus componentes.
Técnicos Superiores •
• •
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• • • • • • • •
•
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• •
•
Cumplimiento y aplicación de disposiciones internas emanadas de la Jefatura del Laboratorio. Realización de Técnicas validadas y normalizadas. Preparación y organización del material de laboratorio. Recepción de muestras. Registro de datos. Acúmulo de información. Elaboración de resultados. Análisis de la información de nivel nacional. Elaboración normas técnicas. Participar ende actividades de investigación. Capacitar a recursos humanos de puestos de diagnóstico y extendido. Cumplimiento del sistema de control de calidad interno y externo. Revisión de avances y actualizaciones. Colaborar en la elaboración de informes nacional y departamental. Monitorear el programa MAREMI
Técnicos Medios • • • • • •
Kárdex de materiales y reactivos Preparación de material. Esterilización de material. Preparado de material para reactivos. Limpieza y control de los equipos. Acondicionamiento de los ambientes.
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Auxiliar de Laboratorio • • • • • •
• • • •
Limpieza de los ambientes de laboratorio. Quemado del material contaminado. Lavado de material. Preparación de material utilizado en laboratorio. Esterilización de material. Eliminación de desechos de laboratorio de acuerdo a clasificación y previo tratamiento. Preparación de baterías para procesos de muestras. Almacenamiento adecuado del material. Ordenamiento del material y ambientes de laboratorio. Acondicionamiento de la ropa utilizada en laboratorio; Ropa de proceso de muestras y ropa de uso externo.
Secretaria • • • • • •
• •
Envío y elaboración de correspondencia. Transcripción de resultados de laboratorio Procesamiento de datos. Organización bibliográfico. Organización del del material material de escritorio. Acúmulo de documentación sobre: Actividades del Laboratorio en capacitación, Supervisión, Evaluación y Normalización. Acondicionamiento de material y equipo de escritorio. Recepción de mensajes.
Mensajero • • • • • •
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Envío de material de laboratorio. Envío de correspondencia. Franqueo de cartas, documentos, etc. Selección de documentación. Control de envío y recepción. Seguimiento de envío de insumos.
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DEPENDENCIA Y OBLIGACIONES Depende directamente del Instituto Nacional de Laboratorio de Salud y efectúa actividades coordinando en forma estrecha con el Programa Nacional de Control de Tuberculosis y los Laboratorios Departamentales de Tuberculosis.
FUNCIONES ADMINISTRATIVAS • • • • •
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• • • •
Organización y Dirección de la Red Nacional Capacitación Supervisión Evaluación y Monitoreo Programación de actividades Programación y gestión de insumos y materiales Recolección y proceso de información Análisis de datos Envío de resultados de pruebas complejas a los Laboratorios Departamentales.
b) Funciones Técnico GerencialesDepartamental de los Laboratorios de- Referencia en el Control de la Tuberculosis
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Llevan adelante la conducción, organización, implementación, inclusión y asistencia técnica a los laboratorios integrantes de la Red de Laboratorios de Tuberculosis de cada Departamento, cumpliendo, facilitando y garantizando el cumplimiento de las normas y procedimientos establecidos en el presente manual. Instaurando coordinación a niveles de Programa Departamental y Laboratorio Nacional en acciones que coadyuven la vigilancia epidemiológica de la tuberculosis.
Funciones Técnico - Operativas FUNCIONES TÉCNICAS •
Gestión y gerencia de la Red de Laboratorios de Tuberculosis de cada Departamento
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•
• •
• • •
•
•
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•
• • • • •
Gestión, administración y distribución de insumos, materiales y reactivos para garantizar el desarrollo y cumplimiento de funciones de la Red Departamental. Capacitación permanente al personal de la red de laboratorios Supervisión: Directa e indirecta y aplicación de los programas de control de calidad interno y externo. Evaluación. Programación. Coordinación con el Laboratorio Nacional de Referencia y el Programa Departamental de Control de la Tuberculosis Consolidación, análisis y envío de información, al Laboratorio Nacional de Referencia y al Programa Departamental de Control de la Tuberculosis. Envío de cepas de Mycobacterium tuberculosis en medio de cultivo para la realización de Pruebas de Sensibilidad y Resistencia al Laboratorio Nacional. Envío de cepas micobacterianas al Laboratorio de nivel II para su identificación. Programación de requerimientos de insumos para la realización de baciloscopía, cultivo, Prueba de la Niacina, Catalasa y Nitrato reducción. Participación activa en investigaciones nacionales Participación en la elaboración de Planes y estrategias del Programa Departamental. Elaboración y gestión de P.O.A. Verificación de P.O.E.S. de baciloscopías y cultivos de Mycobacterium tuberculosis en los laboratorios de la red.
PERSONAL • • • •
3 Bioquímicos 1 Técnico superior 1 Secretaria 1 Mensajero
DEPENDENCIA Dependen técnicamente del Laboratorio Nacional de Referencia y administrativamente de acuerdo al organigrama vigente de cada Ser-
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vicio Departamental de Salud, debiendo cumplir actividades en coordinación estrecha con el PROGRAMA REGIONAL DE CONTROL DE TUBERCULOSIS.
c) Funciones Laboratorios de Nivel II Son aquellos servicios que cuentan con capacidad instalada, ambientes y áreas específicas para realizar además de la baciloscopía, cultivo y pruebas de identificación micobacteriana: Prueba de la Niacina, Nitrato reducción y Catalasa para la identificación de Mycobacterias.
FUNCIONES TÉCNICAS • •
16 •
• •
•
•
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•
Recepción, identificación y registro de muestras. Realización de extendido, fijación, tinción, lectura e interpretación (según normas establecidas) Cumplir normas de bioseguridad en todo el proceso de la baciloscopía y desecho de las muestras. Capacitación de recursos humanos. Supervisión directa a los laboratorios de nivel I a requerimiento del laboratoriodeDepartamental. Realización cultivos e identificación del complejo Mycobacterium tuberculosis. Cumplimiento y aplicación de control interno y externo de Calidad. Investigación operativa a requerimiento del laboratorio departamental.
FUNCIONES ADMINISTRATIVAS • •
•
•
•
Reporte y entrega de resultados. Envío de informes mensuales y trimestrales a la cabecera de red y/o laboratorio departamental. Envío trimestral de láminas para Control de Calidad acompañado con el formulario correspondiente correctamente llenado. Solicitud de insumos y materiales de laboratorio de acuerdo a producción. Coordinar con el Laboratorio de Referencia Departamental.
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Los Laboratorios de nivel II técnicamente dependen del Laboratorio de Referencia Departamental de Tuberculosis y administrativamente del Servicio o institución donde se encuentran instalados.
PERSONAL El Laboratorio de Nivel II deberá contar con el siguiente plantel profesional: • • • •
2 Bioquímicos. 2 Técnicos Superiores de Laboratorio. 2 auxiliares de limpieza. 1 secretaria.
OBLIGACIONES •
•
•
•
•
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Cumplir las disposiciones del presente reglamento tanto en el ámbito administrativo como técnico. Ejecutar las técnicas y procedimientos del laboratorio de acuerdo a las normas de aplicación establecidas por el Laboratorio de Referencia Nacional de Tuberculosis. Cumplir con las regulaciones propias de su nivel respecto al control de calidad. Envío de cepas para la realización de pruebas de sensibilidad y resistencia, tipificación de cepas de Mycobacterias al Laboratorio Nacional de Referencia. Coordinar con el Laboratorio de Referencia Departamental de Tuberculosis.
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Material y Equipos Equipos Microscopio binocular.
Materiales / Insumos Tubos de vidrio con tapa de rosca de 16 x 125 mm
Coagulador (no Morteros necesariamente) queños
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Sistema de Registro Cuadernos de Registro de Laboratorio (cultivo y baciloscopía). pe- F o r m u l a r i o s para envío de láminas y requerimiento de ma-
terial. Incubadora Bac- Envases para Formularios de teriológica recolección de reporte de remuestras esputo sultados de baciloscopía. Determinador Pipetas Pasteur Formularios de de pH solicitud de test de sensibilidad y resistencia Cabina de Segu- Pipetas gradua- Formularios de ridad Biológica das solicitud de culClase II tivo Destilador de Matraces Erlen- Formularios de Agua meyer reporte de cultivo Balanza Digital Centrifugadora Refrigerador Pupinel
Reactivos Fosfato de potasio
Sulfato de magnesio heptahidratado
L-Asparagina
Glicerina
Verde de Malaquita Piruvato de sodio
Vasos pitado de preci- Ficha mientodedeseguicultivos Probetas de vidrio Mecheros Bunsen Embudos
Hidróxido sodio
Asa de platino Gradilla Propipetas
Bencidina Alcohol metílico Agua destilada
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de
Rojo fenol Ácido Sulfúrico Bromo
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Equipos
Materiales / Insumos
Sistema de Registro
Reactivos
Peras de goma
Glutamato de sodio
Indicador de autoclave Termómetro
Nitrato de sodio
Barbijos
Fosfato disodico
Guantes de goma
Fucsina básica
Ropa de Trabajo; batas largas para procesado de cultivo. Ollas de aluminio para material contaminado
Azul de metileno
Toallas
Alcohol etílico de 96°
Papel madera
Aceite de inmersión
Algodón
Hipoclorito de sodio
Fosfato monopotasico
Ácido clorhídrico
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Pita Gasa Papel filtro Papel estañado Marcadores Cuadernos Canastillas Arena fina estéril
d) Funciones Laboratorios de Nivel I Son aquellos servicios que realizan baciloscopía o examen microscópico de esputo, cuentanestá conenequipo, adecuados, material y personal; su ubicación funciónambientes de la necesidad, accesibilidad disponibilidad de recursos humanos, ellos efectúan:.
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FUNCIONES TÉCNICAS Recepción, identificación y registro de muestras. Realización de extendido, fijación, tinción, lectura e interpretación (según normas establecidas) Cumplimiento de normas de bioseguridad en todo el proceso de la baciloscopía y desecho de las muestras. Capacitación de recursos humanos. Supervisión directa a los puestos de diagnóstico a requerimiento del laboratorio Departamental. Realización de cultivos por el método de Ogawa Kudoh (si corresponde)
FUNCIONES ADMINISTRATIVAS 20
• •
•
•
•
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Reporte y entrega de resultados. Recepción, análisis y consolidación de informes mensuales provenientes de puestos de diagnostico. Envío de informes mensuales y trimestrales a la cabecera de red y/o laboratorio departamental. Envío de láminas Control de Calidad trimestralmente acompañado con elpara formulario correspondiente correctamente llenado. Solicitud de insumos y materiales de laboratorio de acuerdo a producción.
Dependen directamente del servicio de salud donde están establecidos y técnicamente del Laboratorio Departamental de Tuberculosis y del Programa de Control de Tuberculosis del Servicio Departamental de Salud respectivo, con los que deberán trabajar en estrecha coordinación, para cumplir sus funciones en forma óptima.
OBLIGACIONES DE LOS SERVICIOS DE NIVEL I • •
Brindar atención permanente a los pacientes de su área. Cumplir las disposiciones técnicas que rigen los laboratorios del Nivel I, tanto en medidas de Bioseguridad y procedimientos técnicos y administrativos garantizando la buena calidad de ejecución de estos.
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•
•
•
•
Cumplir con el envío de láminas positivas y negativas, de diagnóstico y control para el Control de Calidad. Enviar trimestralmente la solicitud de requerimientos para el cumplimiento de sus funciones, al momento de la entrega de la información trimestral. Participar en las actividades de capacitación e información determinadas por el Laboratorio y el Programa de Control de Tuberculosis Departamental. Capacitar a recursos humanos de puestos de extendido y fijación de láminas.
PERSONAL Debe contar con personal bioquímico y/o profesional calificado, dependiente de cada servicio de salud donde se encuentre ubicado.
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MATERIAL NECESARIO PARA LA BACILOSCOPIA Equipos Microscopio binocular
Materiales / Insumos
Sistema de Registro
Envases para Cuadernos de recolección de Registro de Lamuestras esputo boratorio (baciloscopía). Portaobjetos F o r m u l a r i o s esmerilados para llenado de información y requerimiento Algodón
Mechero
de materiales. Formularios para envío de láminas para control de calidad. Formularios de reporte de resultados de baci-
loscopía. Aplicadores de Alcohol blanco madera
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Reactivos Fucsina Fenicada (preparada)
Solución para decoloración (preparado)
Azul de metileno (preparado)
Aceite de inmersión.
Bandeja Hipoclorito de sodio al 1%
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Soporte de madera Varilla de tinción Frascos para guardar reactivo Papel absorbente Papel filtro Embudo Guardapolvos
e) Puestos de diagnóstico 22
Están encargados de realizar la recepción de la muestra, diagnóstico y seguimiento bacteriológico por baciloscopía de esputo, cumpliendo las normas establecidas.
FUNCIONES TÉCNICAS • •
•
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•
Recepción, identificación y registro de muestras. Realización de extendido, fijación, tinción, lectura e interpretación (según normas establecidas) Cumplir normas de bioseguridad en todo el proceso de la baciloscopía y desecho de las muestras. Capacitación de recursos humanos.
FUNCIONES ADMINISTRATIVAS • •
•
•
Reporte y entrega de resultados. Envío de informes mensual al laboratorio del municipio y/o cabecera de Red correspondiente Envío de láminas para Control de Calidad trimestralmente acompañado con el formulario correspondiente correctamente llenado. Solicitud de insumos y materiales de laboratorio de acuerdo a producción.
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e) Puestos de extendido y fijación Están encargados de realizar la toma de muestra, extendido, fijación y/o coloración de la misma en un portaobjeto y envío al laboratorio y/o puesto de diagnostico más próximo para la realización del diagnostico microscópico.
FUNCIONES TÉCNICAS • •
•
• •
Recolección de muestras. Realización de extendido, fijación de la muestra y/o coloración (según normas establecidas) Envío de láminas fijadas para coloración y lectura, acompañado del formulario N°1 (solicitud de baciloscopía) correctamente llenado. Desecho de la muestra de acuerdo a normas de bioseguridad. Exigir el reporte y entrega del resultado.
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PERSONAL Debe contar de condiagnóstico un Responsable que recibió capacitacióndeenlanormas técnicas y seguimiento bacteriológico tuberculosis.
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CAPÍTULO II PROCEDIMIENTOS BACTERIOLÓGICOS BACILOSCOPÍA 1.
ASPECTOS GENERALES
La identificación del Mycobacterium tuberculosis, bacilo de Koch o bacilo de la tuberculosis, causante de la enfermedad, se lo realiza mediante la baciloscopía que permite diagnosticar a las personas que eliminan bacilos al exterior que constituyen la fuente de infección y diseminación de la enfermedad. La baciloscopía es el examen básico para el diagnóstico de la tuberculosis humana, especialmente en su forma bronco pulmonar así como para el seguimiento bacteriológico del tratamiento específico antituberculoso, por su ejecución rápida, sencilla, económica y reproducible, permite lograr una amplia cobertura de diagnóstico y control del tratamiento, aun en regiones alejadas. Ejecutada en condiciones adecuadas permite visualizar a la bacteria causante de la enfermedad, que tiene la forma de bastoncillo delgado, ligeramente curvo y mide de 2 a 4 micras de largo por 0.3 a 1.5 micras de ancho. La composición lipídica de la pared de las micobacterias les confiere la característica de BAAR (bacilo ácido alcohol resistente), puestade decoloración manifiesto usado en la coloración de Ziehl que es el método en microscopía paraNeelsen, el diagnóstico directo, en muestras de esputo. Las micobacterias se colorean con la fucsina fenicada en caliente y resisten la decoloración, a pesar de la acción del alcohol ácido. Al microscopio se observa a la bacteria teñida de rojo sobre un fondo azul. Las otras especies de Micobacterias, también pueden presentar ácido-alcohol-resistencia, aunque más débil.
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Los Sintomáticos Respiratorios constituyen el grupo prioritario en la localización de casos, ya que entre ellos se encuentra la mayor parte de los enfermos baciliferos, que son la principal fuente de transmisión de la enfermedad, la mayoría concurre a los centros de salud, por distintas causas, oportunidad en que es posible su detección. Es importante el diagnóstico oportuno de la enfermedad ya que los pacientes enfermos con tuberculosis eliminan en el esputo gran cantidad de bacilos y las partículas de esputo secas, son capaces de flotar con el polvo en el aire constituyendo una fuente de infección.
2.
CONDICIONES PARA LA REALIZACIÓN DE LA BACILOSCOPÍA
a) Ambientes de Laboratorio 26 Los detalles del acondicionamiento del laboratorio variaran de acuerdo a que se realice allí otro tipo de exámenes; al tamaño de la habitación disponible y también de acuerdo a la necesidad de electricidad o de luz natural para el examen al microscopio, siendo importante quecorrespondiente. el mismo cuente con los servicios básicos y el sistema de desagüe Se debe acondicionar el laboratorio de manera que incluya mínimamente tres áreas: s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
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Un área para registro y reporte de resultados. Un área bien iluminada y ventilada para la preparación del extendido y coloración. Un área para microscopía.
El laboratorio debe contar además con: • • •
Una pileta o cubeta con agua corriente en lo posible. Una mesa o mesón cubierto con cerámica. Un guardarropa o armario cerrado.
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b) Material necesario •
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Un microscopio binocular, que esté en buenas condiciones con objetivo de inmersión. Aceite de inmersión dispuesto en frasco gotero. Porta objetos esmerilados. Aplicadores de madera. Mechero. Lápiz corriente negro. Un soporte de madera para colocar las láminas. Frascos goteros para la batería de tinción. Un frasco o envase de plástico con agua para lavado de láminas. Bandeja de metal para la recepción de muestras. Una olla de aluminio para desechar material contaminado. Libro de registro. Formulario de reporte de resultados. Guardapolvo. Jabón líquido y agua para lavarse las manos. Toalla. Papel periódico u otro de desecho para la bandejas de recepción. Un recipiente para desechar placas positivas. Cubeta con varilla para tinción. Hipoclorito de sodio. Papel absorbente suave.
c) Obtención de la muestra de esputo i) Calidad La muestra indicada proviene del árbol bronquial obtenida después de un esfuerzo de tos, pudiendo conseguirse muestra mucopurulenta, purulenta o sanguinolenta. No es útil la que se obtiene solo de la faringe o por aspiración de secreciones nasales o únicamente saliva.
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En este punto desarrolla especial participación el personal del centro de salud, que toma contacto por primera vez con el Sintomático Respiratorio, quien debe detalladamente explicar la forma correcta de obtención de la muestra.
ii) Cantidad La muestra debe contener un volumen aproximado de 5 a 10 ml. Deberá solicitarse 3 muestras para la realización del examen microscópico a todo Sintomático Respiratorio de acuerdo al siguiente orden: La primera muestra debe ser tomada al momento de la consulta, la segunda corresponde a la muestra matinal del día siguiente, y la tercera en el momento en que se entrega la segunda muestra. 28
El análisis de un número superior a 3 muestras no tiene ningún aporte significativo para el diagnóstico de la enfermedad, solo presenta, desventajas como el uso sin fundamento de materiales e insumos. En la baciloscopía directa de esputo, por término medio, una sola muestra tan solo dará el muestra 85% de positividad, muestras elde95%, por lo tanto (la segunda incrementados la posibilidad positividad en un 10%) y tres el 100%. Es por ello que se recomienda solicitar tres muestras por paciente. El enviar más de tres muestras en un seriado prácticamente no aporta beneficios adicionales.
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Para efectuar el control bacteriológico del tratamiento antituberculoso, se efectúa una baciloscopía de control mensual a partir del segundo mes hasta el sexto u octavo mes de acuerdo al esquema de tratamiento.
iii) Técnica de recolección La recolección de la muestra debe ser realizada en un lugar abierto y ventilado, utilizando un envase de plástico descartable de 50 ml. de capacidad, transparente, boca ancha y con tapa a rosca.
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La persona encargada de la recolección de la muestra debe: •
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Explicar al paciente la razón del examen y la manera de toser, de forma que la expectoración provenga de los bronquios pulmonares. Pedir al paciente que mantenga el envase muy cerca de la boca y que deposite el esputo en el interior del mismo. Se debe dar al paciente el tiempo necesario para que el mismo sienta que la expectoración obtenida provenga de una tos profunda. Verificar la calidad y la cantidad de la muestra. Recibir el envase correctamente cerrado y si se debe enviar al laboratorio hacerlo en forma inmediata y adecuada. Entregar al paciente un envase y asegurarse de que el paciente haya comprendido que debe traer la segunda muestra al día siguiente, momento que deberá obtener la tercera muestra.
d) Conservación de la muestra La probabilidad de encontrar Mycobacterium tuberculosis, está en relación directa con la calidad de la muestra que llega al laboratorio. La temperatura ambiente y el tiempo favorecen la multiplicación de gérmenes comunes y habituales de la boca, dificultando la elección de la partícula útil de la muestra, por desnaturalización de las proteínas, con probable destrucción de los bacilos, por lo que una vez obtenida la muestra esta debe procesarse cuanto antes y evitar la fermentación y putrefacción.
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Sin embargo cuando no es posible procesar la muestra de forma inmediata, se recomienda conservarla máximo por 48 horas, en un lugar fresco y oscuro para evitar fermentación o almacenar en refrigeración a 4° C evitando la congelación, para luego efectuar la técnica siguiendo las instrucciones. En caso de tener que enviarse el extendido a un laboratorio próximo, efectuar el extendido numerando correctamente la lámina, fijando la misma y observando las recomendaciones técnicas de extendido, debiendo enviar en el menor tiempo posible al laboratorio que efectuará la coloración y lectura. Luego envolver con papel cada lámina por separado y enviarla al laboratorio más cercano, adjuntando el formulario de solicitud correspondiente. 30 No olvidar rotular las láminas apropiadamente asignando el número correspondiente.
e) Transporte de las muestras En el transporte de las muestras debe tomarse en cuenta los siguientes aspectos: •
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Protegerlas del calor excesivo. Protegerlas de la luz solar. Se debe verificar el cierre correcto de cada envase Acondicionar los envases sellando las tapas con esparadrapo (tela adhesiva) para evitar que se derramen las muestras. Para el transporte es conveniente disponer de cajas de plastoformo termos u otro material resistente. Toda muestra debe ser enviada con el respectivo formulario Nº 1 de solicitud de baciloscopía, correctamente llenado.
Indicar con flecha la posición en la que debe mantenerse las cajas o los termos que contienen los envases con muestras de esputo señalando que se trata de muestra biológica para su entrega a brevedad posible, colocando una etiqueta con la dirección exacta del laboratorio.
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f) Recepción de las muestras Comprobar que los envases que contienen las muestras estén correctamente rotulados y corresponden a las solicitudes de examen. Si existe derrame del contenido, proceder a limpiar el envase con solución de Hipoclorito de sodio al 1%, si el envase llega sin contenido, mala identificación, o en malas condiciones (en estado de putrefacción, seco o contaminado con hongos), debe solicitarse una nueva muestra y notificar al establecimiento que envío las muestras. Establecer si la muestra es para baciloscopía de diagnostico o de control, registrar con el número correlativo correspondiente anotando en el libro de registro de baciloscopía y en la pared del envase. Depositar el envase de la muestra en una bandeja que tenga un papel periódico empapado con solución de hipoclorito de sodio al 1%.
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g) Preparación del extendido El lugar la realización deolos extendidos, debe ubicado en elegido un áreapara alejada de ventanas puertas abiertas paraserevitar corrientes de aire. Antes de empezar el trabajo, el personal encargado debe lavarse las manos y ponerse un guardapolvo de protección, preparar y verificar el material necesario. Todas las etapas de preparación del extendido deben ser completamente sistematizadas, así como la conservación del orden en general. 1. Colocar sobre la bandeja una hoja doble de papel periódico humedecido con hipoclorito de sodio al 1 %. 2. Colocar los envases que contienen las muestras de esputo previamente rotuladas sobre la bandeja.
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3. Numerar los portaobjetos nuevos de acuerdo al número correlativo del libro de registro de baciloscopías, con un lápiz de color negro común. 4. Ubicar el envase de la muestra detrás del mechero encendido y destapar cuidadosamente. 5. Proceder a elegir la partícula útil, que es la porción mucupurulenta de color amarillo verdoso, con un aplicador de madera. 6. Depositar la partícula útil sobre el portaobjetos y extenderla haciendo movimientos circulares, hasta lograr que el extendido sea homogéneo muy finoanilos muy grueso), 1,5 depara ancho a3 cm de largo. No (ni debe llegar bordes de ladelámina evitar que el operador se contamine al manipular. 7. Por ningún motivo debe calentarse la lamina mientras se efectué el extendido, el calor forma círculos concéntricos y precipitados granulosos. 8. Colocar la lámina con la muestra extendida sobre el mesón, de jar secar a temperatura ambiente.
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9. Terminado el extendido, descartar los aplicadores en un frasco que contenga hipoclorito de sodio al 1 %, proseguir de igual forma para las demás muestras.
h) Fijación del extendido
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Una vez secada la lámina fijar el extendido, mediante tres pases rápidos sobre la llama del mechero o con la ayuda de una flama, con el extendido hacia arriba.
i) Coloración (Técnica Ziehl - Neelsen) La técnica utilizada es la tinción de Ziehl-Neelsen, que se fundamenta en la interacción que se realiza entre los ácidos micólicos de la pared de la micobacteria con la fucsina fenicada, la decoloración tiene por objeto decolorar todos los otros elementos que componen la muestra, a excepción de la micobacteria, para luego utilizar azul de metileno como colorante de contraste o de fondo que da la posibilidad de observar al bacilo teñido de rojo sobre un fondo azul.
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- Coloración Colocar sobre las varillas de tinción, las láminas fijadas, con el extendido hacia arriba, cubrir la totalidad de la superficie del extendido con fucsina fenicada que debe ser filtrada el momento de su utilización. Calentar suavemente por debajo de la lamina, con un hisopo de algodón humedecido en alcohol, hasta la emisión de vapores, repetir el proceso por tres veces, no debe hervir la preparación .Si el volumen del colorante disminuye por evaporación, cubrir nuevamente con colorante el extendido.
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El tiempo de coloración con la fucsina fenicada es de 5 minutos, una vez fría la lámina, lavar la lamina inclinándola hacia delante dejando caer agua corriente a baja presión.
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- Decoloración Cubrir la totalidad de la superficie del extendido con la solución de alcohol ácido (ácido clorhídrico y alcohol) hasta obtener una coloración rosa pálido, de ser necesario añadir más solución decolorante, nuevamente. No exceder de dos minutos. Eliminar el decolorante, lavar nuevamente la lámina con agua a baja presión, cuidando de no desprender el extendido.
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- Coloración de fondo Cubrir la superficie del extendido con el colorante azul de metileno, dejar actuar de 30 segundos a 1 minuto. Eliminar el azul de metileno y lavar cada lámina a baja presión, por ambos lados. http://slide pdf.c om/re a de r/full/ma nua l-la bora tor io-ba c ilosc opia
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- Observación microscópica s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
La observación microscópica tiene dos objetivos importantes: 1. tente Determinar si en el extendido hay bacilos ácido alcohol resis(BAAR). 2. Establecer la carga bacilar
- Lectura •
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Depositar una gota de aceite de inmersión sobre un extremo del extendido. Bajar el objetivo de inmersión hasta visualizar el campo microscópico, enfocar y con el tornillo micrométrico obtener una imagen nítida.
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Es aconsejable seguir una pauta uniforme de observación, avanzando de izquierda a derecha del extendido y observando un mínimo de 100 campos útiles. Se considera como campo microscópico útil, aquel en el cual se observa elementos celulares de origen bronquial, (leucocitos, fibras de mucus, células epiteliales, etc.) Los campos en los que no aparecen dichos elementos no deben considerarse como campo microscópico útil. El observador ira tomando nota del número de bacilos observados y del numero de campos microscópicos a observarse, que variará según la concentración bacilar por ml. en la muestra. Si en una lámina se encuentra solo 1 a 9 bacilos en 100 campos microscópicos observados, debe ampliarse la lectura a otros campos más.
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Si persistiese el resultado, realizar otro extendido de la misma muestra e informar lo encontrado y solicitar nueva muestra. Al término de la lectura, retirar la lámina de la platina del microscopio, limpiar el aceite de inmersión del objetivo con papel absorbente suave.
- Interpretación de resultados La observación microscópica tiene dos objetivos importantes Resultado NEGATIVO
Lectura Ausencia de BAAR en la lamina , leer un mínimo de 300 campos. POSITIVO En un mínimo de 100 campos microscópicos. InNo. Bacilos :1-9 BAAR formarlos numéricamente. POSITIVO (+) 10-99 BAAR en 100 campos microscópicos POSITIVO (++) 1-10 BAAR por campo microscópico (es necesario observar 50 campos) POSITIVO (+++)
10 BAAR por campo microscópico (es necesario observar 20 campos)
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- Reporte de resultados
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El resultado de la lectura de la lámina debe anotarse en el libro de registro de baciloscopías y transcribirse al formulario No. 2 de reporte de resultados de baciloscopías, anotando con bolígrafo rojo los resultados positivos y con negro o azul los resultados negativos. Una vez finalizado el trabajo se deben eliminar las muestras envueltas en papel periódico, para luego proceder al desecho, según cualquiera de los siguientes procedimientos:
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a) Inactivación mediante el agregado de solución de hipoclorito de sodio al 1 % a cada envase. b) Inactivación en autoclave de muestras. c) Incineración de material contaminado. d) Aplicación de cal viva sobre las muestras en cantidad igual al volumen de muestra. Las láminas negativas y las láminas positivas deben guardarse cuidadosamente, previa limpieza con papel absorbente suave para enviarlas al Laboratorio Departamental para su control de calidad respectivo.
j) Limpieza de microscopio El Microscopio es un instrumento óptico de alta precisión y debe ser utilizado con mucho cuidado.
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La inspección del microscopio antes de su uso y la limpieza después de su utilización, son hábitos que contribuyen a la conservación del instrumento. Las partes ópticas y las lentes deben limpiarse cuidadosamente con un trapo de lino fino o papel absorbente suave. Nunca debe
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friccionarse el papel sobre la lente. Se debe cuidar el equipo de la humedad y el polvo ambiental para evitar la formación de hongos y la acumulación de polvo y pelusas. El microscopio debe estar cubierto con una funda, alejado de la humedad y reactivos. La reparación del microscopio debe ser realizada por personal especializado con la finalidad de garantizar que el equipo mantenga su eficiencia y precisión. El personal de laboratorio nunca debe desarmar el microscopio para realizar limpieza o reparación. La superficie exterior de los oculares debe limpiarse diariamente. Recordar que tanto los párpados como las pestañas tienen grasa y al apoyarnos sobre los oculares, las lentes pueden ensuciarse; para la limpieza debe utilizarse papel suave o un paño de lino fino.
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El de suave inmersión debe limpiarse después de cada lectura,objetivo con papel humedecido con alcohol blanco de 96º GL para eliminar el aceite. Por ningún motivo la lente de inmersión quedara sin limpiarse. Se debe verificar el voltaje antes del uso de cada microscopio. Realizar mantenimiento por lo menos una vez al año.
• •
3.
ERRORES EN RESULTADOS DE BACILOSCOPÍA
a) Inherentes a la muestra • • • •
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Muestra no representativa, de mala calidad. Muestra recogida en un momento inadecuado. Muestra en cantidad insuficiente. Muestra mal conservada (licuefacción de la partícula útil, bacteriólisis). Muestra en envases reutilizables.
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b) Inherentes al operador - Falsos Negativos La mala selección de la partícula útil. Extendidos finos, gruesos o poco homogéneos. • • • • • • • • • •
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Calentamiento deficiente. Mala decoloración de fondo. Decoloración excesiva. Uso de microscopio en mal estado. Lectura de un número insuficiente de campos. Observación de un solo nivel de extendido. Confusión de muestras y/ o extendido. Errores en transcripción de resultados.
- Falsos Positivos Uso de porta objetos sucios o rayados. Fijación de extendidos húmedos a temperaturas superiores a 60 grados. Calentamiento excesivo. Precipitación de cristales por uso de reactivos no filtrados. • •
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Uso microscopio mal estado. Pocadecapacidad paraendiferenciar bacilos de artificios de coloración. Transferencia de bacilos de un extendido a otro, varilla de aceite de inmersión. Confusión de muestras. Errores de transcripción de resultados.
b) Inherentes a la técnica - Falsos Negativos Cantidad insuficiente de la muestra (limite de sensibilidad: 5.000 a 10.000 bacilos / ml ). •
- Falsos Positivos Baja especificidad de BAAR que pueden ser no patógenos y Nocardia. •
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CAPÍTULO III GUÍA DE CONTROL INTERNO DE BACILOSCOPÍAS 1. INTRODUCCIÓN En Bolivia país con incidencia elevada de tuberculosis (TB), el exámen microscópico directo a partir del esputo continúa siendo el instrumento básico aplicado para diagnosticar la tuberculosis y efectuar el seguimiento bacteriológico al tratamiento específico. El Programa Nacional de Control de Tuberculosis, dispone en su estructura de la Red Nacional de Laboratorios, establecida en todo el país, y constituida por laboratorios que efectúan bacteriología de Tuberculosis, organizados por niveles, siendo la base de la estructura los 498 laboratorios operativos, dependientes de los 9 Laboratorios Departamentales, los que a su vez se encuentran bajo la dirección técnica del Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis. Para cumplir sus funciones se dispone de Manuales Técnicos y administrativos, que garantizan el funcionamiento y calidad técnica de cada uno de los componentes. El método implementado con mayor cobertura a nivel nacional es la baciloscopía, que permite apoyar las acciones del PNCT, el mismo se realiza bajo normas técnicasy establecidas, quela imponen el desarrollo de un sistema permanente sistemático de calidad mediante procedimientos consensuados para su aplicación a nivel nacional. Desde la constitución de la Red Laboratorios se efectúa en cada departamento el control de calidad indirecto de las láminas producidas en todos los laboratorios miembros de la Red, la definición de metodología aplicada ha surgido de la necesidad de garantizar la calidad de los resultados. El sistema requiere ajustes para continuar mejorando la calidad de trabajo de búsqueda y control de pacientes con Tuberculosis, razón por la que se ha visto la necesidad de incorporar
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conceptos y procedimientos que logren el objetivo de mantener la vigilancia del método a nivel nacional, con documentos e instrumentos aprobados por los mismos ejecutores de la actividad. Por lo que se constituye la presente guía en un instrumento importante para apoyar las funciones de los diferentes niveles de la Red de Laboratorio de Tuberculosis que efectúan control de calidad de láminas de baciloscopía.
2.
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OBJETIVO
Proveer a la Red Nacional de Laboratorios un instrumento que apoye la garantía de emisión de resultados de baciloscopías en los servicios operativos que ejecutan la técnica, mediante la aplicación permanente de procesos de vigilancia en la práctica técnica por los niveles departamentales.
3.
SISTEMA DE ASEGURAMIENTO O GARANTÍA DE CALIDAD (SAC)
Es un sistema concebido de para mejorar la fiabilidad y la eficacia de los servicios de laboratorio manera continua, comprende el control de calidad interno (CCI), control de calidad externo (CCE) y el perfeccionamiento de la calidad(PC). s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
a) Control de Calidad Interno (CCI) Es un sistema concebido para mejorar la fiabilidad y la eficacia de los servicios de laboratorio de manera continua, comprende el control de calidad interno (CCI), control de calidad externo (CCE) y el perfeccionamiento de la calidad(PC).
b) Control de Calidad Externo (CCE) Procedimiento que permite a los laboratorios participantes evaluar sus capacidades mediante la comparación de sus resultados con otros laboratorios de la red a través de la prueba de paneles y de la relectura a ciegas. Debería incluir la relectura de frotis en el sitio supervisado.
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En Bolivia se efectúa desde los niveles departamentales a los laboratorios constituyentes de la Red, y del nivel nacional a los departamentales, para verificar la calidad de los lectores de control de calidad de baciloscopía, establecidos en cada nivel departamental.
c) Perfeccionamiento de la Calidad (PC) Procedimiento por el cual los diferentes componentes de los servicios de baciloscopía son analizados con el objetivo de buscar las formas para eliminar de manera constante los obstáculos. Comprende la evaluación continua, las medidas correctivas incluyendo los talleres de reciclaje y actualización para evitar recurrencia de problemas. El PC se apoya en las visitas de evaluación en el sitio.
4.
METODOLOGÍA
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Es un sistema concebido para mejorar la fiabilidad y la eficacia de los servicios de laboratorio de manera continua, comprende el control de calidad interno (CCI), control de calidad externo (CCE) y el perfeccionamiento de la calidad(PC).
a) Control de Calidad Interno (CCI) Es un sistema concebido para mejorar la fiabilidad y la eficacia de los servicios de laboratorio de manera continua, comprende el control de calidad interno (CCI), control de calidad externo (CCE) y el perfeccionamiento de la calidad(PC).
i) Condiciones para su aplicación Esta metodología debe ser aplicada bajo condiciones muy específicas, que van a facilitar la aplicación del mismo, entre las que tenemos: •
•
• •
Un sistema de laboratorios que dirija y oriente su aplicación, beneficio y análisis de los resultados en forma sistemática. Indicadores definidos para efectuar procesos de corrección y mejoramiento Conocimiento e información del personal del laboratorio. Política de calidad establecida; métodos estandarizados respal-
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•
dados con documentos guía (manuales aprobados y validados). Planificación conjunta de aplicación del control interno.
Condición indispensable Determinación y aceptación de participar en sistemas de aseguramiento y gestión de la calidad consensuada.
ii) Estándares básicos para control interno de baciloscopía Se identifican dos aspectos: •
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• • • • • •
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•
Administrativo: relacionado con instrumentos de registro externos e internos utilizados para la aplicación del método en el laboratorio. Técnico: Referido a proceso de aplicación del método en base a definiciones establecidas. Calidad del microscopio. Calidad de los Calidad de los materiales. reactivos. Calidad de la técnica. Lectura. Interpretación. Bioseguridad.
iii) Estándares mínimos para el control de calidad interno Control de calidad del microscopio • • • •
•
•
Limpieza. Lentes y oculares (limpios y sin daño ). Verificar la utilidad del microscopio (observar laminas) Verificar la parte mecánica del microscopio (platina y fuente de luz y tornillos macro y micrométricos). Implementación de la ficha de mantenimiento en cada laboratorio. Ubicación del microscopio.
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Indicador =
N° de microscopios funcionando correctamente Nº total de microscopios
x100
Control de calidad de colorantes • • • • •
• •
Frascos (preferencia color ámbar) tapa hermética. Identificación correcta de los frascos. Almacenamiento de los frascos. Fecha de preparación de los reactivos. Fecha de recepción y numero de lote de reactivos (cuando el laboratorio recibe) . Uso de fucsina filtrada una vez por semana y/o para cada uso. Prueba de coloración de colorantes preparados (teñir lamina positiva y lamina negativa ).
Indicador =
N° de parámetros cumplidos Nº de parámetros establecidos y evaluados
x100
45
Control de calidad de la solicitud • •
Uso del formulario No 1. Llenado con claridad del formulario que RAZÓN, consigne (fecha deadecuado solicitud,y nombre y apellidos, solicitante, edad y dirección).
Indicador =
N° de formularios llenados correctamente Nº total de formularios controlados
x100
Control de calidad del cuaderno de registro Debe verificarse las hojas de registro llenadas el día en que se efectúa el control interno. Determinado por el Responsable de Calidad o Responsable de Laboratorio • • •
Llenado de datos completo. Claridad de la letra. Uso adecuado de bolígrafos (negro y rojo).
Indicador =
N° total de casillas sin errores de llenado x100 Nº total de casillas de la hoja de registro de cuaderno
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Control de calidad de recepción • • •
Bandeja con antiséptico Envase de recolección de muestra correctamente rotulado. Formulario No 1 Solicitud de examen.
Indicador =
N° de parámetros cumplidos Nº de parámetros establecidos y evaluados
x100
Control de calidad de la técnica • • • •
46
• • •
Calidad de láminas.) Limpieza y acondicionamiento Identificación clara y legible( lápiz ). Extendido de 3 x 1,5 cm, Fijado Coloración Lectura, Registro del resultado en el libro de baciloscopías.
Indicador =
N° de parámetros cumplidos Nº de parámetros establecidos y evaluados
x100
Control de calidad del reporte Llenado del reporte en formulario N º 2 (completo y en forma clara ). Fecha de reporte y firma. Entrega de resultados (registro de fecha y destinatario) •
•
s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
•
Indicador =
N° de formularios llenados correctamente
x100
Nº de total de formularios controlados
Control de calidad del desecho de material Almacenamiento intermedio de muestras procesadas, guardado, tiempo condiciones ( menor 3 días de refrigeración ) Auto clavado. Incineración. Inactivación. Desecho de acuerdo a normas institucionales. •
• • • •
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iv) Programación •
•
Cada laboratorio debe establecer la realización sistemática de control interno en cualquier momento que considere el supervisor, comunicando previamente al técnico que ejecuta la baciloscopía. Este proceso debe comunicarse por escrito e instituirse en consenso para llevar adelante con éxito la tarea.
v) Condiciones destacables Se debe considerar los siguientes aspectos para lograr la implementación. Carga de trabajo del operador. Carga de muestras procesadas. Disponibilidad de tiempo: para ejecutar en presencia del supervisado. Disponibilidad de tiempo para emitir el informe escrito. Este debe ser archivado con fines de verificación del cumplimiento del aseguramiento de la calidad. • • •
47
• •
vi) Documentos recomendados El Laboratorio debe disponer de: Manuales técnicos Formularios estandarizados Hojas de registro del control interno Cuaderno de programación Archivo de reportes Certificados de eficiencia y/o recomendaciones formuladas. • • • • • •
IMPORTANTE DETERMINAR POR LO MENOS UNA VEZ AL MES, LA REALIZACIÓN DEL CONTROL DE CALIDAD INTERNO, EL DÍA QUE DETERMINE O DISPONGA EL JEFEEL DEMISMO SERVICIO, O EL SUPERVISOR, O EN SU CASO OPERADOR.
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Tabla de evaluación de control interno de baciloscopías en la red de laboratorios de tuberculosis Servicio de Salud.………………………………………………….. Evaluador:…………………………………..fecha:………………... Nº de muestras de baciloscopías realizadas en el día de realización del control .………………………………………………….. . . . . . Operador .………………………………………………….. . . . . . . . Indicador Semana 1
Semana 2
Semana 3
Semana 4
Recomendaciones
1. Control de calidad del
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microscopio 2. Control de calidad de colorantes 3. Control de calidad de solicitud 4. Control de calidad del cuaderno de registro 5. Control calidad interno de de recepción. 6. Control de calidad de la técnica. 7. Control de calidad de reporte 8. Control de calidad de eliminación de desechos.
LOS FORMULARIOS DE REPORTE DE REALIZACIÓN DE CONTROL DE CALIDAD INTERNO, DEBEN SER ENVIADOS AL LABORATORIO DEPARTAMENTAL, CON EL INFORME TRIMESTRAL.
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CAPÍTULO IV SUPERVISIÓN INDIRECTA CONTROL DE CALIDAD EXTERNO La SUPERVISIÓN INDIRECTA puede ser de dos tipos:
1.
SUPERVISIÓN INDIRECTA ADMINISTRATIVA
Consiste en los análisis cualitativo y cuantitativo de la información estadística periódica que los servicios envían a nivel intermedio o central. A continuación se destaca el análisis de las variables más importantes. • •
• •
•
•
• •
Oportunidad de la entrega de la información. Una irregularidad en el envío de información puede indicar interrupción de las actividades o exceso de trabajo y falta de tiempo para su envío. Consistencia de la actividad. Si bien pueden existir variaciones estacionales que justifiquen altibajos en las actividades, ellas pueden también deberse a problemas en el servicio tales como disminución en la búsqueda de casos o deficiencias en el laboratorio. Variaciones en la proporción de positividad en las baciloscopías de Un diagnostico. aumento en la proporción puede significar una búsqueda muy dirigida, una disminución, un aumento excesivo del trabajo en el laboratorio con escaso rendimiento. Relación entre positivos de control y enfermos en tratamiento. En un tratamiento regular la gran mayoría de los pacientes negativizan la baciloscopía en el segundo mes (tratamientos cortos) o antes del cuarto mes (tratamiento estándar). Un porcentaje mayor de 40% de baciloscopías de control positivas puede indicar fallas en el seguimiento del paciente (supervisión) o presencia de resistencia primaria.
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Calidad de las muestras. Carga bacilar. Promedio de baciloscopías de diagnóstico y de control. Kárdex de materiales e insumos de laboratorio.
• • • •
La información remitida por los servicios debe ser analizada por el equipo supervisor del programa lo antes posible y es conveniente que los comentarios que surjan de dicho análisis se envíen prontamente al servicio. No se debería requerir ninguna información que no se vaya a analizar y comunicar adecuadamente.
2.
50
SUPERVISIÓN DIRECTA DE LAMINAS O CONTROL EXTERNO
La segunda opción para efectuar el control de calidad de laminas de baciloscopía es a través del Control de Calidad Externo que se efectúa a través del envío trimestral de láminas de baciloscopía, al Laboratorio de Referencia, para verificar la calidad del proceso y lectura efectuada por el operador. Este sistema mide ylalasensibilidad especificidad del diagnóstico determina el error eficiencia dely RRHH de los niveles operativosy y/o Departamentales.
a) Métodos s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
Para el control de calidad externo se pueden aplicar diferentes métodos: 1. Evaluación en el lugar de trabajo (supervisión). 2. Envió de láminas realizadas en cada laboratorio según normas establecidas. 3. Prueba de paneles (envío de frotis preparados y estandarizados por el Laboratorio de Referencia.
b) Modalidad En la estructura de la Red de Laboratorios de Bolivia se ha establecido tres niveles administrativos de organización el nivel nacional, nivel departamental y nivel operativo.
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El control de calidad externo debe aplicarse en forma periódica a todos los laboratorios de acuerdo a la siguiente modalidad establecida:
CONTROL DE CALIDAD EXTERNO DEL LABORATORIO NACIONAL A LOS LABORATORIOS DEPARTAMENTALES Para calificar la calidad de lectura e interpretación de control de calidad ejecutado por los niveles departamentales, el Laboratorio Nacional efectuará la ronda de control de calidad externo a los niveles departamentales de acuerdo a programación establecida previamente.
i) Condiciones Se efectúa mediante el envío de un panel de 10 láminas preparadas de acuerdo a tabla de preparación de paneles de frotis para control de calidad externo.
51
Posteriormente en un periodo de lectura establecido los resultados deben ser remitidos al Laboratorio Nacional de Tuberculosis, para su valoración. Se aplicará la siguiente valoración CADA LÁMINA CORRECTA FALSO POSITIVO FALSO NEGATIVO FALSO POSITIVO DÉBIL FALSO NEGATIVO DÉBIL ERROR DE CUANTIFICACIÓN
=10 PUNTOS = 0 PUNTOS = 0 PUNTOS = 5 PUNTOS = 5 PUNTOS = 5 PUNTOS
SE APRUEBA CON 9O PUNTOS ii) Periodicidad Se realizará en forma semestral, deben ser notificados todos los laboratorios de nivel departamental, el tiempo de envío de resultados será establecido claramente a fin de un cumplimiento óptimo.
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Para este fin cada Laboratorio Departamental enviará al Laboratorio Nacional de Referencia un panel de diez láminas elaborado para este propósito, la aplicación del mismo debe efectuarse en forma semestral. Se realizara el envío de un juego de 10 láminas preparadas en el laboratorio bajo parámetros establecidos en paneles conformados de una de las siguientes formas:
52
OPCIÓN 1
OPCIÓN 2
OPCIÓN 3
OPCIÓN 4
1 frotis cuantificado 3+ 1 frotis cuantificado
1 frotis cuantificado 3+ 1 frotis cuantificado
1 frotis cuantificado 2-3+ 2 frotis cuantificados
1 frotis cuantificado 2-3+ 2 frotis cuantificados
2+ 1 frotis cuantificado 1+ 2 frotis cuantificados 1-9 /100 campos 5 frotis negativos
2+ 2 frotis cuantificados 1+ 3 frotis cuantificados 1-9 /100 campos 3 frotis negativos
3 frotis cuantificados 1-9 /100 campos 4 frotis negativos
1+
1+ 4 frotis cuantificados 1-9 /100 campos 3 frotis negativos
Esta prueba es considerada menos efectiva porque no evalúa la calidad de los resultados de rutina del laboratorio, pero el control con paneles de frotis es útil para: Suplemento de los programas de relectura. Proveer datos preliminares de las capacidades de los laboratorios periféricos, previamente al programa de relectura. Evaluar la calidad existente de los resultados o para detectar rápidamente los problemas asociados a la baja calidad de resultados. • •
s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
•
•
•
Evaluar el impacto de la capacitación recibida a los funcionarios de laboratorio. Evaluar la calidad de los resultados cuando no hay recursos disponibles para implementar la relectura.
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CERTIFICACIÓN DE MICROSCOPISTAS Anualmente el nivel central efectuará en cada departamento la certificación de personal que efectúa baciloscopías, sujeto a condiciones establecidas: • •
Pertenecer a un Laboratorio miembro de la Red. Contar con la calificación anual de haber cumplido con el control de calidad con altos valores de sensibilidad, especificidad y eficiencia.
La evaluación se efectuará mediante la metodología recomendada en la presente guía, complementada con una evaluación teórica escrita.
CONTROL DE CALIDAD EXTERNO DE NIVEL DEPARTAMENTAL A LABORATORIOS OPERATIVOS
53
Se trata de un tipo de control de calidad de relectura a ciegas, es un procedimiento que consiste en la relectura de láminas de baciloscopía del laboratorio a controlar para evaluar su nivel de calidad. Los elementos esenciales de un de relectura preciso y práctico señalados en este manual sonsistema los siguientes: •
•
•
•
Las láminas de baciloscopías a ser controladas, serán seleccionadas de manera aleatoria, determinando el número en función a la tabla convencional. El laboratorio supervisor, llamado controlador, no dará a conocer los resultados iniciales de la baciloscopía al profesional que realizara la lectura de los frotis para evitar un sesgo en los resultados. Los resultados discordantes son resueltos por un segundo controlador. Debe existir un sistema que proporcione una continua retroinformación y mejoramiento a los laboratorios supervisados.
Este es el único método que proporciona un aseguramiento fiable de la calidad de los laboratorios de la red de microscopía de un país. Para la selección de las láminas a ser controladas se utilizará la siguiente tabla de acuerdo al método convencional:
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Nº de láminas recibidas Menor a 20 21 - 50 51 - 100 101 - 200 Mayor a 200
% de láminas enviadas (+) 100 100 100 100 100
(-) 100 100 100 100 100
% de láminas seleccionadas para control (+) (-) 100 100 50 75 25 50 15 20 10 15
DESCENTRALIZACIÓN DEL CONTROL DE CALIDAD
54
Cuando se identifique alta carga de baciloscopías producidas en la Red Departamental el Laboratorio Departamental, delegará funciones como laboratorios de apoyo al Control de Calidad, a servicios que deberán cumplir las siguientes condiciones:
•
Contar con RRHH calificado, capacitado y comprometido. Tener calificación superior a 90% en el control de calidad de
•
láminas con índices de sensibilidad, especificidad, y eficiencia óptimos. Contar con certificación de la Red Nacional de Laboratorios
•
s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
Cada laboratorio delegado, será evaluado anualmente mediante la relectura de láminas que hubiera controlado, de acuerdo a parámetros establecidos. Estos recibirán anualmente el certificado de participación como laboratorio de apoyo al Control de Calidad, determinándose la siguiente escala: Laminas controladas anualmente 360 equivalente a una carga horaria de 60 horas. En caso de haberse efectuado un número mayor de láminas se procederá al cálculo respectivo. En aquellos casos en los que el número de láminas revisadas sea menor al establecido se otorgará el certificado respectivo sin especificación de carga horaria El Laboratorio Departamental anualmente al Laboratorio NacionaldedeNivel Referencia, la nóminaenviará de Operadores Delegados que cumplieron la meta para la emisión del certificado respectivo.
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El Laboratorio delegado es aquel laboratorio nominado por el Laboratorio Departamental como laboratorio de apoyo que efectúa el control de calidad de láminas de baciloscopía, el mismo cumple requisitos como: No presentar discordancias el control de con calidad, disponer de recursos humanosen comprometidos la Red de Laboratorios de Tuberculosis.
1. PERIODICIDAD Y PRIORIDAD Cada nivel departamental efectuará la Programación anual de Control de Calidad determinando frecuencia (considerando que cada laboratorio debe ser controlado mínimamente dos veces al año) y número de laboratorios a ser controlados priorizando de acuerdo a: • •
• •
Laboratorios con recurso humano nuevo. Laboratorios que hubieran tenido resultados de control de calidad con baja sensibilidad, baja especificidad, y error mayor a 1. Laboratorios con alta o baja carga de trabajo. Laboratorios con deficiencias técnicas en el proceso de la baciloscopía.
2. METODOLOGÍA a) Conservación de las láminas. •
•
•
55
Todos los laboratorios que efectúan baciloscopía deben conservar la totalidad de las baciloscopía realizadas durante un trimestre. Para conservar las láminas se debe quitar suavemente el aceite de inmersión con papel absorbente. Posteriormente revisar la numeración o identificación y envolver cada lámina por separado. Antes del día 15 del mes siguiente las láminas se acomodan en una caja en forma ordenada y se envían junto con el formulario Nº 11 de envío de láminas correctamente llenado. ANEXO 3
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b) Lectura comparativa de laminas •
•
•
•
La lectura debe efectuarse de acuerdo a las normas y desconociendo el resultado del laboratorio supervisado. El lector debe tener amplia experiencia en lectura de baciloscopía. El número de láminas seleccionadas para la relectura se determinará aplicando la tabla convencional. Simultáneamente a la lectura efectuar un análisis técnico de la lámina referido a: Calidad de la muestra: Salival, Purulenta, Mucupurulenta y Sanguinolenta. Calidad del Extendido. •
•
a) b) c) d) e) f)
56
•
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Bueno Delgado Grueso Corto Extenso No homogéneo
(B) (D) (G) (C) (E) (NH)
Calidad de la Tinción a) Precipitado de fucsina (PF) b) Mala decoloración. (MD) c) Exceso o falta de coloración de contraste. (ECF o FCC)
•
Comparar los resultados con los enviados por el laboratorio supervisado.
EVALUACIÓN DE RESULTADOS Si se constata una tendencia a efectuar láminas con defectos técnicos (muestra, extendido o coloración) se debe hacer notar con observaciones, sugiriendo la probable razón del error, sus consecuencias y la forma de solucionarlo. Si se observa tendencia a informes cuantitativos de lecturas más ba jas o más altas que las del laboratorio supervisor se debe hacer notar.
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En caso de observar discordancia cualitativa (falsos positivos o negativos) se debe releer minuciosamente la lámina en un número mayor de campos, procurando agotar las posibilidades de error. Si al cabo de esta segunda lectura persiste la discordancia se guardará la lámina, o bien se enviará al laboratorio supervisado.
CONDUCTA A SEGUIR FRENTE A DISCORDANCIAS •
•
•
•
•
En el formulario Nº 12 de Registro de relectura de baciloscopías se marcara la discordancia solicitando al laboratorio supervisado que revise sus registros, a fin de descartar errores de identificación o transcripción. En caso de sospecha de falso positivo se debe colorear nuevamente la lámina y observarla por dos controladores. Si se mantiene el resultado se confirma el falso positivo. En caso de sospecha de falso negativo debe ser observada por un segundo controlador. Si se mantiene el resultado se confirma el falso negativo. Verificada la discordancia comunicar inmediatamente al responsable de laboratorio para el seguimiento respectivo, adjuntando el Nº discordancias 12 al informemayores emitido. (+), (++), (+++) y negatiLa formulario repetición de vo debe ser motivo de un inmediato readiestramiento de la persona responsable de la realización de baciloscopías, ya sea por una supervisión como por estadía en el laboratorio supervisor.
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CAPÍTULO V SUPERVISIÓN DIRECTA TÉCNICA ADMINISTRATIVA 1. DEFINICIÓN La supervisión es un proceso educativo recíproco, permanente, regular y planificado, que permite desarrollar conocimientos, capacidades y actitudes, manteniendo la eficacia de una red de servicios organizados, en este caso los laboratorios que efectúan técnicas bacteriológicas para el diagnostico y seguimiento de tratamiento de la tuberculosis. La actividad de supervisión implica observación, corrección, enseñanza, estímulo y nos permite: Capacitar permanentemente al personal de salud para mejorar su desempeño Motivar al trabajador para el desarrollo del trabajo Mejorar la calidad técnica de la atención y la satisfacción de los usuarios. Retroalimentar al equipo de trabajo. Reorientar la ejecución de actividades en caso necesario.
•
• •
• •
2.
REQUISITOS PARA REALIZAR SUPERVISIÓN
La persona que realiza supervisión debe reunir las siguientes características: • •
• •
Buenas relaciones personales, motivación y dedicación. Conocimientos sólidos y actualizados sobre aspectos técnicos y operacionales del Programa de Control de Tuberculosis y en especial de Bacteriología. Experiencia personal en trabajo de terreno. Flexibilidad para analizar los problemas y sugerir medidas prácticas, adecuadas y sencillas.
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Poseer grado académico acorde al nivel de supervisión que está desarrollando.
•
Para supervisar es preciso tener normas técnicas y operacionales establecidas, en las que se haya capacitado el personal y estimaciones cuantitativas de las actividades a realizar por los establecimientos de salud. La supervisión es una actividad prioritaria en el servicio de salud a fin de mantener la calidad (ver organización de los laboratorios de la Tuberculosis) y constituye una responsabilidad esencial de los niveles central e intermedio de los mismos.
3. 60
OBJETIVOS
Mantener la calidad de las técnicas y procedimientos estandarizados en las normas, por medio de la capacitación permanente, regular y controlada del personal responsable de la bacteriología de la tuberculosis.
4. MÉTODOS DE SUPERVISIÓN La supervisión puede realizarse en forma directa e indirecta.
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SUPERVISIÓN DIRECTA la cual puede ser técnica y administrativa. a) Supervisión directa Técnica y Administrativa Consiste en la visita personal a los servicios de salud que tienen laboratorio con el fin de observar directamente las condiciones de trabajo, los procedimientos técnicos y administrativos. Este método de supervisión es más efectivo, pues permite conocer en terreno los inconvenientes y solucionarlos de acuerdo a la realidad del lugar y con recursos locales. Los laboratorios Nacional y Departamentales efectuarán una programación anual que determinará el número de laboratorios
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a supervisar, la frecuencia la cual debe ser mínimamente una vez al año, ya que esta actividad debe ser regular y sistemática puesto que el contacto personal con los ejecutores de las acciones es la mejor manera de mantener la motivación y calidad técnica. Es recomendable realizar una supervisión coordinada con la supervisión del equipo supervisor del Programa de Tuberculosis u otros equipos de salud, a fin de aprovechar mejor los recursos, para tal efecto es conveniente que el supervisor conozca todas las actividades del programa a supervisar a fin de reducir el número de personas involucradas en la supervisión. Limitaciones de tiempo, movilización y viáticos hacen que se debe utilizar solo en casos de mucha necesidad, en casos de sospecha o detección de problemas a través de la supervisión indirecta, nos muestra la necesidad de efectuar una supervisión directa.
METODOLOGÍA
61
ENTREVISTAS •
•
•
Aviso previo al servicio sobre la visita. Evita desencuentros y falsas Visita impresiones al Director de del inspección. Establecimiento para informar sobre los objetivos de la visita, este paso debe incluir al Jefe de Laboratorio, en lo posible tomar contacto con el personal médico y la encargada de enfermería a fin de interiorizarse sobre la metodología de la localización de casos y las relaciones con el laboratorio. Al término de la visita efectuar, con dichas personas, una evaluación sobre lo observado, en la misma identificar las dificultades y plantear soluciones a los problemas. Las soluciones encontradas en común con los propios efectores tienen mayores posibilidades de ser implementadas.
SUPERVISIÓN DE LABORATORIO En caso de ser primera supervisión realizar una supervisión minuciosa de ambientes, materiales, equipos, técnicas, bioseguridad, evaluación de conocimientos del personal, manejo de instrumentos de registro y otros. En caso de ser supervisión a laboratorios ya supervisados anteriormente, utilizar la guía de la última supervisión con
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la finalidad de realizar seguimiento a las recomendaciones escritas y medir si se consideraron las observaciones y superaron las dificultades encontradas. El instrumento de supervisión es la GUÍA DE SUPERVISIÓN DIRECTA DE LABORATORIO, debiendo registrarse también todas las observaciones en el libro de laboratorio en la sección de Supervisión directa, con firma y sello del supervisor.
LOCAL Observar las condiciones generales de trabajo y la disposición para efectuar: 62
• • • •
La Bacteriología en las mejores condiciones. Lugar de trabajo e iluminación. Movimiento de personas. Luz y agua.
PERSONAL Disposición de los responsables para efectuar tareas de tuberculosis, conocimientos sobre el servicio, disponibilidad real de tiempo, habilidad para el trabajo en bacteriología conocimientos y cumplimiento de medidas de bioseguridad. s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
MATERIAL Y EQUIPOS Estado de uso de microscopio, autoclave, cámara o estufa de cultivo, centrifuga, agitador magnético, coagulador, refrigerador, cabinas de bioseguridad, controles periódicos de su funcionamiento y registro de los mismos (especialmente para cabina de bioseguridad, autoclave, estufa de cultivo, refrigerador y coagulador). Provisión y conservación de materiales como envases, láminas, aplicadores. Reactivos, quien les provee y si la disponibilidad es permanente.
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Coordinación con otros servicios: lugar de procedencia de las muestras, condiciones de recepción, indicación al paciente sobre la toma de muestra, lugar señalado para la toma de muestras, tiempo de entrega de resultados, recepción de resultados, conservación de muestras, sistema de derivación de muestras para efectuar técnicas más complejas.
BACILOSCOPÍA TÉCNICA En general es conveniente observar todas las etapas de la técnica. •
•
•
Extendido, identificación y calidad de laminas elección de la partícula útil, tamaño, grosor homogeneidad y superficie del extendido. Coloración, preparación (En servicios que preparan colorantes) y conservación de reactivos, proceso de coloración. Lectura e informe: Técnica de observación numero de campos observados, informe cuantitativo, relectura de láminas, conser-
vación para supervisión técnica directa. REGISTRO • • •
• •
•
•
• •
Llenado correcto de todas las casillas del Libro de laboratorio. Llenado correcto de los Formularios de solicitud de baciloscopía Llenado correcto de los Formularios de resultados de baciloscopía. Llenado correcto de los Formularios de solicitud de insumos. Llenado correcto de los Formularios de envío de control de calidad indirecto de baciloscopía. Llenado adecuado de Planillas de control de calidad interno de equipos. Recepción y archivo de los Informes de control de calidad de baciloscopías. Recepción y archivo Informes de supervisión directa. Entrega oportuna de resultados al paciente, al médico o la enfermera.
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LA SUPERVISIÓN CONSTITUYE UN MÉTODO DE CAPACITACIÓN RECIPROCA ENTRE SUPERVISADO Y SUPERVISOR CUYO OBJETIVO ES LA OPTIMIZACIÓN DE LAS ACTIVIDADES EN BENEFICIO DEL ENFERMO.
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CAPÍTULO VI NORMAS BÁSICAS DE BIOSEGURIDAD PARA LABORATORIO DE NIVEL I El presente documento establece las normas básicas de bioseguridad para la red de laboratorios de tuberculosis que facilitaran el funcionamiento articulado de los laboratorios en cuanto se refiere a las normas de bioseguridad y harán más eficiente, confiable y garantizaran los procedimientos a realizarse en el laboratorio. NINGÚN ELEMENTO DE PROTECCIÓN ES TAN NECESARIO COMO LA INFORMACIÓN, LA ORGANIZACIÓN EN EL TRABAJO, EL ESTADO DE ALERTA Y LAS MEDIDAS DE PRECAUCIÓN QUE SON MUY SIMPLES Y DE MUY BAJO COSTO. “ EL ES ORDEN Y LA MEDIDA SISTEMATIZACIÓN DEL TRABAJO LA MEJOR DE BIOSEGURIDAD “
1.
FINALIDAD
Las recomendaciones básicas de las normas de Bioseguridad es un aporte para regular diversas acciones desarrolladas en el Laboratorio del Nivel I, Puesto de Diagnóstico Básico, Puesto de Toma de Muestra. El conocimiento del mismo es de carácter obligatorio para todos los funcionarios de la Red de laboratorios de Tuberculosis.
2.
DEFINICIÓN
La bioseguridad comprende un conjunto de medidas preventivas básicas que tiene como objetivo proteger la salud humana y ambiental frente a diferentes riesgos producidos por agentes biológicos, quími-
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cos, físicos y/o factores humanos en el Laboratorio. Debe entenderse como una doctrina de comportamiento encaminada a lograr actitudes y conductas que disminuyan el riesgo del trabajador de la salud de adquirir infecciones en el medio laboral. La seguridad es un proceso de esfuerzo colectivo que funciona en la medida en que todo el personal cumpla con las normas de bioseguridad establecidas.
3.
LABORATORIO DE NIVEL I
a) Estructura del laboratorio 66
El diseño remodelaciones e instalaciones debe considerar las normas de bioseguridad y ser analizados por el personal que cumple funciones en dichos establecimientos Los pisos deben ser lisos e impermeables y con un declive suficiente que permita asear desde sectores limpios hacia sectores sucios. Las paredes deben ser lisas e impermeables con unión cóncava en pared-piso, pared-cielo y pared –pared
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Las instalaciones de agua, luz, aire y otras conexiones deben estar diseñadas de tal modo que impidan la acumulación de suciedad y faciliten la limpieza de pisos, paredes y cielos, además deben funcionar satisfactoriamente Contar con sistemas de protección que eviten la entrada y/o salida de animales y/o artrópodos.
b) Normas de bioseguridad para el personal •
El personal que trabaja con el bacilo de la Tuberculosis debe recibir un adiestramiento técnico previo que incluye una cuidadosa enseñanza sobre las medidas que deben ser adoptadas para proteger su seguridad personal y la del grupo, con el cual trabaja.
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No permitir el ingreso a un laboratorio o puesto de diagnostico, de personal que no corresponda a éste, incluso personal de la misma institución, prohibir el ingreso de familiares o niños. No utilizar ventiladores ni acondicionadores que generen movimientos de aire en el área donde se manipula material potencialmente infeccioso, mientras se está trabajando. El personal nuevo antes de incorporarse al Laboratorio o puesto de diagnóstico de tuberculosis tanto para manipular muestras como las que comparten el área física de trabajo deben ser claramente instruido acerca de cómo se transmite la tuberculosis. (personal administrativo de limpieza). El personal de laboratorio debe haber sido vacunado con la BCG. Evitar el paso innecesario del personal de un ambiente a otro durante el trabajo de laboratorio. Utilizar una bandeja con papel empapado en antiséptico (Hipoclorito de sodio al 1 %) para el depósito de muestras. Comprobar que no haya derrames en las muestras; desinfectar el exterior del envase si los hubiera. Asegurar que los envases con muestras estén siempre en posición vertical. Sistematizar el procesamiento de las muestras. Utilizar aplicadores para realizar los extendidos. Realizar movimientos lentos y suaves cuando se realicen los frotis. Disponer siempre de un frasco con hipoclorito de sodio al 1%. Trabajar con un mechero entre los envases con las muestras y el operador al realizar los extendidos. Conservar los bordes de las láminas limpios, sin muestra. Colorear las láminas tan pronto estén secas y fijadas en la llama. El personal debe someterse a un examen médico y radiológico una vez al año. Prohibido comer, fumar, tomar guardar alimentos aplicarse cosméticos ni dejar prendas de vestir dentro del laboratorio. Evitar hábitos como ser, llevarse las manos a la boca, nariz. No tocar instalaciones, material de escritorio o equipamiento del laboratorio sin antes lavarse las manos. En cualquier interrupción de trabajo el operador deberá lavarse las manos utilizando abundante agua y jabón germicida.
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Trabajar con uñas cortas y no usar anillos o pulseras durante el procesamiento de muestras. Limpiar los pisos diariamente y las paredes semanalmente con una solución de hipoclorito de sodio al 1%. No barrer ni limpiar superficies en seco, utilizar siempre un paño húmedo. No encerar. No levantar polvo al limpiar.
c) Normas para el uso de la vestimenta •
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El personal debe utilizar mandil durante todo el proceso del trabajo dentro del Laboratorio, y dejar la ropa de trabajo en el ambiente de proceso, una vez terminado éste. Todo el vestuario debe ser utilizado únicamente dentro el laboratorio, no se deberá salir con dicha vestimenta fuera del Laboratorio. Las personas que usan pelo largo deben protegerse o mantenerlo recogido y utilizar gorro. Antes de comenzar a trabajar se deberá tener el cuidado de quitarse: reloj, anillos, brazaletes, etc.
d) Recepción, conservación y transporte de las muestras La manipulación, el transporte y el envió de muestras a los laboratorios de la red de tuberculosis indebidamente embaladas entrañan un riesgo de infección para todas las personas que intervienen directamente o entran en contacto con cualquier pasaje del proceso. La manipulación incorrecta dentro del laboratorio pone en peligro no sólo a los trabajadores inmediatamente afectados sino también al personal administrativo o de secretaría y a otros auxiliares. El transporte de muestras entre laboratorios e instituciones extiende el riesgo al público y al personal de los servicios de transporte y de correo. •
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e) Recepción de los pacientes La recepción de los pacientes que entregan sus muestras debe ser organizada en un lugar de la unidad de salud ventilado o donde el aire sea renovado por algún sistema.
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Debe ser ágil de tal manera que el paciente no espere. Debe tenerse en cuenta que la permanencia prolongada de pacientes que están expectorando bacilos en una sala de espera genera riesgo de transmisión de la tuberculosis en el centro de salud a otros pacientes y al personal. El laboratorio o centro de diagnostico debe recibir las muestras durante toda la jornada de atención a los pacientes, y procesarlas inmediatamente. En el momento de recibir la muestra se deben completar los siguientes procedimientos: •
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Disponer de una bandeja exclusiva para la recepción de muestra que tenga papel periódico u otro papel embebido en solución de hipoclorito de sodio al 1 %. Comprobar que los envases de las muestras estén claramente identificados en la pared y no en la tapa y cerrados herméticamente. Verificar que estén acompañados por el formulario de solicitud de baciloscopía. Observar la calidad de la muestra a través de las paredes de envase, sin abrirlo. Si se trata de saliva o secreción nasal es conveniente recibirla porque, aun cuando no sea una muestra de buena calidad, puede contener bacilos. Registrar que es saliva en el formulario. Insistir en las instrucciones indicando al paciente la forma correcta para la recolección de muestras, hasta completar las tres muestras. En caso excepcional de no poder procesar la muestra el mismo día de la recepción se recomienda guardar la misma en el refrigerador a 4 °C hasta el día siguiente.
f) Transporte Cuando el servicio de salud no cuenta con laboratorio, el personal debe tener conocimiento a que laboratorio debe enviar las muestras. Tanto para baciloscopía como para el envió de laminas fijadas y/o teñidas, se debe establecer los días de la semana en lo que se efec-
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tuaran regularmente los envíos, el medio de transporte y el horario de salida y de llegada. Para el envió debe considerarse dos condiciones importantes: • • • •
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•
Protección del calor excesivo y de la luz solar. Eliminación del riesgo de derrame. Traslado de muestras por los medios de transporte público. El recipiente de la muestra se envolverá en material absorbente (por eje. Toallas de papel, o de tela) en cantidad suficiente para absorber todo el liquido en caso de derrame. El recipiente de la muestra, muy bien envuelto, se colocara en otro recipiente resistente (receptáculo secundario) pueden ponerse en este varias muestras envueltas. Es necesario usar material absorbente u otro material en cantidad suficiente para rellenar los huecos que queden entre los recipientes de muestras. El receptáculo secundario se embalará con material bastante sólido parea proteger el contenido de posibles daños durante el traslado. Antes de despachar las muestras, el remitente, transportista el laboratorio o destinatario, habrán hecho los eltrámites necesa-y rios para el envío, la recepción, etc. Todos los formularios, con datos sobre las muestras, cartas y otra información impresa que sirva para identificarlas o describirlas irán pegados en la parte exterior del receptáculo secundario. Por último se pegará en la parte exterior del receptáculo secundario las etiquetas correspondientes de material infeccioso, las flechas que indican la posición del receptáculo secundario, etc.
El transporte de la muestras dentro o entre laboratorios se realizará de tal modo que, en caso de caída, no se produzcan salpicaduras. Se aconseja llevarlo a cabo en cajas herméticas o neveras portátiles, estas cajas o neveras deberán ser rígidas y resistentes a los golpes, contar con materiales absorbentes en su interior y de fácil desinfección.
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Se etiquetarán o identificaran de forma oportuna y no podrán ser utilizadas para otros fines. Bajo ningún concepto se transportarán muestras en la mano, deberán utilizarse gradillas o contenedores adecuados. Todas las muestras deben ser tratadas como altamente infecciosas para evitar el posible contagio. Algunas de las fuentes de producción de aerosoles en los laboratorios son: a) La apertura de los envases de expectoración esto es esencialmente peligroso, si el esputo se ha secado entre la tapa y un lado del envase o si el envase ha sido agitado inmediatamente antes de su apertura. b) Una vez llegue la muestra los bordes del envase deberán limpiarse con algodón empapado en fenol.
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El funcionario que procesa las muestras es el responsable de desinfectar el área de trabajo antes y después de cada sesión de trabajo, con losactuar antisépticos dejando durantecomúnmente 30 minutos. utilizados para este propósito Recepción en el laboratorio que hace baciloscopía: El personal del laboratorio que recibe las muestras debe: •
•
•
• • •
Abrir la caja sobre la mesa dedicada exclusivamente para este fin. Inspeccionar las muestras controlando si se han producido derrames. Desinfectar el exterior de los envases con algodón con soluciones de hipoclorito de sodio al 1%, si se han producido pequeños derrames durante el transporte. Si el derrame ha sido masivo incinerar. Comprobar que las muestras estén bien identificadas. Desinfectar la caja con hipoclorito de sodio al 1%. Lavarse las manos.
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Notificar al servicio que derivó las muestras si se han observado inconvenientes especialmente en la calidad y cantidad de los esputos y en la forma de envío.
•
4.
CUIDADOS ESPECÍFICOS
Tuberculosis Por la alta prevalencia de tuberculosis pulmonar en el país, los traba jadores de salud con frecuencia se encuentran en contacto directo con pacientes tuberculosos, por lo tanto en riesgo de infección.
¿Qué precauciones se deben tener con respecto a la tuberculosis? 72
Es necesario que se tenga presente que: El riesgo de infección está en relación a la exposición frente al bacilo de la TBC. La entre exposición e infección está afectada por las siguientesrelación variables: Tiempo: a mayor tiempo de estar en contacto con el bacilo, mayor la posibilidad de infección
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Carga bacilar: a mayor cantidad de bacilos, mayor posibilidad de infección. Ambiente: en ambientes pequeños y con poca ventilación hay mayor posibilidad de infección.
Eliminación de envases de expectoración y otros materiales Desechar las muestras colocándolas dentro de una bolsa plástica impermeable ubicada dentro del recipiente de descarte. Al finalizar las tareas, cerrar la bolsa anudándola, tapar el recipiente y transportar el material dentro del recipiente hasta el lugar donde será incinerado. Puede ser un incinerador, una fosa al aire libre o un recipiente del
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tipo de los de gasolina vacío. Allí se deposita la bolsa. El operador debe alejarse cuando se encienda el fuego porque el humo producido por los envases plásticos es tóxico y los aerosoles que se generan peligrosos. Descontaminar el recipiente en el que se transportó el material con hipoclorito de sodio al 1% por fuera y por dentro. Otra forma de eliminar los envases y las muestras de esputo es a través de la adición de cal viva a las muestras en cantidad igual a la muestra de esputo para que pueda inactivar la muestra y se pueda desechar.
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ANEXOS
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ANEXO I PREPARACIÓN DE PANELES DE FROTIS CONTROL DE CALIDAD EXTERNO DEL PARA LABORATORIO NACIONAL A LOS LABORATORIOS DEPARTAMENTALES Se realizara el envío de un juego de 10 láminas preparadas en el laboratorio bajo parámetros establecidos en paneles conformados de una de las siguientes formas: 1 frotis cuantificado 3+ 1 frotis cuantificado 2+ 1 frotis cuantificado 1+ 2 frotis cuantificados 1-9 /100 campos
1 frotis cuantificado 3+ 1 frotis cuantificado 2+ 2 frotis cuantificados 1+ 3 frotis cuantificados 1-9 /100 campos
5 frotis negativos
3 frotis negativos
1 frotis cuantificado 2-3+ 2 frotis cuantificados 1+ 3 frotis cuantificados 1-9 /100 campos 4 frotis negativos
1 frotis cuantificado 2-3+ 2 frotis cuantificados 1+ 4 frotis cuantificados 1-9 /100 campos 3 frotis negativos
El control con paneles de frotis, es un método del control de calidad externo que puede ser usado para determinar si un funcionario de laboratorio puede realizar adecuadamente la baciloscopía. Este método evalúa la capacitación individual y no la del laboratorio en general. Esta prueba es considerada menos efectiva que la relectura porque no evalúa la calidad de los resultados de rutina del laboratorio. El control con paneles de frotis es útil para: • •
•
Suplemento de los programas de relectura. Proveer datos preliminares de las capacidades de los laboratorios periféricos previamente al programa de relectura. Evaluar la calidad existente de los resultados o para detectar rápidamente los problemas asociados a la baja calidad de resultados.
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Evaluar la capacitación de funcionarios de laboratorio luego de una formación. Evaluar la calidad de los resultados cuando no hay recursos disponibles para implementar la relectura.
•
•
Este tipo de control consiste en un panel de frotis coloreados y/o no coloreados que son enviados por el laboratorio de referencia a los laboratorios periféricos para su procesamiento, lectura e informe de los resultados. Existen un cierto número de problemas que deben tenerse en cuenta para la implementación del control con paneles de frotis, a saber: La correcta preparación de los paneles de frotis. El numero de frotis a incluir en el panel de frotis. Los tipos de frotis a incluir (coloreados o no coloreados, positivos débiles, frotis espesos o muy finos, mal coloreados). Las condiciones de transporte de los frotis a los laboratorios (correo, servicio de transporte). Los formularios para registrar los resultados de los laboratorios examinados.
• • •
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•
•
Tiempo acordado para lapara lectura informedederesultados los resultados. El criterio de evaluación unaecalidad aceptable. Planificación para entregar los informes de los resultados a los laboratorios evaluados y la implementación de las eventuales acciones correctivas. Los mecanismos para resolver los resultados discrepantes.
•
•
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•
Resultados del funcionario del laboratorio controlado
Resultados originales del controlador Negativo
1-9 BAAR/100 campos
1+
2+
3+
Correcto
FNB
FNE
FNE
FNE
1-9 BAAR /100 campos
FPB
Correcto
Correcto
EC
EC
1+
FPE
Correcto
Correcto
Correcto
EC
2+ 3+
FPE FPE
EC EC
Correcto EC
Correcto Correcto Correcto Correcto
Negativo
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Valoración: Algunos sistemas de puntaje son propuestos aquí. Es importante considerar el tipo de panel de frotis usado cuando se elige el sistema de puntaje. Un programa que utiliza frotis bien confeccionados puede tener un sistema de puntaje más rígido. Los programas nuevos pueden optar por un sistema de puntaje centrado en los Falsos Positivos Elevados (FPE) y los Falsos Negativos Elevados (FNE). Los programas con experiencia deberían evaluar con más atención los errores menores. El puntaje de aprobación será de 80 %. 1. Serie de 10 frotis, cada frotis vale 10 puntos, puntaje total posible = 100. a. Cada frotis correcto vale 10 puntos b. Cada frotis incorrecto (todo tipo de error) vale 0 c. Error de cuantificación vale 5 puntos d. Puntaje aprobación = 80
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Periodicidad.Se realizara de en nivel forma semestral, deben ser de notificados todos los laboratorios departamental, el tiempo envío de resultados será establecido claramente a fin de que los laboratorios intermedios puedan cumplir en forma optima lo establecido.
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ANEXO 2 CONTROL DE CALIDAD DE LABORATORIOS DEPARTAMENTALES A LABORATORIOS URBANOS Y RURALES Se trata de un tipo de control de calidad de relectura a ciegas, es un procedimiento que consiste en la relectura de láminas de baciloscopías del laboratorio a controlar para evaluar su nivel de calidad. Los elementos esenciales de un sistema de relectura preciso y práctico señalados en este manual son los siguientes: 80
•
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Las láminas de baciloscopías a ser controladas, serán seleccionadas de manera aleatoria, determinando el número en función a la tabla convencional. El laboratorio supervisor, llamado controlador, no dará a conocer los resultados iniciales de la baciloscopía al técnico que realizara la lectura de los frotis para evitar un sesgo en los resultados. Los resultados divergentes son resueltos por un segundo controlador. Debe existir un sistema que proporcione una continua retroinformación y mejoramiento a los laboratorios supervisados.
Un apoyo fuerte y contínuo de la partefuncionales del PNT es necesario para implementar programas de relectura y regulares. Este es el único método que proporciona un aseguramiento fiable de la calidad de los laboratorios de la red de microscopía de un país. Todos los PNT deberían esforzarse para incluir un programa de relectura a ciegas.
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MÉTODO CONVENCIONAL.-
Nº de láminas recibidas Menor a 20 21 - 50 51 - 100 101 - 200 Mayor a 200
% de láminas enviadas
% de láminas seleccionadas para control
(+) 100 100 100 100 100
(+) 100 50 25 15 10
(-) 100 100 100 100 100
(-) 100 75 50 20 15
De la misma manera los Laboratorios Departamentales, efectuaran el control anual a los Laboratorios locales, aplicando el método de paneles cumpliendo la metodología aplicada de nivel nacional a departamental.
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Se utilizaran los formularios 11 y 12 debiendo quedarse en el Laboratorio supervisor los originales, devolviéndose la copia al Laboratorio supervisado.
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ANEXO 3 FORMULARIOS RED DE LABORATORIOS DE BACILOSCOPIA Y CONTROL DE CALIDAD
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FORMULARIO 11
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FORMULARIO 12
85 Bueno (B) Delgado (D) Grueso (G) Corto (C) Extenso (E) No Homogéneo (NH)
Precipitado de Fucsina (PF) Mala decoloración (MD) Exceso o falta de coloración de contraste (ECF o FCC)
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ANEXO 4 MODELO DECONTROL NOTA DEDE INFORME DE RETROALIMENTACIÓN DE CALIDAD Documento de envío de resultados discordantes de control de calidad de baciloscopía Laboratorio Supervisor……………………Responsable…………… Funcionario Supervisado…………………………….Servicio ……… Lugar ……………………………………………..Fecha…………… 94
s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
De mi mayor consideración: A tiempo de agradecerle por la importante actividad que realiza efectuando baciloscopías en el servicio en el que cumple funciones , me permito comunicarle que después de realizado el Control de Calidad en las laminas de baciloscopías correspondientes al …….trimestre, se ha identificado discordancias mayores que disminuyen la calidad del trabajo que Usted ha estado realizando con dedicación y atención, por lo que solicito a Usted revisar las laminas que ad juntamos, a fin de corregir el factor de error que ha provocado el presente reporte. Agradeciendo su participación en el Control de Calidad que efectúa la Red de Laboratorios de Tuberculosis del …………………………….
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ANEXO 5 CRONOGRAMA DE REALIZACIÓN DE CONTROL CALIDAD EXTERNO SEGÚN PRIORIZACIÓN DE DE LABORATORIOS Lab. RRHH Nuevos
Lab. con discordancias
Lab. con baja carga
Otros laboratorios
Enero Febrero Marzo Abril Mayo
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Junio Julio Agosto Septiembre Octubre Noviembre Diciembre
Debe colocar el Servicio al que corresponde el Laboratorio y anotar el número de láminas y trimestre al que corresponde la lectura de láminas.
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ANEXO 6 TAMAÑO Y UNIFORMIDAD DEL ÁREA DE TINCIÓN POR OBSERVACIÓN MACRO Y MICROSCÓPICA FROTIS REALIZADOS CORRECTAMENTE
Dimensiones adecuadas consensuadas ende la Red de Laboratorios Tuberculosis del país.
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Láminas adecuadamente realizadas, en cuanto a dimensiones, coloración e identificación. s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
FROTIS REALIZADOS DE FORMA NO ADECUADA
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Frotis demasiado grande, no recomendable, incluso invade el área de identificación.
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Frotis demasiado grande, no uniforme, existen áreas del frotis demasiado gruesas y otras delgadas.
Frotis demasiado delgado con poca o sin muestra, donde no es posible encontrar campos microscópicos útiles.
Frotis demasiado pequeño, no cumple con las dimensiones acordadas y recomendadas en la Red de Laboratorios.
Frotis no uniforme y delgado.
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IDENTIFICACIÓN DE LAMINAS FROTIS IDENTIFICADOS CORRECTAMENTE
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FROTIS IDENTIFICADOS DE FORMA NO ADECUADA
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OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA.FROTIS REALIZADOS CORRECTAMENTE
Coloración realizada de forma correcta, se observan campos microscópicos útiles.
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Lectura de lámina de baciloscopía, se observan los bacilos teñidos de rojo sobre un fondo azul.
FROTIS REALIZADOS DE FORMA NO ADECUADA
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Coloración deficiente, existe precipitados de fucsina, y falta de decoloración.
Coloración deficiente, existe exceso de colorante de fondo, que no permite efectuar un diagnóstico correcto.
Lamina mal realizada, no existen campos microscópicos útiles, para efectuar el diagnóstico con certeza y seguridad.
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ANEXO 7 PREPARACIÓN DE REACTIVOS PARA BACILOSCOPIA Colorante primario FUCSINA FENICADA Fucsina básica 3 gramos Alcohol etílico 96º GL 100 ml Disolver por agitación, agregar 55 ml de fenol acuoso1 y dejar reposar por 24 horas. Posteriormente agitar y agregar agua destilada hasta completar a un litro.
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Decolorante SOLUCIÓN DE ALCOHOL ÁCIDO Ácido Clorhídricoo p.a. 37% 30 ml. Alcohol etílico 96 GL 970 ml Dejar escurrir el ácido por las paredes lentamente hasta completar el volumen de un litro (No pipetear el ácido). Colorante de fondo AZUL DE METILENO Azul de metileno 1 gramo Alcohol etílico 96º GL 100 ml Disolver por agitación y agregar agua destilada hasta completar un litro. Los reactivos deben trasvasarse en frascos de color ámbar, debidamente rotulados con la fecha de preparación y número de lote.
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Fenol acuoso se prepara agregando 100 ml de agua destilada a 1000 gramos de fenol cristalizado, previa fusión en Baño María. 1
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ANEXO 8 PREPARACIÓN DE HIPOCLORITO DE SODIO (LAVANDINA) AL 1%
Concentración de Hipoclorito comercial - 1 = Volumen agua Concentración deseada
Ejemplo
5 1
102
-1=4
Lo que significa que se debe utilizar una parte de hipoclorito para 4 partes de agua.
- 1 = 5,5
Lo que significa que se debe utilizar una parte de hipoclorito para 5,5 partes de agua.
Ejemplo 6,5 1
Ejemplo
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8 1
-1=7
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Lo que significa que se debe utilizar una parte de hipoclorito para 7 partes de agua.
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ANEXO 9 GUÍA DE SUPERVISIÓN DIRECTA A LABORATORIOS QUE REALIZAN BACILOSCOPIAS Red: ________________________ Nº de población: ____________ Nombre del laboratorio: __________________________________ Nombre del responsable del laboratorio: _____________________ Nombre, nivel académico y tiempo de permanencia del personal: __ ______________________________________________________ El personal del laboratorio está familiarizado con las normas del Programa Nacional de control de la tuberculosis ______________________________________________________ Nombre del supervisor: ___________________________________ Fecha de la visita: _________________________________________ Teléfono, Fax, Frecuencia: __________________________________
1. Ambientes: ¿Cuántas habitaciones tiene el laboratorio? 1 2 3 >3 ¿Hay una habitación para el diagnóstico de la TB? si no ¿Agua potable?: si no ¿Lavaplatos?: si no ¿Muebles para el almacenamiento de material, reactivos y otros? si no La mesa de trabajo es de: a) azulejo b) madera c) metal d) formica e) vidrio f) otros: ____________________________
2. Material de trabajo Envases para esputo: si
no
Porta objetos: Aplicadores de madera: Soporte de láminas:
no no no
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si si si
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Varilla para tinción de las láminas: si no, Mechero: si no Bunsen, Alcohol, Embudo: si no Papel filtro: si no Reactivos: fucsina básica: si no azul de metileno: si no Hcl- alcohol: si no ¿Dónde almacenan sus reactivos? ___________________________ _______________________________________________________ ¿En que tipo de recipientes? _______________________________ _______________________________________________________ ¿Hay aceite de inmersión? si no Microscopio: si no Marca _________________________________________________ Años de uso __________________ Estado en que se encuentra ___________________ ¿Forro de microscopio?: si no ¿Paño suave para limpiar los oculares?: si no ¿Caja para guardar los porta objetos?: si no ¿Basurero? si no,de material tiene tapa si no, parabolsa si no Calcula la necesidad trimestralmente baciloscopías si no
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3. Pasos de trabajo Recolección del esputo. ¿Se indica al paciente como debe obtener el esputo? si no ¿Quién enseña el paciente? _________________________________ ¿Entrega el paciente la muestra? si no ¿Se reciben muestras o extendidos del esputo de otros sectores? si no ¿De qué sector? _________________________________________ ¿Quién las trae? ______________________________ ¿Tiempo de transporte? ___________________ ¿Se rechaza pruebas de esputo? si no, Si es así, porque? _______________________________________ ¿Cuántas muestras se procesa para el diagnóstico? _____________________ ¿Si son menos de 3, porque? ________________________________
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¿Quién ordena las baciloscopías? ____________________________ ¿Las muestras de control se solicitan de acuerdo al PNCT? (2, 3, 5, 7, 8,meses) si no ¿En caso de ser no la respuesta porque? ______________________ Baciloscopía, extendido, tinción y microscopía. Donde se señaliza el nombre del paciente en el envase de esputo: a) en la pared si no b). en la tapa si no Para la identificación en la lámina utiliza lápiz corriente: si no La preparación del extendido la realiza con aplicador de madera si no ¿Que parte del esputo se selecciona para el extendido? ________________________ ¿El aplicador de madera, se cambia entre extendido y extendido? si no ¿Se seca el extendido antes de la coloración? si no ¿Se fija el extendido al calor? si no, cuando ________ como______________ cuantas veces _________ ¿Se filtran que reactivo? ______________________________ a) después de la preparación tinción? si no del reactivo? si no b) antes de cada ¿Cuánto tiempo se colorea? Fucsina:____ min. Azul de metileno: ___ min. ¿Se tiene que calentar la fucsina durante la coloración? si no como ___________________________________ cuantas veces ¿Se hace la decoloración con HCL- alcohol? si no, cuánto tiempo: ___________ min. ¿El tiempo de decoloración puede variar? si no, Si es así, porque? ________________________ ¿El extendido debe estar seco antes de la microscopía? si no ¿Con cuál de los objetivos se observa al baciloscopía? _____________________ ¿Se usa aceite de inmersión? si no ¿Cuánto tiempo se examina el extendido? _________min. ¿Cuántos campos se observa? ___________
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¿En caso de duda de la lectura de láminas, cuenta usted con alguien que puede confirmar su resultado? si no si es así, con quien? ______________________________________ ¿Cuándo se limpia el objetivo? ______________________________
4. Control de calidad
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¿Se envía las láminas para el control de calidad indirecto? si no ¿Cuáles, que porcentaje y con qué frecuencia? _________________ ¿Se limpia las láminas que se envía? si no, con qué? ___________________________________ ¿Se separa las láminas positivas de las negativas al guardar? si no ¿Cómo se envuelve e identifica la envoltura? ___________________ ¿Cómo se identifica la caja para el envió al control de calidad? _____ ¿Calidad del extendido? ___________________________________ ¿Calidad de la tinción? _____________________________________ ¿El “FORMULARIO DE ENVÍO DE LAMINAS PARA CONTROL DE CALIDAD INDIRECTO” esta correctamente llenado? si no ¿El de calidad se encuentra archivado?informe del resultado desi controlno
5. Registros s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
N° de S.R.________________________Pacientes BK(+)_________ Total BK realizadas___________Cumplimiento de BK por SR.____________BK (+)____________ Calidad de la muestra______________________________________ N° de Población:____________________ Se informa en el formulario “INFORME TRIMESTRAL DE LABORATORIO DE TUBERCULOSIS” el trabajo realizado? si no Se informa trimestralmente la conversión bacteriológica? si no ¿Solicita trimestralmente los insumos con el formulario “SOLICITUD TRIMESTRAL DE INSUMOS DEL LABORATORIO DE TUBERCULOSIS”? si no ¿Sino es así, porque?: ______________________________________ ¿Recibe trimestralmente el pedido completo de insumos? si no ¿Que falta y porque? ______________________________________
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¿Se lleva el libro de registro de laboratorio según las normas nacionales? si no ¿Se califica el resultado según la escala de las normas nacionales? si no ¿Todas las columnas del registro del laboratorio están llenadas? si no ¿Sino, que columna y que información está faltando? _____________ ¿Están correctamente llenadas las secciones del libro de registro? si no ¿Sino, que sección está faltando? _____________________________ ¿Quién registra los resultados? ________________ ¿Quién informa los resultados? ________________ ¿Cuánto tiempo se necesita de la recepción de la muestra hasta: obtener el resultado ______________ entregar el resultado ¿Se usa el formulario de solicitud la BK para cada paciente? si no ¿Sino, por qué? __________________________________________ ¿El formulario de solicitud de baciloscopia contiene toda la información? si no ¿Sino, que información falta? ________________________________ ¿Quién llena el formulario? _________________________________ ¿Quiéna.entrega los resultados al médico solicitante? El personal del laboratorio b. El personal de guardia c. El paciente ¿ Realiza cruce de información con el equipo de salud? Frecuencia_________________
si
no
6. Medidas de bioseguridad y desinfección. Se usa: Mandil? si no Barbijo? si no Guantes? si no ¿Cuándo se cambia los guantes? _____________________________ Se usa anillos, brazaletes etc.? si no. Se come o bebe en el área del laboratorio? si no Hay un desinfectante de manos? si no Si es así, cuál y de que concentración? ________________________ ¿Cuándo se usa? _________________________ ¿Cuándo se lava las manos? ____________________ La mesa para hacer el extendido esta puesta,
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a) junto a la ventana si no b) junto a la puerta si no Se trabaja con la puerta y/o ventana del laboratorio abierta? si no Se recolecta los envases de esputo en bandeja con papel impregnado
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con lavandina? si no Se usa un desinfectante para mesones y material de trabajo? si no Si es así, cual desinfectante y en que concentración? _____________ Que método se usa para la eliminación de los envases de esputo usados: ninguno, desinfección, quemar, pozo de deshecho, otro_______________________________ Tienen incinerador si no se lo utiliza si no por qué_____________________________ Que método se usa para la decontaminación de los mandiles? a. ninguno ………. b. autoclave ……….. c. hervir ……… d. lavado con lavandina ………… Ingresan los pacientes al área del laboratorio? si no
7. Calificación del supervisor
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1. Ambiente del laboratorio adecuado: si no Si la respuesta es no especificar porque ____________________ __________________________________________________ 2. Material del trabajo completo: si no ¿Que falta? __________________________________________ 3. Pasos de trabajo sin observación: si no ¿Especificar las observaciones? ___________________________ 4. Control de calidad indirecto sin observación: si no ¿Especificar las observaciones? ___________________________________________________ 5. Registro sin observación: si no ¿Cuál la observación? _________________________________ 6. Se cumplen las medidas de bioseguridad y desinfección: si no En caso negativo especificar porque _______________________ ___________________________________________________
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8. Evaluación.
¿Hay logros con respecto a la anterior supervisión? si no ___________________________________________________ ___________________________________________________
¿Hay la necesidad de hacer un curso de capacitación? si no
9. Recomendaciones. _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ ______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ ______________________ ______________________________
____________________ Firma supervisor
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____________________ Firma supervisado
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ANEXO 10 GUÍA DE SEGUIMIENTO DE SUPERVISIÓN DIRECTA A LABORATORIOS QUE REALIZAN BACILOSCOPIAS Nombre del supervisor: Fecha: Red y nombre del laboratorio: Nombre del responsable del laboratorio: Fecha última Supervisión: Recomendaciones de la última supervisión Ambiente: Material de trabajo: Pasos de trabajo:
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Observaciones actuales
Control de calidad: Registro:
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Medidas de bioseguridad y desinfección: Estadística: Observaciones detectadas en la Recomendaciones supervisión actual:
____________________ Firma supervisor
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____________________ Firma supervisado
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COMPROMISO DE TRABAJO DURANTE LA SUPERVISIÓN DIRECTA Día
Mes
Año
Yo................................................................................ con C.I.......................... del laboratorio de..................................................Red.................................. Realizo el siguiente compromiso de trabajo: _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________
111
con la finalidad de trabajar con la mejor calidad, cumpliendo las normas de laboratorio del Programa Nacional de Tuberculosis y aplicando recomendaciones e instrucciones recibidas durantede el curso delascapacitación, consiente que el presente será objeto seguimiento por el Laboratorio Regional TBC.
_______________________ Firma
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INFORME DE SUPERVISIÓN DIRECTA DE LABORATORIO TBC Nombre del supervisor:
Fecha:
Red y nombre del laboratorio: Nombre del responsable del laboratorio:
Observaciones Ambiente:
Recomendaciones
Material de trabajo: 112 Pasos de trabajo:
Control de calidad: Registro: s o v i t a m r o N o c i n c é T s o t n e m u c o D : e i r e S
Medidas de bioseguridad y desinfección: Estadística:
_______________________ Firma
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BIBLIOGRAFÍA.•
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FUJIKY, A. Preparación de muestras de calidad para Baciloscopía. Instituto de Investigaciones de Tuberculosis, Japón. Normas y Guía Técnica: Manual para el Diagnostico Bacteriológico de la Tuberculosis Baciloscopía. Organización Mundial de la salud. UICTER, OMS, DCD,KNCV,JATA,APHL, Control externo de la calidad de la microscopía directa. OPS/OMS, Manual de Baciloscopía parte I, Organización Panamericana de la Salud.
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