Laporan Praktikum Mikrobiologi
Hari/Tanggal: Sabtu, 18 Oktober 2014 Waktu : 0!00 " 1#!00 W$%! P&P P&P : 1! $'o $'one Wulan lan(ari (ari,, S)i, )i, M)i M)i 2! Mu*amma( +ri S! Pi +)i)ten : 1! +(e Setia-an +! M( 2! .mbun o'ita +! M(
TEKNIK ASEPTIK ASEPTIK DAN ISOLASI BAKTERI DARI POPULASI CAMPURAN elompok 4 rika S3ai(atu *inar
&#L21#105
PROGRAM KEAHLIAN ANALISIS KIMIA PROGRAM DIPLOMA INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2014 I Pendahuluan 1.1 Laa! Bela"an#
1.2 Tu$uan Per6obaan ini bertu7uan mempela7ari 6ara melakukan pengen6eran )erial (an menentukan 7umla* bakteri (alam )uatu )ampel (engan meto(e *itungan 6a-an! II Ala dan Bahan +latalat 3ang (igunakan iala* tabung reak)i, rak tabung reak)i, batang pen3ebar, pipet, 6a-an petri, (an pembakar )pirtu)! %a*anba*an 3ang (igunakan iala* P9+ Plate Count Agar ;, larutan i)iologi), )u)pen)e bakteri, (an akua(e)! III P!%&edu! Ke!$a Teknik a)eptik (ilakukan (i (ekat api pembakar )pirtu) (an *aru) )e6ara a)eptik! emu(ian (ua tabung beri)i ma)ingma)ing (H 2O )teril (an me(ia % Nutrient Broth;, (ipegang (engan )ala* )atu tangan 3ang (ipi)a*kan (engan ibu 7ari! a-at o)e (ipana)kan (ari u7ung )ampai pangkal *ingga memi7ar (an (i tunggu *ingga (ingin! e(ua tutup tabung (ibuka! Mulut tabung (ibakar )upa3a kontaminan mati! a-at o)e (i6eluplan ke (alam tabung 3ang beri)i (H 2O )teril! Setela* itu, a-at o)e (i6elupkan ke (alam me(ia 6air! Tutup tabung ti(ak bole* (iletakkan )embarangan karena (ik*a-atirkan akan terkontamina)i ole* mikroorgani)me! Sebelum ke(ua tabung (itutup, tabung (ibakar lagi pa(a u7ung mulutn3a agar kontaminan (ari pro)e) tran)er *ilang! Setela* itu, ka-at o)e (ibakar untuk membunu* bakteri )i)a! $)ola)i bakteri (ari popula)i 6amouran (ilakukan (engan 6ara me(ia P9+ Plate 9ount +gar; 3ang baru (ibagi men7a(i )empat bagian (engan menggunakan )pi(ol (ibelakang 6a-an petri untuk menan(akan gore)an kua(ran, )etela* itu ka-at o)e (ibakar *ingga memi7ar kemu(ian (ibiarkan agar agak (ingin, )etela* itu bakteri (iambil pa(a *a)il screening bakteri 3ang tela* (ilakukan, lalu )ekeliling 6a-an petri (ibakar untuk mengurangi kontaminan, )etela* itu gore)kan pa(a 6a-an petri 3ang baru (engan menggore) pa(akua(ran pertama lalu ka-at o)e (ibakar (an (i(inginkan lalu lan7utkan gore)an pa(akua(ran (ua, kemu(ian (ibakar kembali untuk gore)an ke tiga (an (ibakar kembaliuntuk gore)an pa(a kua(ran empat, )etela* itu )ekeliling 6a-an petri (ibakar (an*a)il (ari teknik a)eptik (an i)ola)i bakteri (ima)ukan ke (alam inkubator untuk(iinkuba)ikan )elama 2448 7am, )etela* itu *a)iln3a (ii(entiika)i!
I' Ha&(l Pen#a)aan dan Daa 4.1 Ha&(l Pen#a)aan %erikut ini (ata (an *a)il pengamatan 3ang (ilakukan pa(a teknik a)eptik (an i)ola)i bakteri (ari popula)i 6ampuran!
ua ma6am koloni 3ang tumbu* terban3ak
9a-an 2
%akteri ti(ak tumbu*
4.2 Pe)*aha&an Teknik a)eptik merupakan teknik (a)ar 3ang*aru) (ikua)ai ole* )eorang anali)i) mikrobiologi (alam menangani )uatu mikroba! Teknik a)eptik (ilakukan (engan pen3e(iaan alatalat ker7a 3ang )teril (an beker7a (i (ekat api bun)en agar ter*in(ar (ari kontaminan u(ara!pa(a -aktu inokula)i 7arum 3ang (igunakan untuk mein(a*kan mikroba *aru) (ipi7arkan (iata) api )egera )ebelum (an )e)u(a* melakukan pemin(a*an! Pemana)an ini meng*7an6urkan )emua bentuk ke*i(upan 3ang a(a pa(a permukaan 7arum atau alat pemin(a*an, )etela* (i inokula)i biakan bakteri (i)impan (an (iinkuba)i (alam lingkungan 3ang )e)uai untuk petumbu*an, -i(7o)eputro 200>;! Me(ia 3ang (ipakai (alam teknik a)eptik a(ala* akua(e) (an me(ia 3ang (ibuat (ari %; Natrium broth. Per6obaan ini menggunakan (H 2O )teril untuk mengu7i )eberapa a)eptik peker7aan 3ang (ilakukan karena (i (alam (H 2O )teril ti(ak ter(apat bakteri )e*ingga 7ika peker7aan ti(ak a)eptik maka me(ia % akan keru*! Ha)il per6obaan menun7ukkan ba*-a me(ia % ti(ak keru* 3ang menan(akan ti(ak a(an3a kontamina)i pa(a )aat melakukan per6obaan! Teknik pemegangan tabung me(ia 6air (an tabung (H2O )teril 3aitu berbentuk pola ? (an (ipi)a*kan (engan ibu 7ari! Hal ini bertu7uan untuk mempermu(a* (alam melakukan pemin(a*an mikroorgani)me ke tempat me(ia 3ang baru (an ti(ak a(a mikroorgani)me 3ang terbuang! Selain itu bertu7uan untuk meminimalkan ter7a(in3a kontamina)i mikroorgani)me 3ang ti(ak (iinginkan (ari u(ara ketika tabung terbuka, )e*ingga (apat (iperole* *a)il 3ang lebi* akurat! Meto(e i)ola)i bakteri (apat (ilakukan (engan beberapa 6ara! Sala* )atun3a 3ang (igunakan (alam per6obaan a(ala* meto(e 6a-an gore)! Meto(e ini mempun3ai (ua keuntungan 3aitu meng*emat -aktu (an ba*an namun ter(apat pula kelema*ann3a 3aitu bakteri anaerob ti(ak (apat tumbu*! Me(ia P9+ 3ang (igunakan ti(ak bole* terlalu pana) karena akan menimbulkan uap pa(a ka6a 6a-an petri! &ika ter(apat uap pa(a 6a-an petri, *aru) (iber)i*kan (enga ti)u 3ang )u(a* (iba)a*i (engan alko*ol @0A! =ap *aru) (iber)i*kan karena 7ika ti(ak (iber)i*kan (apat memba)a*i me(ia P9+ 3ang a(a (i (alam 6a-an! %er(a)arkan per6obaan (iperole* (ata )eperti pa(a tabel 1 6a-an 1 bakteri 3ang (igore)kan pa(a 7alur igag )emuan3a tumbu* )ubur )e*ingga ti(ak a(a 3ang terpi)a*kan! Hal ini kemungkinan (i)ebabkan ole* beberapa aktor (iantaran3a bakteri 3ang (ipin(a*kan )u(a* terkontamina)i ole* 7amur )e*ingga me(ia baru ter)ebut terpenu*i bakteri )ubur 3ang tak (apat (ipi)a*kan, teknik penggore)an 3ang buruk )e*ingga me(ia ter)obek! %akteri pa(a 6a-an 2 ti(ak tumbu*! Hal ini (apat (i)ebabkan )etela* ka-at o)e (ipi7arkan (engan api )pirtu) (alam teknik )terili)a)i, lang)ung (itempelkan ke me(ia 3ang penu* (engan koloni bakteri (an ti(ak (itunggu *ingga ka-at o)e (ingin! a-at o)e (alam kea(aan pana), (apat men3ebabkan mikroorgani)me mati, )e*ingga tak a(a mikroorgani)me 3ang tumbu* pa(a me(ia agar 3ang baru!
' S()+ulan %er(a)arkan per6obaan 3ang (ilakukan (apat (i)impulkan ba*-a teknik a)eptik 3ang (ilakukan ole* praktikan tela* ber*a)il karena ti(ak a(a mikroorgani)me 3ang ti(ak (iinginkan kontaminan; 3ang tumbu*! $)ola)i bakteri pa(a )ampel kantin 4 3ang praktikan lakukan, 6a-an pertama terbentuk koloni koloni 3ang ti(ak terpi)a* 3ang kemungkinan )u(a* terkontamina)i (engan 7amur, akan tetapi pa(a 6a-an ke(ua, ti(ak terbentuk koloni mikroorgani)me!
Da,a! Pu&a"a +rianto L! 2004! Menghitung Mikroba pada Bahan Makanan! %an(ung: $T% Pre))! -i(7o)eputro! 200>! Dasar-Dasar Mikrobiologi. &akarta:
