Laporan Pratikum Biokimia Umum
Hari/tanggal Waktu P#P *%i%ten
: Rabu / 27 Maret 2013 : 0800!1100 W"B : $r Hu%na&ati' ( )e$ : Sari Yuniarini +e%, -malia *n$i *r,a .aar * -$&in *itrian%,a
LIPID )elompok "
Bong *i in Muamma$ *n$ika 5ur .aui *b$urr rraaman Mu Munggara ran n Ula Miran$a +amanik
B04128001 B04120146 B04120140 B04120134
DEPARTEMEN BIOKIMIA DEPARTEMEN BI OKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2013
PENDAHULUAN Tujuan
(etela mengikuti praktikum ini' maa%i%&a akan $apat menunukan %iat $an %truktur lipi$ melalui ui!ui kualitati $an mempelaari %iat!%iat lipi$ melalui beberapa reak%i ui kualitati
Teri
Lipi$ a$ala %en,a&a organik ,ang $iperole $ari pro%e% $ei$rogena%i en$otermal rangkaian i$rokarbon Lipi$ ber%iat amilik' artin,a lipi$ mampu membentuk %truktur %eperti e%ikel' lipo%om' atau membran lain $alam lingkungan ba%a Ber$a%arkan eni% grup pen,u%unn,a' lipi$ $apat $ibe$akan mena$i 8 kategori ,aitu a%am lemak' gli%erolipi$' gli%eroo%olipi$' %pingolipi$' %a99arolipi$' $an poliketi$a Lipi$ memang ti$ak $apat larut $i $alam air' tetapi $apat larut $alam pelarut organik non polar%eperti %uatu i$rokarbon atau $ietil eter "%tila lipi$ %ering $i%inonimkan $engan a%am lemak' me%kipun a%am lemak a$ala %ubgrup lipi$ ,ang $i%ebut trigli%eri$a trigli%erol; Lemak terbentuk $ari %atu gli%erol ,ang mengikat 3 a%am lemak Molekul gli%erol memiliki 3 gugu% i$rok%il
karbok%il =<
trigli%eri$a' gugu% i$rok%il bergabung $engan gugu% karbonil $an membentuk ikatan e%ter Berikut a$ala %kema pembuatan a%am lemak %ekaligu% %trukturn,a
Lipi$ $ibagi $alam $ua golongan be%ar' ,aitu lipi$ %e$erana $an $an lipi$ gabungan Lipi$ %e$erana a$ala %en,a&a e%ter ,ang $iperole $ari gabungan a%am lemak $an gli%erol =onton,a min,ak $an lilin Lipi$ gabungan a$ala
lipi$ %e$erana ,ang ,ang mempun,ai gugu% tambaan %eperti P $an 5 =onto : .o%olipi$ atau o%om,elin Ber$a%arakan %iat kimian,a' lipi$ terbagi mena$i $ua Pertama' lipi$ ,ang $apat $i%abunkan' 9onton,a lemak $an min,ak )e$ua' lipi$ ,ang ti$ak $apat $i%abunkan' 9onton,a %teroi$
METODE PRAKTIKUM
Praktikum
$ilak%anakan
$i
Laboratorium
Pen$i$ikan
+epartemen
Biokimia ,ang terletak $i .akulta% Peternakan Lantai > Praktikum $imulai $ari am 0800 %$ 1030 *lat ,ang $igunakan antara lain : ?abung reak%i' pipet mor' pipet tete%' batang penga$uk' $an labu erlenme,er (ementara baan!baan ,ang akan pa$a meto$e %etiap ui Uji Ke!aru"an
Ma%ukkan 2 ml pereak%i ke $alam tabung reak%i ,ang ber%i )emu$ian bubukan %e$ikit baan per9obaan ke $alam tabung ,ang %u$a ber%i pelarut Lalu ko9ok i%i tabung kuat!kuat $an amati kelarutann,a Pelarut ,ang $igunakan a$ala air' eter @>A' kloroorm' alkali' $an a%am en9er Baan per9obaan ,ang $igunakan a$ala min,ak kelapa' lemak e&an' mentega' margarin' gli%erol' $an a%am %tearat Uji A#r!ein
Ma%ukkan %e$ikit kri%tal )H(< 4 ke $alam tabung ,ang ber%i $an kering )emu$ian' bubukan 3 %ampai 4 tete% baan per9obaan Lalu pana%kan lang%ung $iata% api' mula!mula $engan api ke9il (etela itu peratikan bau akrolein ,ang terbentuk ,ang berupa a%ap puti Ban$ingkan bau akrolein $engan bau (< 2 ,ang terbang $ari karboi$rat ,ang $ipana%kan Uji Ke"i$a#jenu%an
Ma%ukkan kira!kira 1 ml baan er9obaan $alam tabung ber%i )emu$ian ?ambakan kloroorm %ama ban,ak' ko9ok %ampai %emua baan larut Lalu bubukan tete% $emi tete% pereak%i #o$ Hubl %ambil $iko9ok $an amati perubaan ,ang tera$i Uji Ke"en&i#an
Ma%ukkan > ml baan per9obaan ke $alam labu erlenme,er 100 ml )emu$ian tambakan > ml H=l pekat' 9ampurkan ati!ati Lalu ma%ukkan %erbuk =a=<3' %egera ttutup %engan %umbat karet ,ang $iepitkan kerta% loroglu%inol %eingga kerta%n,a tergantung Biarkan 10!20 menit *mati perubaan &arna ,ang tera$i pa$a kerta% ter%ebut Bila tera$i &arna mera mu$a berarti baan ter%ebut tengik Uji Sa!#'(#i
+alam tabung reak%i ,ang ber%i $an kering' lerutkan beberapa miligram kole%terol $i $alam 3 ml kloroorm ani$rat Lalu tambakan a%am %ulat pekat $engan olume ,ang %ama' ko9ok tabung perlaan!laan Biarkan lapi%an 9airan terpi%a *mati &arna ,ang tera$i Uji Lie)er*an
)e $alam larutan!larutan kole%terol $an koloroorm $ari per9obaan %alko&%ki; tambakan 10 tete% a%am a%etat ani$rat $an $ua tete% a%am %ulat pekat )o9ok perlaan!laan $an biarkan beberapa menit
HASIL PER+OBAAN Uji Ke!aru"an
Baan Ui 5o
Pelarut
1 2 3 4 >
Min,ak )elapa ! C C !
*ir -ter )loroorm *lkool *%am ! -n9er )eterangan: CCC : %angat larut CC : larut C : %e$ikit larut ! : ti$ak larut
Lemak He&an ! C C !
Mentega
Margarin
li%erol
! C C !
! C C !
! ! ! C
*%am (tearat ! C C !
!
!
!
CCC
!
Ha%il *%ap ! ! CC C C
Bau CC CC CC ! C
Uji A#r!ein
5o
Baan Ui
1 Min,ak kelapa 2 Lemak e&an 3 li%erol 4 *%am %tearate > Pati )eterangan: CC : a$a a%ap / bau min,ak $ibakar C : %e$ikit a%ap / bau go%ong ! : ti$ak a$a a%ap / ti$ak a$a bau
N Ba%an Uji , Min,ak kelapa 1 Min,ak kelapa tengik 2 3 Lemak e&an Mentega Blue ban$ *%am
Ha(i!
Ke"eran&an
C ! ! C C !
Mera mu$a Puti Puti Mera kekuningan Mera oran,e Puti
Ha(i!
.arna #er"a( /!r&!u(in!
C C ! C
Mera Mera mu$a Puti Mera
!;: ?i$ak tengik
Uji Sa!#'(#i $an Lie)er*an Bur%a$ (ampel )ole%terol
(alko&%ki C
U i Lieberman Bur9a$ C
)eterangan (alko&%ki Lieberman Bur9a$ ?erbentuk9in ?erbentuk9in9iniau 9inmera
PEMBAHASAN Uji Ke!aru"an
Umumn,a' at ,ang polar $apat larut $alam pelarut ,ang ber%iat polar' namun ti$ak $apat larut $alam pelarut nonpolar Begitu uga %ebalikn,a Hal ini $ikarenakan a$an,a momen $ipol pa$a at atau pelarut %eingga $apat berikatan $an berinterak%i $engan %e%aman,a (e$angkan pa$a pelarut nonpolar ti$ak memiliki momen $ipol' %eingga ti$ak bi%a berinterak%i $engan at ,ang polar' a$i ti$ak $apat larut +eraat kelarutan lipi$ $apat $itentukan $engan pengamatan lang%ung Dat polar lebi mu$a larut $alam pelarut polar $aripa$a $alam pelarut
nonpolar' begitu uga %ebalikn,a Lipi$ merupakan molekul %en,a&a organik ,ang pa$a umumn,a ber%iat nonpolar' maka lipi$ lebi mu$a larut $alam pelarut! pelarut nonpolar %eperti kloroorm' eter' benena' a%eton' petroleum eter' $an lain! lain Poe$iai 1@@4; Prin%ip ui kelarutan a$ala a$a ti$akn,a re%i$u ,ang tertinggal Ha%il per9obaan ,ang $iperole menunukkan ba&a %emua baan per9obaan menga%ilkan re%e$u ketika $ilarutkan $alam air Hal ini karena air ber%iat polar %e$angkan lipi$ ber%iat non polar 5amun' gli%erol &alaupun terma%uk lipi$' %earu%n,a $apat larut $alam air karena memiliki gugu% E
Uji A#r!ein
*krolein iala propenal ,ang berbau taam' ti$ak %e$ap' $an %pe%iik' %eperti bau min,ak goreng ,ang $ibakar *krolein terbentuk apabila gli%erol atau atau %uatu lemak $ipana%kan kuat $engan %uatu $ei$rator Poe$iai 1@@4; li%erol pa$a per9obaan %ebagai kontrol po%iti' %e$angkan pati a$ala kontrol negati
Ber$a%arkan tabel $iata%' ke9uali a%am %tearate' keempat baan ui
menunukkan a$an,a bau' pa$aal %earu%n,a a%am %tearate pun menga%ilkan bau karena mengan$ung gli%erol Bau gli%erol berbe$a $engan =< 2 $ari karboi$rat li%erol berbau %eperti lemak ,ang $ibakar' %e$angkan =< 2 $ari karboi$rat berbau go%ong Bau ,ang timbul pa$a gli%erol $i%ebabkan ole terbentukn,a akrolein' %eingga kebera$aan akrolein mu$a $iketaui Beberapa baan ui mengalami $ei$ra%i ,ang $itan$ai $engan mun9uln,a a%ap puti 5amun' a%il per9obaan terbalik' %earu%n,a ,ang menunukkan a%il po%iti an,a pa$a baan ui min,ak kelapa $an lemak e&an )eti$ak%e%uaiaan pa$a per9obaan ui akrolein ini $apat $i%ebabkan %empurna
karena pemana%an ,ang ti$ak
Uji Ke"i$a#jenu%an
*%am lemak ti$ak enu mempun,ai ikatan rangkap ,ang $apat $ia$i%i ole golongan alogen Pa$a ui keti$akenuan ini' pereak%i "o$ Hubl berung%i mengok%i$a%ikan a%am lemak ,ang mempun,ai ikatan rangkap mema$i ikatan tunggal "o$ $alam pereak%i ini memutu%kan ikatan rangkap pa$a a%am lemak $an menggantikan po%i%i $ari ikatan rangkap Warna mera ,ang %emakin pu$ar pa$a larutan baan per9obaan menunukkan ba&a a%am lemak ti$ak enu tela mere$uk%i pereak%i "o$ Hubl #ika &arna mera pa$a larutan per9obaan ti$ak ilang' ini menunukkan ba&a baan per9obaan ter%ebut merupakan a%am lemak enu ,ang ti$ak mempun,ai ikatan rangkap Pa$a ui ini' tern,ata an,a a%am oleat ,ang terma%uk $alam a%am lemak ti$ak enu Hal ini $apat $iliat $ari &arna mera larutan ,ang mena$i pu$ar (ebalikn,a' baan per9obaan ,ang lain %emuan,a terma%uk $alam a%am lemak enu karena &arna meran,a tetap $an ti$ak mena$i pu$ar
Uji Ke"en&i#an
Min,ak atau lemak mena$i tengik karena ok%i$a%i )etengikan min,ak atau lemak menunukkan ba&a keban,akan golongan trigli%eri$a terok%i$a%i ole ok%igen $i u$ara beba% H=l ,ang $i9ampurkan ke $alam larutan per9obaan men,umbang ion!ion ,$rogen ,ang $apat meme9akan un%ur lemak $an terbentuk lemak ra$ikal beba% $an i$rogen ra$ikal beba% ketika bereak%i $engan %erbuk =a=<3 Ha%iln,a' terbentuk molekul!molekul perok%i$a +alam ui ini' pembentukan &arna mera mu$a ,ang $ia%ilkan ole kerta% loroglu%inol menunukkan ba&a baan per9obaan ter%ebut tela mena$i tengik ?era$in,a &arna mera mu$a karena tera$in,a reak%i antara loroglu%inol $engan molekul ok%igen ,ang mengok%i$a%ikan min,ak atau lemak )erta% loroglu%inol berung%i %ebagai penampak ber9ak +ari a%il per9obaan ini' ter$apat ba&a min,ak kelapa $an lemak e&an ti$ak tengik karena kerta% loroglu%inol ber&arna puti' %e$angkan pa$a min,ak kelapa tengik $an mentega terbentuk &arna mera mu$a
Uji Sa!#'(#i
Uji
Salkowski
merupakan
untuk mengidentifikasi keberadaan
uji
kualitatif
yang
dilakukan
kolesterol. Kolesterol dilarutkan
dengan kloroform anhidrat lalu dengan volume yang sama ditambahkan asam sulfat. Asam sulfat berfungsi sebagai pemutus ikatan ester lipid. Apabila
dalam
sampel
tersebut
terdapat
kolesterol,
maka
lapisankolesterol di bagian atas menjadi berwarna merah dan asam sulfat terlihat
berubah
menjadi
kuning
dengan
warna
fluoresens
hijau (Pramarsh !!"#. Uji Lieberman Buchard Uji
$ieberman
%u&hard
merupakan
uji
kuantitatif
untuk
kolesterol. Prinsip uji ini adalah mengidentifikasi adanya kolesterol dengan penambahan asam sulfat ke dalam &uran. Sebanyak '! tetes asam asetat
dilarutkan
(dari per&obaan
ke
dalam
Salkowski#.
larutan kolesterol dan
Setelah
itu,
asam
kloroform
sulfat
pekat
ditambahkan.abung diko&ok perlahan dan dibiarkan beberapa menit. )ekanisme yang terjadi dalam uji ini adalah ketika asam sulfat ditambahkan ke dalam &uran yang berisi kolesterol, maka molekul air berpindah dari gugus *+ kolesterol, kolesterol kemudian teroksidasi membentuk +,-kolestadiena. Produk ini dikonversi menjadi polimer yangmengandung kromofor yang menghasilkan warna hijau. arna hijau ini menandakan hasil yang positif (ikiAnswers !!"#. /eaksi positif uji
ini
ditandai
dengan
adanya
perubahan
warna
dari
terbentuknya warna pink kemudian menjadi biru-ungu dan akhirnya menjadi hijau tua. Simpulan 0ari
beberapa
bahan
per&obaan
yang
digunakan,
dapat
disimpulkan gliserol bukan merupakan bahan yang mengandung $ipid. 0an lipid mampu larut dalam eter dan kloroform.
DAFTAR PUSTAKA
+ .ir$a 2011 *nali%i% lipi$ Fterubung berkalaG ttp://&&&%li$e%arenet/ir$a+/anali%i%lipi$ 1 *pril 2013; Poe$iai * 1@@4 Dasar-dasar Biokimia #akarta :U" Pre%% (amo%ir #eri%9o 2010 Ui )elarutan' Ui )eti$akenuan ' Ui *krolein' Ui )ole%terol Fterubung berkalaG ttp://i$%oong9om/ea9t! %9ien9e%/biolog,/208@4>4!ui!kelarutan!ui!keti$akenuan!ui/ 1 *pril 2013;
