LAPORAN PRAKTIKUM SUBKULTUR ANGGREK ( Dendrobium Dendrobium sp.) sp.)
Disusun untuk memenuhi tugas engganti U!ian Akhi" Semeste" mata ku#iah Ku#tu" $a"ingan
Disusun O#eh% S&a"ah Nu"u# Si#'iant& **+**,-
PROGRAM STUDI BIOLOGI AKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU OENGETA/UAN ALAM UNI0ERSITAS PAD$AD$ARAN $ATINANGOR 1*,
KATA PENGANTAR PENG ANTAR
Puji syukur penulis panjatkan ke Hadirat Tuhan Yang Maha Esa karena atas kasih dan rahmat-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan laporan praktikum yang berjudul “Kultur Jaringan dari ubkultur !nggrek !nggrek " Dendrobium Dendrobium sp.#$% sp.#$% &aporan &aporan ini disusun disusun dari hasil praktikum praktikum kultur kultur jaringan jaringan yang yang merupakan merupakan mata kuliah kuliah sekali sekaligus gus bagian bagian dari dari kuriku kurikulum lum pada pada Jurusa Jurusan n 'iolog 'iologi( i( )akult )akultas as Matema Matematik tikaa dan *lmu *lmu Penget Pengetahu ahuan an !lam( !lam( +ni,er +ni,ersita sitass Padjad Padjadjara jaran% n% &apora &aporan n prakti praktikum kum ini diharap diharapkan kan dapat dapat memberikan sedikit inormasi mengenai kultur jaringan pada tumbuhan% Penuli Penuliss sangat sangat menya menyadari dari bah.a bah.a dalam dalam penuli penulisan san lapora laporan n prakti praktikum kum ini jauh jauh dari dari kesempurnaa kesempurnaan% n% /leh karena itu( penulis menerima kritik dan saran agar kesalahan yang ada bisa diperbaiki dan tidak terulang kembali pada penyusunan penyusunan laporan%
Jatinangor(
Penulis
Juni 0123
DATAR ISI
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 4 BAB I%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% PENDA/ULUAN%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%4 %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%4 . Lata" Be#akang%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%4
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%3 %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%3 .1 Tu!uan%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% .+ I2enti3ikasi Masa#ah%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%3 %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%3 BAB II%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%5 TIN$AUAN PUSTAKA%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%5
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%5 %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%5 1. Se!a"ah Ku#tu" $a"ingan%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 1.1 Taks4n4mi Angg"ek %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%5 %%%%%%%%%%%%%5 1.+ Ku#tu" $a"ingan%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%6 1. Ke#e5ihan 2an Keku"angan Ku#tu" $a"ingan%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%22 1.6 Ku#tu" Ka#us%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%20 BAB III%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%27 %%%%%%%%%%%%%%%%%27 METODE PENELITIAN%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%27 +.. A#at 2an Bahan%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%27 +.1 P"4se2u"%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%24
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%28 %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%28 BAB I0%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% /ASIL DANPEMBA/ASAN%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%28
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %28 . /asi#%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% .1 Pem5ahasan%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%28
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%02 %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%02 BAB 0%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% KESIMPULAN%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%02 %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%02
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%00 %%%%%%%%%%%%%%%%%%00 DATAR PUSTAKA%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
BAB I PENDA/ULUAN
. Lata" Lata" Be#akan Be#akang g
Teknik budidaya tanaman dengan menggunakan metode kon,ensional dalam medium tanah atau pasir seringkali menghadapi menghadapi kendala kendala teknis( teknis( lingkunga lingkungan n maupun maupun .aktu% .aktu% ebagai ebagai 9ontoh perbanyakan tanaman dengan menggunakan biji memerlukan .aktu yang relati,e lama dan seringkali seringkali hasilnya hasilnya tidak seperti tanaman induknya% induknya% Kendala Kendala lain yang juga sering mun9ul adalah gangguan alam( baik yang disebabkan oleh jasad hidup( misalnya hama dan penyakit( maupun 9ekaman lingkungan yang dapat mengganggu keberhasilan perbanyakan tanaman di lapangan% Kebutuhan akan bibit tanaman dalam jumlah besar( berkualitas( bebas hama dan penyakit penyakit serta harus tersedia dalam .aktu singkat singkat seringkali seringkali tidak dapat dipenuhi dipenuhi dengan menggunakan metode kon,ensional baik se9ara generati maupun ,egetati% Pada tahun 2612 Morgan mengemukakan bah.a setiap sel mempunyai kemampuan untuk untuk berkem berkemban bang g menjad menjadii suatu suatu jasad jasad hidup hidup yang yang lengka lengkap p melalu melaluii proses proses regene regenerasi rasi%% Kemampuan ini oleh morgan disebut sebagai totipotensi "totipoten9y#% Konsep totipotensi tersebu tersebutt mempun mempunya yaii makna makna sangat sangat pentin penting g dalam dalam bidang bidang kultur kultur jaringa jaringan% n% *stilah *stilah kultur kultur jaringan menga9u pada teknik untuk menumbuhkan jasad multiseluler dalam medium padat maupun 9air menggunakan jaringan yang diambil dari jasad tersebut% Teknik kultur jaringan tersebut tersebut dilakukan dilakukan sebagai alternati,e alternati,e perbanyak perbanyakan an tanaman tanaman bukan bukan dengan dengan mengguna menggunakan kan media tanah( melainkan dalam medium buatan di dalam tabung%teknik ini sekarang sudah berkembang luas sehingga bagian tanaman yang digunakan sebagai a.al perbanyakan tidak hanya berupa jaringan melainkan juga dalam bentuk sel sehingga juga dikenal teknik kultur sel% 'erdasarkan dari hal tersebut diatas( maka diadakanlah penulisan makalah ini dengan tujuan untuk mengetahui teknik kultur jaringan tumbuhan dengann menggunakan kultur kalus atau kutur sel% Kultur jaringan tanaman merupakan teknik budidaya "perbanyakan# sel( jaringan( dan organ tanaman dalam suatu lingkungan yang terkendali dan dalam keadaan aseptik atau bebas dari mikroorganisme% e9ara umum perbanyakan tanaman berdasarkan perkembangan dan siklus siklus hidupn hidupnya ya dapat dapat digolo digolongk ngkan an menjadi menjadi dua( dua( yaitu yaitu perban perbanya yakan kan se9ara se9ara seksua seksuall dan perbanyakan se9ara aseksual%
'erdasarkan bagian tanaman yang dikulturkan se9ara lebih spesiik terdapat tipe-tipe kultur yaitu( kultur kalus( kultur suspensi sel( kultur anter( kultur akar( kultur pu9uk tunas( kultur embrio( kultur o,ul( dan kultur kun9up bunga% Kultur jaringan bermula dari adanya pembuktian siat totipotensi sel( yaitu bah.a setiap sel tanaman yang hidup dilengkapi deng dengan an ino inorm rmasi asi gene genetik tik dan dan peran perangk gkat at isio isiolo logi giss yang leng lengka kap p untu untuk k tumb tumbuh uh dan dan berkembang menjadi tanaman utuh( jika berada dalam kondisi yang sesuai% Penemuan :at pengatur tumbuh ";PT# dan upaya pengembangan ormulasi media sangat berperan penting dalam dalam menent menentuka ukan n keberh keberhasil asilan an teknik teknik kultur kultur jaring jaringan% an% Prinsi Prinsip p utama utama dari dari teknik teknik kultur kultur jaringan adalah perbanyakan tanaman dengan menggunakan menggunakan bagian ,egetati tanaman dengan menggunakan media buatan yang dilakukan di tempat yang steril% *nisiasi pembentukan kalus merupakan salah satu langkah penting yang menentukan keberhasilan teknik kultur in ,itro% Kalus merupakan massa sel yang tidak terorganisir( pada mulanya sebagai respon terhadap pelapukan ".ounding#% Pembelahan selnya menjadi tidak terkendali( sel-selnya mengalami prolierasi yaitu membelah terus menerus dengan sangat 9epat( hal ini dimungkinkan karena sel-sel tumbuhan yang se9ara alamiahnya bersiat autotro dikondisikan menjadi heterotro oleh adanya nutrisi yang 9ukup komplek dan :at pengatur tumbuh didalam medium kultur% elain dari luka bekas irisan( kalus juga dapat berasal dari pembelahan sel-sel kambium yang terus membelah dan berpolierasi% Polierasi sel-sel akan menjadi lebih baik jika eksplan yang digunakan berasal dari jaringan yang masih muda% el-sel kalus se9ara isiologis dan biokimia sangat berbeda dengan sel-sel eksplannya yang sudah terdierensiasi% el-sel pada kalus bersiat meristematik dan merupakan salah satu .ujud dari dedierensiasi%
.1 Tu!uan •
Tujuan dari makalah ini adalah untuk mengetahui 9ara dan tahapan subkultur tanaman anggrek melalui teknik kultur jaringan%
.+ I2enti3ikasi Masa#ah •
'agaimana 9ara dan tahapan subkultur tanaman anggrek melalui teknik kultur jaringan%
BAB II TIN$AUAN PUSTAKA
1. Se!a"ah Ku#tu" $a"ingan
Menurut uryo.inoto "2662#( kultur jaringan dalam bahasa asing disebut sebagai tissue tissue 9ultur 9ulture( e( .eesel .eesel 9ultuu 9ultuuss atau atau ge.ebe ge.ebe kultur kultur%% Kultur Kultur sendir sendirii berart berartii budiday budidayaa dan jaringan adalah sekelompok sel yang mempunyai bentuk dan ungsi yang sama% Maka( kultur jaringan berarti membudidayakan suatu jaringan tanaman menjadi tanaman ke9il yang mempunyai siat seperti induknya "riyanti dan =ijayani( 2664#% Meto Metode de kult kultur ur jarin jaringa gan n beras berasal al dari dari tahu tahun n 2610 2610(( keti ketika ka >ott >ottlie lieb b Habe Haberl rlan andt dt memperl memperliha ihatka tkan n bah.a bah.a adalah adalah mungki mungkin n memelih memelihara ara tipe tipe terten tertentu tu sel tumbuh tumbuhan an dalam dalam suasana sehat dalam media kultur% !kan tetapi tanaman anggrek baru dapat dikulturkan pada tahu tahun n 2600 2600 oleh oleh Knud Knudso son% n% Mesk Meskip ipun un sel-s sel-sel el itu itu tida tidak k memb membel elah ah(( namu namun n peke pekerja rjaan an Habe Haberl rlan andt dt tela telah h melet meletak akka kan n arah arah untu untuk k pene peneli liti tian an yang yang mun9 mun9ul ul di masa masa mend mendata atang ng "udarmadji( 0117#% 1.1 Taks4n4mi Angg"ek
!nggre !nggrek k se9ara se9ara takson taksonom omii diklasi diklasiik ikasi asikan kan ke dalam dalam phyllum Spermatophyta atau tumbuhan tumbuhan berbiji( kelas Angiospermae atau berbiji tertutup( subkelas Monocotyledonae subkelas Monocotyledonae atau bijinya berkeping satu( ordo Gynand Gynandrae rae karena alat reproduksi jantan dan betina bersatu sebagai tugu bunga dan amili Orcidaceae amili Orcidaceae atau keluarga anggrek "Kartiman( ?% 0114#% )amili anggrek mempunyai 581 genus berbeda dengan 08 111 spesies dan lebih dari 71 111 kulti,ar hasil persilangan "He. dan Yong( 2663#% Dendrobium merupakan Dendrobium merupakan salah satu genus anggrek terbesar di !sia "=arren dan Tettoni( 2663#% Nama Dendrobium Dendrobium berasal dari bahasa Yunani( yang terdiri dari kata dendron artinya dendron artinya pohon dan biein artinya untuk hidup% e9ara keseluruhan Dendrobium keseluruhan Dendrobium berarti berarti tanaman yang hidup pada pohon% >enus Dendrobium Dendrobium diperkenalkan oleh seorang botanist .edia( /la .arts pada tahun 2@11% Botanist 2@11% Botanist tersebut mend mendis iskr krip ipsik sikan anny nyaa dala dalam m sembi sembilan lan spesi spesies es%% Dendrobium Dendrobium tumbuh tumbuh di !siaT !siaTen engga ggara( ra( Himalay Himalayaa "Nepal "Nepal dan ikkim ikkim#( #( 'irma( 'irma( propin propinsi si Moulme Moulmein( in( *ndia *ndia 'arat 'arat
uinea( !ustralia( Aina dan Jepang "=idiastoety% 2665#%
'entuk daun anggrek berma9am-ma9am dari sempit memanjang( pensil( bulat( bulatlonjong( bulat telur( mata lembingBlanset( jantung dan masih banyak lagi ,ariasi lainnya% eperti umumnya tumbuhan monokotil( daun anggrek memiliki tulang daun yang sejajar dengan helaian daun dan tidak memiliki pertulangan yang ber9abang% Tebal daun ber,ariasi dari tipis hingga tebal berdaging "sukulen#% Pada setiap bukunya( daun melekat berselangselin seling g atau atau berp berpasa asang ngan an dan dan seti setiap ap buku buku terd terdap apat at dua dua hela helaii daun daun yang berh berhad adap apan an "=idiastoety% 2665#% Menurut
Plantae
permatophyta
ubdi,isi
!ngiospermae
Kelas
Mono9otyledoneae
/rdo
/r9hidales
)amili
/r9hida9eae
ubamili
Epidendroideae
uku
Epidendreae
ubsuku
>enus
Dendrobium Dendrobiu m
>enu >e nuss Dendrobiu Dendrobium m memp mempunya unyaii keragam keragaman an yang sangat besar besar(( baik habitat( ukuran( bentuk pseudobulb bentuk pseudobulb(( daun maupun .arna bunganya% pektrum penyebarannya luas( mulai dari daerah pantai sampai pegunungan% Tersebar di *ndia( ri &anka(Aina elatan( Jepang ke selatan sampai !si !siaa Te Tengga nggara ra hing hingga ga ka.asan Pasiik( !ustralia( !ustralia( eland elandia ia 'aru( dan Papu Papuaa Nugini% Tumbuh Tumbuh baik pada ketinggian 1D811 m dpl dengan kelembapan 31D@1% 'udi daya angg an ggre rek k yang pa pali ling ng mu muda dah h ad adala alah h yang be beras rasal al da dari ri tem tempa patt as asaln alnya ya " &ingga &ingga(( P% dan Marsono% 0112#% 0112 #% Persyaratan tumbuh setiap jenis anggrek berbeda-beda( tetapi semua jenis memerlukan aliran aliran udara udara yang yang selalu selalu berger bergerak% ak% Manaat Manaat aliran aliran udara udara ini untuk untuk men9ega men9egah h timbul timbulny nyaa penyakit akibat lingkungan yang terlalu basah( menurunkan suhu udara pada siang hari yang panas( dan memba.a unsur-unsur yang yang dibutuhkan tanaman seperti A/ 0( N0( dan air "Yusnita( 0117C@#% !nggre !nggrek k
yang yang hanya hanya 9o9ok 9o9ok di daerah daerah dingin dingin seperti seperti Paphio Paphioped pedill illum% um%
1.+ Ku#tu" $a"ingan
Menurut uryo.inoto "2662#( kultur jaringan dalam bahasa asing disebut sebagai tissue tissue 9ultur 9ulture( e( .eesel .eesel 9ultuu 9ultuuss atau atau ge.ebe ge.ebe kultur kultur%% Kultur Kultur sendir sendirii berart berartii budiday budidayaa dan jaringan adalah sekelompok sel yang mempunyai bentuk dan ungsi yang sama% Maka( kultur jaringan berarti membudidayakan suatu jaringan tanaman menjadi tanaman ke9il yang mempunyai siat seperti induknya "riyanti dan =ijayani( 2664#% Kultur jaringan atau budidaya in ,itro adalah suatu metode untuk mengisolasi bagian dari tanaman seperti protoplasma( sel( jaringan atau organ yang serba steril( ditumbuhkan pada media buatan yang steril( dalam botol kultur yang steril dan dalam kondisi yang as eptik( sehingga bagian-bagian tersebut dapat memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi tanaman yang lengkap "Yusnita( 0117C@#%
9ahaya% ering kali kultur aseptik disebut juga kultur in ,itro yang artinya sebenarnya adalah kultur di dalam gelas% una.an( 26@5#% Kultur Kultur jaringa jaringan n adalah adalah salah salah satu metode metode dalam dalam perban perbanya yakan kan tanama tanaman n anggre anggrek( k( dengan mengambil bagian-bagian tanaman anggrek "eksplan# serta menumbuhkannya dalam kond kondis isii asept aseptik ik%% ehi ehing ngga ga bagi bagian an tana tanama man n terse tersebu butt dapa dapatt memp memper erba bany nyak ak diri diri dan dan beregenerasi menjadi tanaman utuh kembali% alah satu aktor pembatas dalam keberhasilan kutur jaringan adalah kontaminasi yang dapat terjadi pada setiap saat dalam masa kultur% Kontaminasi dapat berasal dari C eksplan "baik eksternal maupun internal#( organisme yang masuk kedalam media( botol kultur atau alat-alat alat-alat yang kurang steril( lingkungan lingkungan kerja yang kotor( ke9erobohan dalam pelaksanaan ">una.an( 26@5#% Persiapan media harus dilakukan dengan teliti dan hati-hati( kebersihan alat-alat harus selalu dijaga( diusahakan bekerja diruang terkendali dan aseptik% ?uang untuk menumbuhkan biji dan bibit anggrek memerlukan penyinaran 9ukup lama( yakni antara 20-2@ jam dengan intensitas sinar 01117111 luF% 'ibit anggrek dapat tinggal sementara didalam botol selama 21-20 bulan sesudah itu baru dipindahkan kedalam pot% etelah pemindahan kedalam pot( bibit perlu diberi naungan% Penyinaran oleh sinar matahari matahar i se9ara langsung kurang baik bagi
pertumbuhan bibit yang baru dikeluarkan dari botol% ebagian media yang digunakan pada pot biasanya menggunakan han9uran han9uran pakis( arang kayu dan serabut kelapa "!shari( 2668#% Teknik kultur jaringan melalui biji atau embrio "seksual# dilakukan dengan alasan biji tidak mempunyai endosperm "9adangan makanan# atau biji berukuran sangat ke9il% elain itu( teknik kultur jaringan juga bertujuan untuk mendapatkan keseragaman bibit dalam jumlah besar dan .aktu yang relati singkat%
1. Ke#e5ihan 2an Keku"angan Ku#tu" $a"ingan
Kelebihan kultur jaringan antara lainC 2% Tidak Tidak meme memerluk rlukan an tempa tempatt yang yang luas% luas% 0% Tanaman Tanaman bisa diperb diperbanyak anyak dalam .aktu yang yang singkat% singkat% 7% Pelaks Pelaksana anaann annya ya tidak tidak tergan tergantun tung g pada musim musim%% 4% 'ibit 'ibit yang yang dihasil dihasilkan kan lebih lebih seha sehat% t% 8% Memung Memungkin kinkan kan adany adanyaa rekayasa rekayasa geneti genetika% ka% elain itu juga memiliki kelemahan-kelemahan( yaituC
2%
1.6 Ku#tu" Ka#us
Tanam Tanaman an dapat dapat diperb diperbany anyak ak se9ara se9ara ,egetat ,egetati i menggu menggunak nakan an teknik teknik kultur kultur in ,itro ,itro dengan teknik kultur kalus atau kultur sel% Kultur kalus merupakan pemeliharaan bagian ke9il tanaman dalam lingkungan buatan yang steril dan kondisi yang terkontrol% Kalus adalah suatu kumpulan sel amorphous yang terjadi dari sel-sel jaringan yang berprolierasi se9ara terus menerus dan tidak terorganisasi sehingga memberikan penampilan sebagai massa sel yang bentuknya tidak teratur% Prolierasi jaringan ini dapat dilakukan se9ara se9ar a tidak terbatas dengan 9ara melakukan subkultur sepotong ke9il jaringan kalus pada medium yang segar dengan inter,al .aktu yang teratur ">una.an( 26@5#% Penelitian pembentukan kalus pada jaringan terluka pertama kali dilakukan oleh innott pada tahun 2631% Pembentukan kalus pada jaringan luka dipa9u oleh :at pengatur tumbuh auksin dan sitokinin endogen% e9ara in ,i,o( kalus pada umumnya terbentuk pada bekas bekas luka akibat serangan ineksi mikro organisme seperti !groba9terium tumea9iens( gigitan atau tusukan serangga dan nematoda% Kalus juga dapat terbentuk sebagai akibat stress% Kalus yang diakibatkan oleh hasil dari ineksi bakteri !groba9terium tumea9iens disebut tumor%Kalus adalah jaringan meristematik yang merupakan .ujud dari dedierensiasi%
kalus dan memindahkannya pada medium baru% una.an( 26@5#%
BAB III METODE PENELITIAN
+.. A#at 2an Bahan
!lat-al !lat-alat at yang yang diguna digunakan kan pada pada prakti praktikum kum ini dianta diantaran ranya ya yaitu yaitu(( !lumi !luminiu nium m oil oil berungsi untuk menutup botol kultur agar tidak terjadi kontaminasi% !uto9la,e berungsi untuk mensterilkan media( baik media agar atau pun media 9air juga dapat digunakan untuk sterilisasi tanah atau kompos yang akan digunakan untuk media tanaman% 'otol kultur steril berungsi sebagai tempat untuk menkulturkan atau menanam eksplan% 'unsen berungsi untuk menjaga sterilisasi lingkungan di sekitar tempat penanaman subkultur% >elas ukur digu diguna naka kan n untu untuk k mena menaka karr air air suli suling ng dan dan baha bahan n kimi kimiaa yang akan akan digu diguna naka kan% n% Hotp Hotpla late te berungsi untuk homogen dan juga untuk pemanas% &aminar !ir )lo. yang berungsi untuk menana menanam m eksplan eksplan ke dalam dalam botol botol dalam dalam kondi kondisi si steril steril atau atau melaku melakukan kan sub kultur kultur yang yang dileng dilengkap kapii dengan dengan blower dan lampu lampu +G% +G% /,en /,en berun berungsi gsi untuk untuk sterili sterilisasi sasi botol botol kultur kultur(( gunting( gunting( pinset( pisau( dan lain sebagainya sebagainya yang digunakan digunakan dalam kultur kultur jaringan% jaringan% Petridish Petridish steril yang berungsi sebagai tempat menyimpan potongan-potongan eksplan anggrek% Pinset steril "pendek dan panjang# ungsinya sebagai alat untuk mengambil eksplan yang akan ditanam% 9alpel steril ungsinya untuk memotong-motong eksplan anggrek% tirer berungsi untuk untuk menggojok menggojok dengan pemanas%
didalamnya yaitu agar( unsur makro dan unsur mikro yang berungsi sebagai media tanam eksplan%
+.1 P"4se2u"
&angkah pertama yaitu( menyiapkan alat-alatC pinset( s9alpel( petridish( botol berisi medi mediaa kult kultur ur(( alkoh alkohol ol dan dan buns bunsen en%% Meny Menyal alak akan an lampu lampu dan dan blo. blo.er er &!) &!)( kemu kemudi dian an memasukkan memasukkan alat-alat ke dalam &!) dengan dengan terlebih terlebih dahulu dahulu menyemprot menyemprotkan kan alkohol alkohol 51% Mematik Mematikan an lampu lampu dan blo.er blo.er(( kemudi kemudian an lampu lampu +G dinya dinyalaka lakan% n% Penyi Penyinar naran an lampu lampu +G dilakukan selama 01-71 menit( setelah itu dimatikan% &u dan blo.er &!) dinyalakan dan memasukkan memasukkan plb anggrek plb anggrek yang sudah disemprot alkohol 51 ke dalam &!)% Menyalakan 'unsen 'unsen(( masukk masukkan an ujung ujung s9alpel s9alpel dan pinset pinset ke dalam dalam botol botol yang yang berisi berisi alkoho alkoholl 51% 51% Mengreluarkan eksplan dari eksplan dari botol dengan pinset dengan sebelumnya ujung pinset dile.atkan di atas api 'unsen% elanjutnya elanjutnya meletakkan eksplan di petridish steril% Menanam ekplan ekplan pada media tanam yang sudah disterilkan% Penanaman dilakukan pada jarak yang tidak terlalu dekat% Memberi label pada kultur yang berisi tanggal pengkulturan( nama kelompok dan nama peneliti% Menyimpan kultur pada ruang inkubasi%
BAB I0 /ASIL DANPEMBA/ASAN . /asi#
No% Hasil
Keterangan Hari pertama aat mengkultur bagian kalus dari tanaman anggrek
Hari ke tujuh
1
Melakukan penge9ekan dari pertumbuhan kalus% Hasilnya kalus yang di kultur dapat tumbuh dan tidak terjadi kontaminasi%
.1 Pem5ahasan
Pada praktikum kali ini yaitu mengenai subkultur dari tanaman anggrek " Dendrobiu " Dendrobium m sp.# sp.# Praktikum ini dilakukan untuk mengetahui 9ara dan tahapan melakukan kultur kalus dari tanam tanaman an angg anggrek rek%% Hal Hal pert pertam amaa yang ang haru haruss dipe diperh rhat atik ikan an pada pada kult kultur ur jarin jaringa gan n adala adalah h menyia menyiapka pkan n alat dan bahan bahan yang yang akan akan diguna digunakan kan%% !lat yang yang diguna digunakan kan sepertiC sepertiC pinset( pinset( s9alpel( s9alpel( petridish( petridish( botol berisi media media kultur( kultur( alkohol alkohol dan bunsen% &alu semua alat yang akan digunakan haruslah dalam keadaan steril( hal ini dikarenakan untuk meminimalisir terjadinya
kontaminas kontaminasii pada subkultur anggrek yang akan dikultur nantinya% nantinya% &alu menyalakan menyalakan lampu dan blo.er &!)( kemudian memasukkan alat-alat ke dalam &!) dengan terlebih dahulu meny menyem empro protk tkan an alko alkoho holl 51% 51% Mema Memati tika kan n lampu lampu dan dan blo. blo.er er(( kemu kemudi dian an lampu lampu +G dinyalakan% dinyalakan% Penyinaran Penyinaran lampu +G dilakukan dilakukan selama 01-71 menit( setelah itu dimatikan% dimatikan% )ungsi penyinaran menggunakan +G yaitu agar laminar serta alat dan bahan yang ada di dalamnya steril dan saat melakukan pengerjaan tidak terjadi kontaminasi% &u dan blo.er &!) dinyalakan dan memasukkan plb memasukkan plb anggrek anggrek yang sudah disemprot alkohol 51 ke dalam &!)% Menyalakan 'unsen( masukkan ujung s9alpel dan pinset ke dalam botol yang berisi alkohol alkohol 51% Mengreluarkan Mengreluarkan eksplan eksplan dari botol dengan pinset dengan sebelumnya ujung pinset dile.atkan di atas api 'unsen% Pengerjaan seperti ini dilakukan berulang menjaga agar setiap perlakuan perlakuan tetap steril( elanjutny elanjutnyaa meletakkan meletakkan eksplan di petridish petridish steril% Menanam ekplan pada media tanam yang sudah disterilkan% Penanaman dilakukan pada jarak yang tidak terlalu dekat% Memberi label pada kultur yang berisi tanggal pengkulturan( nama kelompok dan nama peneliti% Menyimpan kultur pada ruang inkubasi%
etelah etelah dilakuka dilakukan n penge9ekk penge9ekkan an terlihat terlihat hasil kultur kultur anggrek anggrek yang ditanam ditanam pada pada media media
baru dapat berhasil tumbuh menjadi kalus dan tidak terjadi kontaminasi% Hal ini dapat dilihat pada tabel hasil% Kalus terbentuk melalui tiga tahapan( yaitu induksi( pembelahan sel( dan dierensiasi% Pembentukan kalus ditentukan sumber eksplan( komposisi nutrisi pada medium dan aktor lingkung lingkungan%eks an%eksplan plan yang berasal dari jaringan jaringan meristem meristem berkemban berkembang g lebih 9epat dibanding jaringan dari sel-sel berdinding tipis dan mengandung lignin% +ntuk memelihara kalus( maka perlu dilakukan subkultur se9ara berkala% Menurut Yu Yusnita "0114#( tahapan yang dilakukan dalam perbanyakan tanaman dengan teknik kultur jaringan adalahC 2#
Pembuatan media
0#
*nisiasi
7#
terilisasi
4#
Multiplikasi
8#
Pengakaran
3#
!klimatisasi
2#
Pembuatan media Medi Mediaa kult kultur ur jarin jaringa gan n meru merupa paka kan n salah salah satu satu akto aktorr penu penunja njang ng kebe keberh rhas asil ilan an
perbanyakan tanaman se9ara kultur jaringan% Komponen media kultur yang lengkap le ngkap sebagai se bagai berikut air destilata "aIuades# air bebas ion sebagai pelarut atau a tau sol,en( hara-hara makro dan mikro( mikro( gula gula umumn umumnya ya sukros sukrosaa sebaga sebagaii sumber sumber energ energi( i( ,itami ,itamin( n( asam amino( amino( dan bahan bahan organik lain( :at pengatur tumbuh( suplemen berupa bahan-bahan alami jika diperlukan( agaragar atau gelrite sebagai pemadat media "Yusnita( "Yusnita( 0114#% 0#
*nisiasi *nisiasi adalah pengambilan eksplan dari bagian tanaman yang akan dikulturkan%
'agian tanaman yang sering digunakan untuk kegiatan kultur jaringan adalah tunas% 7#
terilisasi teri terili lisas sasii meru merupa paka kan n pemb pembers ersiha ihan n alat alat(( tempa tempatt maup maupun un ekspl eksplan an yang yang akan akan
digunakan digunakan agar terhindar dari berbagai mikrob yang dapat mengganggu mengganggu kelan9aran selama proses pengkulturan% Aara untuk membebaskan ruangan( alat( maupun media eksplan dari berbagai mikroorganisme( masing-masing menggunakan 9ara-9ara yang sangat berbeda% e9ara isis( sterilisasi dilakukan dengan menggunakan udara keringdan panas( menggunakan uap air bertekanan( menggunakan sinar +G atau sinar gamma( menggunakan iltrasi( serta bisa pula menggunakan pemijaran atau pengganggangan% e9ara kimia.i( sterilisasi dilakukan dengan menggunakan senya.a-senya.a kimia% ebagai antiseptik( senya.a kimia yang yang diguna digunakan kan antara antara lainC lainC etilen etilen oksid oksida( a( alkoho alkohol( l( spirit spiritus( us( dan hipokl hipoklori orit% t% edang edangkan kan sebagai antibiotik( senya.a kimia yang digunakan adalah kanamisin dan kimisitin% +ntuk sterilisasi alat( dilakukan dengan menggunakan pemanasann o,en( uap air panas( autokla( dan sinar sinar +G% +G% edang edangkan kan untuk untuk alat-al alat-alat at yang yang berasal berasal dari dari logam( logam( diguna digunakan kan sterili sterilisasi sasi dengan pengapian atau pemijaran% 4#
Multiplikasi Multip Multiplik likasi asi merupa merupakan kan kegiat kegiatan an dalam dalam memper memperban banyak yak 9alon 9alon tanama tanaman n dengan dengan
menanam menanam eksplan pada media% Kegiatan ini dilakukan dilakukan di laminar flow flow untuk menghindari adanya kontaminasi yang menyebabkan menyebabkan gagalnya pertumbuhan eksplan% Tabung Tabung reaksi yang telah ditanami ekplan diletakkan pada rak-rak dan ditempatkan di tempat yang steril dengan suhu kamar% 8#
Pengakaran Pengakaran adalah ase dimana eksplan akan menunjukkan adanya pertumbuhan
akar yang menandai bah.a proses kultur jaringan yang dilakukan mulai berjalan dengan
baik% Pengamatan dilakukan setiap hari untuk melihat pertumbuhan dan perkembangan akar serta serta untu untuk k meli meliha hatt adan adany ya kont kontam amin inas asii oleh oleh bakt bakteri eri atau ataupu pun n jamur jamur%% Eksp Ekspla lan n yang terkontaminasi akan menunjukkan gejala seperti ber.arna putih atau biru "disebabkan jamur# atau busuk "disebabkan bakteri#% 3#
!klimatisasi !klimatisasi adalah kegiatan memindahkan eksplan keluar dari ruangan asepti9 ke
bedeng% Pemindahan dilakukan se9ara hati-hati dan bertahap( yaitu dengan memberikan sungkup% ungkup digunakan untuk melindungi bibit dari udara luar dan serangan hama penyakit karena bibit hasil kultur jaringan sangat rentan terhadap serangan hama penyakit penyakit dan udara udara luar% luar% etela etelah h bibit bibit mampu mampu berada beradapta ptasi si dengan dengan lingku lingkunga ngan n baruny barunyaa maka maka se9ara se9ara bertahap sungkup dilepaskan dan pemeliharaan bibit dilakukan dengan 9ara yang sama dengan pemeliharaan bibit generati% Eksplan terbaik untuk induksi kalus adalah jaringan bagian-bagian semai "seedling# yang yang dike9a dike9amba mbahka hkan n se9ara se9ara in ,itro% ,itro% +kuran +kuran ekspla eksplan n juga juga pentin penting g untuk untuk diperh diperhati atikan kan(( idealnya ukuran eksplan yang dikehendaki adalah yang ke9il tetapi mempunyai kemampuan yang yang tinggi tinggi untuk untuk membela membelah( h( hal ini dimaks dimaksudk udkan an agar agar dipero diperoleh leh sel-sel sel-sel yang yang relati relati homogen% el yang berasal dari tanaman anggrek dapat dibiakkan atau dikulturkan se9ara asepti9 pada atau dalam medium hara% Kultur biasanya dimulai dengan menanamkan satu iris jaringan steril pada medium hara yang dipadatkan dengan agar% una.an( 26@5#%
kotiledon( kotiledon( mesoil daun dan jaringan jaringan pro,askular pro,askular%% Kalus mempunyai mempunyai pertumbuhan pertumbuhan yang abnormal dan berpotensi untuk berkembang menjadi akar( tunas dan embrioid yang nantinya akan dapat membentuk plantlet "?ahardjo( 26@6#% Menururt Menururt ?ahardjo ?ahardjo "26@6#( "26@6#( pada umumnya umumnya kemampuan kemampuan pembentuk pembentukkan kan kalus dari jaringan jaringan tergantung juga dariC 2#
+mur isiologi dari jaringan .aktu diisolasi%
0#
Musim pada .aktu bahan tanaman diisolasi%
7#
'agian tanaman yang dipakai%
4#
Jenis tanaman% *nisiasi pembentukan kalus dimulai dari hasil pembelahan sel yang terus menerus pada jaringan induk yang tidak perlu harus berhubungan langsung dengan medium kultur% Pertumbuhan yang ter9epat terjadi didaerah perier% Hal ini disebabkan karena pada daerah tersebut ketersediaan hara dan oksigennya lebih baik% Pertumbuhan kalus merupakan hasil interaksi yang sangat komplek antara eksplan( komposisi medium dan kondisi lingkungan selama periode inkubasi% inkubasi% el-sel memperlihatkan memperlihatkan peningkatan peningkatan akti,itas akti,itas sitoplasmik sitoplasmik yang ditand ditandai ai dengan dengan mening meningkat katny nyaa respira respirasi si dan jaring jaringan an kembal kembalii kekead kekeadaan aan meriste meristemat matik ik "dedierensiasi#% elama pertumbuhannya kalus dapat mengalami ligniikasi yang 9ukup kuat hingga menyebabkan kalus bertekstur keras dan kompak( ada juga yang riabel dan lunak sehing sehingga ga mudah mudah terpe9ah terpe9ah-pe9 -pe9ah ah menjadi menjadi serpiha serpihan-s n-serp erpiha ihan n ke9il% ke9il% Kalus Kalus dapat dapat ber.arn ber.arnaa kekuningan( putih( hijau "iti( 011@#% Pada perbanyakan tanaman hortikultura( dianjurkan melalui tunas aksilair( karena dapat mengha menghasilk silkan an bibit bibit yang yang true-to true-to-ty -type pe "sesuai "sesuai dengan dengan siat siat indukn induknya ya#% #% Tunas Tunas ad,ent ad,enti( i( terutama yang melalui ase kalus( tidak dianjurkan dalam perbanyakan tanaman hortikultura( ke9ual ke9ualii untuk untuk tujuan tujuan seleksi seleksi dan ,arias ,ariasi% i% Tunas unas ad,ent ad,enti i langsu langsung( ng( juga juga menunj menunjukk ukkan an kemungkinan ,ariasi( hanya dalam tara lebih rendah daripada regenerasi melalui ase kalus% uatu siat yang diamati dalam jaringan yang membentuk kalus adalah bah.a pembelahan sel tidak terjadi pada semua sel dalam jaringan asal( tetapi hanya sel di lapisan periser yang membelah terus menerus sedangkan sel-sel di tengah tetap Iuis9ent "iti( 011@#% Menurut iti "0116#( aktor-aktor yang menyebabkan inisiasi pembelahan sel hanya terbatas di lapisan luar dari jaringan kalus( adalahC
2#
Ketersediaan oksigen yang lebih tinggi%
0#
Keluarnya gas A/0%
7#
Ketersediaan hara yang lebih banyak%
4#
Penghambat yang bersiat olatik lebih 9epat menguap%
8#
Aahaya% Menuru Menururt rt udarm udarmadj adjii "0117# "0117#(( agar kalus kalus dapat dapat dijaga dijaga pertum pertumbuh buhann annya ya dan dapat dapat diperbanyak se9ara berkesinambungan( maka perlu dipindahkan se9ara teratur pada media baru dalam jangka .aktu terentu "subkultur#% !pabila kalus disubkultur disubkultur pada media agar yang dilakukan se9ara regular( maka akan menunjukkan ase pertumbuhan kur,a "sigmoid#% ase pertumbuhan kalus terbagi menjadi lima ase( yaituC
2#
)ase lag( dimana sel-sel mulai membelah%
0#
)ase eksponensial( dimana laju pembelahan sel berada pada pun9aknya%
7#
)ase linear( linear( dimana dimana pembelahan pembelahan sel mengalami mengalami perlambatan perlambatan tetapi laju ekspansi ekspansi sel meningkat%
4#
)ase deselerasi( dimana laju pembelahan dan pemanjangan sel menurun%
8#
)ase stationer( dimana jumlah dan ukuran sel tetap%
BAB 0 KESIMPULAN
•
'erd 'erdasa asark rkan an hasi hasill prak prakti tiku kum m kali kali ini ini 9ara 9ara dan dan tahap tahapan an yang yang dila dilaku kuka kan n adal adalah ah pembuatan media( inisiasi( sterilisasi( multiplikasi( pengakaran( aklimatisasi
DATAR PUSTAKA
!nggre !nggrek%o k%org% rg% 0118% 0118% 'udida 'udidaya ya Tanama anaman n !ngg !nggrek rek%% httpCB httpCBB.. B...% .%ang anggre grek%o k%org rgBB budida budidaya ya tanaman-anggrek%html% @ No,ember 011@%etia.an( 0118% !shari( %( 2668% Hortikultura !spek 'udidaya% +*-Press( Jakarta% >una.a >una.an( n( &%=% &%=%( 26@5( 26@5( Teknik eknik Kultu Kulturr Jaringa Jaringan( n( &abora &aborator torium ium Kultur Kultur Jaringa Jaringan n P!+ 'iotekbologi *P'( 'ogor% Hendaryono(
