LAPORAN RESMI PRAKTIKUM KROMATOGRAFI “KROMATOGRAFI KERTAS”
Disusun Oleh: (Kelompok 15 ) 1. 2. 3. 4.
Larial Tri Julisah Lidya Aprilian Elkel Linda Linda Mailiya Safriani
(050217A058) (050217A059) (050217A060) (050217A061)
PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS NGUDI WALUYO 2017/2018
I
JUDUL PERCOBAAN “
II
Identifikasi Zat Warna Buatan Yang Larut Dalam Air Secara Kromatografi Kertas ”
TUJUAN PERCOBAAN
Untuk mengetahui jenis zat warna buatan yang larut dalam air. III
DASAR TEORI
Kromatografi digunakan untuk memisahkan substansi campuran menjadi komponen - komponennya, Seluruh bentuk kromatografi bekerja berdasarkan prinsip tersebut. Kromatografi juga merupakan pemisahan campuran senyawa menjadi senyawa murninya dan mengetahui kuantitasnya.Untuk itu kemurnian bahan baku atau komposisi campuran dengan kandungan yang berbeda dapat dianalisis dengan benar. Tidak hanya kontrol kualitas, tetapi juga kontrol dan optimasi reaksi kimia dan proses berdasarkan penentuan analitik dari kuantitas material. Pemilihan teknik kromatografi sebagian besar bergantung pada sifat kelarutan senyawa yang akan dipisahkan.Kromatografi adalah suatu istilah umumnya digunakan untuk bermacam-macam teknik pemisahan yang didasarkan atas partisi sampel diantara suatu rasa gerak yang bisa berupa gas ataupun cair dan rasa diam yang juga bias berupa cairan ataupun suatu padatan. Penemu kromatografi adalah Tsweet yang pada tahun 1903, mencoba memisahkan pigmen pigmen dari daun dengan menggunakan suatu kolom yang berisi kapur (CaSO4). Istilah kromatografi diciptakan oleh tsweet untuk melukiskan daerah – daerah yang berwarna yang bergerak kebawah kolom (Efendy, 2004). Kromatografi kertas merupakan salah satu bagian dari teknik pemisahan yang paling sederhana, dan merupakan cara klasik. Dalam pemisahan menggunakan teknik pemisahan kromatografi kertas pada dasarnya didasarkan pada prinsip adsorbsi fase diam dan fase gerak , dimana yang menjadi fase diam adalah kertas yang mengandung selulosa, sedangkan yang menjadi fase geraknya adalah (mobile) eluen yang digunakan untuk setiap spesifikasi campuran yang akan dipisahkan. Semua kromatografi memiliki fase diam ( dapat berupa padatan, atau kombinasi cairan – padatan ) dan fase gerak (berupa cairan atau gas). Fase gerak mengalir melalui fase diam dan membawa komponen – komponen yang berbeda bergerak pada laju yang berbeda.Eluent adalah frasa gerak yang berperan penting pada proses elusi bagi larutan umpan untuk
melewati fasa diam (adsorbent). Interaksi antara adsorben dengan eluent sangat menetukan terjadinya pemisahan komponen. (Kurniawan, 2004). Susunan serat kertas membentuk medium berpori yang bertindak medium berpori yang bertindak sebagai tempat untuk mengalirnya fase gerak. Berbagai macam kertas yang secara komersial tersedia adalah whatman 1,2,31 dan 3 MM, kertas asam asetil, kertas kieselgurh, kertas silikon dan kertas penukar ion juga digunakan. Tersedia juga kertas selulosa murni, kertas selulosa yang dimodifikasi dan kertas serat kaca. Zat – zat hidrofobik dapat dipisahkan pada kedua jenis kertas terakhir ini. Kertas asam asetil atau kertas silikon dapat digunakan untuk zat – zat hidrofobik, sedangkan untuk reagent yang korosif kertas serat kaca dapat digunakan. Untuk memilih kertas, yang menjadi pertimbangan adalah tingkat dan kesempurnaan pemisahan, difusifitaspembentukan spot, efek tailing dan pembentukan komet serta laju pergerakan pelarut terutama untuk teknik descending (Khopkar, 2008). Berdasarkan arahnya kromatografi kertas terbagi atas dua kromatografi kertas satu arah dan kromatografi kertas dua arah.
yaitu
1. Kromatografi Kertas Satu Arah Dalam kromatografi kertas, fase diam adalah kertas serap yang sangat seragam. Fase gerak adalah pelarut atau campuran pelarut yang sesuai. Sampel tinta diteteskan pada garis dasar pensil pada selembar kromatografi kertas. Beberapa pewarna larut dalam jumlah yang minimum dalam pelarut yang sesuai, dan itu juga diteteskan pada garis yang sama. Kertas digantungkan pada wadah yang berisi lapisan tipis pelarut atau campuran pelarut yang sesuai didalamnya. Perlu diperhatikan bahwa batas pelarut berada dibawah garis pada bercak diatasnya. Kadang – kadang kertas hanya digulungkan secara bebas pada silinder dan diikatkan dengan klip kertas pada bagian atas dan bawah. Silinder kemudian ditempatkan dengan posisi berdiri pada bawah wadah. Alasan untuk menutup wadah adalah untuk meyakinkan bahwa atsmosfer dalam gelas kimia terjenuhkan dengan uap pelarut. Penjenuhan udara dalam gelas kimia dengan uap menghentikan penguapan pelarut sama halnya dengan pergerakan pelarut pada kertas (Khopkar, 1990). 2. Kromatografi kertas dua arah Kromatografi kertas dua arah dapat digunakan dalam menyelesaikan masalah pemisahan subtansi yang memiliki nilai Rf yang sangat serupa. Pada saat kromatogram dibuat dari bercak tunggal dari campuran yang ditempatkan ke depan dari garis dasar. Kromatogram ditempatkan dalam
sebuah pelarut sebelum dan sesudah sampai pelarut mendekati bagian atas kertas (Khopkar, 1990). IV
ALAT DAN BAHAN
a. Alat
Chamber kromatografi
Kertas Whatman No. 1
Pipa Kapiler
Gelas ukur
Beker glas
Timbangan analitik
Sendok tanduk
Kertas perkamen b. Bahan
V
Tri Natrium Sitrat
Ammonia 6%
Baku Pewarna
aquadest
CARA KERJA
Menyiapkan alat dan bahan
Melakukan Organoleptis
Penyiapan Larutan Baku
Pembuatan Eluen (menimbang 0,2 g tri natrium sitrat dilarutkan dalam 1,5 ml amonia dan ditambahkan aquadest 10 ml)
Mengidentifikasi hasil pengamatan dari Kromatografi kertas
VI
VII
HASIL PENGAMATAN No.
Bahan Penotol
1. 2. 3. 4.
Sampel Baku dark Red Baku brialian blue Baku Apple Green
5.
Baku tartrasin
Hasi bercak Warna Merah Biru Biru dan Kuning -
Nilai Rf 1,8/10,7 = 0,1 9,5/10,7 = 0,8 9,7/10,7 = 0,9 dan 6,8/10,7= 0,6 -
PEMBAHASAN Hasil praktikum kali ini melakukan identifikasi dan memisahkan suatu campuran dengan teknik kromatografi kertas. Teknik kromatografi kertas adalah salah satu pengembangan dari kromatografi partisi, yang menggunakan kertas sebagai padatan pendukung fase diam dengan melihat hasil bercak pada nilai Rf. Rf merupakan jarak yang ditempuh solut dibagi dengan jarak yang ditempuh fase gerak. Beberapa solut yang telah diuji diantaranya sampel (zat warna buatan), baku dark red, baku brilian blue, baku apple green, dan baku tartrasin. Masing-masing zat dielusi menggunakan eluen campuran tri natrium sitrat yang dilarutkan dengan amoniak dan disajikan pada gambar 7.1. Pada zat warna sampel tidak menimbukan bercak noda warna. Hal ini diduga eluen yang digunakan tidak sesuai dengan sifat sampel. Sehingga sampel ikut terbawa dengan fase gerak. Selain itu penotolan juga diduga terlalu sedikit sehingga bercak tidak nampak. Sehingga zat warna sampel tidak dapat dicocokkan dengan baku warna dan didentifikasi jenisnya. Profil kromatogram menunjukkan 4 bercak noda yaitu pada baku warna dark red meghasilkan bercak merah dengan nilai Rf 0,1; baku brillian blue menghasilkan bercak biru dengan nilai Rf 0,8; dan baku apple green menghasilkan bercak biru dan kuning dengan nilai Rf 0,9 dan 0,6. Pada masing – masing bercak menggunakan jarak fase gerak yaitu 10,7 cm. Identifikasi bercak berwarna merah dengan nilai Rf 0.1 menunjukkan bahwa fase diam menahan baku dark red, sehingga tidak ikut terbawa oleh fase gerak, selain itu diduga dark red juga memiliki sifat yang sama
dengan fase diam atau menurut (Sulaiman, 2007) kekentalan yang tinggi dapat menyebabkan terbatasnya kemampuan gerak senyawa. Baku brillian blue dengan nilai Rf 0,8 menunjukkan nilai Rf baik. Hal ini memenuhi standart Rf baik yaitu (0,2 – 0,8). Tingkat penotolan dan eluen yang sesuai juga dapat mempengaruhi nilai Rf yang baik. Pada Baku apple green terdapat 2 bercak noda berturut – turut dengan nilai Rf 0,9 berwarna biru dan nilai Rf 0,6 berwarna kuning. Hal ini didukung penelitian (Wahyuni, 2013) bahwa apple green akan terpisah menjadi dua bercak warna. Hasil baku tartrasin diharapkan muncul bercak bewarna kuning, akan tetapi tidak menghasilkan bercak. Hal ini diduga karena penotolan yang dilakukan terlalu sedikit. Selain itu eluen yang tidak sesuai dengan sifat tartrasin menyebabkan bercak tidak nampak atau ikut terbawa oleh fase gerak. Jadi urutan nilai Rf yang memiliki nilai tertinggi sampai terendah pada baku dark red, brillian blue dan apple green yaitu: 0,9; 0,8; 0,6; dan 0,1.
VIII KESIMPULAN
Prinsip kromatografi kertas adalah adsorbsi dan kepolaran, dimana adsorbsi didasarkan pada banyaknya komponen dalam campuran yang diardsorbsi pada permukaan fase diam. Dan kepolaran komponen berpengaruh karena komponen akan larut dan terbawa oleh pelarut jika memilki kepolaran yang sama serta kecepatan jarak tempuh pada fase diam dan fase gerak.
Hasil dari praktikum ini sampel tidak dapat diidentifikasi karena tidak menimbukan bercak dengan menggunakan teknik kromatografi kertas.
Daftar Pustaka 1. Putra, Effendy De Lux. (2004). Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dalam Bidang farmasi. Jurnal Kimia Farmasi FMIPA. Universitas Sumatra Utara. 2. Kurniawan Y., dan Santoso H M. (2004). Pengaruh Jumlah umpan Dan laju Alir Eluen Pada Pemisahan Sukrosa Dari Tetes Tebu Secara Kromatografi (The Effects Of Feed and Eluent Flow Rate Toward
3.
4. 5. 6.
Separation Of Sucrose From Cane Molasses By Chromatography ). Jurnal Ilmu Dasar Vol. 5 No 1. Sulaiman, Hardi G Adang Aanis Kundari Noor. (2007). Pemisahan dan Karakterisasi Spesi Senyawa Kompleks Ytrium-90 Dengan Elektroforesis Kertas. JFN, Vol. 1 No.2 November 2007 . Yogyakarta. Khopkar, SM. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. UI- Press. Jakarta. Khopkar, SM. 2008. Konsep Dasar Kimia Analitik. UI-Press. Jakarta. Wahyuni, ika. (2013). Pemerikasaan Kandungan Pemanis dan Pewarna Sintetik dalam es lilin Tidak bermerek dan tidak berlabel yang diproduksi oleh industri rumah tangga “x” Kecamatan Ambulu – Jember. Journal imiah Mahasiswa universitas Surabaya, Vol 2 N0 2.
