Laporan Fito 4

Laporan Praktikum Fitofarmasi Pembuatan Fingerprint dan Penetapan Senyawa Marker dalam Ekstrak Rimpang Kencur (Ekstrak  Kaempferia galanga L.

!isusun ole" # $ES%& M'S%K& S&R% )*+)+*,+*-++))* Farmasi !  Kelompok F&K'L&S %LM' KESE/&&$ 0'R'S&$ F&RM&S%

%.

%%. %%%.

u1uan Praktikum Untuk memahami cara menentukan Fingerprint dan menetapkan kadar senyawa

marker dalam ekstrak anggal Praktikum 24 November 2015 in1auan Pustaka Serangkaian proses yang melibatkan berbagai metode pada standarisasi herbal yaitu analisis kimiawi berdasarkan data armakologis! melibatkan analisis isik dan mikrobiologi berdasarkan karakteristik umum keamanan "toksikologi# terhadap suatu ekstrak alam "tumbuhan obat#$ %ada kromatograi Fingerprint merupakan analisis semikuantitati dari ekstrak tanaman dan mampu melakukan penggambaran secara sistemats semua konsistuen yang ada di dalam tanaman$ &apat 'uga diartikan kromatograi Fingerprint merupakan pola kromatograi baik segi armakologi secara ak ti dari suatu tanaman ataupun karakteristik kimiawi yang ada pada ekstrak$ (etode Fingerprint dilakukan dengan melakukan analisis kromatograi dari suatu spesies tanaman yang akti secara armakologis atau hanya melakukan rerata intensi puncak)puncak kromatogram dari minimal tiga daerah penghasil spesies tanaman obat yang tanpa memperhatikan aspek  armakologis yang ditun'ukan untuk control kualitas sa'a$ *da beberapa macam teknik ! yaitu ada 4 yang digunakan untuk pemisahan  permunian kandungan tumbuhan atau bisa 'uga dilakukan dengan gabu ngan dari empat teknik tersebut$ +eempat teknik tersebut adalah kromatograi kertas!kromatograi lapis tipis!kromatograi gas cair dan kromatograi cair kiner'a tinggi$ (arker dapat digunakan untuk identiikasi dengan benar dan autentik sumber  bahan alam! mencapai kualitas yang konsisten! mengkuantiikasi senyawa armakologik akti pada produk akhir! atau memastikan eikasi produk$ (arker sangat  penting dalam evaluasi 'aminan kualitas produk$ Senyawa marker tidak harus memiliki aktivitas armakologi$ Senyawa marker dapat digolongkan men'adi 4 kategori berdasarkan bioaktivitasnya$

a$ ,at akti  (erupakan senyawa kimia dengan aktivitas klinik yang diketahui$ -ontoh. epedrin pada  Epedra sinensis dan sylimarin pada Sylibum marianum$

 b$ (arker akti  (erupakan /at kimia yang mempunyai eek armakologi! tapi belum tentu mempunyai eikasi klinik$ -ontoh. alliin pada Allium sativum! hiperisin dan hiperoryn pada St$ ohn ort " Hypericum perforatum#$ c$ (arker analisis (erupakan /at kimia yang dipilih untuk determinasi kuantitati tetapi belum tentu mempunyai aktivitas biologi dan eikasi klinis$ Selain itu! marker ini 'uga berguna untuk  identiikasi positi bahan baku dan ekstrak untuk standardisasi$ -ontoh. alkilamid yang  berbeda ditemukan pada akar Echinaceae angustifolia dan E. purpurea tetapi tidak ada  pada E. pallida$ d$ (arker negati  Senyawa akti dengan /at akti toksik atau allergenik$ -ontoh. *sam ginkolat pada Gynko biloba$ +encur " Kaemferia galanga $# merupakan tanaman tropis yang mengandung senyawa etil) p-metoksisinamat sebagai komponen utama dan terkandung pula senyawa lainnya seperti etil sinamat dan p)metoksistiren$ +adar etil) p-metoksisinamat dalam kencur cukup tinggi "tergantung spesiesnya# dengan bias sampai 103$ %2.

3a"an 1$ kstrak kencur dalam etanol 03 2$ Standar etil para metoksi sinamat " %(S #

2.

&lat 1$ 2$ 8$ 4$ 5$ 9$ :$

6- scanner  empeng +6 ukuran 20 cm 7 10 cm abu ukur 5 ml abu ukur 5 ml dan 10 ml %ipet mikro -awan 6imbang ;ial bertutup "sebelumnya sudah dibilas dengan etanol lalu dikeringkan

sebelum dipakai# <$ =elas ukur 100 ml $ >atang pengaduk 2%.

Pembuatan Eluen

luen yang digunakan adalah n)heksan . etil asetat . asam ormiat "0.10.1# $ >uatlah eluen sebanyak 101 ml$ (asukkan ke dalam chmber $ ?omogenkan didalam chamber dengan cara digoyang)goyang $ *pabila volume eluen terlalu banyak ! maka dikurangi$ angan sampai totolan awal pada lempeng +6 tercelup didalam eluen 2%%.

Pembuatan Larutan 3aku

Pembuatan larutan baku induk (BI) 10.000 ppm Ditimbang standar EPMS dengan seksama sebanyak 100.0 mg, ditambah dengan 5 mL etanol 96%, diltrasonik selama 5 menit kemdian ditambah dengan etanol 96% sam!ai te!at 10,0 mL.

Pembuatan baku kerja Lartan bak

Diambil lartan  "ambahkan !elart etanol 96% yang indk

akan dibat #00 !!m '00 !!m (00 !!m 500 !!m 600 !!m )00 !!m

10.000

!!m sebanyak 100,0 $L

ad 5,0 ml dalam lab kr 5,0

150,0 $L

ml& ad 5,0 ml dalam lab kr 5,0

#00,0 $L

ml& ad 5,0 ml dalam lab kr 5,0

#50,0 $L

ml& ad 5,0 ml dalam lab kr 5,0

'00,0 $L

ml& ad 5,0 ml dalam lab kr 5,0

(00,0 $L

ml& ad 5,0 ml dalam lab kr 5,0 ml&

2%%%. Preparasi sampel 

Sam!el ntk Peneta!an *adar

Ditimbang sam!el sebanyak #0 mg masing+masing sebanyak tiga kali, ditambah !elart masing+masing sebanyak # mL. Diltrasonik selama 5 menit, ditambah etanol 96% sam!ai 5,0 ml. 

Sam!el ntk Penentan e-oeri Ditimbang sam!el sebanyak #0 mg masing+masing sebanyak tiga kali, ditambah !elart masing+masing sebanyak # ml, diltrasonik selama 5 menit, ditambah standar EPMS 5000 !!m sebanyak 100 $l, kemdan ditambah !elart sam!ai 5,0 mL.



Penotolan sam!el dan standar !ada lem!eng *L" )

Dilakkan !engen-eran/ ambil 1000 $L lartan sam!el ditambah dengan etanol 96% sebanyak 1000 $L dalam ial bertt!&.

)  "otolkan sam!el dan sam!el ntk re-oeri sebanyak # $L, sedangkan

standar EPMS sebanyak # $L !ada !lat *L".

IX. o

Cara Kerja

Penentuan panjang gelombang maksimum Lem!eng *L" yang sdah di+s-an !ada !anang gelombang #5( dan '65 nm, kemdian di+s-an !ada !anang gelombang #00+(00 nm. Dari sini

da!at

diketahi

!ada

!anang

gelombang

bera!a

EPMS

memberikan absorban maksimm. Panang gelombang maksimm tersebt yang akan dignakan ntk !engkran. o

Penentuan linearitas Linearitas menentkan dari lartan standart EPMS !ada lem!eng *L", kemdian dianalisis dengan menggnakan *L"+densitometer !ada !anang gelombang maksimm. Dihitng bera!a regresi linear antara

o

kadar dan las area noda. Penentuan presisi ntk menghitng !resisi, ditotolkan sam!el masing+masing # $L dan lartan standar EPMS masing+masing # $L !ada lem!eng *L". Lem!eng ini kemdian dielasi dengan 2ase gerak dan dianalisis menggnakan

*L"+densitometer !ada !anang gelombang maksimm.Sehingga da!at o

dihitng bera!a standart deiasi SD& dan koe3sien ariasinya *4&. Penentuan akurasi ntk menentkan % re-oery, ditotolkan sam!el re-oery masing+ masing # $L lihat !re!arasi sam!el ntk re-oery& dan lartan standar EPMS masing+masing # $L !ada lem!eng *L". yLem!eng ini kemdian dielasi dengan 2ase gerak dan dianalisis menggnakan *L"+ densitometer !ada !anang gelombang maksimm.  Kadar yang diperoleh Ct  = recovery = x 100  Kadar yang sebenarnya Cp + Cst 

Dimana " ! st 7asil yang sdah

 *adar EPMS yang di!eroleh  *adar EPMS dalam sam!el  *adar standar EPMS yang ditambahkan di!eroleh kemdian dihitng standar deiasi SD& dan

koe3sen ariasinya *4&.