UNIVERSIDAD ANDRÉS BELLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR BIO-131 SECCIÓN 2 PROFESORES: INGRID ARAYA PATRICIO PONCE
TRABAJO PRÁCTICO N°4: COMPONENTES QUÍMICOS DE LA CÉLULA.
Autores: - Mauricio Hinojosa Cuellar. - Thomas Hofman . - Pamela Marin Villalón. - Michel Melendes Cornejo.
- 2011 -
Índice Página
I.- Introducción…………………………………………………………………………………..……..
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II.- Objetivos………………………………………………………………………………..…………..
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III.- Materiales y métodos……………………………………………………………………..……….
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Actividad Nº1…………………………………………………………………………………
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Actividad Nº2…………………………………………………………………………………
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Actividad Nº3…………………………………………………………………………………
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Actividad Nº4…………………………………………………………………………………
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Actividad Nº5…………………………………………………………………………………
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IV.- Resultados…………………………………………………………………………………..……..
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Actividad Nº1…………………………………………………………………………………
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Actividad Nº2…………………………………………………………………………………
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Actividad Nº3…………………………………………………………………………………
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Actividad Nº4…………………………………………………………………………………
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Actividad Nº5…………………………………………………………………………………
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V.- Discusión……………………………………………………………………………………………
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VI.- Conclusión…………………………………………………………………………........................
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VII.- Bibliografía………………………………………………………………………………………..
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I.- Introducción Los seres vivos están caracterizados, entre otras cosas, por poseer una organización celular, es decir, determinadas moléculas se organizan de una forma particular y precisa e interactúan entre sí para establecer la estructura celular (1). La química de la célula está basada en los compuestos de carbono. Éste se destaca del resto de los elementos por su capacidad para formar grandes moléculas. Estas moléculas se denominan moléculas orgánicas, mientras que el resto, incluida el agua, reciben el nombre de moléculas inorgánicas. Todas las moléculas orgánicas se sintetizan a partir de un conjunto de compuestos simples, en los que también pueden degradarse. Por ende, los compuestos de una célula se relacionan químicamente, clasificándose en familias diferenciadas, las cuales al polimerizar sus monómeros forman las siguientes macromoléculas: carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. (2) Los hidratos de carbono o glúcidos se componen de átomos de carbono, hidrogeno y oxígeno. Los azúcares más sencillos corresponden a los monosacáridos, (p.ej.glucosa). Estos al agruparse en moléculas más complejas, dan origen a los oligosacáridos (unión de 2 a 6 moléculas de monosacáridos, p.ej. sacarosa) o a los polisacáridos (agrupan cientos o miles de monosacáridos, p.ej. almidón, celulosa). (3) La importancia biológica principal de este tipo de moléculas es que actúan como reserva de energía o pueden conferir estructura, tanto a nivel molecular (forman nucleótidos), como a nivel celular (pared vegetal) o tisular (tejidos vegetales de sostén, con celulosa) (4) Los lípidos son un grupo heterogéneo de compuestos biológicos escasamente solubles en agua debido a su condición hidrofóbica. Los ácidos grasos son los lípidos más simples, y son además constituyentes de otros lípidos más complejos como los fosfolípidos, triglicéridos y colesterol esterificado. Cumplen múltiples funciones en el organismo, como constituyentes de las membranas biológicas, hormonas, vitaminas solubles en grasas (vitamina E), aislantes térmicos, reguladores biológicos y reserva energética. (5) Las proteínas se componen por átomos de carbono, oxígeno, hidrógeno y nitrógeno. Los monómeros de las proteínas son los aminoácidos, que se unen por medio de un enlace peptídico y forman estructuras más complejas. Las principales funciones de las proteínas son:función reguladora, función de defensa (inmunoglobulinas), función de transporte (hemoglobina), función energética (en caso de necesidad), función amortiguadora, función enzimática (aceleran la velocidad de las reacciones químicas del metabolismo), participan en el movimiento celular (contracción muscular a través de la miosina y actina), función de resistencia (colágeno, elastina y reticulina). (6) Los ácidos nucleicos tienen dos tipos principales, el ADN (ácido desoxirribonucleico), y el ARN (ácido ribonucleico) estas son grandes moléculas constituidas por la unión de monómeros, llamados nucleótidos. Los nucleótidos se forman por la unión de una base nitrogenada, una pentosa y uno o más ácidos fosfóricos. (7) Los ácidos nucleicos se diferencian en el azúcar que contienen (ribosa en el ARN y desoxirribosa en ADN) y en las hebras (una sola hebra en el ARN y doble hebra en el ADN). Las funciones de los ácidos nucleicos son principalmente dos: almacenamiento de la información hereditaria (ADN) y síntesis proteica, que se lleva a cabo mediante los distintos tipos de ARN ( ARN mensajero, ARN ribosomal y ARN de transferencia). (3) II.- Objetivos El objetivo de este laboratorio es que seamos capaces de reconocer y diferenciar moléculas orgánicas e inorgánicas por medio de una actividad experimental en que a través de la justificación de los resultados obtenidos, se conozcan los métodos de reconocimiento utilizados. 3
III.- Materiales y métodos Actividad Nº1: Reconocimiento de hidratos de carbono. Parte A: Identificación de monosacáridos mediante la reacción de Fehling Para la identificación de monosacáridos preparamos y rotulamos 5 tubos de ensayo con diferentes tipos de soluciones. En cada tubo agregamos alrededor de 3 ml de las diferentes sustancias. Para el tubo numero 1 agregamos agua destilada, en el tubo 2 agregamos una solución de glucosa al 1%, en el tubo 3 agregamos una solución de almidón al 1%, en el tubo numero 4 agregamos leche y por ultimo en el tubo numero 5 agregamos una solución de cloruro de sodio al 1%. Después de agregar las distintas soluciones agregamos 1 ml del reactivo de Fehling A y 1 ml del reactivo de Fehling B, ambos ya preparados con anterioridad. Después de agregar los reactivos agitamos la solución y los colocamos en una gradilla dentro de la máquina de baño termo regulado, a una temperatura de alrededor de los 79°C por unos 3 minutos. Luego dejamos enfriar las soluciones y anotamos nuestras observaciones con respecto a los precipitados en las distintas soluciones, si es que estaban presentes. Parte B: Identificación de polisacáridos mediante la prueba de Lugol De la misma manera que el experimento anterior preparamos y rotulamos 5 tubos de ensayo con las mismas soluciones nombradas anteriormente. En este caso no usamos los reactivos de Fehling, pero en cambio ocupamos el reactivo de Lugol. Agregamos una gota del reactivo de Lugol a cada tubo de ensayo y agitamos la mezcla. A diferencia del experimento anterior las soluciones no fueron calentadas en el baño termo regulado. Observamos e interpretamos los resultados de cada uno de los tubos de ensayo. Actividad Nº2: Reconocimiento de proteínas. En esta parte del laboratorio práctico preparamos y rotulamos 5 tubos de ensayo con diferentes tipos de soluciones. En cada tubo agregamos alrededor de 2 ml de las distintas soluciones. Para el tubo 1 agregamos agua destilada, en el tubo 2 agregamos una solución de glicina al 1%, en el tubo 3 agregamos clara de huevo al 1%, en el tubo 4 agregamos leche y por último en el tubo 5 agregamos cloruro de sodio al 1%. Después de preparar los distintos tubos agregamos 2 ml del reactivo de Biuret a cada uno de los tubos. Posterior a eso agitamos las muestras y observamos e interpretamos los distintos resultados en cada uno de los tubos. Actividad Nº3: Reconocimiento de lípidos. Para el reconocimiento de lípidos preparamos y rotulamos 2 tubos de ensayo. Primero agregamos en uno de los tubos de ensayo 3 ml de agua destilada y en el otro 3 ml de éter. Posterior a eso procedimos con agregar a cada uno de los tubos 1 ml de aceite y agitamos vigorosamente la solución de cada uno de los tubos. Observamos la formación de micelas y dejamos reposando los tubos por un tiempo. Después de eso registramos nuestras observaciones acerca de las 2 reacciones en los tubos de ensayo. Actividad Nº4: Reconocimiento de sales minerales. Preparamos y rotulamos 2 tubos de ensayo para el reconocimiento de Sales Minerales. A cada uno de los 2 tubos le agregamos 3 ml de Cloruro de Calcio. El tubo numero 1 fue asignado para la identificación de cloruros por lo que agregamos 1 ml de solución de Nitrato de Plata al 1%. Observamos e interpretamos los resultados acorde al precipitado y lo dicho en la guía. Para la identificación de calcio ocupamos el tubo 2. A este le agregamos 1 ml de una solución de Oxalato de Amonio al 1%. De la misma manera observamos e interpretamos los resultados acorde al precipitado y lo dicho en la guía.
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Actividad Nº5: Reconocimiento de enzimas. Para el reconocimiento de enzimas, preparamos y rotulamos 2 tubos de ensayo. En cada uno de los tubos de ensayo agregamos 1 trozo de hígado para después hacerlo reaccionar con peróxido de hidrogeno. En el tubo numero 1 introducimos un trozo de hígado y posterior a eso agregamos 5 ml de peróxido de hidrogeno. Luego observamos e interpretamos los resultados. Para el tubo numero 2 agregamos un trozo de hígado pero a este le agregamos agua destilada primero para así cocer el hígado en el baño termorregulado a una temperatura de 88.7 °C. Después de unos 10 minutos el hígado estaba cocido, por lo que procedimos a remover el exceso de agua. Después de esto agregamos 5 ml de peróxido de hidrogeno y observamos e interpretamos los resultados.
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IV.- Resultados Actividad Nº1: Reconocimiento de hidratos de carbono. A) Identificación de monosacáridos mediante la reacción de Fehling:
Tabla 1: Imágenes y observaciones de las muestras con reactivo de Fehling. Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Imagen de la muestra luego del procedimiento
Muestra
Agua destilada H2O (1 mL) Reactivo Fehling A (1 mL) utilizado Fehling B (1 mL) Observaciones. La muestra * 10 minutos mantiene el color después de azul inicial. hervir las No presenta muestras por 3 precipitado.
minutos en baño termorregulado a 79ºC.
Solución de Glucosa 1% (1 mL) Fehling A (1 mL). Fehling B (1 mL). La muestra se ve de color naranjo traslúcido. Presenta una precipitación de color naranjo intenso de 5 mm de altura aproximadamente.
Solución de Almidón 1% (1 mL) Fehling A (1 mL). Fehling B (1 mL). La muestra no presenta variación en el color, se mantiene azul. Ausencia de precipitado.
Tubo 4
Leche (1 mL) Fehling A (1 mL). Fehling B (1 mL). La muestra se separa en tres capas. La primera, más superficial, de color café claro. La segunda, en medio de las otras dos, de color café oscuro. Y una tercera capa de precipitado al fondo del tubo, de color naranjo de 5 a 6 mm de espesor.
Tubo 5
Solución de NaCl 1% (1 mL) Fehling A (1 mL). Fehling B (1 mL). La muestra no presenta cambios en su color azul. Ausencia de precipitado.
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B) Identificación de polisacáridos mediante la prueba del Lugol: Tabla 2: Imágenes y observaciones de las muestras con Lugol. Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Imagen de la muestra luego del procedimiento
Muestra Reactivo utilizado Observaciones. * Luego de agitar la muestra.
Agua destilada Solución de H2O Glucosa 1% (1 mL) (1 mL) Lugol diluído Lugol diluído (2 gotas) (2 gotas) La muestra se ve La muestra se ve de color de color amarillento amarillento transparente. transparente.
Solución de Almidón 1% (1 mL) Lugol diluído (2 gotas) La muestra se ve de color morado oscuro.
Actividad Nº2: Reconocimiento de proteínas. Tabla 3: Imágenes y observaciones de las muestras con Biuret. Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Muestra Agua destilada Solución glicina Clara de huevo (1mL) 1% (1mL) (1mL) Reactivo Biuret utilizado (1mL) Imagen de la muestra luego del procedimiento
Biuret (1mL)
Observaciones
Color celeste Color violeta. Al muy claro. principio la Disolución del muestra tenía reactivo. tintes violeta, luego de unos minutos la muestra tomó un color violeta
Color celeste muy claro. Disolución del reactivo.
Biuret (1mL)
Tubo 4
Tubo 5
Leche
Solución de NaCl 1% (1 mL) (1 mL) Lugol diluído Lugol diluído (2 gotas) (2 gotas) La muestra se ve La muestra se ve de color blanco. de color amarillento transparente.
Tubo 4 Leche (1mL) Biuret (1mL)
Color violeta claro. Al principio color violeta claro en una parte de la muestra, luego de un tiempo el color era violeta en su totalidad.
Tubo 5 Solución NaCl 1% (1mL) Biuret (1mL)
Color celeste muy claro. Disolución del reactivo.
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total. - ¿Cómo se explica la diferencia de intensidades en los tubos que presentaron una reacción positiva? En la reacción de biuret la intensidad de coloración depende de la concentración de reactantes al reactivo de biuret que haya en la muestra (10), puesto que podría dar un falso positivo (11), para este caso se descarta la posibilidad de falsos positivos debido a que los resultados obtenidos concordaron con lo esperado, por lo tanto podemos decir que en el tubo 3 había una mayor concentración de proteínas que en el tubo 4 que contenía leche. Actividad Nº3: Reconocimiento de lípidos. Tabla 4: Imágenes y observaciones de las muestras de aceite con agua y aceite con éter. Tubo 1 Tubo 2 Muestra Agua + Aceite Éter + Aceite (1mL) (1mL) (1mL) (1mL) Imagen de la muestra luego del procedimiento
Observaciones
Muestra agitada fuertemente: Al añadir 1 ml de agua a 1 ml de aceite y luego agitar la muestra fuertemente, se pudo observar la formación de gotitas en casi la totalidad de la mezcla. Además de una separación muy marcada entre el agua y el aceite, viéndose el aceite suspendido sobre el agua. Muestra en reposo: Las gotitas que antes se encontraban en casi la totalidad de la mezcla ahora solo se observaron en límite entre el agua y el aceite. Se aprecia la misma separación entre el agua y el aceite que en la muestra agitada.
Al añadir un 1 ml de éter a 1 ml de aceite, se pudo observar que el aceite se disolvió en el éter, formándose una solución homogénea de aspecto amarillento.
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Actividad Nº4: Reconocimiento de sales minerales. Tabla 5: Imágenes y observaciones de las muestras de reconocimiento de sales minerales. Tubo 1 Tubo 2 Muestra Solución de nitrato de plata 1% Solución de oxalato de amonio (1mL) 1% (1mL) Reactivo utilizado Cloruro de calcio Cloruro de calcio (1mL) (1mL) Imagen de la muestra luego del procedimiento
Observaciones
Al principio, tomó un color blanco lechoso con precipitados de color blanco tanto al fondo como en la superficie de la muestra. Luego de unos minutos, el líquido se tornó translúcido con pequeñas partículas en suspensión.
Al principio, tomó un color blanco total. Luego de 30 minutos la muestra se tornó de color blanco transparente.
Actividad Nº5: Reconocimiento de enzimas. Tabla 6: Imágenes y observaciones de las muestras de hígado en reconocimiento de enzimas. Tubo 1 Tubo 2 Muestra Hígado crudo Hígado hervido por minutos a 88,7ºC. Reactivo utilizado Peróxido de hidrógeno Peróxido de hidrógeno (5mL) (5mL) Imagen de la muestra luego del procedimiento
Observaciones
Al agregar el peróxido de hidrogeno empezaron a salir burbujas, las cuales subieron por el tubo hasta rebalsar. Se podían apreciar burbujas saliendo del hígado durante unos 5 minutos después de haber agregado el peróxido.
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Al agregar el peróxido de hidrógeno no se produjo ningún tipo de reacción. En otras palabras la muestra quedó intacta.
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V.- Discusión Para la experimentación con reactivo de Fehling: En el caso de la reacción en el Tubo 1, que contenía agua, la muestra mantuvo su color azul debido a que esta sustancia, como ya sabemos, no posee hidratos de carbono, de modo que es utilizada como muestra blanco en el procedimiento, ya que siendo solvente en la muestra, si se produce en este tubo una reacción, debería producirse en todos los otros tubos. El Tubo 2, por otro lado, que contenía una solución de glucosa al 1%, sí presentó una modificación en su color, ya que, como sabemos la glucosa es un monosacárido y por tanto puede ser reconocido mediante la reacción con Fehling, produciendo un precipitado de color anaranjado como se vio en los resultados. Cuando esta molécula está presente en un medio en que existen grupos aldehídos (-CHO), como en los monosacáridos y algunos disacáridos, oxida a este grupo funcional y se produce el precipitado de cobre reducido de +2 a +1. (8) En este caso la reacción produce una oxidación del –CHO del carbono 1 de la molécula de glucosa, precipitando el cobre reducido en el fondo del tubo, según la reacción (8): calor Azúcar reductor + 2 H2O + complejo tártaro cúprico ------------ > Cu 2O + derivado del reactivo + ácido carboxílico Para este Tubo, entonces, existe un reconocimiento de un disacárido, que es la lactosa presente en la leche, formado por glucosa y galactosa. Lo anterior, también explica que en el Tubo 3, en el que había almidón, no hubiese ninguna reacción. Para el procedimiento realizado con Lugol: Los resultados en el Tubo 1 fueron negativos al igual que en el procedimiento anterior porque, como ya se mencionó, el agua es utilizada como muestra blanco en el procedimiento, ya que siendo solvente en la muestra, si se produce en este tubo una reacción, debería producirse en todos los otros tubos. En la muestra de glucosa 1%, no hubo cambios en el color más allá de la dilución del color del lugol en la muestra. Por el contrario, en el Tubo 3 en que la muestra era una solución de almidón 1% (polisacárido), hubo un gran cambio en el color de la muestra que evidencia la reacción de ésta con el reactivo, o más bien un cambio de inclusión. En la actividad 2 de reconocimiento de proteínas usamos el reactivo de biuret, este se llama así debido a que el “compuesto coloreado formado por la condensación de dos moléculas de urea con eliminación de amoníaco. Esta reacción está dada por aquellas sustancias cuyas moléculas contienen dos grupos carbamino (-CO. NH) unidos directamente o a través de un solo átomo de carbono o nitrógeno” (12) esto nos da un color azul violeta, que en este caso nos denota la presencia de proteínas en la muestra. En el tubo 1 que contenía agua no obtuvo un color azul violeta debido a que el reactivo de biuret no reacciono con el agua debido a lo anteriormente referido, por lo que podemos decir que la muestra y el reactivo estaban correctos y sin impurezas, a esto se le llama un control negativo El tubo 2 que estaba ocupado por glicina 1 % tampoco vimos reacción esto es debido a que al ser un aminoácido la glicina no contenía enlaces peptídicos o dicho de otra forma no tenía el mínimo de grupos carbamino necesarios para producir la reacción, esto nos dice que el reactivo de biuret funciona de acuerdo a la teoría que manejamos En la muestra contenida en el tubo 3 había clara de huevo, según los resultados obtenidos, el color de la muestra cambio a azul violeta, esto es concordarte de acuerdo a lo que dijimos antes, debido a que la clara de huevo tiene ovoalbúmina en su mayoría y conoalbumina entre otros(13), las que son proteínas Para la muestra del tubo 4 que contenía leche, según los resultados, vimos el cambio de color correspondiente a la reacción de biuret, esto según la imagen 1 es concordante debido a que la leche tiene proteínas En la muestra 5 donde colocamos la solución de NaCl 1 % no vimos la coloración característica a la presencia de proteínas, debido a que el NaCl en agua se disocia en iones imposibles de reaccionar con el reactivo de biuret.
Imagen 1: Tabla de proteínas presentes en la leche.
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En la actividad de reconocimiento de lípidos, pudimos observar diferentes situaciones: En la muestra de agua más aceite, observamos que el aceite no se disolvió en el agua, la explicación de por qué no se mezclaron tiene que ver con la estructura molecular de ambos líquidos. El agua es una molécula polar la cual está compuesta por tres átomos: dos de hidrógeno y uno de oxígeno. Este líquido no posee fuerzas de atracción para tentar a una molécula de agua. Para que pudiera existir atracción entre estos líquidos los extremos de las moléculas del agua tendrían que ser afines con los del aceite, cosa que no sucede.(14) Las interacciones entre las moléculas se rigen por varios parámetros, entre ellos esta “lo semejante disuelve a lo semejante”, inferimos entonces que el agua disuelve solo a sustancias polares, por ende el aceite al ser apolar no puede ser disuelto.(15) Observamos también que el aceite flota sobre el agua, esto se debe sencillamente a que el aceite es menos denso que el agua por lo tanto queda suspendido sobre ella.(14) Además vimos que se formaron micelas en la muestra. Por ultimo la variación en el numero y disposición al dejar la muestra en reposo, se debe a que solo formará micelas la porción del aceite que esta en contacto con el agua, por eso la muestra al haber reposado y haberse separado completamente el agua del aceite, se reagruparon las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad se sitúa sobre la capa del agua (16). En la muestra de éter mas aceite, observamos totalmente lo contrario, el aceite se disolvió completamente en el éter. En la actividad 4 de reconocimiento de sales minerales en el tubo A, el objetivo era la identificación de cloruros usando nitrato de plata, nuestra muestra al ser cloruro de calcio reacciono con el nitrato de plata formando AgCl lo que vimos como el precipitado blanco de aspecto lechoso (17), la reacción está dada por: CaCl2(aq) + 2AgNO3 (aq) 2 AgCl (s) + Ca(NO 3)2 (aq) Para el tubo B en donde identificamos la presencia de calcio usando el oxalato de amonio, vertiéndolo en el cloruro de calcio, según los resultados logramos observar un precipitado blanco cristalino después de un tiempo, debido a que el calcio reacciono con el oxalato de amonio(17) formando oxalato de calcio esta reacción se describe según la ecuación química: (NH4)2C2O4(aq) + CaCl2(aq) CaC2O4(s) + 2NH4Cl(aq) Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica y se dedican a la catalización de reacciones químicas. Estas hacen posible que reacciones, que solas ocurrirían a muy bajas velocidades, ocurran de manera más rápida y eficiente. En el caso de la catalasa esta cataliza la descomposición de peróxido de hidrogeno, producido en el metabolismo celular, en agua y oxigeno según la siguiente reacción:
La catalasa es una de las enzimas más abundantes en la naturaleza y se encuentra distribuida en todo nuestro cuerpo. Esta enzima esta en abundancia en tejidos como el hígado y los riñones, principalmente. A nivel celular se encuentra en la mitocondrias y los peroxisomas, donde realiza la reacción antes señalada. En nuestro experimento de reconocimiento de enzimas hicimos reaccionar el peróxido de hidrogeno con 2 trozos de hígado en diferentes condiciones. Primero hicimos reaccionar el peróxido de hidrogeno con un trozo de hígado no cocido y pudimos ver la producción de oxigeno que se vio manifestado con el gran numero de burbujas que salieron de la solución. En el caso del hígado cocido no pudimos ver una producción de oxigeno ya que la enzima se desnaturalizo, perdiendo así su estructura terciaria debido a las altas temperaturas. Al perder la enzima su estructura terciaria su sitio activo fue inactivado dejando a la enzima fuera de funcionamiento, es por esto que no se produjo ningún tipo de reacción con el hígado cocido. Un correcto funcionamiento de la catalasa es de crucial importancia en el cuerpo humano ya que sin ella se pueden producir un sin número de enfermedades. El peróxido de hidrogeno es una sustancia muy tóxica e invasiva para el funcionamiento de nuestros sistemas. Entre las enfermedades que se asocian con un mal funcionamiento de la catalasa esta la reperfusión (18), hemólisis (19), lesiones hemorrágicas en la mucosa intestinal (20), entre otras.
VI.- Conclusión En conclusión, como grupo nos hemos dado cuenta acerca de la utilidad de las sustancias usadas en el laboratorio, creemos entender fuertemente las potencialidades en el campo de la medicina que tiene todo este práctico, también este practico nos dio el pie a investigar la cantidad de sustancias que se pueden usar para reconocer distintas cosas en la célula, lo cual nos deja con un suspiro y añoranza de poder entender y lograr a lo largo de nuestra formación, la experticia necesaria para poder usar estas herramientas en favor de nuestra vocación. Algo que nos sorprendió particularmente, y que de principio pasamos por alto y que es sumamente importante al tratar de identificar compuestos en una muestra, es el sistema de la muestra de control negativa, que nos dice en un principio si nuestro experimento es viable, descartando toda posibilidad de contaminación, algo que nos agrado fue el poder comprobar experimentalmente, los conocimientos teóricos, en especial el de la desnaturalización en la catalasa.
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VII.- Bibliografía - Libros:
(2) B. Alberts. Introducción a la Biología Celular. (2007) Editorial Médica Panamericana, 2ª edición. Madrid. pp. 50-51. (18) Gulati G. Ischemia-reperfusion injury biochemical alterations in peroxisomes of rat kidney. Arch Biochem Biophys 1992; 15:90-100 (19) Durak I, Akyol D, Basesme E. Reduced erythrocytes defense mechanism against free radical toxicity in patients with chronical renal failure. Nephron 1994; 66:76-80 (20) Schoenberg MH. Reperfusion injury after intestinal ischemia. Crit Care Med 1993; 21:1376-86 - Páginas de internet:
(1) http://www.genomasur.com/lecturas/Guia02-1.htm (3) http://www2.udec.cl/~lilherna/molorganic.html (4) http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/biomol/contenidos5.htm (5) http://www.bio.puc.cl/vinsalud/boletin/42lipidos.htm (6) http://www.enbuenasmanos.com/articulos/muestra.asp?art=546 (7) http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/biomol/contenidos18.htm (8) http://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r46784.PDF (9)http://webcache.googleusercontent.com/search? q=cache:35J6GsxwhdkJ:www.scribd.com/doc/7244232/CARBOHIDRATOS+reaccion+quimica+del+ lugol&cd=5&hl=es&ct=clnk&source=www.google.com (10)http://www.ehu.es/biofisica/juanma/lab3/pdf_doc/biuret.pdf (11) http://www.modna.com/public/mft/producto/p1928.htm (12) http://es.scribd.com/doc/11323090/Determinacion-de-Proteinas (13) http://www.nuevaalejandria.com/archivos-curriculares/ciencias/nota-011.htm (14)http://www.buenastareas.com/ensayos/Quimica/556736.html (15) http://www.sagan-gea.org/hojared_AGUA/paginas/19agua.html (16)http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/2BCH/B1_BIOQUIMICA/t12_AGUA/infor macion.htm (17) http://www.csicsif.es/andalucia/modules/mod_ense/revista/pdf/Numero_21/ALMUDENA_MORENO_1.pdf
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