ABSTRACT Kalsium hidroksida telah digunakan intercanal dresing dalam perawatan endodontik karena alkalinnya yang tinggi dan kapasitas antimikrobial. Kalsium hidroksida juga bisa menguraikan jaringan nekrotik, mencegah resorpsi akar gigi dan meregenerasi jaringan baru yang keras. Tujuan dari penelitian ini adalah menentukan konsenrasi kalsium hidroksida yang memiliki efek antimikrobial tertinggi terhadapStreptococcus viridans. Seluruh sampel dibagi menjadi 5 grup; setiap grup terdiri dari 8 sampel dengan konsentrasi kalsium hidroksida yang berbeda. PENGENALAN Karena kalsium hidroksida diaplikasikan dalam kedokteran gigi, telah digunakan untuk berbagai keperluan seperti liner rongga; Capping pulp langsung dan tidak langsung; apexifikasi; pencegahan penyerapan akar; perforasi iatrogenik; perbaikan rongga dasar dan dinding saluran akar; pengobatan fraktur akar horizontal dan vertikal; Zat utama pasta saluran akar (sealer) dan saluran akar (filler); dan bahan irigasi. Seiring dengan perkembangan sains dan teknologi modern, kalsium hidroksida sebagai saus intrancia telah diperkenalkan pada perawatan endodontik modern untuk mencapai saluran akar steril. Hal ini disebabkan kemampuan kalsium hidroksida untuk mengatasi jaringan nekrotik; Merangsang aktivitas odontoblast dan mampu menembus ke dalam asesoris saluran akar dan tubulus dentinal sehingga akan menurunkan permeabilitas permukaan dentin; Mampu menetralisir kondisi asam yang dihasilkan oleh aktivitas osteoklas sehingga dapat mencegah jaringan yang tersuspensi dari kerusakan lebih lanjut; Karena adanya ion kalsium maka bisa meningkatkan eksudat yang berlebihan hingga kering dan membuat permeabilitas pembuluh darah kapiler menurun; Dan akhirnya kalsium hidroksida memiliki efek antimikroba yang sangat efektif dal am pengobatan endodontik. Grossman dkk., Mengemukakan bahwa obat yang digunakan sebagai saus intrkanal harus memenuhi beberapa persyaratan seperti: pembasmi kuman dan fungisida; zat tidak teriritasi pada jaringan periapikal; stabil dalam larutan; Efek antimikroba panjang; Adanya darah, serum dan turunan protein jaringan tidak menurunkan efeknya; Tegangan permukaan rendah; Tidak mengubah warna gigi. Tronstad et al., 6 mengemukakan bahwa menempatkan kalsium hidroksida ke dalam saluran akar akan meningkatkan pH, menyumbang lingkungan alkali pada jaringan yang berdekatan dengan menyalurkan ion hidroksil melalui tubulus dentin. Peningkatan pH akan membuat kalsium hidroksida bakterisida dan menghambat aktivitas osteoklas. Bila kalsium hidroksida dipecahkan dalam aquabidest steril, akan terurai dalam ion kalsium (Ca2 +) dan ion hidroksil (OH--). Terjadinya ion hidroksil dalam larutan akan membuat lingkungan alkalis (pH = 12,5 pada suhu 37 ° C) dan menghancurkan membran bakteri. Kondisi itu akan membunuh bakteri. Menurut Siquira dan Lopes8, efek antibakteri kalsium hidroksida yang digunakan sebagai saus intrakanal adalah karena kemampuannya menghancurkan sel membran sitoplasma bakteri, protein yang didenaturasi dan menghancurkan DNA bakteri. Bakteri yang paling umum ditemukan di saluran akar yang terinfeksi adalah bakteri gram positif seperti: Streptococcus viridans termasuk Streptococcus hemolyticus, Lactobacillus dan Staphylococcus dan diikuti oleh bakteri gram negatif dan beberapa kelompok jamur.8,9 Grossman dkk menemukan me nemukan dominasi Streptococcus α Hemolitycus seperti Streptococcus viridans (63%), Staphylococcus albus (17%), Dipteroid bacilli (6,5%), Staphylococcus aureus, Bacillus proteus, Bacillus coli. Saifudin10 menemukan Streptococcus α hemolyticus (76,6%) dan bakteri anaerob obligat (23,4%) saluran akar yang terinfeksi. Pada awal 1900, sebuah teori ditemukan pada infeksi fokus dengan menggunakan saus intrakanal dengan efek antimikroba kuat untuk perawatan saluran akar. Ini menyumbang saluran akar steril dan jaringan periapikal dan mencegah kemungkinan penyebaran bakteri berbahaya ke dalam tubuh.6 Grossman et al.5 dan Suzuki dkk.11 menyatakan bahwa saus intrakanal dapat menghancurkan bakteri patogen dan membunuh flora mikroba dari saluran akar yang terinfeksi. Secara umum penggunaan klinis 50% kalsium hidroksida (50 gram kalsium hidroksida bubuk dalam 100 ml air mani steril) didasarkan pada prosedur pabrik.12 Hosoya et al.2 dan Estrela13
menggunakan 44% dan 38% kalsium hidroksida dengan pH = 11,24 dalam studi mereka untuk memeriksa pelepasan ion kalsium ion (Ca2 +) dan hidroksil (OH-) di apikal kanal akar yang berdekatan selama 3 hari. Sjogren et al.14 menyatakan bahwa pasta kalsium hidroksida masih efektif asalkan berada di saluran akar dan menunjukkan kekuatan antimikroba selama tujuh hari. Grossman et al.5 melaporkan bahwa kalsium hidroksida adalah desinfektan yang kuat di saluran akar. Dalam penelitian ini, kalsium hidroksida murni digunakan bukan hanya karena biayanya relatif murah namun juga karena ketersediaannya. Diharapkan kalsium hidroksida murni bisa diaplikasikan sebagai saus intrakanal dalam perawatan endodontik. Konsentrasi optimum kalsium hidroksida sebagai saus intra-kanal yang memiliki efek antimikroba tertinggi pada Streptococcus viridans masih perlu dipelajari lebih lanjut. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui konsentrasi kalsium hidroksida yang memiliki efek antimikroba optimal terhadap Streptococcus viridans. Keuntungan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui konsentrasi kalsium hidroksida yang diaplikasikan sebagai dressing intrkanal, perawatan endodontik yang optimal juga bisa tercapai. Material dan Metode Penelitian ini menggunakan post test only controlled group design. Penelitian dilakukan di Fakultas Kedokteran Gigi dan Kesehatan Lisan Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Airlangga dan uji antimikroba dilakukan di laboratorium mikrobiologi Rumah Sakit Umum Dr. Soetomo Surabaya. Bahannya adalah bubuk kalsium hidroksida murni (M2047, Merck Darmstad, Jerman), bakteri steril aquabidest (Kimia Farma), Media Brain Heart Infusion (BHI), media chocolate agar, normal saline (NaOCl 0,85%), Streptococcus viridans (diisolasi dari pasien ). Persiapan pasta kalsium kalsium Pasta kalsium hidroksida dibuat dengan mencampur bubuk kalsium hidroksida dengan aquabidest steril dengan konsentrasi 50%, 55%, 60%, 65%, dan 70% sampai pasta terbentuk. Campuran dibuat di tabung appendorf, setelah dicampur menggunakan semen spatel steril selama satu menit campuran dihomogenisasi dengan vortex selama 30 detik. Isolasi Streptococcus viridans Streptococcus viridans diisolasi dari gigi anterior rahang atas pasien dengan diagnosis pulpa nekrotik
dan lesi periapikal. Prosedurnya dilakukan sebagai berikut; wilayah kerja diisolasi oleh bendungan karet dan 70% alkohol dioleskan pada gigi permukaan. Pintu masuk rongga dibuat dengan menggunakan bur steril dan mengeluarkan dinding pulpa. Titik kertas steril dimasukkan ke dalam saluran akar selama satu menit, kemudian titik kertas dimasukkan ke dalam Brain Heart Infusion (BHI) dan diinkubasi dalam 37 ° C selama 24 jam. Kultur bakteri diinokulasi kembali dengan menyebarkannya dengan ose ke media agar darah. Setelah inkubasi 37 ° C selama 24 jam, pertumbuhan bakteri diperiksa dengan menggunakan mikroskop cahaya. Bakteri tersebut dibiakkan kembali dengan menggunakan piring agar coklat dan diinkubasi 37 ° C selama 24 jam untuk mengetahui pertumbuhan bakteri positif coccus gram (bentuk rantai, hemolitik). Identifikasi dilakukan dengan pewarnaan gram. Antibacterial examination
Suspension was done by taking colonies of Streptococcus viridans and its culture media using ose, and then mixed by normal saline (NaCl 0.85%) until turbidity equal to standard Mc. Farland 0.5. One ml of S. viridans suspension was taken and put into petridish containing Muller Hinton agar media and spread using sterile spreader. Wells were made at the surface of agar media by placing platinum ring with diameter of 6 mm and 9 mm height. Twenty five μl of Calcium Hydroxide with concentration of 50% (group I), 55% (group II), 60% (group III), 65% (group IV), 70% (group V) were put into the wells in Muller Hinton agar media using pippete and incubated at 37° C for 24 hours. The inhibition zone was measured using caliper (0.5 accuracy; in millimeter).
HASIL
Mean dan standar deviasi zona inhibisi untuk 50%, 55%, 60%, 65%, dan 70% kalsium hidroksida terhadap Streptococcus viridans ditunjukkan pada tabel 1 dan gambar 1. Hasilnya menunjukkan bahwa 60% kalsium hidroksida memiliki penghambatan tertinggi. Zona dibandingkan dengan kelompok lainnya. Analisis statistik menggunakan uji ANOVA One Direction dengan tingkat signifikansi p = 0,05 dilakukan untuk mengetahui perbedaan zona inhibisi kalsium hidroksida terhadap Streptococcus viridans. Hasil statistik menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan zona penghambatan kalsium hidroksida dalam berbagai konsentrasi terhadap Streptococcus viridans (p <0,05). Sedikitnya Signifikan. Selisih (LSD) dilakukan untuk mengetahui perbedaan diameter zona inhibisi. DISKUSI
Pemakaian intra-canal harus diberikan sebelum persiapan saluran akar dalam perawatan endodontik untuk mensterilkan saluran akar baik dari anaerob atau bakteri anaerob fakultatif. Bakteri dominan yang ditemukan di saluran akar adalah Streptococcus viridans yang merupakan anaerob fakultatif. Kalsium hidroksida digunakan sebagai saus intrakanal dalam perawatan endodontik karena memiliki pH alkali (12,5) dan efek anti mikroba tinggi.5,17,22 Efek antimikroba dari bahan atau obat dapat diperiksa dengan tes sensitivitas terhadap bakteri, seperti pengenceran atau metode difusi. Metode difusi agar dipilih berdasarkan beberapa alasan. Pertama, metode ini bisa digunakan untuk evaluasi aktivitas obat antimikroba yang telah ditentukan konsentrasi. Kedua, waktu yang diperlukan untuk menganalisa zona penghambatan relatif singkat. Ketiga, peralatannya sederhana dan mudah didapat. Keempat, biayanya relatif murah, dan yang terpenting adalah metode tersebut bisa menentukan efek bakterisida obat dengan mengamati zona penghambatan yang terjadi pada media agar. Metode ini umumnya digunakan untuk meneliti efek anti mikroba bahan termasuk bahan perawatan endodontik. Di Fiore, 19 Siqueira dan Uzeda, 18 Gomes dkk.20 menyatakan bahwa hasil uji anti mikrobial dengan metode difusi agar tergantung pada beberapa aspek: ukuran molekul material, kelarutan dan difusibilitas material pada media agar, sensitivitas obat, sumber bakteri (strain koloni spesies), jumlah bakteri yang diinokulasi, pH substrat dalam piring, viskositas agar, kondisi penyimpanan agar, waktu inkubasi dan aktivitas metabolik bakteri. Semakin tinggi kelarutan dan difusibilitas material terhadap media, semakin besar zona penghambatannya. Lima puluh persen kalsium hidroksida adalah konsentrasi terendah. Hasil penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa viskositas kalsium hidroksida dicampur dengan aquabidest steril yang mirip dengan pasta. Dalam hal ini, hal ini serupa dengan penggunaan klinis dimana perbandingan antara bubuk kalsium hidroksida dan aquabidest steril dengan konsentrasi 50%. Gomes et al.20 menggunakan 50% konsentrasi pasta kalsium hidroksida membuktikan bahwa bakteri Gram negatif anaerob lebih sensitif terhadap kalsium hidroksida dibandingkan bakteri fikat bakteri anaerob positif Gram. (Tabel 1) yang merupakan efek antimikroba tertinggi dibandingkan kelompok lainnya. Mungkin karena ion hidroksil dilepaskan (OH-) dari kalsium hidroksida. Ion hidroksil (OH-) adalah oksidan radikal bebas yang menunjukkan reaktivitas kuat terhadap sel bakteri.21 Efek ion hidroksil (OH-) sangat reaktif dan cepat menggabungkan dirinya dengan asam lipid, protein dan nukleat yang menghasilkan peroksida lipida. Ini akan meningkatkan permeabilitas membran sel bakteri, dan diikuti denaturasi protein, enzim yang tidak aktif dan penghancuran DNA yang membunuh bakteri.1,12 Dalam konsentrasi ini kalsium hidroksida belum mencapai titik jenuh sehingga kalsium
hidroksida masih mampu berdifusi ke Muller Hinton. Media kultur agar-agar yang telah terkena Streptococcus viridans. Tabel 2 menunjukkan hasil uji antimikroba kalsium hidroksida terhadap Streptococcus viridans. Kalsium hidroksida 55%, dan konsentrasi 60% dibandingkan dengan kelompok 50%, konsentrasi 60% dibandingkan dengan 55%, tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan. Ini mungkin karena viskositas campuran dan jumlah ion hidroksil yang dilepaskan sama. Pada konsentrasi 65% dibandingkan dengan 50%, 55%, dan 60% konsentrasi kalsium hidroksida, dan konsentrasi 70% yang membandingkan 50%, 55%, 60%, 65% kalsium hidroksida menunjukkan perbedaan zona penghambatan yang signifikan terhadap Streptococcus viridans. Ini mungkin karena viskositas bubuk kalsium hidroksida dan aquabidest steril telah mencapai titik jenuh dalam konsentrasi 65% dan 70%, oleh karena itu, ion hidroksil sulit dilepaskan ke media agar menghasilkan penurunan jumlah ion hidroksil dan zona penghambatan kecil. Kelarutan dan kelarutan kalsium hidroksida pada media aga r sangat rendah karena viskositas material yang tinggi. Safavi dan Nakayama7 menyarankan bahwa efek pelarut yang tidak larut dalam air akan menurunkan keefektifan kalsium hidroksida. Hal ini juga dibuktikan oleh Suzuki11 dengan mencampur kalsium hidroksida dan gliserin murni atau propilen glikol (termasuk kendaraan kalsium hidroksida). Kedua bahan tersebut bersifat non-polar sehingga tidak menunjukkan zona inhibisi bakteri. Karena larutan telah mencapai titik jenuh, maka ion hidroksil (OH-) tidak dapat menyebar ke media kultur agar-agar. Jumlah hidroksil (OH-) yang telah dilepaskan akan berkurang dan efek anti mikroba akan menurun. Ada faktor lain seperti kapasitas buffer media kultur yang menurunkan pH. Ini membuat antimikroba kalsium hidroksida penurunan.23, 26 Penelitian menunjukkan bahwa kalsium hidroksida dengan konsentrasi 60% menunjukkan efek antimikroba tertinggi dibandingkan dengan kalsium hidroksida dengan konsentrasi 50%, 55%, 65%, dan 70%.
