FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLÍNICO Y ANATOMÍA PATOLÓGICA
PRÁCTICA Nº 2
Métodos de et!"##$%& de t%$#os o!'(&$#os )*os+ ASIGNATURA: TOXICOLOGÍA SECCIÓN: LC3N1
SEMESTRE: 2015-2
Grupo: B ALUMNO: JIMENEZ IBARRA IB ARRA MIRIAM MIRIAM CÓIGO MA M ATRÍCULA N!: 201"20032# $EC%A E REALIZACIÓN REALIZACIÓN E LA &R'CTICA: 03 () *)+,).r) ()/ 2015 $EC%A E &RESENTA &RESENTACIÓN CIÓN EL IN$ORME: 10 () *)+,).r) ()/ 2015 DOCENTE: Q.F. CECILIA VENTOCILLA CASAYCO
LIMA- PERÚ 2015
INTROUCCIÓN La extracción es una técnica de separación es importante ya que se puede aplicar a todo tipo de mezclas, ya sean éstas sólidas, líquidas o gaseosas. La extracción se basa en la diferencia de solubilidad de los componentes de una mezcla en un disolvente adecuado. La forma más simple de realizar una extracción consiste en tratar la mezcla de compuestos con un disolvente de manera que uno de los componentes se disuelva y los demás no. Sin embargo, la técnica de extracción más empleada consiste en la disolución de la mezcla a separar en un disolvente que disuelva a todos los componentes. continuación, se procede a la adición de un segundo disolvente, no miscible con el primero, de manera que los componentes de la mezcla se distribuyan entre los dos disolventes seg!n su coeficiente de reparto, que está directamente relacionado con la solubilidad de cada compuesto. Si alg!n componente de la mezcla es muy soluble en uno de los disolventes y muy poco en el otro quedará prácticamente todo en el que es soluble, mientras que los otros componentes de la mezcla quedarán en el otro disolvente. La separación de los dos disolventes y su evaporación suministrará residuos enriquecidos en los componentes más solubles. "l principal ob#etivo de la extracción es separar selectivamente el producto de una reacción, o bien eliminar las impurezas que lo acompa$an en la mezcla de reacción, gracias a sus diferencias de solubilidad en el disolvente de extracción elegido. %ambién se tiene otros ob#etivos específicos como son el conocer la técnica de extracción más importante en toxicología y conocer los tipos desustancias comprendidas entre los tóxicos orgánicos que pueden extraerse por medio de esta técnica
II. MARCO TEÓRICO
La extracción es la técnica más empleada para proceder a la separación y purificación de los componentes de una mezcla o para aislar un compuesto orgánico de sus fuentes naturales. &uede definirse como la separación de un componente de una mezcla por medio de un disolvente orgánico 'inmiscible con el agua( en contacto con una fase acuosa. Lo que en realidad se realiza en una extracción es la transferencia de una sustancia de una fase a otra, normalmente de una fase acuosa a una orgánica. "n una extracción los diferentes componentes de una mezcla se distribuyen entre las fases orgánica y acuosa de acuerdo con sus solubilidades relativas. &or e#emplo, consideremos una mezcla constituida por un compuesto orgánico parcialmente soluble en agua y diferentes sales inorgánicas solubles en agua, con todos los componentes de la mezcla disueltos en la suficiente cantidad de agua para disponer de una disolución )omogénea. &ara separar y aislar el compuesto orgánico de esta mezcla se dispone la disolución en un embudo de separación o decantación, se a$ade un disolvente orgánico inmiscible con el agua 'por e#emplo, éter(, se tapa el embudo y se procede tal como se indica en el apartado del procedimiento experimental. La cantidad total del compuesto orgánico presente en la disolución acuosa inicial se repartirá entre la fase orgánica y la fase acuosa de acuerdo con las solubilidades de dic)o compuesto en el disolvente orgánico y en agua. )ora bien, como el compuesto orgánico suele ser muc)o más soluble en disolventes orgánicos que en agua, la mayor parte del compuesto orgánico )abrá quedado disuelto en la fase orgánica y las sales inorgánicas, que no son solubles en disolventes orgánicos, permanecerán en la fase acuosa. *ediante una decantación en el embudo de separación se separan las dos fases, se recoge la fase orgánica y se aísla el compuesto orgánico mediante una destilación del disolvente empleado. "l disolvente ideal para una extracción debería cumplir los siguientes requisitos+ a( debe disolver fácilmente el 'los( compuesto's( orgánico's( a extraer. b( debe tener un punto de ebullición lo más ba#o posible para que se pueda destilar fácilmente. c( deber ser totalmente inmiscible con el agua. d( no debe reaccionar con los compuestos orgánicos a extraer. e( no debe ser inflamable ni tóxico.
f( debe ser relativamente barato.
EXTRACCIÓN 'CIO-BASE on frecuencia se consiguen unas separaciones excelentes de los componentes de una mezcla de compuestos orgánicos utilizando disoluciones acuosas ácidas o básicas que pueden convertir algunas de las sustancias de la mezcla en sales solubles en agua e insolubles en los disolventes orgánicos mediante una sencilla reacción ácido-base. "ste tipo de extracción involucra reacciones simples entre ácidos y bases. "l cambio de solubilidad que experimentan entre sí el ácido y su base con#ugada, permite su separación. onsideremos, por e#emplo, un alco)ol, un ácido carboxílico y una amina.
Las especies iónicas, alcóxido y carboxilato, son solubles en soluciones acuosas como sales de metales alcalinos, al igual que los cloruros de /01 2 , mientras que las especies no disociadas 'alco)ol, ácido carboxílico y amina( son muy solubles en solventes orgánicos3 de igual manera lo son las sustancias neutras 'e#.+ )idrocarburos(. "l valor de p4a de los ácidos y p4b de las bases permite estimar las especies que predominan a distintos valores de p0. "n la práctica se va a extraer ácido benzoico de una disolución orgánica. "n el siguiente esquema se muestran los procesos involucrados+
&ara extraer el ácido benzoico, disuelto por e#emplo en diclorometano, se deberá agitar la disolución orgánica con una disolución saturada de carbonato ácido de sodio 'base débil(. "l carbonato ácido reaccionará con el ácido para formar benzoato 'como benzoato de sodio(, soluble en la fase acuosa, pudiéndose separar en un embudo de decantación.
III. METODOLOGÍA
*ateriales - 5iferentes muestras problemas - *atraces de 677 mL - &eras de separación 689 mL - Soporte universal para peras - %iras indicadoras de p0
Se utilizó orina como muestra problema
"quipos - :a$o *aría '/; S"
eactivos+ - cetona - =cido sulf!rico 8>1 /. - =cido clor)ídrico 67?. - gua destilada - 0idróxido de amonio 67? - 0idróxido de sodio 67? - @ter dietílico q.p. - %ungstato de sodio 67?
Se utilizó la campana extractora como medida
Soluciones extractoras
Métodos Las técnicas son+ . on disolvente polar 'etanol(+ %écnica de Stas-;tto.
Soluciones reguladoras de H
:. on disolventes apolar+ los más frecuentes son éter etílico, cloroformo y diclorometano. 5irecta+ sólo aplicable a muestras biológicas limpias como la orina. &revia purificación de la muestra 'eliminación de proteínas( • •
Procedimiento &ara una muestra 'visceras( se desproteiniza previamente . Se procederá a )acer una desproteinización seg!n el método de urry obteniéndose un filtrado limpio. • • • • • •
*uestra &roblema 'Aísceras( 677 g %ungstato de sódio 67? 687 mL gua destilada 6B7 mL 0idróxido de sódio 67? 87 mL cido sulf!rico 8>1/ 677 mL :a$o *aria )irviente por 69C, filtrar.
:. Luego se )ará una extracción con solventes orgánicos a p0 ácido '8-1( con 0l q.p. con el solvente inmiscible, se guarda la fase orgánica. . Luego, con el mismo filtrado, se llevará a p0 alcalino con el /0D;0q.p. 'E,9( y se extraerá con otra alícuota del solvente, se guarda la fase orgánica. 5. mbas fases orgánicas servirán para futuras prácticas.
IV. RESULTADOS "F%G;/ G5
5espues del procedimento se tendra dos fases
;/S"A L *<"S% "/ HS; &"I<"J;
"F%G;/ G5 5espues del procedimento se tendra dos fases
V. DISCUSIÓN La extracción es la técnica empleada para separar un producto orgánico de una mezcla de reacción o para aislarlo de sus fuentes naturales. &uede definirse como la separación de un componente de una mezcla por medio de un disolvente. "sta práctica es muy utilizada para separar compuestos orgánicos de las soluciones o
suspensiones acuosas en las que se encuentran. "l procedimiento consiste en agitarlas con un disolvente orgánico inmiscible con el agua y de#ar separar ambas capas. Los distintos solutos presentes se distribuyen entre las fases acuosas y orgánicas, de acuerdo con sus solubilidades relativas. 5e este modo, las sales inorgánicas, prácticamente insolubles en los disolventes orgánicos más comunes, permanecerán en la fase acuosa, mientras que los compuestos orgánicos que no forman puentes de )idrógeno, insolubles en agua, se encontrarán en la orgánica. Separación de un compuesto por extracción se basa en la transferencia selectiva del compuesto desde una mezcla sólida o líquida con otros compuestos )acia una fase líquida 'normalmente un disolvente orgánico(. "l éxito de la técnica depende básicamente de la diferencia de solubilidad en el disolvente de extracción entre el compuesto deseado y los otros compuestos presentes en la mezcla inicial. "l método de Stan-;tto es considerado como el más importante en toxicología, debido a la previa extracción del medio con solvente polar '"tanol( después de sus acidificación, que permitirá la solubilizacion de las bases en forma de sales, y de la consecuencia purificación de extracto por medio de la coagulación de las albuminas con etanol, proceso que logra eliminar la mayor proporción de las proteínas, así como las grasas que no se disuelven en el agua.
VI. CONCLUSIONES l finalizar la práctica se pudo obtener una muestra limpia de impurezas que contienen metabolitos que serán analizadas en otra práctica. /o se pudo concentrar la muestra por un factor tiempo pero si se obtuvo una peque$a cantidad de muestra que será almacenada para su próximo análisis, este método resulto ser uno de los más efectivos y sencillos para obtener la muestra aunque no es rápido si es seguro si se tiene un correcto procedimiento en el cual se evitara a toda costa contaminar o perder la muestra ya que en términos prácticos no se sabe si se puede obtener más muestra problema
VII. RECOMENDACIONES • • • • •
Se sugiere comenzar la práctica a tiempo para poder realizarla entera ealizar la desproteinizacion en el caso de una muestra que no sea liquida Se debe tener cuidado al manipular los instrumentos ya que estos son delicados %ratar de no derramar la muestra en las mesas de traba#o Solicitar más material d traba#o para que alcance a todos
VIII. REFERENCIAS BIBLIOR!FICAS
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is"ert #$ Vi%%&n'e(& E. *edicina Legal y %oxicología. K ed. :arcelona+ *asson S..3 877D. Menc)&s E$ M&*ero LM. *anual de %oxicología :ásica. *adrid+ "diciones 5íaz de Santos S..3 8777 Re+etto M$ Re+etto . %oxicología Hundamental. D ed. *adrid+ "diciones 5íaz de Santos S..3 877E. is"ert #$ Vi%%&n'e(& E. *edicina Legal y %oxicología. K ed. :arcelona+ *asson S..3 877D. ,%&ssen D$ -&tins #B. Casarett y Doull. Hundamentos de %oxicología. *adrid+ *craM- 0ill. Gnteramericana3 8779. Menc)&s E$ M&*ero LM. *anual de %oxicología :ásica. *adrid+ "diciones 5íaz de Santos S..3 8777. Re+etto M. %oxicología vanzada. D ed. *adrid+ "diciones 5íaz de Santos S..3 6EE9. ,%&ssen D$ -&tins #B. Casarett y Doull. Hundamentos de %oxicología. *adrid+ *craM- 0ill. Gnteramericana3 8779.
I/. ANE/OS &0 Mencione & %os t12icos 3'e se +'eden 4&%%&r en e% resid'o 5cido. :*G;S Los carbamatos son compuestos orgánicos derivados del ácido carbámico '/08;;0(. %anto los carbamatos como los ésteres de carbamato y los ácidos carbámicos son grupos funcionales que se encuentran interrelacionados estructuralmente y pueden ser interconvertidos químicamente. ::G%<G;S Los barbit!ricos son una familia de fármacos derivados del ácido barbit!rico que act!an como sedantes del sistema nervioso central y producen un amplio esquema de efectos, desde sedación suave )asta anestesia total. %ambién son efectivos como ansiolíticos, como )ipnóticos y como anticonvulsivos. Los barbit!ricos también tienen efectos analgésicos, sin embargo, estos efectos son algo débiles, impidiendo que los barbit!ricos sean utilizados en cirugía en ausencia de otros analgésicos. %ienen un alto potencial de adicción, tanto física como psicológica. Los barbit!ricos )an sido reemplazados por las benzodiacepinas en la práctica médica de rutina, por e#emplo, en el tratamiento de la ansiedad y el insomnio, principalmente porque las benzodiacepinas son muc)o menos peligrosas en sobredosis. Sin embargo, todavía se utilizan barbit!ricos en la anestesia general, para la epilepsia y el suicidio asistido. SLGGL%;S
Los salicilatos en dosis tóxicas estimulan el sistema nervioso central directamente, causando )ipercapnia y un trastorno metabólico con acumulación de ácidos orgánicos. %ambién disminuyen la protrombina al dificultar la utilización de la vitamina 4 en el )ígado. "n presencia de ácido gástrico, la aspirina produce lesiones en la mucosa con la )emorragia consecuente. Los )allazgos patológicos encontrados en los pacientes fallecidos a consecuencia de envenenamiento por salicilatos son erosión y congestión del aparato digestivo, así como edema, )emorragia y cambios degenerativos en los ri$ones, cerebro, pulmones e )ígado.
"0 Descri"& & %os t12icos 3'e se +'eden 4&%%&r en e% resid'o &%c&%ino. LL;G5"S Se llaman alcaloides 'de álcali, carbonatos de alcalinos, y -oide, parecido a, en forma de( a aquellos metabolitos secundarios de las plantas sintetizados, generalmente, a partir de aminoácidos, que tienen en com!n su )idrosolubilidad a p0 ácido y su solubilidad en solventes orgánicos a p0 alcalino. Los alcaloides verdaderos derivan de un aminoácido, son por lo tanto nitrogenados. %odos los que presentan el grupo funcional amina son básicos. La mayoría de los alcaloides poseen acción fisiológica intensa en los animales incluso a ba#as dosis con efectos psicoactivos, por lo que son muy usados en medicina para tratar problemas de la mente y calmar el dolor. "#emplos conocidos son la cocaína, la morfina, la atropina, la colc)icina, la quinina, cafeína, la estricnina y la nicotina. /%G5"&"SGA;S
c0 Se6&%e %&s +rec&'ciones 3'e se de"en tener d'r&nte %& des+roteini7&ci1n * se+&r&ci1n en resid'os. %ener cuidado de no contaminar la muestra
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uidad que todos los reactivos estén puros y libres de contaminación que puedan afectar a la muestra problema
d0 E2+%i3'e %&s (ent&8&s de 'ti%i7&r e% método de C'rr*. La poca cantidad de muestra que se utiliza '6 gota de sangre( método seguro y sin errores solo se necesita una punción en el dedo o en la ore#a para extraer la muestra cromatografía es rápido y exacto prueba fe)aciente una ante los %ribunales. • • • • •