MARCHA FITOQUIMICA PRELIMINAR DE LA ALSTROEMERIA PHYTOCHEMICAL MARCH IN ALSTROEMERIA Autores: Bernal J, Marín M.A, Torres A.M Corporación Tecnológica de Bogotá / Tecnología en Regencia de Farmacia / Fitoquímica (V Semestre) Bogotá DC Colom!ia "#/$%/&$"' manuelmarin&*otmailcom
El RESUMEN estudio de los metabolitos secundarios presentes en la planta Alstroemeria se realizó a través de la marcha fitoquímica preliminar la cual es la segunda etapa en el proceso de investigación de la planta mencionada, los ensayos se llevaron a cabo con el extracto etanólico de la alstroemeria y en el betún obtenido por la evaporación a través de un bao maria de dicho extracto, ya en el laboratorio se siguieron los lineamientos de la guía y se procedió a hacer las pruebas correspondientes para cada metabolito secundario y de esta manera determinar si estos se encuentran presentes en la alstroemeria! "alabras #lave$ %archa fitoquímica, alstroemeria, metabolitos secundarios, extracto etanólico! &he ABSTRACT study of secondary
metabolites present in the Alstroemeria plant 'as conducted through the phytochemical march 'hich is the second stage in the investigation process of the plant, the tests 'ere carried out 'ith the ethanol extract of alstroemeria and in bitumen obtained by evaporation through a maria bath, and in the guide of laboratory 'ere and proceeded to ma(e the appropriate tests for each secondary metabolite and thus determine if these are present in the alstroemeria! )ey *ords$ "hytochemical %arch, Alstroemeria, +econdary %etabolites, Ethanolic Extract!
INTRODUCCIÓN a marcha fotoquímica se realiza con el fin de identificar los diferentes tipos de metabolitos presentes una determinada planta y determinar su características
estructurales, en este caso de la Alstroemeria, esta identificación se realiza con el extracto etanólico de la planta obtenido en el proceso de extracción por monta-e de soxleth del cual se obtuvo la goma a través del proceso de evaporación por bao en agua caliente, la marcha fitoquímica se fundamenta en métodos colorimétricos y se realiza por la adición de reactivos específicos a cada tipo de metabolito en este caso se realizara la identificación de carotenoides, flavonoides, taninos, quinonas, cardiotónicos, saponinas, cumarinas y alcaloides!
RESULTADOS DISCUSIÓN RESULTADOS
Y DE
CAROTENOIDES: "ara la prueba de carotenoides se usó la prueba +al(o's(i, esta consistió en
aadir lentamente por las paredes de un tubo de ensayo ./ m de extracto etanólico a .!/ m de 0cido sulfúrico al 123! +i después de la reacción se daba un color azul en la interfase, significaba que en efecto la planta Alstroemeria contenía carotenoides! El resultado dio negativo, puesto que no se dio el color esperado!
TANINOS: +rue!a con Cloruro F,rrico$ al agregar la
solución de cloruro férrico se dio una coloración verdosa, resultado positivo para taninos! Esta coloración se da por la formación de enlaces cristalinos entre el hierro y los pares electrónicos libres en los compuestos fenólicos!
"rueba del cloruro férrico +rue!a con -cetato de +lomo. al extracto
etanolito de la planta se le adiciono acetato de plomo presentando turbidez lo cual indica prueba positiva para taninos, la prueba de acetato de plomo indica la presencia de taninos proteínas y mucinas que precipitan con el acetato de plomo!
"rueba de acetato de plomo
FLAVONOIDES: +rue!a de s*inoda.
al agregar la cinta de magnesio y 0cido clorhídrico no se produ-o un color de naran-a a ro-izo lo cual indica la no presencia de flavonoides en la planta Alstroemeria, los flavonoides con núcleo benzopirona producen coloraciones ro-izas en presencia de estos reactivos 4magnesio y 0cido clorhídrico5!
+rue!a gelatina sal.
al adicionar reactivo de gelatina sal al extracto etanólico se produ-o precipitado siendo positivo para esta prueba de taninos!
"rueba +hinoda +rue!a de eucoantocianidinas las .
eucoantocianidinas o 6lavandioles a p7 acido presentan coloraciones ro-as, violetas y moradas,
esta prueba resulto negativa al no evidenciar un cambio de color en el extracto etanólico al agregar 0cido clorhídrico lo que indica la ausencia de compuestos flavondioles en la planta Alstroemeria!
QUINONAS: a detectar quinonas en la Alstroemeria se realizó la prueba química de comportamiento ante 0cido y donador de electrones, esta prueba consiste en agregarle a .!8 m de extracto etanólico zinc en polvo y gotas de 0cido clorhídrico concentrado, si en el resultado de la reacción se aprecia coloración amarilla, es indicativo de que la prueba da positivo para quinonas, luego se repite la misma operación, pero esta vez en vez de 7#l, se usa hidróxido de
sodio! El resultado obtenido fue negativo tanto con 7#l como con 9a:7!
#omportamiento ante 0cido y donador de electrones as soluciones alcalinas diluidas, son solventes químicamente activos que se utilizan generalmente para la extracción de quinonas de naturaleza 0cida! a fuerza 0cida de las quinonas hidrolizadas depende de la posición y el número de los grupos ;:7 fenólicos y, en algunos casos, del grupo carboxilo ; #::7 4"<=#&>#A 2$ ?@>9:9A+; A9&
9:9A+ es!scribd!com5!
SAPONINAS: Esta prueba consistió en aadir a /m de extracto etanólico 2m de agua! uego se agito
enérgicamente! 9o por la cromatografía se observó líquida de alto formación de desempeo 7"# espuma por lo que la ya que indica la prueba fue negativa concentración de para +aponinas en la saponinas y el perfil Alstroemeria! as del extracto o saponinas son solución y permite glicósidos esteroides mostrar el efecto de con un núcleo la hidrólisis por el espirostano que notable cambio de tienen la propiedad perfil, seguiremos el de formar espuma estudio de la abundante y estable Alstroemeria sin al agitar sus contar a la soluciones acuosas saponinas como uno como la obtenida al de sus metabolitos agitar la solución secundarios, acuosa de un -abón! haciendo caso a la +in embargo y cabe prueba de destacar que puesto laboratorio que existen otras 4espuma5! sustancias que pueden formar CARDIOTÓNICOS: también espuma en +rue!a de -ntrona. la misma prueba, se Al extracto etanólico debe asumir este se le agregó reactivo ensayo como una de antrona! +e prueba presuntiva de observó coloración la presencia de azulBverdosa en la saponinas interfase, lo que nos esteroides! "or lo indica la presencia tanto puede que de #ardiotónicos en aunque la prueba la planta haya dado negativa alstroemeria! si existan saponinas en la alstroemeria, +rue!a de 0olis*. Al pero dado que el extracto etanólico se método m0s exacto le aadió reactivo de para la %olish y a determinación de la continuación, se le concentración de agregó 0cido saponinas en sulfúrico, acto solución est0 dado seguido surgió un
anillo violeta que aparto al 0cido sulfúrico, deba-o del anillo, de la solución acuosa dando positivo para alstroemeria este metabolito secundario!
metanólico! a mezcla se calienta hasta que aparezca una espuma de color ro-izo! +e enfría y se acidula con 7#l .!2 9 y aadir una gota de cloruro ferrico/3! a formación de una coloración viol0cea es prueba positiva para este tipo de metabolitos secundarios! Esta prueba da positiva en general para todas las sustancias con funcionalidad éster o lactona, y la formación del color es generada por el comple-o que se origina entre el 0cido hidrox0mico
SESQUITERPENLA CTONAS: a prueba que se efectuó para el reconocimiento de sesquiterpenlactonas consistió en tomar una muestra de extracto etanólico aadir una gota de solución metanólica 89 de clorhidrato de hidroxilamina y una gota de ):7 89
obtenido y el cloruro férrico!
COUMARINAS:
generación de una coloración naran-a es prueba positiva!
+rue!a del *idro1amato 2errico.
El procedimiento que se desarrolló en esta prueba, es el mismo F 45R3SC36C7-. desarrollado en Aunque esta prueba sesquiterpenlactonas no se desarrolló en , la formación del la pr0ctica se debe mismo comple-o tener en cuenta entre el 0cido debido a que es una de las pruebas m0s hidrox0mico, obtenido de tratar la importante para la de coumarina con identificación El clorhidrato de cumarinas! hidroxilamina para la procedimiento formación de consiste en calentar hidroxamato de a bao %aría un sodio, el cual al ser tubo de ensayo con mililitro de tratado con 0cido un etanólico clorhídrico genera el extracto papel filtro compuesto anteriorC con impregnado con y el cloruro férrico! 9a:7 por 2 o /. minutos, luego se debe observar en fluorescencia al @D! as cumarinas son compuestos que en su estructura presentan un gran número de instauraciones, por lo cual exhiben una fuerte fluorescencia azul o verde al ser irradiados con luz ultravioleta! +rue!a de 3rlic*. A un mililitro de extracto etanólico agregar / ml de ALCALOIDES: reactivo de Erlich, la
as pruebas que se efectuaron para la identificación de alcaloides se fundamentan en la capacidad que tienen los alcaloides de combinarse con metales pesados! a especificidad de estas pruebas no es absoluta, debido a que algunos metabolitos como las flavonas o cumarinas pueden dar falsos positivos! +rue!a con reacti8o de Dragendor22. El
producto de mezclar ambas soluciones da tetrayodobismutato pot0sico conocido como reactivo de ragendorff! a prueba consiste en agregar al extracto acido unas gotas de reactivo d dragendorff! a prueba se considera positiva por un precipitado color anaran-ado ; marrón correspondiente al reactivo mencionado anteriormente!
+rue!a con reacti8o de 0a9er. Esta
prueba no fue desarrollada en el laboratorio debido a la ausencia del reactivo! +in embargo, se dar0 una breve explicación del fundamento de la reacción! El reactivo de %ayer se emplea para la caracterización no específica de alcaloides! a mayoría de los alcaloides reaccionan dando un precipitado blanco o amarillo claro,
F<@": %E&AG:>&:+ +E#@9A<>:+
amorfo o cristalino! El precipitado 4una sal comple-a5 puede disolverse posteriormente en algún solvente menos polar para su identificación!
El producto de reacción final es un compuesto de naftalina con un sustituyente fenilo, el cual genera el precipitado de color café
E
"<@EGA ?@>%>#A
+al(o's(i #A<:&E9:>E+ #loruro 6érrico &A9>9:+
Acetato "lomo
de
Felatina B +al
El precipitado amarillo o blanco que se obtiene, se debe a que precipita el reactivo de %ayerC como se muestre m0s adelante!
+hinoda 6AD:9:>E+ eucoantociani dinas +A":9>9A+
Espuma
?@>9:9A+
#omportamient o ante 0cido y donador de electrones
+rue!a con reacti8o de Valser.
Antrona #A<>&:9>#:+
se observó la formación de un precipitado debido a la reacción del reactivo de valser con la estructura del alcaloide!
+rue!a con reacti8o de :agner.
+e trata un mililitro de extracto acido con unas gotas de reactivo de *agner! +e observó la formación de un precipitado café!
%olish
+E+?@>&E<"E9A#& :9A+ #@%A<>9A+
+rue!a con reacti8o de Sc*lei!er.
se observó la formación de un precipitado blanco debido a la reacción del reactivo de valser con la estructura del alcaloide
CONCLUSIONES
7idroxamato 6érrico
7idroxamato 6érrico Erlich
Dalser ragendorff A#A:>E+ +chleiber *agner
+e determinó mediante las pruebas positivas de la marcha fitoquímica los metabolitos presentes en las raíces y ho-as de la planta Alstroemeria! +e comprendió mediante la experimentación las distintas pruebas de la marcha fitoquímica!
as pruebas que se realizan para alcaloides no son /..3 efectivas ya que nos son muy específicas y pueden tener falsos positivos!
"or otra parte, se concluyó de manera experimental que nuestra especie, alstroemeria, tiene como metabolitos secundarios los reportados en la siguiente tabla$
Referen!"s B!#$!o%r&f!"s
#ardona #lavi-o, 9!, H +alazar :sorio, %! 49oviembre de 8./85! Frupos polifenoles! "ereira! 7all >! #osta
