RESULTADOS -
Se observo bacterias de muestras de abono líquido líquido orgánico, biofowling y agua estancada.
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Utilizándose la técnica de tinción simple se observo bacterias muertas, levadura y se distinguió sus asociaciones.
DISCUSIONES as bacterias son microorganismos unicelulares que se reproducen por fisión binaria. a mayoría son de vida libre, a e!cepción de algunas que son de vida intracelular obligada, como "#lamydias y $ic%ettsias. &ienen los mecanismos productores de energía y el material genético necesarios para su desarrollo y crecimiento. as bacterias integran el reino procariota 'pro de primitivo y cariota de n(cleo). '*írez + ota, -/). 0ay técnicas que permiten observar los microorganismos en vivo. Seg(n 1ranados y 2illaverde '344/) éstas son5 6!amen en fresco, que incluye e!amen en fresco entre portaob7etos y cubreob7etos y e!amen en fresco sobre gota pendiente en porta e!cavado8 y tinción vital. 6n la práctica de laboratorio se realizó un primer e7ercicio en e!amen en fresco entre portaob7etos y cubreob7etos. 6sta consiste en suspender el microorganismo ob7eto de estudio en agua destilada o cualquier otro medio líquido transparente colocándolo en un portaob7etos a fin de poder posteriormente, mediante microscopía, visualizar su morfología, disposición y motilidad. '1ranados y 2illaverde, 344/).
9demás, 1ranados y 2illaverde '344/) agrega que en esta técnica se e!tenderá la muestra en el portaob7etos con el fin de #omogeneizar la mezcla colocando con cuidado sobre la suspensión un cubreob7etos formando inicialmente un ángulo de :;< evitando que se formen burbu7as de aire 'en nuestra muestra de agua estancada se formaron peque=as burbu7as de aire) al caer el cubreob7etos sobre la suspensión.. uego se sellaran con parafina 'vaselina) los bordes de los cubreob7etos para disminuir la evaporación y evitar corrientes en la preparación. 6n la microscopía óptica se toma en cuenta el factor contraste, porque sin un contraste adecuado es difícil diferenciar una estructura del fondo que la rodea. 6s así que se usan coloraciones para incrementar el contraste entre el espécimen y el fondo que lo rodea, pero desafortunadamente las coloraciones dificultan la observación de los microorganismos vivos. '9tlas, 344). 6n la mayor parte de las técnicas de coloración se pone una suspensión de microorganismos en un portaob7etos y se de7a secar. 9 la preparación así obtenida se le pasará rápidamente sobre una flama para que el calor fi7e las células que se encuentran allí, esto es, las células se fi7an al portaob7etos de tal manera que no pueden ser arrastradas al lavar la preparación. ás adelante, se agrega colorante, se de7a actuar por alg(n tiempo, se en7uaga para quitar el e!ceso de colorante y se observa. '9tlas, 344). 6l segundo e7ercicio realizado en la práctica de laboratorio fue de observación de bacterias por la técnica de tinción simple. 6n un procedimiento de coloración simple, se usa un solo reactivo colorante que no intenta producir reacciones de coloración diferenciales para los distintos tipos de microorganismos o estructuras. as técnicas de coloración simple para microorganismos son de utilidad cuando el colorante es fi7ado por las células y así los microorganismos aparecen de color oscuro o coloreados sobre un fondo luminoso o claro, y son negativas cuando los microorganismos no fi7an el colorante, en cuyo caso el fondo es el que se ti=e y los microorganismos aparecen brillantes sobre el fondo oscuro. 6stas dos técnicas dependen del #ec#o de que las bacterias y otros microorganismos poseen carga negativa asociada a la capa e!terna de la célula, principalmente debido a los grupos *>:?@ de la membrana celular. '9tlas, 344). 6n los procedimientos de coloración positiva un colorante ácido 'catiónico), que tiene cromóforo 'porción colorida de la molécula de colorante) cargado positivamente, es atraído #acia la cubierta e!terna de la célula cargada negativamente. "olorantes como el azul de metileno 'que fue el colorante utilizado en el e7ercicio de laboratorio) tienen una
porción de la molécula de color azul, que es atraída a la superficie de la célula, dando como resultado una tinción positiva del microorganismo. '9tlas, 344).
CONCLUSIONES -
6n la observación de bacterias en forma directa8 para las muestras del abono líquido orgánico, biofowling y agua estancada se observaron colonias de bacterias de diferentes formas desplazándose. Se distinguían formas de cocos y bacilos, pero no claramente.
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6n la observación de bacterias utilizándose la técnica de tinción simple se observo cocos 'en forma aislada, diplococos, estreptocos) y bacilos 'aislados, diplobacilos y estreptobacilos). &ambién se observaron levaduras aisladas y en con7unto. &odas las especies estaban quietas y de un color azul violeta. Se distinguían claramente.
CUESTIONARIO 1. ¿Cuáles son las asociaciones más frecuentes en bacterias Seg(n Aurdon y Billiams '34C3) entre los cocos, y también con menor frecuencia entre bacilos y espirilos, las células que crecen rápidamente tienden a ordenarse en gurpos características. 6l aspecto de cada agrupamiento seg(n se observa en el microscopio, es una importante ayuda para reconocer las especies. &enemos5 -
Diplococos5 "ocos en pare7as. 1eneralmente los lados ad yacentes de los organismos apareados son ac#atados.
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6streptococos5 "ocos en cadena.
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6stafilococos5 "ocos en masas irregulares que seme7an racimos de uvas. Se dividen en más de un plano del espacio y permanecen fuertemente ad#eridos, formando masas irregulares.
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&étradas5 "ocos en grupos de cuatro. 6stos cocos se dividen en dos planos que forman ángulo recto entre sí.
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Sarcinas5 "ocos en bloques c(bicos.
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1rupos de bacilos y espirilos5 6l crecimiento característico de algunas especies de bacilos es por pare7as 'diplobacilos). >tros pueden formar largas cadenas 'estreptobacilos). 9lgunos muestran una disposición muy sorprendente de células paralelas8 otros crecen en una masa entrete7ida y enmara=ada. os espirilos no se agrupan en ninguna forma característica, sino que crecen en forma de cadenas largas y ondulantes. 9 veces el espirilo no logra encadenarse y aparece el filamento como una forma de ovillo retorcido.
!. ¿En "u# ran$o %e tama&o se %efinen las bacterias Seg(n 1ranados y 2illaverde '344/), el tama=o de las bacterias se mide en Em '.3 m) y oscila entre .- y - Em. 6l tama=o de las bacterias oscila entre las .; y ? Em, pudiendo llegar en algunos tipos a 3 Em. Solo son visibles entonces, al microscopio óptico o microscopio electrónico. *ara observarlas con el microscopio óptico se usa el ob7etivo de inmersión '3F), sumergiendo esta lente en una gota de aceite 'aceite de inmersión) en el preparado a observar. 9 modo comparativo, una célula eucariota mide más de ; Em, mientras que un reo virus mide menos de .3 Em. '*írez + ota, -/).
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