Hematologia Practica

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Dacie y Lewis

HEMATOLOGÍA PRÁCTICA 10.a edición S. Mitchell Lewis, BSc, MD, FRCPath, DCP, FIBMS Emeritus Reader in Haematology, University of London; Senior Research Fellow in Haematology, Imperial College School of Medicine, Hammersmith Hospital, Londres, Reino Unido

Barbara J. Bain, FRACP, FRCPath Professor of Diagnostic Haematology, St. Mary’s Hospital Campus of Imperial College Faculty of Medicine, Londres, Reino Unido

Imelda Bates, MD, FRCP, FRCPath Senior Lecturer in Tropical Haematology, Liverpool School of Tropical Medicine, University of Liverpool, Liverpool, Reino Unido


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Índice de capítulos

Autores

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9. Métodos de laboratorio utilizados para la investigación de las anemias hemolíticas 161

Prefacio

ix

S. M. Lewis y D. Roper

Abreviaturas Nota

10. Investigación de las anemias hemolíticas hereditarias: anomalías enzimáticas y de la membrana 177

xi

xiii

D. Roper y M. Layton 1. Recogida y manipulación de la sangre

1 11. Anemias hemolíticas adquiridas

S. M. Lewis y N. Tatsumi

205

B. J. Bain y N. Win

2. Intervalos de referencia y valores normales

11 12. Investigación de las hemoglobinas anómalas y de las talasemias 233

S. M. Lewis 3. Técnicas hematológicas básicas

B. Wild y B. J. Bain

23

B. J. Bain, S. M. Lewis e I. Bates

13. Citoquímica eritrocitaria y leucocitaria

267

D. Swirsky y B. J. Bain

4. Métodos de preparación y tinción de las extensiones sanguíneas y de la médula ósea

51 14. Inmunofenotipado

B. J. Bain y S. M. Lewis

287

E. Matutes, R. Morilla y D. Catovsky 5. Morfología de las células sanguíneas normales y patológicas 69

15. Radioisótopos en el diagnóstico hematológico

B. J. Bain

I. Dokal y S. M. Lewis

6. Biopsia de la médula ósea

16. Exploración de la hemostasia

99

325

M. Laffan y R. Manning

I. Bates 7. Anemia ferropénica y sobrecarga de hierro

305

113

17. Investigación de la tendencia trombótica

379

M. Worwood


8. Investigación del estado de la cobalamina, el folato y los metabolitos en la anemia megaloblástica 139

18. Control de laboratorio de la terapia anticoagulante, trombolítica y antiplaquetaria 399

M. Hamilton y S. Blackmore



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HEMATOLOGÍA PRÁCTICA

19. Antígenos y anticuerpos de las células sanguíneas: eritrocitos, plaquetas y granulocitos 413

24. Organización y gestión del laboratorio S. M. Lewis y A. Bradshaw

S. Knowles y F. Regan 25. Seguridad en el laboratorio 20. Aspectos de laboratorio de las transfusiones sanguíneas 449 M. Rowley y C. Milkins 21. Análisis molecular y citogenético T. Vulliamy y J. Kaeda Con la contribución de B. J. Bain 22. Miscelánea

S. M. Lewis 26. Control de calidad

477

511

553

561

S. M. Lewis y B. De la Salle 27. Hematología en laboratorios de recursos escasos 573 I. Bates y B. Mendelow

S. M. Lewis 28. Apéndices

587

23. Aproximación al diagnóstico y clasificación de los trastornos hemotológicos 521

S. M. Lewis

I. Bates y B. J. Bain

Índice alfabético

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Prefacio

Esta 10.ª edición celebra el 55 aniversario de Hematología Práctica. Tanto la primera edición de J.V. Dacie de 1950 como las sucesivas ediciones con Mitchell Lewis como coautor se basaron en el curso de hematología para el London University Diploma of Clinical Pathology (DCP) y posteriormente en la licenciatura en Hematología en la entonces llamada Royal Postgraduate Medical School. La ciencia médica ha crecido de forma exponencial en el último medio siglo; sin embargo, ninguna disciplina se ha expandido más que la hematología, tanto en sus aspectos clínicos como de laboratorio. Inicialmente, la hematología de laboratorio se restringía casi al «recuento sanguíneo» con una cámara de recuento y un microscopio. El recuento sanguíneo sigue siendo una prueba esencial porque proporciona un componente importante para el diagnóstico y el tratamiento del paciente; sin embargo, los instrumentos automáticos actuales analizan las propiedades fisicoquímicas de las células sanguíneas individuales y ofrecen datos metrológicos precisos sobre los eritrocitos, los leucocitos y las plaquetas a una velocidad inimaginable en aquellos primeros tiempos. La sofisticada tecnología permite que los análisis más complejos sean realizados de forma rutinaria en muchos laboratorios; entre ellos se incluyen los estudios de ADN, el inmunofenotipado para la clasificación de las leucemias, el diagnóstico de las anemias megaloblásticas y las mediciones con radioisótopos. No obstante, tenemos que admitir que no todos los laboratorios disponen de las pruebas más sofisticadas y dedicamos un capítulo a las pruebas esenciales en los laboratorios con pocos recursos y en los centros de salud. También tenemos en cuenta el uso creciente de los dispositivos listos para su uso, comercialmente disponibles, para muchas pruebas de laboratorio, y la tendencia a la realización de algunas de estas pruebas en el punto de asistencia; aportamos sugerencias sobre el papel de soporte del laboratorio para garantizar la fiabilidad de esta última práctica. Otro avance de enorme impacto es Internet, mediante el cual se puede localizar cualquier tema, a menudo con una abrumadora cantidad de información, a partir de una sola palabra clave. Indicamos unos cuantos sitios de In-

ternet que son importantes para la hematología, incluyendo los de los fabricantes de dispositivos y reactivos especializados. Los científicos biomédicos son, cada vez más, los responsables del trabajo de laboratorio, de la misma forma que los hematólogos, médicamente cualificados, están más implicados en la asistencia clínica a los pacientes. Sin embargo, ambos grupos deben ser conscientes de la importancia de la organización y la dirección eficaz de un laboratorio, de la necesidad de mantener unos estándares técnicos elevados con controles de calidad bien establecidos y del conocimiento de la importancia clínica de las investigaciones hematológicas. Los principios de buena práctica de laboratorio los estableció Dacie en su 1.ª edición, cuando escribió: «Todos aquellos implicados en el trabajo de laboratorio deben comprender cuál es la importancia de las pruebas que realizan, el valor relativo de las investigaciones hematológicas y el orden en que deben emprenderse». Hemos intentado mantener su enfoque por lo que hace al contexto y al estilo, si bien actualizado para satisfacer la práctica actual. Deseamos expresar nuestro agradecimiento a todos nuestros colaboradores, y también a otros colegas que nos facilitaron consejo experto en temas específicos; entre ellos debemos mencionar especialmente a Michel Deenmamode (Radioisótopos), Mark Griffin (Salud y seguridad), Julia Howard (Citogenética), John Meek (Química clínica), Andrew Osei-Bimpong (Hematología general). Como especial homenaje con ocasión del 55 aniversario, esta edición está dedicada a Sir John Dacie, a sus estudiantes de diversos países, cuyas posteriores y distinguidas carreras se inspiraron en él, y al centro que él mismo fundó en la antigua Royal Postgraduate Medical School de la Universidad de Londres, actualmente Faculty of Medicine of Imperial College at Hammersmith Hospital. S. Mitchell Lewis Barbara J. Bain Imelda Bates


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Abreviaturas

ACD ácido citrato dextrosa AcMc, anticuerpo monoclonal AcMo ACRES sitio de amplificación creado por enzimas de restricción (del inglés, amplification created restriction enzyme site) ADA adenosindesaminasa ADE amplitud de la distribución eritrocitaria ADH amplitud de distribución de la hemoglobina ADN ácido desoxirribonucleico ADP adenosindifosfato AET 2-aminoetil-iso-tiouronio AHA anemia hemolítica autoinmunitaria ANAE alfa naftil acetato esterasa ANB alfa naftil butirato AP activador del plasminógeno APAAP fosfatasa alcalina anti-fosfatasa alcalina (del inglés, alkaline phosphatase anti-alkaline phosphatase) ARN ácido ribonucleico ASB albúmina de suero bovino ASOH hibridación de oligonucleótidos específicos de alelos (del inglés, allele-specific oligonucleotide hybridization) AT antitrombina ATP adenosintrifosfato BCSH Comité británico de normalización en hematología (del inglés, British Committee for Standards in Haematology) C complemento C3, C3d, componentes del complemento C3sg CAE naftol AS-D cloroacetato esterasa CD cúmulo de diferenciación CFA capacidad de fijación del anticuerpo CHAD enfermedad por hemoaglutinina fría (del inglés, cold haemagglutinin disease) CHCM concentración de hemoglobina corpuscular media Cp citoplasmático CPD citrato-fosfato-dextrosa CTP citosintrifosfato CV coeficiente de variación

DAB DE DMSO 2,3 DPG DTT EDTA EGIL

diaminobenzidina desviación estándar dimetilsulfóxido 2,3-difosfoglicerato ditiotreitol ácido etilendiaminotetraacético Grupo europeo para la clasificación inmunológica de las leucemias (del inglés, European Group for the Immunological Classification of Leukaemias) ELISA análisis de inmunoabsorción ligada a enzimas EN eritrocito nucleado ENE esterasa no específica ER enzima de restricción FAB francés-americano-británico (clasificación) FAG fosfatasa alcalina granulocítica FE ficoeritrina FSc dispersión de la luz hacia delante (del inglés, forward light scatter) FVL factor V de Leiden g gramos o fuerza centrífuga relativa, según contexto G6PD glucosa-6-fosfato deshidrogenasa GPI glucosilfosfatidilinositol Hb hemoglobina o concentración de hemoglobina HbCO carboxihemoglobina HCM hemoglobina corpuscular media HEMPAS multinuclearidad eritroblástica hereditaria con prueba del suero acidificado positiva (del inglés, hereditary erythroblastic multinuclearity with positive acidified-serum test) Hi metahemoglobina HiCN cianometahemoglobina HPF hemoglobinuria paroxística por frío HPLC cromatografía en fase líquida de alta resolución (del inglés, high performance liquid chromatography) HPN hemoglobinuria paroxística nocturna Hto hematocrito ICSH Comité internacional para la normalización en hematología (del inglés, International Council for Standardization in Haematology) IDR inmunodifusión radial


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HEMATOLOGÍA PRÁCTICA

IEF

enfoque isoeléctrico (del inglés, isoelectric focusing) Ig inmunoglobulina IgA inmunoglobulina A IgD immunoglobulina D IgE immunoglobulina E IgG immunoglobulina G IgM immunoglobulina M IP immunoperoxidasa ITCF isotiocianato de fluoresceína kb kilobase LCP leucemia de células peludas LELV linfoma esplénico con linfocitos vellosos LISS medio salino de baja fuerza iónica (del inglés, low ionic strength saline) LLA leucemia linfoblástica aguda LLC leucemia linfática crónica LLC/PL leucemia linfática crónica con aumento de prolinfocitos LLTA leucemia/linfoma de linfocitos T del adulto LMA leucemia mieloide aguda LMC leucemia mieloide crónica LPLB leucemia prolinfocítica de células B 2-ME 2-mercaptoetanol MESF moléculas de fluorocromo soluble equivalente MGG May-Grünwald-Giemsa MO médula ósea MPO mieloperoxidasa NEQAS evaluación externa de la calidad nacional (del inglés, national external quality assessment) NISS medio salino de fuerza iónica normal (del inglés, normal ionic strength saline) OMS Organización Mundial de la Salud p/v peso/volumen PAI prueba de antiglobulina indirecta PAS ácido peryódico de Schiff pb par de bases PBS medio salino tamponado con fosfato (del inglés, phosphate-buffered saline) PBSmedio salino tamponado con fosfato que azidacontiene azida sódica y albúmina de suero BSA bovino PCR reacción en cadena de la polimerasa PCR-TR reacción en cadena de la polimerasa de la transcriptasa reversa PDA prueba directa de antiglobulina PDF productos de degradación de la fibrina/fibrinógeno

PHHF pI PK PML POE PVP QSC RE RFLP RL RTCN RVH SDS SHb SMD SmIg SMRA SP SSc SSCP

TAE TBE TBS TCR TE TEB TP t-PA TR TT TTPA UI UIBC UV v/v VCM VIH vol VPM

persistencia hereditaria de la hemoglobina fetal punto isoeléctrico piruvatocinasa proteína codificada por el gen PML procedimiento operativo estándar polivinil pirrolidina quantum simply cellular recuento eritrocitario polimorfismo de la longitud de fragmentos de restricción recuento leucocitario recuento total de células nucleadas región hipervariable dodecil sulfato de sodio sulfahemoglobina síndrome o síndromes mielodisplásicos immunoglobulina de superficie (del inglés, surface immunoglobulin) sistema de mutación refractario a la amplificación sangre periférica dispersión de la luz lateral (del inglés, sideways light scatter) polimorfismo de conformación monocatenario (del inglés, single-strand conformation polymorphism) tris-acetato EDTA (tampón) tris-borato EDTA (tampón) salino tamponado con tris receptor del linfocito T tris–EDTA (tampón) tris-EDTA-borato (tampón) tiempo de protrombina activador del plasminógeno tisular transcriptasa reversa tiempo de trombina Tiempo de tromboplastina parcial activado unidades internacionales capacidad no saturada de fijación del hierro (del inglés, unsaturated iron-binding capacity) ultravioleta volumen/volumen volumen corpuscular medio virus de la inmunodeficiencia humana volumen volumen plaquetario medio


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NOTA Siguiendo las recomendaciones de la Organización Internacional de Estandarización (ISO), la Organización Mundial de la Salud (OMS) y otras autoridades internacionales, hemos utilizado el sistema internacional (SI) para expresar las cantidades y las unidades (v. págs. 592-593). La concentración de las soluciones se expresa en mol/l (para las concentraciones de las sustancias) o en g/l (para las concentraciones de la masa). Aunque somos conscientes de que en algunos países aún se utilizan los g/dl para expre-

sar la concentración de hemoglobina, hemos empleado g/l según la convención internacional. Para convertir esta cantidad en g/dl, basta con dividirla por 10. Hemos indicado la fuente de un reactivo, equipo o dispositivo en caso de que haya un único fabricante o cuando se recomienda una fabricación específica. Si no se indica la fuente, el material o el equipo adecuado estarán disponibles, por lo general, en diferentes suministradores. Los catálogos de estos fabricantes y la información detallada sobre el uso de sus equipos exclusivos pueden encontrarse en sus páginas web.

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