UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA FACULTAD DE FARMACIA
EVALUACIÓN DE LA EFICACIA ACLARANTE DE UN DESODORANTE ANTITRANSPIRANTE DIRIGIDO A PERSONAS CON HIPERPIGMENTACIÓN AXILAR.
FARMACÉUTICAS: LUISANA MARCANO FIGUEROA JESSICA VANESSA RIVERA RANGEL
Caracas, Junio 2013 i
UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA FACULTAD DE FARMACIA POSTGRADO DE CIENCIA Y TECNOLOGIA COSMETICA
EVALUACIÓN DE LA EFICACIA EFICACIA ACLARANTE DE UN DESODORANTE ANTITRANSPIRANTE ANTITRANSPIRANTE DIRIGIDO A PERSONAS CON HIPERPIGMENTACIÓN AXILAR.
FARMACÉUTICAS: LUISANA MARCANO FIGUEROA JESSICA VANESSA RIVERA RANGEL Trabajo presentado ante la ilustre Universidad Central de Venezuela para optar al título de Especialista en Ciencia y Tecnología Cosmética.
TUTORA: Dra. ISABEL ANDUEZA ii
A todas aquellas personas con axilas hiperpigmentadas que nos inspiraron a realizar este trabajo
iii
AGRADECIMIENTOS Principalmente queremos agradecer a Dios por estar con nosotros y colocar en nuestro camino a las personas perfectas para culminar esta meta además de iluminar nuestras mentes para la realización de este proyecto. A la Universidad Central de Venezuela por ser la casa que vence la sombra y nuestro segundo hogar. A la Facultad de Farmacia de la Universidad Central de Venezuela por permitir nuestra formación en el fascinante mundo de la Tecn ología Cosmética. A nuestros padres y esposos por su apoyo, comprensión y ánimos que nos brindaron para culminar este trabajo. A mi hijo Cristopher Daniel por ser mi mayor motivación para culminar este reto profesional. A nuestra tutora la Dra. Isabel Andueza por su dedicación, tiempo, conocimiento y en especial ayuda cuando más lo necesitamos. A la Dra. Susana Misticone por su colaboración, paciencia y apoyo. A todos los laboratorios de la industria cosmética que nos facilitaron las materias primas necesarias para realizar las formulaciones.
iv
A nuestras voluntarias por creer en nosotras y por ser consecuentes durante el estudio. A nuestra colega Ftica. Carolina Fumero por prestarnos una ayuda incondicional en la realización del trabajo de campo. Al equipo de la Mención de Ciencia y Tecnología Cosmética por permitirnos utilizar sus equipos para la realización de este trabajo. A nuestras compañeras de postgrados por brindarnos ideas y su experiencia. A todas aquellas personas que nos animaron a seguir adelante y fueron un estimulo para culminar nuestra meta. Mil gracias.
v
RESUMEN La pigmentación de la piel es un factor de importancia en el desarrollo social del individuo, ya que una piel sin discromías puede sugerir que se goza de buena salud, sin embargo existen evidencias en donde se demuestra que la PIH es una de las consultas más comunes en los centros dermatológicos en distintas partes del mundo. El presente trabajo tuvo como finalidad desarrollar y caracterizar un DAC y un desodorante antitranspirante-aclarante empleando extracto purificado de Hipoxis rooperi y Caesalpinia spinosa como activo aclarante. Asimismo, se realizó un estudio piloto abierto randomizado y prospectivo, para evaluar la eficacia antitranspirante y aclarante en voluntarias de sexo femenino y con axilas hiperpigmentadas, previamente seleccionadas por un médico dermatólogo. La eficacia desodorante antitranspirante se determinó mediante la opinión de 15 voluntarias, que usaron regularmente el producto control por un período de dos semanas y emitida a través de una encuesta
previamente
validada.
La
eficacia
aclarante
se
determinó
cuantificando el índice de melanina en voluntarias con axilas hiperpigmentadas que usaron durante 30 días el producto aclarante en una axila y el DAC en la otra. Los resultados fueron registrados con fotografías consecutivas en ambas axilas.
Por otra parte, se realizó la estabilidad fisicoquímica de las
formulaciones en función del tiempo a temperatura de 40ºC ± 2ºC y a 75% ± 5ºC de humedad relativa, se determinó la distribución del tamaño de las partículas, el comportamiento reológico, el pH, la gravedad específica, la velocidad de sedimentación y las propiedades organolépticas. Ambos productos vi
demostraron ser estadísticamente estables durante el período de estudio. Adicionalmente, con el análisis de varianza se determinó que no había cambios significativos en los índices de melanina en la zona tratada, lo que evidencia una baja eficacia aclarante para el desodorante antitranspirante desarrollado a la concentración y frecuencia de uso estudiada.
vii
TABLA DE CONTENIDO DEDICATORIA
iii
AGRADECIMIENTOS
iv
RESUMEN
vi
TABLA DE CONTENIDO
viii
LISTA DE FIGURAS
xii
LISTA DE TABLAS
xiv
LISTA DE ANEXOS
xvi
LISTA DE ABREVIATURAS
xvii
INTRODUCCIÓN
1
MARCO TEÓRICO
4
La piel
4
El color de la piel humana
4
Histología y fisiología general de la epidermis y sistema
6
pigmentario de melanina Definición de melanina
7
viii
Mecanismo de biosíntesis de melanina
8
Función de la melanina
9
Tipos de melanina
11
Fototipos de la piel
12
Trastornos de hiperpigmentación
14
Hiperpigmentación postinflamatoria
15
Melasma
17
Glándulas sudoríparas
17
Mecanismo de secreción del sudor
19
Desodorantes y Antitranspirantes
20
Mecanismo de acción desodorante
23
Mecanismo de acción antitranspirante
25
Características de los cosméticos
29
Formas cosméticas de un desodorante y/o antitranspirante
29
Activo cosmético aclarante
31
ix
OBJETIVOS
41
Objetivo General
41
Objetivos Específicos
41
MATERIALES Y METODOS
42
METODOLOGÍA
44
Desarrollo de un desodorante antitranspirante
44
Formulación por el método de ensayo y error
44
Desarrollo de un desodorante antitranspirante aclarante
45
Determinación de las propiedades fisicoquímicas y estabilidad
46
de las formulaciones desarrolladas Determinación de la eficacia desodorante / antitranspirante
51
Determinación de la eficacia aclarante del desodorante
55
antitranspirante Evaluación de la aceptación por parte de los usuarios de los
62
desodorantes antitranspirantes desarrollados RESULTADOS Y DISCUSIONES
63
x
CONCLUSIONES
84
RECOMENDACIONES
85
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
86
ANEXOS
97
xi
LISTA DE FIGURAS FIGURA Nº 1. Etapas del sistema pigmentario de la melanina
7
FIGURA Nº 2. Síntesis enzimática de melanina Raper-Mason
12
FIGURA Nº 3. Hiperpigmentación melanótica, melanocítica, dérmica
15
y piel normal FIGURA Nº 4. Estructura del Rooperol y el Hipoxósido
33
FIGURA Nº 5. Análisis por Western Blot de la expresión de la
37
tirosinasa en melanocitos B16 FIGURA Nº 6. Potenciómetro Orion SA 210
48
FIGURA Nº 7. Reómetro Brookfield RV DV-III Ultra
48
FIGURA Nº 8. Caracterizador de partículas LS 230 Beckman Colulter
49
FIGURA Nº 9. Picnómetro para Muestras Semisólidas
50
FIGURA Nº 10. Turbiscan® classic modelo MA 2000
51
FIGURA N° 11. Skin pigmentation analyzer SPA99®
61
FIGURA Nº 12. Valores promedios de pH en el DAC y DAA
67
FIGURA Nº 13. Reograma del DAC en función del tiempo
69
FIGURA Nº 14. Reograma del DAA en función del tiempo
69
xii
FIGURA Nº 15. Reograma del DAA y DAC a t 5
71
FIGURA 16. Distribución del tamaño de las partículas del DAC en
72
función del tiempo FIGURA 17. Distribución del tamaño de las partículas del DAA en
73
función del tiempo FIGURA 18. Distribución del tamaño de las partículas del DAC y DAA
73
a t0 y t5 FIGURA Nº 19. Determinación de la Velocidad de sedimentación del
76
DAC FIGURA Nº 20. Determinación de la Velocidad de sedimentación del
77
DAA FIGURA Nº 21. Evaluación de la aceptación del producto DAC:
78
Distribución por edad FIGURA Nº 22. Evaluación de la aceptación del producto DAA: Distribución por edad
xiii
81
LISTA DE TABLAS Tabla Nº I. Propiedades de la melanina
10
Tabla Nº II. Clasificación Fitzpatrick fototipos de la piel
13
Tabla Nº III. Efecto de la fracción activa de Darkout TM en los
36
melanocitos B16 Tabla Nº IV. Inhibición de la formación de ERO provocada por THBP
39
en FDH Tabla Nº V. Resultados de la síntesis del colágeno I y III
40
Tabla Nº VI. Fórmula del DAC
63
Tabla Nº VII. Fórmula del DAA
64
TABLA Nº VIII. Propiedades organolépticas del DAC
66
Tabla Nº IX. Propiedades organolépticas del DAA
66
Tabla Nº X. pH promedio del DAC y del DAA
67
Tabla Nº XI. Gravedad especifica promedio del DAC y DAA en
75
función del tiempo Tabla Nº XII. Resultado de los atributos evaluados por las voluntarias para el DAC
xiv
78
Tabla Nº XIII. Resultado de los atributos evaluados por las voluntarias para el DAA
xv
82
LISTA DE ANEXOS ANEXO Nº I. Aprobación del proyecto por parte del Comité de
97
Bioética del Hospital Universitario de Caracas ANEXO Nº II. Propuesta de encuesta para evaluación de eficacia
98
desodorante antitranspirante ANEXO Nº III. Encuesta validada para evaluación de la eficacia del
101
producto desodorante antitranspirante ANEXO Nº IV. Consentimiento informado
104
ANEXO Nº V. Hoja de información al participante del proyecto de
107
investigación ANEXO Nº VI. Díptico informativo para las voluntarias
109
ANEXO Nº VII. Valores de los índices de melanina y eritema para la
111
AD y la AI ANEXO Nº VIII. Comparación fotográfica de las voluntarias durante
114
las tres captaciones realizadas ANEXO Nº IX. Evaluación del producto desodorante antitranspirante aclarante
xvi
123
LISTA DE ABREVIATURAS AD: Axila derecha ADN: Ácido desoxirribonucleico AI: Axila izquierda AlCl3: Cloruro de aluminio Al(OH)3: Hidróxido de aluminio -MSH: Hormona estimulante de melanocitos ANAVA: Análisis de varianza ARN: Ácido ribonucleico cm2: Centímetro cuadrado Ca: Característico carboxi-H2DFCDA: Diacetato de 5-6-Carboxi-2′,7′ -diclorodihidrofluoresceína cps: Centipoise DAA: Desodorante antitranspirante aclarante DAC: Desodorante antitranspirante control DHI: 5,6-dihidroxiindol DHICA: Ácido 5,6-dihidroxiindol-2-carboxílico
xvii
DOPA: L-3-4dihidroxifenilalanina ELISA: Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay - Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas
ERO: Especies reactivas al oxígeno. FDA: Administración de drogas y alimentos. FDH: Fibroblastos dérmicos humanos. GM-CSF: Factor estimulante de colonias de granulocitos y monocitos Kg: Kilogramo L: Litro LT: Leucotrienos Lig: Ligeramente viscosa LTD4: Leucotrienos D4 m2: Metro cuadrado mEq: Miliequivalente ml: Mililitro mm: Milímetro µm: Micra NO: Óxido nítrico xviii
PDCT: Pirrolidina ditiocarbamato PIH: Hiperpigmentación postinflamatoria ppm: Partes por millón r.p.m: Revoluciones por minutos TBHP: Hidroperóxido de terc-butilo TH: Tirosina hidroxilasa TYRP-1: Proteína relacionada con la tirosinasa-1 TYRP-2: Proteína relacionada con la tirosinasa-2 TROLOX: 6-hidroxi-2, 5, 7,8-ácido tetrametilcroman-2-carboxílico t0: 48 h después de fabricado el producto. t1: dos semanas después de t0. t2: realizada cuatro semanas después de t 0. t3: realizada seis semanas después de t0. t4: realizada ocho semanas después de t 0. t5: realizada doce semanas después de t 0. t0´: Medida inicial t1´: Medida a los 15 días
xix
t2´: Medida a los 30 días
xx
INTRODUCCIÓN
El tratamiento cosmético de la piel con el fin de lograr un tono visiblemente uniforme es una práctica común desde la antigüedad. El uso de extractos y ungüentos derivados de plantas para aclarar o iluminar las pieles oscuras ha sido muy habitual entre las diferentes culturas.
1
En general la mayoría de las personas presentan una pigmentación regular, pero existen varios factores que pueden causar discromías. Entre estos factores podemos mencionar: hereditarios, nutricionales, daños causados por el sol, hormonales, cicatrices, trastornos post inflamatorios y el proceso natural de envejecimiento. 1
La hiperpigmentación en la piel es un problema cosmético con un impacto desfavorable en la calidad de vida de los pacientes. Consiste en el oscurecimiento de una región de la piel, a causa de un aumento de la producción y acumulación de melanina. hiperpigmentación
como:
lentiginas,
2
Existen varios trastornos de melasma,
hiperpigmentación
postinflamatoria, y también podemos mencionar la acantosis nigricans. 3
En el caso del melasma, es una forma común de hipermelanosis adquirida la cual ocurre por exposición al sol. Es un término derivado del griego “melas” que
significa negro. 4, 5, 6 Frecuentemente se produce en la cara, ocasionalmente en 1
el cuello y raramente en la frente. La enfermedad afecta a cualquier persona independientemente de su fenotipo; es generalmente prominente en los latinoamericanos y asiáticos y es mucho más común en tipos de pieles oscuras que en pieles claras.
6
Otra de las afecciones que involucra hiperpigmentación es la acantosis nigricans, la cual se caracteriza por oscurecimiento y engrosamiento de la piel con exageración de las marcas de la piel normal. Los sitios de elección son axilas, ingle, nuca, lados del cuello y también periorbital y nudillos.
7, 8
Esta
patología frecuentemente se encuentra asociada con obesidad, malignidad, síndrome genético, el uso de algunos fármacos y endocrinopatologías.
9
La hiperpigmentación postinflamatoria (PIH; siglas en ingles), es una hipermelanosis adquirida que ocurre después de la inflamación cutánea o de lesiones que pueden surgir en todo tipo de piel, pero más frecuentemente afecta
a
personas
de
pieles
oscuras,
incluyendo
afroamericanos,
latinoamericanos, asiáticos, americanos nativos, Islas del Pacífico y los de ascendencia del Medio Oriente.
7, 10
La piel de las axilas oscuras se ha atribuido a la PIH, sobre la base de que la piel muy pigmentada experimenta un mayor incremento en el color después de un trauma inflamatorio o de estimulación, que la piel no pigmentada o ligeramente pigmentada. El oscurecimiento axilar es por PIH leve, caracterizado por incremento de la melanina epidermal, seguido de estimulación e irritación 2
leve de la piel. Una variedad de factores estimulantes pueden estar implicados en la PIH en el área axilar incluyendo el tipo de depilación, el movimiento, estiramiento y la contracción axilar de la piel pigmentada, el roce de la ropa sobre la piel, y la estimulación física de lavado y secado de la axila.
11
En la actualidad para los usuarios de desodorantes antitranspirante, no solamente es importante la protección y la eficacia de los mismos, sino el aroma y el valor agregado que estos pueden tener. La tendencia actual es la formulación de productos multifuncionales que controlen el olor corporal y disminuyan la cantidad de sudor como principal acción y además posean algunos de los siguientes beneficios adicionales: minimizar el crecimiento del vello axilar, disminuir la irritación después de la depilación, aclarar el tono de la piel de las axilas, entre otros atributos. Las manchas en las axilas son una de las grandes preocupaciones de las mujeres, ya que son desagradables a la vista, difíciles de esconder y además generan incomodidad.
En este trabajo se formuló un desodorante antitranspirante aclarante y un desodorante antitranspirante control a los cuales se le comprobó la estabilidad fisicoquímica sometiéndolos a un estudio de estabilidad acelerada por tres meses. Después de asegurar la estabilidad de los productos se evaluó la eficacia desodorante antitranspirante a través de una encuesta de aceptación y el poder aclarante en las axilas a través de la medición del índice de melanina y con toma de fotografías durante un estudio de cuatro semanas de duración.
3
MARCO TEORICO
La piel
La piel está constituida por diferentes tejidos integrados para realizar funciones específicas de protección, es el órgano más grande del cuerpo humano en área superficial y peso, en adultos la piel cubre un área de casi 2 m 2 y pesa 4.5 a 5 kg, o sea, casi 16% del peso corporal. Su grosor varía desde 0.5 mm en los párpados hasta 4 mm en los talones, sin embargo en gran parte del cuerpo es de 1 a 2 mm. 12 Desde el punto de vista estructural, la piel consta de dos partes principales: la superficial y más delgada está compuesta de tejido epitelial y se denomina
epidermis, la profunda y más gruesa, de tejido conectivo, es la dermis. Debajo de ésta se encuentra el tejido subcutáneo, aunque no forma parte de ella, es denominado hipodermis, el cual consiste en tejido areolar y adiposo. Las fibras provenientes de la dermis fijan la piel al tejido subcutáneo, el cual a su vez se une a los tejidos y los órganos subyacentes. La hipodermis sirve como área de almacenamiento de grasa y contiene vasos sanguíneos de gran calibre que irrigan la piel. 12
El color de la piel humana
La pigmentación juega un papel importante en la apariencia y biología de los organismos vivos. Por ejemplo, estar dotado de ciertos pigmentos de color 4
proporciona ventajas ambientales para el organismo, tales como camuflaje, comunicación visual, sucesos reproductivos o termorregulación. En humanos, la pigmentación de la piel es la diferencia visual más evidente entre las diferentes poblaciones y representa la evolución de las diferentes razas. El color de la piel humana puede variar desde casi negro en algunos africanos específicamente, hasta blanco rosado entre algunos europeos del norte. El color de la piel es una mezcla resultante de los diferentes compuestos cromóforos de la piel, como lo son: la oxihemoglobina en los capilares superficiales dérmicos (rojo), la hemoglobina oxigenada en las vénulas dérmicas (azul), carotenoides de la dieta (amarillo-naranja), bilirrubina, que se forma por la degradación de la hemoglobina de los glóbulos rojos (amarillo), y el más importante, la melanina (negro / marrón). Además, la microtextura de su superficie y el sebo en la piel afecta las propiedades reflectantes de la misma y por lo tanto el impacto general del color que se percibe en la piel.
13
La síntesis de melanina y su destino en la epidermis es un proceso biológico complejo que involucra queratinocitos y melanocitos, células del sistema inmune, sustancias solubles derivadas de células de la epidermis y la dermis (fibroblastos dérmicos), de las células en otras partes del cuerpo (las glándulas pituitarias y adrenales) y la cantidad de exposición a la radiación solar. En ausencia de las influencias ambientales, la genética determina el rasgo hereditario del color de piel y se llama pigmentación constitutiva. En contraste, la pigmentación facultativa se refiere al color adicional de la piel y es logrado
5
por un incremento de la producción de melanina más allá de los niveles de pigmentación constitutiva en respuesta a exposición a la radiación. 13
Histología y fisiología general de la epidermis y sistema pigmentario de melanina
Como ya se mencionó, entre las células epidérmicas se encuentran los queratinocitos que constan de varias capas: los queratinocitos ectodermo somáticos, derivados en diferentes etapas de diferenciación y los queratinocitos de la capa basal que se compone de tres poblaciones de células: las células madre, las células de tránsito de amplificación, y las células comprometidas en la diferenciación terminal. El último movimiento hacia arriba de la capa basal para formar capas de células cada vez más diferenciada culmina en los queratinocitos terminales diferenciados que se encuentran localizados en el estrato córneo. 13 Para el propósito de comprensión de la pigmentación de la piel, cuatro etapas del sistema pigmentario de la melanina pueden ser claramente definidas. Estas etapas, posiblemente, pasan como un proceso fluido in vivo. Aunque es conveniente para su estudio por separado, están claramente vinculados, y la investigación revela ciclos de retroalimentación de control que operan a través de estas etapas (figura Nº 1): 1. Biogénesis de los melanosomas en los melanocitos 2. Biosíntesis de los precursores de melanina y la polimerización de la melanina en los melanocitos. 6
3. Transferencia de los melanosomas a los queratinocitos. 4. Movimiento y degradación en queratinocitos.
13
FIGURA Nº 1. Etapas del sistema pigmentario de la melanina.
13
Definición de melanina
La melanina es el color principal determinante en la piel. La coloración de la piel humana depende casi exclusivamente de la concentración y la distribución espacial de la melanina y hemoglobina; ambos cromóforos, donde la melanina desempeña el papel dominante en la conducción de la coloración constitutiva. La melanina se sintetiza como dos tipos químicamente distintos, un pigmento marrón o negro eumelanina y un pigmento amarillo o rojo feomelanina. 14, 15, 16
7
Mecanismo de biosíntesis de melanina
El color de la piel, ya sea negro o blanco, siempre ha captado la atención de la humanidad. La mención acerca de los diversos cambios de color de piel fue bien documentada en casi todas las literaturas tradicionales del mundo. Sin embargo, los mecanismos implicados en tales cambios no se conocen claramente, Sangiovanni en 1819 fue el primero en describir las células de pigmento, a las cuales se refirió como “ cromatóforos”. Más tarde, Ehrmann y Meyerson inventaron los términos “ melanina” y “melanoblasto”, posteriormente
a eso, Henle en 1837 identificó las células que producen pigmento en la epidermis humana. Con el descubrimiento de la melanina y los melanocitos, el foco de la investigación se volvió hacia la comprensión de los mecanismos implicados en la pigmentación. La melanina es el pigmento de la piel que determina el color principal y es sintetizada por unas células dendríticas especializadas llamadas melanocitos. En la piel, los melanocitos se encuentran en la capa epidérmica, intercalados entre los queratinocitos y en los folículos pilosos. Los melanocitos sintetizan la melanina en orgánulos llamados melanosomas
y
posteriormente
transfieren
estos
melanosomas
a
queratinocitos, el mecanismo de la transferencia de melanosomas a los queratinocitos no es bien comprendido hasta los momentos. Después de que los melanosomas son transferidos a los queratinocitos, los melanosomas se empaquetan en lisosomas secundarios que contienen fosfatasa ácida. Una vez redistribuido en los queratinocitos, los melanosomas son degradados por los
8
lisosomas. Esta melanina protege el núcleo de la luz ultravioleta (UV) y ofrece un color de piel muy visible a los queratinocitos.
17
Función de la melanina
En la Tabla I se muestra las diferentes propiedades que han sido atribuidas a la melanina.
9
Tabla Nº I. Propiedades de la melanina.
Propiedad Absorción UV (fototóxica y
Actividad Protege contra el estrés oxidativo
fotosensibilizante) Fotoprotección
Polímero estructural
Dispersión y la densidad del filtro
Escudo del ADN contra los rayos UV
Termorregulación
Protección contra el fotoenvejecimiento
Extingue los radicales libres
Trampa de comunicación (se une con los fármacos tóxicos)
Protege contra la peroxidación
Regula la síntesis de vitamina E
lipídica
Camuflaje y atractivo sexual
Prostaglandinas D2 y E2 Protege contra fotocarcinogénesis Fuente: Walters y Roberts. 2008. 13
La melanina tiene tanto un efecto biofísico / bioquímico; ya que absorbe en el infrarrojo cercano, luz visible y la radiación UV con aumento de la absorción en las longitudes de onda más cortas, por lo tanto, la melanina puede proteger los tejidos de daños causados por luz visible o radiación UV. La melanina es un
10
antioxidante, extingue los radicales libre y tiene una afinidad por los metales y otras sustancias químicas tóxicas. Debido a estas propiedades, la melanina eficientemente filtra las sustancias tóxicas y protege los tejidos del estrés oxidativo y químico. 18
Tipos de melanina
Generalmente se reconocen dos tipos de melanina: eumelanina y feomelanina. La eumelanina es comúnmente aceptada por ser una macromolécula heterogénea de 5,6-dihidroxiindol (DHI) y su forma ácido 5,6-dihidroxiindol-2carboxílico (DHICA). La feomelanina se deriva de la cisteinildopa que contienen azufre, y de nuevo se cree que es una macromolécula heterogénea.
19
Esta última, es más soluble que la eumelanina. Ha sido demostrado que ambas pueden ser sintetizadas por el mismo melanocito (en la piel y en el cabello). En la actualidad se cree que las dos melaninas se mezclan en la misma célula sin embargo, no está claro si se encuentran en el mismo melanosoma. 13 En la figura Nº 2 podemos observar que la producción del pigmento melanina es catalizado por la enzima específica tirosinasa, la cual cataliza la hidroxilación de L-tirosina a L-DOPA (L-3,4-dihidroxifenilalanina) y la oxidación de L-DOPA en dopaquinona. Si la cisteína o glutatión está presente, reacciona con dopaquinona para producir cisteinildopa y los derivados de benzotiazina de feomelanina. Como cisteína disminuye, dopaquinona cicla en dopacromo. TYRP-2 cataliza la tautomerización de dopacromo al DHICA, que posteriormente se oxida a DHICA- subunidades de melanina. La oxidación de 11
DHICA a eumelanina se cree que está catalizada por TYRP-1. En ausencia de TYRP-2, el resto de ácido carboxílico de dopacromo está perdido espontáneamente para formar DHI. DHICA en conjunción con DHI comprenden subunidades de eumelanina. 20, 21
FIGURA Nº 2. Síntesis enzimática de melanina Raper-Mason. 13
Fototipos de la piel La capacidad de bronceado varía entre los individuos con diferentes fenotipos pigmentarios. Las personas con piel muy clara (fototipos I y II) se queman fácilmente y no se broncean, las personas con piel oscura (fototipos III-V) se broncean bien a la exposición al sol y no se queman. Ellos tienen una mayor proporción de eumelanina a feomelanina que en la piel ligeramente
12
pigmentada.13 La clasificación de Fitzpatrick Fitzpatrick (Tabla Nº II) es la más más empleada hasta los momentos, es un sistema que depende de las reacciones y la vulnerabilidad de los diversos tipos de piel a la luz solar y la radiación UV. Esto correlaciona el color de la piel con la dinámica capacidad de respuesta a la luz UV con la que se quema o broncea.
22
Tabla Nº II. Clasificación Fitzpatrick fototipos de la piel
Fototipos I
II
Apariencia Apariencia
Capacidad de bronceado
Muy Blanca o
Nunca se broncean, siempre se
pecoso
queman
Blanca
Se broncean muy fácilmente, siempre se queman
III
Blanca a oliva
Se broncean fácilmente, se queman moderadamente
IV
V
Ligeramente
Se broncean ocasionalmente,
morena
raramente de queman
Morena
Se broncean intensamente y se queman muy poco
VI
Negra
Se broncean intensamente, nunca se queman
Fuente: Matts y col. 2007.
14
13
Trastornos de hiperpigmentación
Los cambios de color en la piel por la edad pueden ser originados principalmente por: manchas postinflamatorias y melasmas ocasionados generalmente
por
el
fotoenvejecimiento
o
también
conocido
como
envejecimiento actínico, el cual ocurre cuando el sujeto es expuesto crónicamente a radiaciones UV provocando una aceleración del proceso de envejecimiento cronológico y generando distintas modificaciones cutáneas. Estas discromías son importantes desde el punto de vista cosmético, ya que a pesar de que en sí no son una enfermedad, su presencia podría causar estrés emocional y psicológico entre los individuos que lo manifiestan.
13
La hiperpigmentación típicamente resulta de melanina, lo que puede ocurrir en la epidermis, dermis, o ambos. Típicamente, esto sucede, ya sea por aumento de la producción de melanina por los melanocitos existentes (hiperpigmentación melánica) o de la proliferación de melanocitos activos (hiperpigmentación melanocítica) (ver figura Nº 3). Normalmente, los melanocitos se encuentran en la capa basal de la epidermis y un incremento en el número o la actividad causarán hiperpigmentación epidérmica. Sin embargo, la melanina formada puede ser transferida a la dermis o en algunos casos, los melanocitos dérmicos están presentes. Un aumento de la actividad o del número de melanocitos en estos casos conducirá a la hiperpigmentación cutánea (ver figura Nº 3). También, una combinación de lo anterior puede tener lugar, lo que provoca la hiperpigmentación mixta. 13
14
FIGURA Nº 3. Hiperpigmentación melanótica, melanocítica, dérmica y piel normal. 13
Hiperpigmentación postinflamatoria
Son lesiones cutáneas que aparecen después que ha solucionado un evento de inflamación en la piel, estos pueden ser debidos a infecciones, heridas, alergias, cirugías cosméticas, procedimientos láser entre otros. Es más común 15
encontrarlas en los tipos de piel Fitzpatrick IV-VI. 12 Estos procesos postinflamatorios pueden tener un impacto negativo en la calidad de vida de las personas, particularmente en pacientes de piel oscura ya que son los más afectados y susceptibles a sufrir PIH. Algunos estudios muestran que las discromías incluyendo la PIH son una de las preocupaciones más comunes de grupos de personas de piel oscura cuando visitan el dermatólogo. Esto es debido probablemente a un incremento en la producción o deposición de la melanina en la epidermis o la dermis por melanocitos lábiles.
13, 23
La patogénesis de los trastornos de la piel incluye dos procesos principales: puede ocurrir aumento de la actividad de los melanocitos, con aumento de la melanogénesis y la transferencia de gránulos de melanina en las proximidades del queratinocito así como, la acumulación de melanófagos en la dermis superior, como resultado de destrucción de la capa de células basales en la inflamación de la piel. Esta distinción entre la epidermis frente a la participación de la dermis es importante cuando se consideran las opciones terapéuticas. Varios mediadores químicos parecen jugar un papel en la PIH como lo son: metabolitos del ácido araquidónico, la prostaglandina E2, el tromboxano B2, leucotrienos (LT) C4 y LTD4. Estos aparecen cuando hay inflamación y se sabe que estimulan los melanocitos por la creciente cantidad de tirosinasa inmunoreactiva, una enzima que participa en la formación de melanina.
7, 9
Otros factores relacionados con la inflamación que aumentan la melanogénesis incluyen histamina, NO, GM-CSF, y α-MSH. Sin embargo, no todas las citocinas inflamatorias aumentan la pigmentación de la piel.
16
24
Melasma
El Melasma es una forma común de hipermelanosis adquirida la cual ocurre por exposición al sol, frecuentemente en la cara, ocasionalmente en el cuello y raramente en la frente. El Melasma es un desorden común multifactorial de la piel, caracterizado por hiperpigmentación.
25
Típicamente simétricos parches o
máculas son encontrados a ambos lados de la cara, con una tendencia a ocurrir por exposición solar (mejillas, labio superior). Este desorden es mucho más común en mujeres que en hombres (una proporción 9:1) y en personas con un fototipo alto (V, VI). Muchos factores etiológicos incluyendo influencia genética, hormonas sexuales femeninas, y exposición a la radiación UV favorecen la aparición de melasma. Histopatológicamente se han encontrado indicadores de hiperpigmentación en todos las capas epidermales causando un incremento en la melanina y también el número de melanocitos activos.
13
Glándulas sudoríparas
Por otra parte, las glándulas sudoríparas ecrinas están distribuidas en toda la piel, a excepción del borde muco cutáneo de los labios, los lechos ungueales en pies y manos, glande del pene y del clítoris, labios menores (vulva) y membrana del tímpano. Estas glándulas, son más numerosas en la piel de la frente, palmas de las manos y plantas de los pies. En las palmas de las manos pueden llegar hasta 450 glándulas/cm2. 26
17
El sudor que producen las glándulas sudoríparas ecrinas (aproximadamente 600 ml/día), 13 es claro, hipotónico, inodoro,
27
y está constituido por agua, iones
(principalmente Na+ y Cl -), urea, ácido úrico, amoníaco, aminoácidos, glucosa y ácido láctico. 12 La función principal de estas glándulas es participar en la regulación de la temperatura corporal.
28
El sudor de estas glándulas también participa
mínimamente en la eliminación de desechos, como la urea, ácido úrico y amoníaco. 12 Las glándulas sudoríparas apocrinas, se localizan principalmente en la piel de las axilas, ingle, areolas de las mamas y región de la cara correspondiente a la barba de hombres adultos.
12, 28, 29
Su porción secretora se localiza
principalmente en el tejido subcutáneo, mientras que su conducto excretor se abre en los folículos pilosos. Su producto de secreción es un poco más viscoso que el de las glándulas ecrinas; además, los componentes del sudor apocrino contienen lípidos y proteínas. Las glándulas sudoríparas ecrinas empiezan a funcionar poco después del nacimiento, mientras que las apocrinas lo hacen en la pubertad. Éstas son estimuladas durante el estrés emocional y la excitación sexual, en cuyo caso la secreción se conoce como “sudor frío” .12
18
Mecanismo de secreción del sudor La glándula sudorípara es una estructura tubular compuesta por dos elementos: una porción enrrollada subdérmica y profunda donde se secreta el sudor, y un conducto que sale hacia afuera a través de las dermis y de la epidermis de la piel. 30 Como sucede con muchas otras glándulas, la parte secretora de la glándula sudorípara segrega un líquido denominado secreción primaria o secreción precursora; luego, las concentraciones de los componentes de ese líquido se modifican en su paso por el conducto. 30 La composición de la secreción precursora es semejante a la del plasma, pero no contiene proteínas plasmáticas. La concentración de sodio es de unos 142 mEq/L, mientras que las de los demás solutos del plasma son mucho más reducidas, esta secreción precursora fluye por el conducto glandular, se modifica por la reabsorción de casi todos los iones sodio y cloruro, los cuales dependen de la tasa de sudoración. 30 Cuando las glándulas sudoríparas sólo se estimulan de forma ligera, el líquido precursor pasa lentamente por el conducto, en este caso, casi todos los iones sodio y cloruro se reabsorben y su concentración desciende hasta 5 mEq/L. Esto reduce la presión osmótica del líquido sudoríparo, casi toda el agua también se reabsorbe y se concentran la mayoría de los demás constituyentes. En consecuencia, si la sudoración es lenta, algunos componentes como la urea, el ácido láctico y los iones potasio están normalmente muy concentrados. 19
30
Al contrario sucede, cuando el sistema nervioso simpático estimula las glándulas sudoríparas con fuerza, se forman grandes cantidades de secreción precursora y el conducto sólo puede reabsorber algo más de la mitad del cloruro sódico; las concentraciones de los iones sodio y cloruro alcanzan un máximo de 50-60 mEq/L, algo menos de la mitad de sus concentraciones plasmáticas. Además, el sudor fluye por los túbulos glandulares tan rápidamente que se reabsorbe muy poca agua. Por esta razón, la concentración de los demás constituyentes disueltos en el sudor aumenta muy poco; la urea es entonces unas dos veces la del plasma; el ácido láctico, unas cuatro veces; y el potasio 1.2 veces. 30
Desodorantes y antitranspirantes
Los cosméticos son definidos, según la Comunidad Andina en su decisión 516 (año 2002) titulada Armonización de Legislaciones en Materia de Productos Cosmético en el artículo 1, como: “Se entenderá por producto cosmético toda sustancia o formulación de aplicación local a ser usada en las diversas partes superficiales del cuerpo humano: epidermis, sistema piloso y capilar, uñas, labios y órganos genitales externos o en los dientes y las mucosas bucales, con el fin de limpiarlos, perfumarlos, modificar su aspecto y protegerlos o mantenerlos en buen estado y prevenir o corregir los olores corporales”.
31
Después de conocer la definición de cosméticos, y sabiendo que entre sus principales funciones se nombra la capacidad de prevenir y/o corregir olores 20
corporales; como los generados por las bacterias gram positivas de la flora saprófita cutánea, que descomponen el sudor ecrino y apocrino generando el mal olor corporal
32
es importante conocer que según la Administración de
Drogas y Alimentos de los Estados Unidos (FDA) en el año 2003 definió el antitranspirante como un producto tópico que reduce la transpiración en el sitio donde es aplicado y a los desodorantes como un producto que reduce el mal olor en el sitio donde sea aplicado.
33
La historia de los desodorantes y antitranspirantes se inicia desde la era primitiva del hombre, en donde descubre que algunas plantas al ser quemadas desprendían fragancias que podían ser usadas para corregir olores corporales, para ello se utilizaba diferentes partes de las plantas como lo eran las flores, las cortezas y las hojas. 34
Cerca de 5000 a.C. los egipcios preparaban una mezcla de aceites perfumados y los aplicaban en las axilas después de baños aromatizados. Entre las plantas que comúnmente fueron utilizadas están la madera quemada, mirra, romero y varios aceites entre ellos el aceite de oliva. Durante el imperio Romano eran empleados unos pequeños cojines en las axilas que estaban compuestos por hierbas aromatizadas que corregían los olores corporales.
35
En China (1500
a.C.) eran utilizados los perfumes como desodorantes así como resinas aromáticas provenientes de árboles que eran mezcladas con grasas animales. 34
21
En los años 1888 – 1890 d.C. se conoció el primer desodorante de marca comercial conocido bajo el nombre de Mum (Bristol Myers Co.) este primer desodorante fue desarrollado en los Estados Unidos, utilizando como activo cosmético el óxido de zinc. Este producto poseía una apariencia de crema cerosa y su acción desodorante se le atribuía a la débil acción antimicrobiana del óxido de zinc. 34, 36
En inicios del siglo XX, específicamente en el año 1902 fue desarrollado el primer antitranspirante, el cual fue formulado con cloruro de aluminio como activo cosmético que actuaba directamente en el control de las glándulas sudoríparas, este antitranspirante era aplicado en las axilas con el uso de un algodón 34,
36
y fue rotulado para excesiva transpiración bajo la promesa o
eslogan: “mantiene las manos libres de transpiración”
33
, sin embargo estas
formulaciones ocasionaban irritación en la piel por su alto poder corrosivo,
34, 35
lo que representó un reto para la industria cosmética, el desarrollar un activo antitranspirante que no causara irritación y fuese efectivo contra la transpiración. En 1914, apareció la primera publicidad de un antitranspirante en revista el cual fue Odoro-no.
34, 36
Con el tiempo se fueron usando menos sales
de aluminio con efectos corrosivos y en 1921 se intentó realizar soluciones amortiguadoras de bórax y aluminio,
36
que coadyuvaban a controlar el pH de
las formulaciones. En 1926, Erik Rotheim desarrolló la tecnología de dispersar los sólidos en un medio líquido empleando un propelente, técnica que fue reforzada en la década de los 70 con el descubrimiento del Clorhidróxido de aluminio en polvo, 35 lo que permitió el desarrollo de antitranspirantes en forma 22
de aerosoles. En 1930 la empresa Arid Cream desarrolló el sulfato de aluminio como ingrediente activo con el mismo propósito de disminuir su capacidad irritante. 34
En 1996, fue introducido en el mercado el complejo clorhidrato zirconio glicina como un activo cosmético para productos antitranspirantes. Más recientemente, ciertas marcas comerciales ofrecen una protección 24 horas y otros beneficios como aclaramiento de las axilas, disminución del crecimiento del vello, disminución del residuo blanco en la ropa o en el cuerpo, entre otros. 34, 35
Mecanismos de acción desodorante
Un desodorante, es un cosmético dirigido a corregir el mal olor corporal proveniente de la descomposición del sudor provocado por las bacterias gram positivas. La eficacia de un desodorante se puede atribuir a la acción bactericida que posee los activos cosméticos, dado que eliminan la flora saprófita no patógena y coadyuva a la eliminación del crecimiento de bacterias gram negativas patógenas en la superficie cutánea.
32
La acción bactericida o bacteriostática de algunas sustancias como lo es el Triclosan; el cual es un activo contra bacterias gram positivas y negativas ya que altera la pared del citoplasma celular e interactúa con el ARN (ácido ribonucleico). Es uno de los antibacteriales más utilizados en las axilas.
37
El Triclosan es un fenol clorado (2,4,4-tricloro-2-hidroxi-
difenileter) que se presenta como polvo blanco insoluble en medio 23
acuoso pero fácilmente soluble en alcoholes, glicoles y tensoactivos no iónicos,
32
el triclosan como agente desodorante ha sido usado
aproximadamente por 30 años por lo que ha implicado una revisión a su seguridad y efectividad como agente antibacterial. En la actualidad, ha sido estudiada la seguridad desde su obtención, dado a algunos contaminantes comunes en su manufactura, como lo son el 2,3,7,8tetraclorodibenzo-p-dioxina
y
2,3,7,8-tetraclorodibenzofurano,
sin
embargo varias industrias manufactureras de materias primas han trabajado en obtener Triclosan con la pureza adecuada para la producción de cosméticos y productos para el cuidado del hogar. El triclosan es principalmente un activo antimicrobial con fuerte actividad biológica en la superficie cutánea como lo es la piel y algunas membranas mucosas por lo que es eficaz en desodorantes, desinfectantes para la piel y productos para el cuidado bucal. Según algunos estudios la actividad antibacterial, el Triclosan puede variar en función del microorganismo, por ejemplo: a bajas concentraciones no es activo para las bacterias Pseudomonas. 37
Compuestos de amonio cuaternario como el cloruro de benzalconio, es activo a muy bajas concentraciones,
38
el cual proviene de una
mezcla de cloruros de alquildimetilbencilamonio, activo principalmente contra bacterias gram positivas y contra algunas bacterias gram negativas, su mecanismo de acción se debe a la desnaturalización de las proteínas lo que genera ruptura de la pared celular bacteriana. 24
39
Sales metálicas similares al aluminio y el zirconio, son usadas a altas concentraciones como antitranspirante pero a bajas concentraciones ellas tienen un efecto desodorante debido a dos posible mecanismos: la reducción del sudor o la reducción de la actividad microbiana.
38
Algunos autores creen que los iones de aluminio y zirconio poseen varios mecanismos de acción; estos han generado varias teorías: el sello de queratina, la manguera agujereada, la carga electroestática negativa y la teoría neurológica que serán descritas más adelante.
Las fragancias o componentes aromáticos, son las sustancias más frecuentemente usadas en desodorantes, 38 su acción cosmética es enmascarar los olores corporales aunque en la mayoría de las veces es insuficiente; estas fragancias pudiesen tener presente aceites esenciales volátiles con moléculas capaces de desarrollar una actividad bacteriostática. 32
Mecanismos de acción antitranspirante
Por otro lado, los antitranspirantes se consideran sustancias capaces de limitar las secreciones sudoríparas excesivas, principalmente en las manos, pies y axilas, y solo se puede considerar eficaz si la reducción del sudor es mayor del 20% según parámetros establecido por entes oficiales. 33
25
El mecanismo de acción por el cual se obtiene un efecto antitranspirante no ha sido oficialmente demostrado, sin embargo, existen varias teorías reconocidas mundialmente como lo son:
La teoría del sello de la queratina (monosacáridos), se fundamenta en la obstrucción mecánica del ducto de sudoración, algunos investigadores sugieren que las sales metálicas precipitan en forma de complejos con los monosacáridos o queratina, lo que genera un aglomerado, evitando la excreción del sudor a la superficie cutánea. 36, 38, 40
La carga electroestática negativa en el extremo del conducto sudoríparo, rige el transporte de las secreciones a la superficie de la piel. La aplicación de la carga electropositiva de las sales metálicas, como el aluminio, neutraliza la carga negativa y por lo tanto inhibe la sudoración. 36
La manguera agujereada: Activos como el cloruro de aluminio, daña el conducto sudoríparo, lo que causa que el sudor secretado se filtre al espacio intersticial en lugar de llegar a la superficie de la piel.
36
La teoría neurológica se basa en la influencia de los iones metálicos sobre la sudoración; estos interrumpen el impulso neurológico hacia las glándulas sudoríparas. De igual modo, estas sales pueden alterar actividades enzimáticas y pueden disminuir la secreción del sudor.
36
Algunos activos cosméticos usados en los antitranspirantes pudiesen proveer de alguna acción desodorante, justificando así la reducción del sudor y por ende 26
se previene la formación del mal olor, por el contrario hasta el momento no se ha demostrado que los activos desodorantes pudieran conferir alguna actividad antitranspirante, dado que solo poseen una acción bactericida.
En el texto de etiqueta de los antitranspirantes, se hace énfasis en el tipo de beneficio según el porcentaje de reducción de sudor, obtenido durante las pruebas de eficacias realizadas al producto, así como también se prohíbe el uso de palabras como “Ayuda”, “Elimina”, “Para”, “Detiene”, “Termina”, “Ayuda a eliminar la humedad de la transpiración vergonzosa”. Todas estas palabras o
frases pudiesen ser subjetivas para uno u otro individuo, no obstante en la monografía final se permite palabras como “Disminuye” o “Reduce”. La FDA ha
determinado que un antitranspirante puede declarar en su etiqueta para “Sudoración emocional” y/o “Protección 24 horas” si reduce un 20% del sudor en pruebas gravimétricas o podrá declarar en su etiqueta “Extra efectivo” si la
reducción es de un 30%. 33 Los ingredientes activos utilizados en los antitranspirantes son principalmente sales de aluminio y complejos de aluminio zirconio, aunque se han reportado activos como:
Sulfato de Aluminio: Este fue uno de los primeros agentes antitranspirantes, las soluciones acuosas de estas sales poseen pHs muy bajos y al estar en contacto con la superficie cutánea húmeda de sudor provocaban un exagerado descenso del pH, lo que coadyuva a irritación de la piel, el formulador debe tener la precaución de incluir un 27
mecanismo corrector adecuado como lo son soluciones amortiguadoras que estabilizarán el pH del medio y así disminuye la capacidad irritante. 41
Cloruro de Aluminio: Presenta los mismos problemas que el sulfato de aluminio, este activo fue desarrollado para actores y modelos, su principal inconveniente es su alta acidez causando daño en los textiles e irritación en la piel. Para evitar este problema, se uso solución tampón de urea. En los últimos años el cloruro de aluminio ha vuelto a adquirir popularidad, en mezclas con el clorhidróxido de aluminio, en donde éste hace el papel de tampón y así disminuir los efectos corrosivos de la acidez de estos productos. 41
Clorhidrato de aluminio: Es una sal inorgánica formada esencialmente por un complejo de cloruro de aluminio básico.
32
Es poco soluble en
agua, sin embargo, en el mercado se puede encontrar soluciones saturadas al 50% de clorhidróxido de aluminio que permiten una mejor manufactura de productos antitranspirantes. El compuesto inicial es un cloruro de aluminio básico que tiene un radio atómico de dos aluminios por uno de cloruro (Al 2(OH5)Cl), esto es comúnmente conocido como clorhidróxido de aluminio que se origina a partir de la neutralización de cloruro de aluminio (AlCl 3) con hidróxido de aluminio Al(OH) 3. Posee el beneficio de ser mucho menos ácido que las sales de sulfato y cloruro de aluminio además de ser menos irritante. 42
28
Característica de los cosméticos
Para la evaluación de un producto cosmético se requiere considerar previamente las siguientes características:
La indicación cosmética.
La forma cosmética.
El estatus social y económico de los potenciales compradores.
Imagen, tamaño y precio.
Diseño del empaque en el cual será comercializado.
El beneficio adicional que pudiese diferenciarlo de otros cosméticos del mercado.
Propiedades organolépticas, químicas y fisicoquímicas. 32
Formas cosméticas de un desodorante y/o antitranspirante
En cuanto a las formas cosméticas de un desodorante y/o antitranspirante se refiere, se pueden encontrar: barras, aerosoles, geles transparentes (emulsiones agua/siliconas), lociones emulsificadas bajo la forma de bolita (rollon). El envase roll-on es la forma cosmética de mayor crecimiento en el mercado; durante los últimos años. Se caracteriza por la aplicación de una loción poco viscosa mediante una bolilla que permite la dosificación del producto. Un estudio de mercado en el 2008 en Brasil, revela que las mujeres prefieren la
29
presentación en bolita y los hombres el aerosol, así mismo US$ 4.930,5 millones que se vendieron en Latinoamérica, en Brasil se vendió el 58% y también fue el país donde se experimento el mayor crecimiento desde el 2003, con un 293% en el segmento de productos en envases roll-on, mientras que el país con menor crecimiento fue México con 45.64%.
43
Por otra parte, las lociones emulsificadas, son sistemas dispersos en los que dos fases inmiscibles (una acuosa y otra oleosa) en conjunto con la adición de un componente anfifílico llamado agente emulsificante, que hacen que estos sistemas sean termodinámicamente menos inestables debido a la tensión interfacial que existe entre el aceite y el agua. Solo la presencia de moléculas anfifílicas llamadas emulsificantes, son capaces de modificar la tensión interfacial y situarse en la interfase, estabilizando así estos sistemas.
32
Sin
embargo, en la práctica no solo encontramos emulsiones constituidas por tan solo estos tres componentes, sino también aditivos que coadyuvan a la estabilidad fisicoquímica, química y microbiológica. Con las emulsiones, se ha desarrollado un lenguaje propio en donde la fase dispersa es también conocida como fase interna o discontinua y la fase dispersante es conocida como fase externa o continúa. Las emulsiones pueden ser de dos tipos gotas de agua (o fase hidrofílica) dispersas en aceite (fase lipofílica), que se designan con las siglas agua/aceite y las gotas de aceite dispersas en agua aceite/agua. Otras emulsiones más complejas son las emulsiones múltiples, por ejemplo, una gota de agua incluida en otra de aceite y ésta a su vez está dispersa en agua (agua/aceite/agua) o viceversa.
44
De otro modo, las emulsiones según su
viscosidad se pueden clasificar entre cremas y lociones. Estas últimas, son de 30
menor viscosidad y con la capacidad de fluir en un envase ideal para ser dosificada mediante una bolilla. En el cuidado personal la utilización de desodorantes y antitranspirantes tiene gran importancia dado al impacto que conciben en la aceptación social del individuo debido a las modificaciones fisiológicas que estos generan en la disminución del mal olor y la transpiración; en esta época los cosméticos se caracterizan por ser multifuncionales y ofrecer al consumidor una gama de beneficios adicionales a los básicos como lo es en este caso la acción desodorante y antitranspirante, como hemos descrito anteriormente la PIH es una consecuencia del afeitado en la zona axilar, lo que se traduce en un problema dermocosmético, que puede ser corregido mediante activos cosméticos específicos, que pudiesen ser desarrollados bajo la promesa de un desodorante / antitranspirante aclarante de la zona axilar.
Activo cosmético aclarante
Para lograr un efecto aclarante en la zona axilar, se han evaluado algunos activos tanto naturales como sintéticos.
Sin embargo, la nueva tendencia
cosmética va dirigida a la incorporación de extractos naturales de plantas con beneficios dermocosméticos; es por ello, que la introducción de extractos de plantas que poseen actividad inhibitoria en la cadena de formación de melanina, es un punto de diferencia innovador en el desarrollo de este tipo de formulaciones. 45
31
El producto que usaremos con propiedades aclarantes es el Darkout TM y su nombre INCI es: water, glycerin, hypoxis rooperi rhizome extract, caesalpinia spinosa gum;
46
el cual es un extracto purificado de tallo subterráneo de
Hypoxis rooperi formulado en una innovadora matriz hidrocoloide tridimensional
compuesta por galactomanos obtenidos a partir de semillas de Caesalpinia spinosa, que liberan los activos en la piel y evitan la pérdida de agua
transepidérmica. 45 Su nombre botánico es Hypoxis hemerocallidea y es conocida como Hypoxis rooperi . En el sur de África, localmente se conoce como inkomfe o ilabatheka, 47, 48
también se le llama pasto estrella africana y patata africana. Se tarda unos
cinco o seis años a crecer hasta su madurez y crece en todos los países del sur de África en el medio natural. 47 La designación Hypoxis fue otorgada por Linneo en 1759 a partir de los vocablos griegos hypo (“debajo de”) y oxi (“afilado”) en referencia al cormo, que está orientado hacia la base.
49
La planta de Hypoxis rooperi son geófitas y superan los meses invernales en forma de rizoma enterrado, denominado cormo. También cuentan con raíces adventicias gruesas y carnosas conectadas a los cornos que nacen en la base de los cormos jóvenes. Las hojas oscilan entre lineales y ampliamente lanceoladas y a menudo se confunden con las de las cebolletas. El aspecto peludo de las hojas es un factor diferenciador determinante. Los tallos de floración no son ramificados y hay entre 2 y 12 flores en cada tallo.
45
La Caesalpinia spinosa se conoce comúnmente como tara y pertenece a la familia de las leguminosas. Esta especie es del Perú, aunque se ha extendido 32
por las zonas áridas de América del Sur.
45
Crece en forma silvestre en los
bosques y valles andinos, a alturas de entre 1000 y 3100 m, normalmente con 5 sépalos, 5 pétalos unidos en la
base y 10 estambres libres o unidos
basalmente, soportan los climas secos y crece también en terrenos arenosos y pedregosos. Por lo tanto, esta especie se ha adaptado para soportar y crecer en condiciones climáticas, nutricionales y de humedad adversas.
45, 50
Los principales ingredientes activos presentes en el extracto de rizoma de Hypoxis rooperi son los norlignanos polifenólicos hipoxósido (R1=R2=Glucosa)
y rooperol (R1=R2=H) (ver figura Nº 4). Además, también hay presentes fitoesteroles y esterolinas en el cormo de Hypoxis rooperi , concretamente daucosterol, un glicósido β -sitosterol.
45
Adicionalmente, la literatura reporta que
el extracto del bulbo de H. Hemerocallidea ha sido usado para el tratamiento de problemas de próstata en Europa por su actividad antiinflamatoria y el alivio de los síntomas.
48
El rooperol aumenta la síntesis de colágeno e inhibe el
crecimiento de células tumorales. 47, 51
ROOPEROL
HIPOXÓSIDO
FIGURA Nº 4. Estructura del Rooperol y el Hipoxósido. 45
33
Las semillas de Caesalpinia spinosa son ricas en polisacáridos denominados galactomananos. Tiene como función principal actuar como agente hidratante natural, debido a su excelente propiedad de retención de agua.
45
Los mecanismos de acción de esta mezcla de extracto se fundamenta en pruebas in vitro realizadas por el fabricante del activo cosmético las cuales se detallan a continuación:
Prueba 1 Inhibición de la actividad de la tirosinasa e inhibición de la melanina Se incubaron melanocitos murinos B16 en condiciones basales (medio de cultivo estándar; nivel de pigmentación bajo) durante 24 horas con la fracción activa DarkoutTM, ácido kójico o medio de cultivo (control). Los parámetros que se midieron fueron el número de células viables, el contenido normalizado de melanina (µg de melanina/mg de proteína) y las actividades específicas de la tirosina hidroxilasa (TH) y la dopa-oxidasa (dopa). La actividad de la TH se midió por medio de espectrofotometría. Los resultados están normalizados respecto al control. Se realizó una prueba similar con melanocitos murinos B16 que se preincubaron durante 48 horas con ɑ-MSH, una hormona estimulante de los melanocitos. De este modo se producen melanocitos con nivel de pigmentación más elevado, que puede ser más parecido a las condiciones de hiperpigmentación que se presentan en la piel. Después de un tratamiento con -MSH, los melanocitos B16 se incubaron durante 24 horas con la fracción
ɑ
34
activa de DarkoutTM, ácido kójico o medio de cultivo (control). Una vez más los parámetros que se midieron fueron el número de células viables, el contenido normalizado de melanina (µg de melanina/mg de proteína) y las actividades específicas de la tirosina hidroxilasa y la dopa-oxidasa. Los resultados están normalizados respecto al control. 45
35
TABLA Nº III. Efecto de la fracción activa de DarkoutTM en los melanocitos B16 Condición
Contenido de Grupo
experimental
de melanina
Control
Reducción
Reducción TH
Reducción de DOPA
de TH
melanina
DOPA
100%
-
100%
-
100%
-
74%
26%
85%
15%
134%
-34%
67%
33%
46%
54%
47%
53%
100%
-
100%
-
100%
-
96%
4%
91%
9%
130%
-30%
49%
51%
66%
34%
80%
20%
Kójico 100 Células B16 basales
ppm Activo 100 ppm Control
MSH +
Kójico 100
ɑ
ppm células B16 Activo 100 ppm
Fuentes: Provital Group. Darkout; 2008.45
36
Los resultados de la Tabla Nº III indican que, en ambas condiciones experimentales, la fracción activa del extracto de rizoma de Hypoxis rooperi produjo una reducción considerable de las actividades de la TH y la dopaoxidasa en comparación con el ácido kójico, que tuvo un efecto muy reducido en la misma baja concentración. Además, el contenido de melanina también fue menor en el caso del extracto de Hypoxis rooperi que con el ácido kójico; este efecto fue incluso más apreciable en las células tratadas con ɑ-MSH. 45
Prueba 2
Inhibición de la expresión de la tirosinasa Se lisaron melanocitos murinos B16 tratados en las mismas condiciones de la prueba anterior y se cuantifico la concentración de tirosinasa mediante Western Blot con anticuerpos de tirosinasa específicos ɑDEP7. 45
CONTROL
HYPOXIS ROOPERI
CONTROL
HYPOXIS ROOPERI
FIGURA Nº 5. Análisis por Western Blot de la expresión de la tirosinasa en melanocitos B16. 45 37
Tanto en el caso de los melanocitos basales como en los activados por ɑMSH, el tratamiento durante 24 horas con extracto purificado de Hypoxis rooperi produce una reducción de la expresión de la tirosinasa (ver figura Nº 5).
Prueba 3
Eliminación de Especies Reactivas al Oxígeno (ERO)
El método de prueba se basó en la medición de especies reactivas al oxígeno (ERO) intracelulares con una sonda molecular C-400 diacetato de 5-6-Carboxi2′,7′ -Diclorodihidrofluoresceína y se abrevia carboxi-H2DFCDA) de Invitrogen.
Se preincubaron fibroblastos dérmicos humanos (FDH) primarios con el compuesto de prueba y la sonda C-400 durante 40 minutos, y se midió la velocidad de formación de ERO (entre 0 y 60 minutos) tras la activación de las células con TBHP (hidroperóxido de terc-butilo). La cuantificación se realizó mediante fluorescencia, y se utilizó pirrolidina ditiocarbamato (PDCT, 50 µM) y TROLOX (100 µM) como controles positivos para la inhibición de ERO (65 de inhibición de ERO). 45
38
Tabla Nº IV. Inhibición de la formación de ERO provocada por THBP en FDH.
Compuesto
Inhibición de ERO
Control (TBHP)
0%
Activo 10 ppm
37,5%
Activo 100 ppm
50,5%
TROLOX (100 µM)
65%
Fuentes: Provital Group. Darkout; 2008. 45
Los resultados de la Tabla Nº IV muestran que la fracción activa de Darkout TM posee una capacidad de eliminación de ERO moderada, solo ligeramente inferior a la del control positivo TROLOX.
Prueba 4
Activador de la síntesis de colágeno I y III. Se midió el contenido de proteína (colágeno I y III) con el método de análisis ELISA (Enzyme-linked immuno sorbent assay de sus palabras en inglés) y que en español significa ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas. Los resultados muestran que el extracto purificado es un potente activador de la síntesis de colágeno I y III en los cultivos de fibroblastos (Tabla N° V). Por lo tanto, la calidad de la piel mejora y pasa a ser más radiante y menos apagada.45
39
TABLA Nº V. Resultados de la síntesis del colágeno I y III.
Síntesis de colágeno I Concentración
Síntesis de colágeno III
Aumento
Concentración
Aumento
respecto al
respecto al
control
control
10 ppm
88,9%
10 ppm
48,9%
100 ppm
108,7%
100 ppm
51,3%
500 ppm
242,2%
500 ppm
186,0%
Fuentes: Provital Group. Darkout; 2008. 45
Este activo cosmético de origen natural posee propiedades aclarante según lo reseña su casa fabricante Provital Group, aunque no se ha utilizado en el desarrollo de lociones desodorantes antitranspirantes. El uso de este activo aclarante en el desarrollo de este trabajo es un aporte novedoso para la industria cosmética de desodorantes antitranspirantes ya que la tendencia actual del mercado es la obtención de productos con beneficios adicionales.
40
OBJETIVOS
Objetivo general
Evaluar la eficacia aclarante de un desodorante antitranspirante dirigido a personas con hiperpigmentación axilar.
Objetivos Específicos
1. Desarrollar un desodorante antitranspirante. 2. Desarrollar un desodorante antitranspirante aclarante. 3. Determinar las propiedades fisicoquímicas de los desodorantes antitranspirantes formulados. 4. Evaluar la estabilidad fisicoquímica de los desodorantes antitranspirantes formulados. 5. Determinar la eficacia aclarante del desodorante antitranspirante en sujetos con manchas oscuras en las axilas. 6. Evaluar la aceptación por parte de los usuarios de los desodorantes antitranspirantes desarrollados.
41
MATERIALES Y METODOS
MATERIALES
Recursos humanos
Dos farmacéuticos responsables de la investigación.
Una tutora del proyecto.
Un dermatólogo
Voluntarias
Recursos materiales
Material de laboratorio
Materias prima para la fabricación de los lotes
Recursos tecnológicos
Computadora e impresora.
Acceso a internet
Estufas con controladores de Temperatura marca Memmert
Desecadores
Balanzas
Cocinilla eléctrica
Mezclador marca IKA
Picnómetro para semisólidos 42
Reómetro de cono y plato, marca Brookfield RV-DV III Ultra
Potenciómetro Orion SA 210
Turbiscan MA 2000
Caracterizador de partículas LS 230 Beckman Coulter LS 230
Skin Pigmentation Analyzer ® SPA 99 (Analizador de pigmentación en la piel)
Cámara fotográfica marca Canon
Recursos Bibliográficos
Revistas científicas especializadas
Libros y textos de consulta
43
METODOLOGÍA
Desarrollo de un desodorante antitranspirante
Formulación por el método de ensayo y error
Este método aplica la lógica y la probabilidad, si la opción utilizada funciona, se tiene una solución al problema presentado; pero si no funciona se prueba con otra opción, basándose en los resultados de la prueba anterior, obteniendo así productos estables. 52
La formulación del desodorante antitranspirante control (DAC) fue una loción emulsificada, para ser aplicada con una bolilla (envases roll-on), empleando como activos: el clorhidróxido de aluminio como antitranspirante y el triclosan como desodorante. La fabricación del desodorante antitranspirante se llevó a cabo aplicando la siguiente técnica de manufactura: Se pesaron los ingredientes que conforman la formulación en la balanza galénica. Se calentó la fase A (conformada por todos los ingredientes de naturaleza oleosa) y se calentó la fase B (conformada por todos los ingredientes de naturaleza acuosa), cuando ambas fases se encontraban entre 75ºC y 80ºC, la fase B fue adicionada sobre la fase A para formar la emulsión y se mezclaron a 850 rpm durante 15 minutos con una agitador de hélice IKA, con una varilla agitadora de áncora, una vez que las fases A-B 44
alcanzaron una temperatura menor a 50ºC se agrego la fase C (activo antitranspirante) a una velocidad de 700 rpm durante 10 minutos y luego la fase D (activo desodorante) a una velocidad de 700 rpm durante 5 minutos.
Desarrollo de un desodorante antitranspirante aclarante
El desodorante antitranspirante aclarante (DAA) fue una loción emulsificada tomando como base la fórmula del desodorante antitranspirante control (DAC), de igual forma para ser aplicada con una bolilla (envases roll-on), empleando
como
activos:
el
clorhidróxido
de
aluminio
como
antitranspirante, el triclosan como desodorante y la mezcla de extractos (Water, Glycerin, Hypoxis rooperi Rhizome Extract, Caesalpinia spinosa Gum) como aclarante. Para la fabricación del DAA se empleó la siguiente técnica de manufactura: Se pesaron cada uno de los ingredientes que conforman la formulación en la balanza galénica. Se calentó la fase A (conformada por todos los ingredientes de naturaleza oleosa) y se calentó la fase B (conformada por todos los ingredientes de naturaleza acuosa), cuando ambas fases se encontraban entre 75ºC y 80ºC, la fase B fue adicionada sobre la fase A para formar la emulsión y se mezclaron a 850 rpm durante 15 minutos con una agitador de hélice IKA, con una varilla agitadora de áncora, una vez que las fases A-B alcanzaron una temperatura menor a 50ºC se agrego la fase C (activo antitranspirante y aclarante) a una velocidad de 700 rpm
45
durante 10 minutos y luego la fase D (activo desodorante) a una velocidad de 700 rpm durante 5 minutos. Para evaluar la estabilidad fisicoquímica de los productos desarrollados, se elaboraron 3 lotes de 140g cada uno.
Ambas formulaciones se realizaron usando activos cosméticos y excipientes que cumplieron con los debidos estándares de calidad, además de ser materias primas aprobadas y comercializadas en el mercado cosmético nacional que no producen daños en la piel y no son tóxicas.
Determinación de las propiedades fisicoquímicas y estabilidad de las formulaciones desarrolladas
Todas las determinaciones de las formulaciones del DAC y DAA se realizaron por triplicado para asegurar la reproducibilidad de los resultados y durante un periodo de tres meses, sometiendo los lotes de ambos productos en condiciones aceleradas a una temperatura 40°C ± 2°C y humedad relativa controlada de 75% ± 5%.
53, 54, 55
fisicoquímicos fueron realizados a los siguientes tiempos:
1.
t0: 48 h después de fabricado el producto.
2.
t1: dos semanas después de t 0.
3.
t2: realizada cuatro semanas después de t 0.
4.
t3: realizada seis semanas después de t 0. 46
Los análisis
5.
t4: realizada ocho semanas después de t 0.
6.
t5: realizada doce semanas después de t 0.
El t 0 fue considerado después de las 48h de fabricado el producto, permitiendo un lapso de tiempo para que el sistema pueda estabilizarse y el agente emulsificantes pueda organizarse en la interfase agua y aceite del producto para luego si ser sometido a altas temperaturas para evaluar si estabilidad acelerada.
Las propiedades fisicoquímicas evaluadas se detallan a continuación:
Propiedades Organolépticas: Se realizó la evaluación de las fórmulas mediante percepción visual, considerando el olor, color y la apariencia de estas con respecto a la obtenida al comienzo del estudio de estabilidad t0.
pH: Se aplicó el método de la USP 30 capítulo (791) 56, empleando un potenciómetro con electrodo combinado de Ag/AgCl. Para la determinación del pH se utilizó un potenciómetro Orion Research modelo SA 210 (Figura Nº 6) previamente calibrado. Las muestras se diluyeron con agua para formar una dispersión al 10%p/v, se agitaron ligeramente antes de ser
introducidas en el electrodo. Todas las
determinaciones se realizaron a 26ºC ± 2 ºC.
47
FIGURA Nº 6. Potenciómetro Orion SA 210.
El comportamiento reológico: Se determinó con un reómetro Brookfield de cono y plato RV-DVIII Ultra, (Figura Nº 7), con la aguja CPE-51 a una temperatura de 26°C 2°C, a diferentes velocidades de deformación: 5, 10,15, 25, 30 revoluciones por minuto (r.p.m.) en sentido creciente y decreciente con intervalos de 30.2 segundos, para así obtener el reograma completo de cada uno de los analitos.
55
Los
resultados se expresaron en centipoise (cps). Se empleó el programa Rheocalc. 57
FIGURA Nº 7. Reómetro Brookfield RV DV-III Ultra 48
Distribución del tamaño de las partículas: Se realizó con el equipo caracterizador de partículas por difracción láser Coulter LS230, (Figura Nº 8), provisto de un módulo para pequeños volúmenes, el cual analiza el tamaño de las partículas por difracción láser. Se realizó una dispersión al 10% p/v de cada muestra. Para el análisis de los resultados se aplicó el software versión 2.01 Microsoft Windows based y se obtuvieron las representaciones gráficas de la distribución del tamaño de las partículas expresadas en diámetro volumen medio. 57
FIGURA Nº 8. Caracterizador de partículas LS 230 Beckman Coulter.
La gravedad específica: Este ensayo se realizó usando un picnómetro de vidrio para muestras semisólidas (Figura Nº 9) y aplicando el método de la USP 30 capítulo (841) a 26ºC ± 2 ºC. 57
49
FIGURA Nº 9. Picnómetro para Muestras Semisólidas Para realizar los cálculos de la gravedad específica se empleó la siguiente fórmula: ρr = (m2 - m1) / (m3 – m1)
En donde ρr = Gravedad específica
m1 = masa del picnómetro m2 = masa del picnómetro con dispersión problema m3 = masa del picnómetro con agua destilada.
Velocidad de sedimentación: Se utilizo un analizador óptico llamado Turbiscan MA 2000 ® (Figura Nº 10). Para el análisis de los resultados se aplicó el software Turbisoft. Este equipo consiste en la difracción de la luz a través de una dispersión concentrada de la muestra a evaluar, para caracterizar su estabilidad fisicoquímica en el tiempo, y detectar inestabilidades mucho antes que se puedan detectar a simple vista. Los resultados son representados en curvas que demuestran el porcentaje
50
de retrodispersión o de transmisión de la luz en función de la longitud del tubo de la muestra. 57 Las muestras se colocaron en unos tubos de vidrio tapados por ambos extremos y se introdujeron en el equipo, cada muestra se corrió 3 veces con una diferencia de 2 minutos entre cada lectura.
FIGURA Nº 10. Turbiscan ® classic modelo MA 2000
La medición de la velocidad de sedimentación fue realizadas a 26ºC ± 2 ºC.
Determinación de la eficacia desodorante / antitranspirante
Previo a la determinación de la eficacia aclarante se determinó la eficacia desodorante antitranspirante con la formulación del DAC, ya que ambas formulaciones contenían la misma cantidad de triclosan y de clorhidróxido de aluminio de manera de poder cumplir con la promesa desodorante y antitranspirante. 51
Se realizó un estudio piloto abierto randomizado y prospectivo en voluntarias sanas, el cual fue aprobado por el Comité de Bioética del Instituto Autónomo Hospital Universitario de Caracas (Anexo I).
Para determinar la eficacia desodorante antitranspirante y la aceptación de la fórmula se realizó una propuesta de encuesta (Anexo Nº II) la cual fue entregada a 10 expertos en el área de desodorantes antitranspirantes (formuladores, tecnólogos cosméticos, médicos dermatólogos, personas en el área de mercadeo) y estos hicieron las modificaciones y sugerencias necesarias en base a lo que se quería medir en la encuesta, de ésta manera la encuesta quedó validada (Anexo III). Para determinar la acción del desodorante antitranspirante y su aceptación por parte de las voluntarias, se sometió el producto control desarrollado y estable, a una prueba de aceptación realizada a 15 voluntarias; las cuales usaron regularmente el producto por un período de 15 días como su desodorante antitranspirante de uso diario. Al cabo de ese período, procedieron a llenar la encuesta validada.
A cada voluntaria, se le suministró el producto, previa explicación del uso adecuado del mismo. En caso de dudas, éstas les fueron aclaradas.
52
A) Selección de Sujetos Los criterios de inclusión y exclusión fueron tomados del estudio de efectividad antitranspirante validado por la FDA con ligeras modificaciones para adaptarlos a este proyecto. 33
Criterios de Inclusión
Mujer de 17 - 35 años de edad, en buen estado de salud general.
Deben tener sudoración regular.
Criterios de Exclusión
Hombres.
Tener irritación severa en la axila.
Tener una historia de irritación en la axila por productos antitranspirantes y desodorantes.
Persona que hayan participado recientemente en algún estudio dermatológico.
Tener una historia recurrente de infecciones, absceso, inflamación de ganglios linfáticos, psoriasis, eczema, cáncer de piel o condiciones dermatológicas que pudieran interferir con la evaluación.
Tomar cualquier medicamento o tener una enfermedad endocrina importante que pueda interferir con los resultados del estudio o presentar problemas insalubres.
Diabéticos insulinodependientes. 53
De tomar algún antibiótico sistémico o antibiótico tópico en el área de las axilas en el plazo de dos semanas antes del inicio del estudio.
Mujeres embarazadas o en periodo de lactancia.
Abandono del estudio
Después de comenzar la evaluación, las voluntarias podrán retirarse en cualquier momento y por cualquier razón. El motivo del abandono será informado de manera justa, precisa y debidamente documentado para luego ser referenciado en los resultados del estudio.
B) Días de evaluación de eficacia desodorante antitranspirante
Una vez realizada la captación de las voluntarias se procedió a entregarles el producto desodorante antitranspirante y explicadas las instrucciones correctas de uso (aplicación en ambas axilas de forma regular y no utilizar productos comerciales), se les indicó que el producto debía ser utilizado durante 15 días continuos.
Transcurrido los 15 días de uso del producto las voluntarias tuvieron que llenar la encuesta para determinar la eficacia desodorante antitranspirante.
54
Determinación de la eficacia aclarante del desodorante antitranspirante
Una vez que se evaluó la eficacia desodorante antitranspirante y garantizar de esta manera que la formula actuaría controlando el mal olor de las axilas y la transpiración se procedió a evaluar la eficacia aclarante del producto desodorante antitranspirante que se formuló mediante la medición del índice de melanina. Se realizó la captación de las voluntarias en la Facultad de Farmacia de la Universidad Central de Venezuela. Todas las voluntarias fueron sometidas a diagnostico visual por un médico dermatólogo para evaluar la presencia de hiperpigmentación axilar. Después de la evaluación dermatológica solo 22 voluntarias cumplieron con los criterios de inclusión establecidos en este proyecto. A cada una de ellas, se le explicó el uso adecuado del producto y se le entregó las instrucciones por escrito, las cuales leyeron y entendieron. En caso de dudas, éstas le fueron aclaradas y posteriormente firmaron el consentimiento informado (Anexo IV). El DAA y el DAC fueron entregados a todas las voluntarias en el t 0’, a partir de ese día las participantes usaron el DAA entregado y formulado por las investigadoras una vez al día en la axila derecha (AD), mientras que en la axila izquierda (AI) usaron el DAC
sin ninguna propiedad adicional (placebo o
control). La AI fue el control del estudio; el cual permitió evaluar si el desodorante antitranspirante sin el extracto, posee algún efecto aclarante por sí solo. Adicionalmente, se realizaron tomas de fotografías al inicio (t 0’), a los 15 días (t1’) y a los 30 días (t 2’). 55
A) Selección de Sujetos Criterios de Inclusión
Mujer de 17 - 35 años de edad, en buen estado de salud general.
Deben ser personas de fototipos de piel altos (IV-VI) según la clasificación Fitzpatrick.
Deben tener sudoración regular.
Participar y aprobar los requisitos establecidos de una breve revisión médica en el t 0´. (Presencia de manchas oscuras a nivel axilar en ambas axilas).
Firmar el consentimiento informado.
Criterios de Exclusión
Tener una irritación severa en la axila.
Tener una historia de irritación en la axila por productos antitranspirantes y desodorantes.
Tener una historia recurrente de infecciones, absceso, inflamación de ganglios linfáticos, psoriasis, eczema, cáncer de piel o condiciones dermatológicas que pudieran interferir con el estudio.
Tomar cualquier medicamento o tener una enfermedad endocrina importante que pueda interferir con los resultados del estudio o presentar problemas insalubres.
Diabéticos insulinodependientes.
56
De tomar algún antibiótico sistémico o antibiótico tópico en el área de las axilas en el plazo de dos semanas antes del inicio del estudio.
Mujeres embarazadas o en periodo de lactancia.
Abandono del estudio
Después de ingresar al estudio, las voluntarias podrán retirarse en cualquier momento y por cualquier razón. El motivo del abandono será informado de manera justa, precisa y debidamente documentado para luego ser referenciado en los resultados del estudio.
Luego de ser evaluados todos los criterios de inclusión y exclusión a los voluntarios seleccionados, se les entregó un consentimiento informado en donde se les explicó a las participantes las clausulas y condiciones del estudio.
B) Examinación Axilar
El área axilar de todos los voluntarios fue examinada por un médico dermatólogo, capaz de detectar cualquier patología dermatológica, esta revisión se realizó en conjunto con las investigadoras.
El examen axilar se realizó durante los días t0’, t1’ y t2’ del estudio, antes de la toma de las fotografías y la medición de índices de melanina con el equipo SPA 99 ®. Esto se hizo con el objetivo de evaluar y asegurar las buenas condiciones dermatológicas y evitar interferencias en el estudio. 57
Todos los datos del examen axilar encontrados para cada paciente fueron debidamente documentados.
C) Días de evaluación de eficacia aclarante
Se realizó la revisión axilar por las investigadoras en el t 0´. Además ese día se les entregó a las voluntarias la hoja de información al participante (Anexo V) y un díptico ilustrativo (Anexo VI) con información sobre el estudio, en el mismo estaban los datos más relevantes del proyecto de interés para las voluntarias y el uso del producto.
Se tomaron las fotografías en ambas axilas en el t 0´. Se realizó la medición del índice de melanina inicial en el t 0´. Se realizó la revisión axilar por las investigadoras, transcurrido 15 días (t1’) de uso continuo del DAA.
Se tomó las fotografías en ambas axilas en el t 1’.
Se realizó la medición del índice de melanina en el t 1’.
Se realizó la revisión axilar por las investigadoras, transcurrido 30 días (t2’) de uso continuo del DAA.
Se tomó las fotografías en ambas axilas en el t 2’.
Se realizó la medición del índice de melanina en el t2’.
58
Para las tomas de fotografías se utilizó una cámara fotográfica marca Canon Esos rebel T3 zoom lens EF-S 18-55 mm, la cual se utilizó de forma automática y con autofoco. Lo primero que se hizo fue establecer un protocolo que incluía cinco variables: a) uso de un fondo que proporcione contraste, b) establecimiento de una distancia constante entre la cámara y el paciente, c) empleo de iluminación adecuada, d) establecimiento de las posiciones o poses respecto del área del cuerpo que se enfoca (sobre todo cuando se trata de obtener el historial del cuerpo entero, por ejemplo: lesiones pigmentarias, y el mantenimiento de un estricto control del contenido de la imagen. 58 Puntos a tener en cuenta con el fin de capturar una imagen clara Los siguientes aspectos deben ser considerados cuidadosamente para capturar una imagen clara: 1. Siempre es preferible tomar imágenes en color natural luz solar difusa. El participante debe enfrentarse a la inclinación los rayos del sol, con el fin de obtener una imagen sin sombras. Para fotografía de interiores, se debe utilizar luz blanca fluorescente difusa. 2. Párese a una distancia de 3 pies del paciente, ajuste la cámara en modo macro y flash apagado, y debe asegurarse que ninguna sombra o resplandor se encuentre a la vista; zoom y disparar. 3. Al pulsar "W" el interruptor o 'T' en la cámara, se amplía o reduce el tamaño. "W" significa "ángulo amplio" (reducir) y en 'T' es sinónimo de 'tele' (Ampliar). Utilice un trípode para evitar movimiento de la cámara. Si un trípode no está disponible, hará descansar la barbilla del participante en la mano del mismo.
59
4. Coloque una etiqueta adhesiva del número de referencia del paciente en la parte a ser fotografiada, de modo que se hace más fácil localizar al paciente y su registro fotográfico. Tome nota de la posición del paciente (al frente, perfil, dorso ventral, etc) en las historias clínicas. Es más fácil tomar la foto clínica de seguimiento en la misma posición, misma iluminación y el fondo. 59
Para la medición de los índices de melanina se utilizó el equipo Skin Pigmentation Analyzer ® (SPA 99®, analizador de pigmentación en la piel) (Figura N° 11) con el cual se realizó una medida inicial (t 0’), a los 15 días (t 1’) y a los 30 días (t 2’) durante el uso de los productos formulados en las voluntarias del sexo femenino que aceptaron participar en el estudio. El equipo SPA 99® determina el contenido de melanina y hemoglobina (eritema) en la piel, estos dos componentes son los principales responsables del color de la piel. El fundamento se basa en los principios de absorción, la sonda especial del SPA 99® emite luz de tres longitudes de onda definidas, un receptor mide la luz reflejada por la piel. Las posiciones del emisor y receptor garantizan que sólo la luz difusa y dispersa se mida, como la cantidad de luz emitida está definida, la cantidad de luz absorbida por la piel puede ser calculada.
60
La melanina es medida por dos longitudes de ondas. Estas longitudes de onda se han elegido con el fin de alcanzar diferentes tasas de absorción de los pigmentos de melanina. Para la medición del eritema, dos longitudes de onda diferentes se utilizan para medir la capacidad de absorción de la piel. Una de estas longitudes de onda se corresponde con el pico de absorción espectral de 60
la hemoglobina. La otra longitud de onda ha sido elegida para evitar las influencias de otros colores de la piel (por ejemplo, la bilirrubina).
60
Una vez transcurrido los 30 días del estudio, se analizaron los valores de melanina y se compararon las fotos de las axilas en los diferentes tiempos de análisis. Los datos y fotografías obtenidas para cada una de las voluntarias fueron procesados bajo escrita confidencialidad.
FIGURA N° 11 Skin Pigmentation analyzer SPA99 ®
Adicionalmente, a la evaluación cuantitativa de la eficacia aclarante, se les entregó una encuesta a las voluntarias (Anexo IX) para evaluar la formulación y su apreciación de la misma. Dicha encuesta fue realizada basada en la propuesta
realizada
para
la
determinación
de
eficacia
desodorante
antitranspirante y los mismos 10 expertos mencionados anteriormente ayudaron en la adaptación de la misma y la validación para evaluar la formulación en general. 61
Para realizar el análisis estadístico de todos los datos obtenidos, se utilizó el Paquete Estadístico SPSS (Statistica Package for the Social Sciencies) versión 15.0 y el programa de Office Excel para agrupar los datos. Para las determinaciones fisicoquímicas, la estabilidad y la eficacia aclarante se utilizó el procedimiento estadístico ANAVA (Análisis de varianza) con un 95% de exactitud.
Evaluación de la aceptación por parte de los usuarios de los desodorantes antitranspirantes desarrollados Para evaluar la aceptación de la formula se utilizó el mismo instrumento de medición (encuesta) utilizada en la eficacia desodorante antitranspirante (Anexo Nº III), y para evaluar la formulación del DAA en los atributos referentes a su eficacia desodorante y antitranspirante, además de la percepción de las voluntarias ante el producto se utilizó la misma encuesta modificada para DAA (Anexo Nº IX).
62
RESULTADOS Y DISCUSIONES
Desarrollo del desodorante antitranspirante El desodorante antitranspirante se formuló libre de fragancia para evitar tener algún componente que pudiera causar reacción alérgica de contacto
61, 62, 63
o
inflamación axilar en las voluntarias y generar interferencia en los resultados del estudio, la fórmula cuantitativa se presenta a continuación.
TABLA Nº VI. Fórmula del DAC INGREDIENTES
FASE
JUSTIFICACIÓN
(Nomenclatura INCI)
%P/P
Cetyl alcohol
Agente de cuerpo
0.5
Glyceryl monostearate
Agente de cuerpo
0.5
Emulsificante
3.5
Emoliente
2
Propylene glycol
Humectante
2
Hydroxyethylcellulose
Agente viscosante
0.4
Water
Vehículo
51.70
Aluminium chlorohydrate 50%
Antitranspirante
36
Triclosan
Agente desodorante 0.4
Alcohol
Secante
Cetearyl Alcohol (and) Glyceryl A
Stearate (and) PEG-40 Stearate (and) Ceteareth-20 Pentaerythrityl Tetracaprylate/Tetracaprate
B
C
D
63
3
Desarrollo del desodorante antitranspirante aclarante Una vez desarrollado el DAC se realizaron las pruebas necesarias de estabilidad y compatibilidad para incorporar el agente aclarante a la formula anterior y de esta manera obtener el producto DAA.
TABLA Nº VII. Fórmula del DAA INGREDIENTES FASE
JUSTIFICACIÓN
(Nomenclatura INCI)
%P/P
Cetyl alcohol
Agente de cuerpo
0.5
Glyceryl monostearate
Agente de cuerpo
0.5
Cetearyl Alcohol (and) Glyceryl Stearate (and) PEG-40 Stearate Emulsificante A
(and) Ceteareth-20 Pentaerythrityl
Emoliente
Tetracaprylate/Tetracaprate
B
D
2
Propylene glycol
Humectante
2
Hydroxyethylcellulose
Agente viscosante
0.4
Water
Vehículo
39.70
Water
Vehículo
10
Water, Glycerin, Hipoxis rooperi C
3.5
Rhizome Extract, Caesalpinia
2 Agente aclarante
spinosa Gum
Aluminium chlorohydrate 50%
Agente antitranspirante
36
Triclosan
Agente desodorante
0.4
Alcohol
Secante
3
64
Determinación de las Propiedades Fisicoquímicas y Estabilidad
En cada semana se realizaron pruebas fisicoquímicas para evaluar la estabilidad del producto en el tiempo, con lo cual se garantiza que bajo óptimas condiciones de almacenamiento podrán mantener sus propiedades iniciales durante el tiempo de la evaluación de eficacia aclarante. Los estudios de estabilidad acelerados durante tres meses, se realizaron para asegurar que durante la utilización del los productos por parte de las voluntarias, se mantengan sin alterar las propiedades fisicoquímicas más importantes, para así garantizar resultados confiables durante el tiempo de evaluación de la eficacia desodorante antitranspirante - aclarante.
A continuación los resultados obtenidos:
Propiedades Organolépticas Se evaluó por percepción visual la apariencia, color y olor comparando los productos en estudio en función del tiempo con sus características iniciales.
57
En el producto DAC no se evidenció diferencias en sus propiedades organolépticas (Tabla Nº VIII) manteniendo el color blanco inicial y el olor característico durante las 12 semanas.
65
TABLA Nº VIII. Propiedades organolépticas del DAC t0
t1
t2
t3
t4
t5
Loción
Loción
Loción
Loción
Loción
Loción
Fluida
Fluida
Fluida
Fluida
Fluida
Fluida
Color
Blanco
Blanco
Blanco
Blanco
Blanco
Blanco
Olor
Ca
Ca
Ca
Ca
Ca
Ca
Apariencia
Ca: Característico
En relación a la apariencia en general del producto DAA durante el tiempo se pudo apreciar un poco más viscoso, el color también se oscureció ligeramente y el olor si fue característico al extracto utilizado como aclarante durante las 12 semanas.
TABLA IX. Propiedades organolépticas del DAA t0
t1
t2
t3
t4
t5
Loción
Loción
Loción
Loción
Loción
Loción
Fluida
Fluida
Lig Vis
Lig Vis
Lig Vis
Lig Vis
Color
Beige
Beige
Marrón
Marrón
Marrón
Marrón
Olor
Ca
Ca
Ca
Ca
Ca
Ca
Apariencia
Ca: Característico Lig Vis: Ligeramente viscosa 66
pH En el caso del DAC y del DAA el pH obtenido se encontró dentro del rango de pH indicado para productos desodorantes antitranspirantes según la norma COVENIN (pH 3-10) 64, ver Tabla Nº X
TABLA Nº X. pH promedio del DAC y DAA. Tiempo t0
t1
t2
t3
t4
t5
DAC
4,27
4,25
4,24
4,27
4,26
4,23
DAA
4,29
4,27
4,28
4,30
4,29
4,28
Producto
FIGURA N° 12. Valores promedios de pH en el DAC y DAA
67
Al graficar el pH en función del tiempo (figura N° 12), se observa que ambos productos mantienen una tendencia constantes durante el periodo evaluado. Al realizar una revisión de los datos obtenidos según un p-valor tanto para el DAA como para el DAC encontramos que ambos son superiores al nivel de significación alfa igual a 0,05 en consecuencia no se puede rechazar la hipótesis nula. No existen evidencias muestrales a un 5% de significación para afirmar que el pH promedio de los productos es diferente a través del tiempo de medición de 12 semanas. Específicamente, para la fórmula del DAA se comprueba que el pH promedio no varía a través de los tres meses, bajo las condiciones establecidas.
Reología En el análisis de los reogramas obtenidos durante la estabilidad fisicoquímica de los productos en estudio se pudo concluir que ambos desodorantes antitranspirantes poseen un flujo No Newtoniano de tipo Pseudoplástico, lo cual se observa en los reogramas correspondientes, estos flujos se caracterizan porque a medida que un esfuerzo cortante progresivo, en este caso la velocidad medida en r.p.m es aplicada al producto, se genera una disminución de su viscosidad, esto nos permite asegurar que el producto podrá ser dispensado por la bolilla a medida que esta genera una fuerza de fricción sobre los desodorantes, permitiendo además al consumidor aplicar con mayor facilidad el producto en la zona axilar.
68
A continuación
los
reogramas
obtenidos
para
ambos desodorantes
antitranspirantes durante el tiempo de análisis: 1.000 Promedio DAC t0
900
Promedio DAC t1 Promedio DAC t2
) s 800 p c ( d a 700 d i s o c s i V 600
Promedio DAC t3 Promedio DAC t4 Promedio DAC t5
500
400 5
10
15
20
25
30
Velocidad (rpm)
FIGURA N° 13. Reograma DAC en función del tiempo.
Promedio DAA t0
900
Promedio DAA t1 Promedio DAA t2
800
Promedio DAA t3 Promedio DAA t4
700
) s p c ( 600 d a d i s o500 c s i V
Promedio DAA t5
400 300 200 5
10
15
20
25
Velocidad (rpm)
FIGURA N° 14. Reograma DAA en función del tiempo.
69
30
Este comportamiento observado en las figuras anteriores se debe a la incorporación de materias primas que poseen estructuras complejas, que se encuentran desarregladas en su estado de reposo, pero a medida que se le aplica una fuerza se van alineando en la dirección del sentido en que es aplicada la fuerza, presentando a la vez menor resistencia al fluir y disminuyendo así la viscosidad del sistema a medida que la velocidad aumenta.55 Al comparar el DAC y el DAA en los reogramas realizados transcurrida las doce semanas de estabilidad acelerada, podemos observar que ambos productos generan un anillo de histéresis, esto podría revelar, que al aplicar una fuerza de deformación la estructura se modifica, no permitiendo un reordenamiento inmediato al reducir o eliminar dicha fuerza; por lo que se requiere de un tiempo para restaurar el equilibrio dentro del sistema. Al mantener ambos productos en reposo, se observó que sus viscosidades iniciales se recuperan, lo cual asegura la estabilidad y la capacidad de ser administrado y aplicado en la piel de manera satisfactoria durante el periodo del estudio.
70
1000 900 ) s p c ( d a d i s o c s i V
800 700 600 Promedio DAA t5 500 Promedio DAC t5 400 300 200 5
10
15
20
25
30
Velocidad (rpm)
FIGURA N° 15. Reograma del DAA y DAC a t 5. Durante el análisis de los datos y utilizando como herramienta estadística el análisis de varianza, podemos concluir que tanto para la viscosidad promedio del desodorante aclarante y la del producto control, a un nivel del 5% de significación no existen evidencias muestrales para afirmar que las varianzas sean diferentes, es decir, existe homogeneidad entre los datos. Al realizar las comparaciones múltiples dos a dos, nos encontramos que en todos los casos con un 5% de significación no existen evidencias muestrales para afirmar que la viscosidad promedio es diferente (no se puede rechazar la hipótesis nula, todos los p-valor son superiores al 5%). Especialmente si observamos la comparación de la viscosidad promedio inicial t 0 con la realizada al final t 5 encontramos que no se produjeron cambios en la viscosidad promedio, como se esperaba. Mientras que los resultados para el DAC indican que la viscosidad promedio no varió a través de los 3 meses.
71
Distribución del tamaño de las partículas Al realizar el análisis del tamaño de las partículas tanto para el DAC, como para el producto aclarante a lo largo del tiempo, las características se mantienen hasta los 90 días. En las figuras 16 y 17 se puede observar que el tamaño de las partículas para ambas formulaciones se encontró en el rango de 20-40 µm.
7,00 6,00 ) % ( n e m u l o V
5,00 4,00
t0 t1 t2 t3 t4 t5
3,00 2,00 1,00 0,00 0
50
100
150
Diámetro de las partículas (µm)
FIGURA 16. Distribución del tamaño de las partículas del DAC en función del tiempo.
72
6,00 5,00 4,00
t0
n e m 3,00 u ) l o V % (
t1 t2
2,00
t3 t4
1,00
t5
0,00 0
50
100
150
Diámetro de Partículas (µm)
FIGURA 17. Distribución del tamaño de las partículas del DAA en función del tiempo.
6,00 5,00 ) 4,00 % ( n e m 3,00 u l o V
t0 DAA t5 DAA t0 DAC t5 DAC
2,00 1,00 0,00 0
50
100
150
Diámetro de Partículas (µm)
FIGURA 18. Distribución del tamaño de las partículas del DAC y DAA a t 0 y t5.
73
En la figura anterior podemos observar que no hubo cambios en la distribución del tamaño de las partículas durante todo el estudio para ambas formulaciones. Para el análisis de los datos obtenidos se realizó análisis de varianza, en lo cual se evidenció que para los p-valor tanto del DAA como del DAC, son superiores al nivel de significación alfa igual a 0.05, en consecuencia no podemos rechazar la hipótesis nula. No existen evidencias muéstrales a un 5% de significación para afirmar que la distribución del tamaño de las partículas de los productos es diferente a través de las mediciones realizadas durante todo el estudio. Específicamente, para la fórmula del DAA se concluye que el volumen de las partículas promedio no varía a través de los tres meses.
Gravedad Específica Con las mediciones de la gravedad específica se determinó las contracciones o dilataciones de volumen, como evidencia de la disminución o aumento de la gravedad, respectivamente. La gravedad específica de las formulaciones a la temperatura y humedad establecida, se presentan a continuación.
74
TABLA Nº XI. Gravedad especifica promedio del DAC y del DAA en función del tiempo.
Tiempo t0
t1
t2
t3
t4
t5
DAC
1,0895
1,0849
1,0874
1,0888
1,092
1,0981
DAA
1,0774
1,0918
1,1012
1,1091
1,1025
1,1188
Productos
Se puede evidenciar que tanto para el DAA como el DAC no existen evidencias muestrales al 5% de significación para afirmar que la gravedad específica es diferente durante el tiempo de evaluación, pues el p-valor es superior al nivel de significación, por lo tanto no se puede rechazar la hipótesis nula planteada. En particular para el DAA y su DAC la gravedad específica promedio se mantiene igual durante los tres meses de la estabilidad realizada.
Velocidad de sedimentación
En las figuras 19 y 20 se muestran la evaluación de la velocidad de sedimentación del DAC y del DAA, respectivamente. El eje de las abscisas (eje X) representa la altura del tubo en mm que contiene la muestra, el eje de las ordenadas (eje Y) representa el porcentaje de transmisión y el back scattering (luz reflejada). Ninguno de los dos productos presentaron valores de
75
transmisión, durante el periodo del ensayo, demostrándose
que no hubo
separación de las fases de los productos en el periodo de evaluación de tres meses, en las figuras anteriormente mencionadas se puede observar el comportamiento general de cada uno de los lotes de DAC y DAA. En cuanto a la luz reflejada, no hay variación de los valores obtenidos en el tiempo de medición; la cantidad de luz reflejada es prácticamente la misma en función del tiempo de análisis de 12 semanas, esto nos indica que ambos productos han mantenido la estabilidad en el tiempo analizado. Por los resultados anteriormente expuestos se puede inferir que no se produjo sedimentación de las partículas que conforman ambas lociones, manteniendo sus características en el tiempo sin presentar alteraciones físicas que comprometan su estabilidad.
FIGURA Nº 19. Determinación de la velocidad de sedimentación del DAC.
76
FIGURA Nº 20. Determinación de la velocidad de sedimentación del DAA.
Determinación de la eficacia desodorante / antitranspirante
Previo a la determinación de la eficacia aclarante se evaluó la eficacia desodorante antitranspirante a través de una encuesta; de esta manera se aseguró que el DAA no causará ningún problema en el control del mal olor y la transpiración. Luego de la recolección y el procesamiento de los datos de las encuestas, la evaluación de la aceptación del DAC arrojo los siguientes resultados: La distribución de las edades en las voluntarias que participaron en el estudio, tuvo mayor incidencia el rango de 18 a 23 años, ocupando el 40% de la población participante y las de menor incidencia fue el rango de edad 24-29 años, como se puede observar en la figura N° 21. 77
FIGURA N° 21. Evaluación de la aceptación del producto DAC: Distribución por edad A través de la encuesta se obtuvo que el 80% de las voluntarias calificaron al producto como bueno y muy bueno controlando el mal olor (acción desodorante) y el 87 % de las mismas calificaron como bueno y muy bueno el DAC controlando la transpiración (acción antitranspirante). De esta manera se aseguró que al usar las mismas concentraciones del triclosan y clorhidróxido de aluminio en la formulación DAA las voluntarias no tendrían algún problema con la función desodorante y antitranspirante. En relación a los atributos evaluados del producto se presentan en la tabla Nº XII.
TABLA Nº XII. Resultado de los atributos evaluados por las voluntarias para el DAC. Regular
Bueno
Muy Bueno
Eficacia desodorante
3
4
8
Eficacia antitranspirante
2
6
7
9
6
8
7
Atributos
Muy Malo
Malo
Funcionamiento del aplicador Practicidad del envase 78
En la tabla anterior se puede apreciar que ninguna de las características fue evaluada como muy mala o mala, la mayoría de las usuarias calificaron como bueno y muy bueno los atributos de eficacia desodorante y eficacia antitranspirante, determinando que el producto control posee una aceptación favorable por las consumidoras, permitiendo la utilización de la fórmula para la determinación aclarante del extracto, dado que se utilizó la fórmula del control como preparación base. En la encuesta también se evaluó si el producto manchaba la ropa y todas las encuestadas contestaron que no, así mismo ninguna tuvo irritación axilar con el uso continuo del producto y manifestaron que el producto era muy bueno en el control de la sudoración y el mal olor, así como que podrían usarlo como su desodorante antitranspirante de uso diario; una de las características que más resaltaron las voluntarias era el rápido secado del producto y fue una bondad del mismo ampliamente resaltada. Según todos los resultados anteriormente expuestos el producto fue aceptado satisfactoriamente por las participantes.
Determinación de la eficacia aclarante del desodorante antitranspirante Para la determinación de la eficacia aclarante del producto formulado, el mismo fue usado durante 30 días por las 17 voluntarias que culminaron el tiempo anteriormente establecido. Los índices de melanina tanto para la axila derecha (AD) como para la axila izquierda (AI) se encuentran en el anexo VII.
79
Tanto para los índices de melanina de la AD y AI a un nivel del 5% de significación se encontró mediante el análisis de varianza que: “ no existen evidencias muéstrales para afirmar que las varianzas sean diferentes ”, esto es, existe homogeneidad de varianzas. El análisis de varianza permite contrastar la hipótesis nula planteada a través del estadístico de contraste F, en ambos casos el p-valor es superior al nivel de significación alfa igual al 5%, en consecuencia (no se puede rechazar la hipótesis nula) no existe evidencia muestral a un 5% de significación para afirmar que los niveles promedio de melanina son diferentes en las tres medidas es decir, durante el período de estudio. Por consiguiente, en el caso de la AD, no existe evidencia muestral que permita afirmar que el DAA produjo reducción en los niveles promedios de melanina. Como es de esperarse en la AI tampoco se puede rechazar la hipótesis nula considerada y no existe evidencia muestral a un 5% de significación para afirmar que los niveles promedio de melanina son diferentes en las tres medidas realizadas es decir, durante el período de estudio. Adicionalmente, a la evaluación cuantitativa a través de la medición de los índices de melanina realizados, se realizó la toma de fotografías al inicio del estudio, transcurridos 15 días y a los 30 días. A través de la observación de las fotografías tomadas no se visualizan cambios contundentes en el tiempo luego del uso del producto aclarante, sin embargo, algunas pocas voluntarias señalaron observar una aparente mejoría de la hiperpigmentación en la axila tratada con el aclarante, pero esto no fue estadísticamente representativo en las 80
medidas cuantitativas. Las fotografías de todas las voluntarias se encuentran en el Anexo Nº VIII.
Evaluación de la aceptación por parte de los usuarios del DAA El DAA fue evaluado por las 17 voluntarias que culminaron el estudio también mediante una encuesta validada. En este caso, se obtuvo como resultado una incidencia en el rango de edad de 18 a 23 años ocupando el 94,11% de la población participante y las de menor incidencia fue el rango de edad 24-29, como se puede observar en la figura 22.
5,88%
Edad 18-23 Edad 24-29
94,11%
FIGURA N° 22. Evaluación de la aceptación del producto DAA: Distribución por edad Los atributos evaluados del DAA se presentan en la tabla Nº XIII.
81
TABLA Nº XIII. Resultado de los atributos evaluados por las voluntarias para el DAA. Atributos
Muy
Malo
Regular
Bueno
Malo Eficacia desodorante
1
Eficacia antitranspirante
1
Funcionamiento
Muy Bueno
2
6
8
7
9
2
3
12
3
1
13
del
aplicador Practicidad del envase
Solo dos voluntarias calificaron como muy malo la eficacia desodorante y antitranspirante, mientras que el resto de los atributos tuvieron calificación en su mayoría de buena o muy buena. En el DAA el 70% de las encuestadas expresaron en una pregunta abierta que podían usar el producto como de uso diario aún cuando este producto no tuvo resultados cuali-cuantitativos de aclarar sus axilas hiperpigmentadas, igual que en el caso del DAC una bondad ampliamente resaltada del producto aclarante es que se secaba muy rápido y esto fue agradable para las participantes en el estudio. Además solo un 5% expresó que manchaba su ropa y ninguna tuvo irritación axilar. Dentro de las observaciones realizadas por las voluntarias y un 82
punto común entre todas fue que el DAA no tenía fragancia y sugirieron que el producto debía tener fragancia para que el olor fuera más agradable. También se evaluó si las voluntarias habían tomado sol durante los días de uso del producto y 4 manifestaron que estuvieron expuestas al sol en ese período de uso del DAA, en este caso estas voluntarias tuvieron mayores valores de índice de melanina que el tomado inicialmente ya que, la exposición al sol hace que la mancha en la axila se tornen más oscura. Por los resultados obtenidos y anteriormente expuestos las participantes tuvieron buena aceptación del producto.
83
CONCLUSIONES
En general los productos DAC y DAA formulados permanecieron estables bajo las condiciones de temperatura y humedad establecidas durante el tiempo de su evaluación. Tanto el producto DAC y el DAA cumplieron con su objetivo de ser buenos desodorantes y antitranspirantes, ya que, las voluntarias manifestaron que podían considerar usar los productos desodorante/antitranspirante de uso diario. Adicionalmente, tenían como ventajas que se secaba muy rápido y que no generaban irritación en la piel. La aceptación de la formulación aclarante por parte de los voluntarias fue muy buena, aunque el cambio en los índices de melanina no fue estadísticamente representativo para sugerir que el DAA aporta un beneficio aclarante en las personas con axilas hiperpigmentadas.
84
RECOMENDACIONES
En base a los resultados obtenidos de los estudios realizados se recomienda:
Continuar con la estabilidad natural y acelerada de las formulaciones, hasta los 6 meses.
Aumentar la frecuencia de aplicación del DAA, mínimo dos veces al día y evaluar su eficacia aclarante.
Aumentar el tiempo de uso del DAC y DAA por lo menos tres meses, para comprobar si la eficacia aclarante del activo, tiene mejores resultados.
Controlar la exposición solar de las participantes en el estudio, para así asegurar que no existan variaciones de la melanina en la zona a estudiar.
Evaluar la eficacia aclarante y la estabilidad fisicoquímica en una
formulación con mayor concentración del activo aclarante (4%).
Realizar la evaluación de la eficacia aclarante del DAA en otras formas cosméticas que permitan el contacto del producto por más tiempo en la piel, generando un efecto oclusivo, por ejemplo barras desodorantes o emulsiones a base de siliconas.
85
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Pérez A, Muñoz M, Camacho F. Management of Facial Hyperpigmentation. Am. J. Clin. Dermatol [revista en Internet]. (2000, Septiembre) [Consultado el 29 Noviembre de 2011]; 1(5): 261-268. Disponible en: http://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=a9h&AN=6398783&lan g=es&site=ehost-live 2. Ke M, Soriano T, Lask G. Optimal treatments for hyperpigmentation. J. Cosmet Laser Ther. [revista en Internet]. (2006, Abril), [Consultado el 15 Noviembre de 2011]; 8(1): 7-13. Disponible en: http://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=a9h&AN=20350400&la ng=es&site=ehost-live 3. Cayce K, McMichael A, Feldman S. Hyperpigmentation: An Overview of the Common Afflictions. Dermatol Nurs [revista en Internet]. (2004, Octubre), [Consultado el 18 de Noviembre de 2011]; 16(5): 401-411. Disponible en: http://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=a9h&AN=14962530&la ng=es&site=ehost-live 4. Rosenbach A, Ram R. Treatment of Acanthosis Nigricans of the Axillae Using a Long-Pulsed (5-msec) Alexandrite Laser. Dermatol Surg [revista en Internet]. (2004, Agosto), [Consultado el 16 de Noviembre de 2011]; 30(8): 1158-1160. Disponible en: http://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=a9h&AN=13879848&la ng=es&site=ehost-live 5. Rigopoulos D, Gregoriou S, Katsambas A. Hyperpigmentation and melasma. 86
J Cosmet Dermatol [revista en Internet]. (2007, Septiembre), [Consultado el 10 de Noviembre de 2011]; 6(3): 195-202. Disponible en: http://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=a9h&AN=26334589&la ng=es&site=ehost-live 6. Bandyopadhyay D. Topical treatment of melasma. Indian J Dermatol [revista en Internet]. (2009, Octubre), [Consultado el 1 de Diciembre de 2011]; 54(4): 303-309. Disponible en: http://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=a9h&AN=45126336&la ng=es&site=ehost-live 7. Davis E, Callender V. Postinflamatory Hyperpigmentation A review of the epidemiology, clinical features, and treatment options in skin color. J Clin Aesthet Dermatol [revista en Internet]. (2010, Julio), [Consultado el 1 de Diciembre de 2011]; 3(7): 20-31. http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=6&sid=7530f340-6398-49df-99b3936ea71a5b44%40sessionmgr112&hid=126&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=51893153 8. Maitra S, Payne C. The obesity syndrome and acanthosis nigricans. Acanthosis nigricans is a common cosmetic problem providing epidemiological clues to the obesity syndrome, the insulin-resistance syndrome, the thrifty metabolism, dyslipidaemia, hypertension and diabetes mellitus type II. J Cosmet Dermatol [revista en Internet]. (2004, Diciembre), [Consultado el 1 de Diciembre de 2011]; 3(4): 202-210.
87
http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=8&sid=7530f340-6398-49df-99b3936ea71a5b44%40sessionmgr112&hid=126&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=15327646 9. Guran T, Turan S, Akcay T, Bereket A. Significance of acanthosis nigricans in childhood obesity. J Paediatr Child Health [revista en Internet]. (2008, Junio), [Consultado el 1 de Diciembre de 2011]; 44(6): 338-341. http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=10&sid=7530f340-6398-49df-99b3936ea71a5b44%40sessionmgr112&hid=126&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=31998980 10. Callender V, Surin-Lord S, Davis E, Maclin M. Postinflammatory Hyperpigmentation Etiologic and Therapeutic Considerations. Am J Clin Dermatol. 2011; 12: 87-99. 11. James A, Pople J, Parish W, Moore A, Dunbar N. Histological evaluation of hyperpigmentation on female Filipino axillary skin. Int J Cosmet Sci [revista en Internet]. (2006, Agosto), [Consultado el 1 de Noviembre de 2011]; 28(4): 247253. Disponible en: http://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=a9h&AN=21588567&la ng=es&site=ehost-live 12. Tortora G, Grabowski S. Principios de anatomía y fisiología. 9° ed . Mexico: Oxford University Press; 2000. 13. Walters K, Roberts M. Dermatologic, Cosmeceutic and Cosmetic Development. Nueva York: Informa Healthcare; 2008. 14. Matts P, Dykes P, Marks R. The distribution of melanin in skin determined in vivo. Br J Dermatol [revista en Internet]. (2007, Abril), [Consultado el 1 de 88
Noviembre
de
2011];
156(4):
620-628.
Disponible
en
http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=16&sid=7530f340-6398-49df-99b3936ea71a5b44%40sessionmgr112&hid=126&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=24421904 15. Ortonne J. Photoprotective properties of skin melanin. Br J Dermatol [revista en Internet]. (2002, Abril), [Consultado el 1 de Noviembre de 2011]; 146: 7-10. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=18&sid=7530f340-6398-49df-99b3936ea71a5b44%40sessionmgr112&hid=126&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=6533925 16. Sutter J, Bidláková T, Karolin J, Birch D. Eumelanin kinetics and sheet structure. Applied Physics Letters [revista en Internet]. (2012, Diciembre), [Consultado el 3 de Febrero de 2013]; 100(11): 113701. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=20&sid=7530f340-6398-49df-99b3936ea71a5b44%40sessionmgr112&hid=126&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=73443444 17. Radhakrishnan N, Vijayachandra K, Ranganathan S. Changing skin color: evolution and modern trends. Indian J Dermatol [revista en Internet]. (2007, Junio), [Consultado el 1 de Noviembre de 2011]; 52 (2): 71-77. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=7530f340-6398-49df99b3-936ea71a5b44%40sessionmgr112&vid=23&hid=126 18. Dan-Ning H, Methodology for Evaluation of Melanin Content and Production of Pigment Cells in Vitro. Photochem Photobiol [revista en Internet]. (2008, Junio), [Consultado el 1 de Noviembre de 2011]; 84 (3): 645-649. Disponible en: 89
http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=7530f340-6398-49df99b3-936ea71a5b44%40sessionmgr112&vid=25&hid=126 19. Meredith P, Sarna T. The physical and chemical properties of eumelanin. Pigment Cell Res [revista en Internet]. (2006, Diciembre), [Consultado el 1 de Noviembre de 2011]; 19 (6): 572-594. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=7530f340-6398-49df99b3-936ea71a5b44%40sessionmgr112&vid=28&hid=126 20. Ebanks J, Wickett R, Boissy R. Mechanisms Regulating Skin Pigmentation: The Rise and Fall of Complexion Coloration. Int. J. Mol. Sci. 2009; 10: 40664087. 21. Wakamatsu K, Kavanagh R, Kadekaro A, Terzieva S, Sturm R, Ito S, et al. Diversity of pigmentation in cultured human melanocytes is due to differences in the type as well as quantity of melanin. Pigment Cell Res [revista en Internet]. (2006, Abril), [Consultado el 1 de Noviembre de 2011]; 19 (2): 154-162. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=7530f340-6398-49df99b3-936ea71a5b44%40sessionmgr112&vid=30&hid=126 22. Hexsel D, Arellano I, Rendon M. Ethnic considerations in the treatment of Hispanic and Latin-American patients with hyperpigmentation. Br J Dermatol [revista en Internet]. (2007, Enero), [Consultado el 1 de Noviembre de 2011]; 156 (1): 7-12. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=7530f340-6398-49df99b3-936ea71a5b44%40sessionmgr112&vid=32&hid=126
90
23. Use depigmenting agents judiciously to lighten skin in patients with postinflammatory hyperpigmentation. Drugs Ther Perspect. 2011; 27: 10-13. 24. Yamaguchi Y, Hearing V. Physiological factors that regulate skin pigmentation. Biofactors. 2009; 35: 193-199. 25. Alam M, Bhatia A, Kundu R, Chan H. Cosmetic dermatologic for skin of color. Editorial Mc Graw – Hill Medical; 2009. 26. Kreyden O, Scheidegger E. Anatomy of the sweat glands, pharmacology of botulinum toxin, and distinctive syndromes associated with hiperhidrosis. Clin Dermatol. 2004; 22: 40-44. 27. Constanzo L. Fisiología. México: Editorial Mc Graw – Hill Interamericana; 2000. 28. Wilke K, Martin A, Terstegen L, Biel S. A short history of sweat gland biology. Int J Cosmet Sci [revista en Internet]. (2007, Junio), [Consultado el 1 de Noviembre de 2011]; 29(3): 169-179. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=31&sid=16ce1a6f-d16d-4375-b28a7c17bb4abbf1%40sessionmgr104&hid=122&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=25150276 29. Fox I. Fisiología Humana. 7ª ed. Madrid: Editorial Mac Graw- Hill Interamericana; 2003. 30. Guyton A. Tratado de Fisiología Médica. 10a ed. México: Editorial Mc Graw – Hill Interamericana; 2001.
31. Comunidad Andina, [sede web]. 2002. [acceso el 8 de agosto de 2010]. Sanidad Humana – Productos cosméticos. Disponible en: http://www.comunidadandina.org/normativa/dec/D516.htm 91
32.
Parra J, Pons L. Ciencias Cosméticas: bases fisiológicas y criterios
prácticos. Madrid : Consejo General de Colegios Oficiales de Farmacéuticos; 1995. 33. Food and Drug Administration [sede web]. EEUU. FDA; 9 de junio de 2003. [acceso el 8 de Julio de 2010]. Final Rule - Antiperspirant Drug Products for Over-The-Counter Human Use, Final Monograph; [aproximadamente 10 pantallas]. Disponible en: www.fda.com 34. Perfumes e desodorantes. Cosmetic and Toiletries (Edición en Portugues), 2006; 18(5): 15-17. 35. Crear hábitos: el origen de los productos. Cosmetic and Toiletries (Latinoamérica). 2009; 8: 12 - 16. 36. Jungermann E. Antiperspirants and Deodorants. Cosmetic Science and Technology Series. 1988; 7: 2. 37. Brewster B. Testing Triclosan on Three Fronts. Cosmetics and Toiletries. 2001; 119: 8-12. 38. Benohanian A .Antiperspirant and Deodorants. Clin. Dermatol. 2001; 19: 398 - 405. 39. De Castro N, Curtis ML. Preservación en cosméticos: pieza clave de la calidad.
Caracas:
Universidad
Central
de
Venezuela,
Vicerrectorado
Académico; 1997. 40. Benohanian A. Palmar and plantar hyperhidrosis: a practical management algorithm. Future Medicine. 2007: 279-283. 41. Bretschneider E. Antiperspirant efficacy. J Soc Cosmet Chem. 1976: 441446. 92
42. Giannini E, Robert P. Hydrolytic behavior of some aluminum antiperspirant materials in acid. Int J Pharm. 1978: 49-59. 43. Gamboa O. Higiene Personal. Cosmet Toiletries (Latinoamericana). 2009; 8: 18-20. 44. Vila Jato, J. Tecnología Farmacéutica Volumen I: Aspectos fundamentales de los sistemas farmacéuticos y operaciones básicas. 1era edición. Madrid: Editorial Sintesis; 2001. 45. Provital Group. Catálogo: Darkout; España. 2008. 46. ctfa.com, INCI name. Europa. Revisada el 30 de noviembre de 2011 http://www.ctfa.org/ 47. Jonnalagadda S, Kindness A, Kubayi S, Cele M. Macro, minor and toxic elemental uptake and distribution in Hypoxis hemerocallidea, "the African Potato" - an edible medicinal plant. J Environ Sci Health B [revista en internet]. (2008, Marzo), [consultado el 9 de noviembre de 2011]; 43(3): 271-280. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=16ce1a6f-d16d-4375b28a-7c17bb4abbf1%40sessionmgr104&vid=10&hid=122 48. Hostettmann K, Marston A, Ndjoko K, Wolfender J. The Potential of African Plants as a Source of Drugs. Curr Org Chem [revista en internet]. (2000, Octubre), [Consultado el 14 de Diciembre de 2011]; 4(10): 973. Disponible en: http://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=a9h&AN=11136233&la ng=es&site=ehost-live 49. Drewes S, Khan F. The African potato (Hypoxis hemerocallidea): a chemical-historical perspective. S Afr J Sci [revista en internet]. (2004, 93
Septiembre), [Consultado el 9 Noviembre de 2011]; 100(9/10): 425-430. Disponible en: http://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=a9h&AN=15627276&la ng=es&site=ehost-live 50. De la Cruz P. Aprovechamiento Integral y Racional de la Tara Caesalpinia spinosa – Caesalpinia tinctoria an integral and rational utility of tara ( Caesalpinia spinosa – Caesalpinia tinctoria). Instituto de Investigación FIGMMG. 2004;
7(14): 64-73. 51. Dietzsch E, Albrecht C, Parker M. Effect of Rooperol on Collagen Synthesis and Cell Growth. IUBMB Life [revista en internet]. (1999, Septiembre), [consultado el 1 de noviembre de 2011]; 48(3): 321-325. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=16ce1a6f-d16d-4375b28a-7c17bb4abbf1%40sessionmgr104&vid=9&hid=122 52. Popper, K. La lógica de la investigación científica. Madrid: Tecnos.1980. 53. International Conferences of Harmonisation http://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Quality/ Q1A_R2/Step4/Q1A_R2__Guideline.pdf 54. Guia de Estabilidades de Productos Cosméticos. Sanitaria, Agencia Nacional de Vigilancia. Brasil : s.n., Mayo de 2005, Serie de Calidad en Cosméticos, Vol. 1. 55. Aulton M, editor. Pharmaceutics. The Science of Dosage Form Design. 2da ed. Londres. Elsevier Limited; 2002.
94
56. Farmacopea de los Estados Unidos de América 30ª ed. y NF 25ª. Edición anual en español. 2006. 57. Santtino Settimo L, Costa Da Silva S, Manteiga Prego A. [Trabajo Especial de Grado] Estudio de la estabiliadad fisicoquímica en productos cosméticos emulsificados propuesta de un protocolo, Universidad Central de Venezuela. 2007. 58. Poletti E, Muñoz R. Capacidad prerretiniana y fotografía clínica. Dermatología Rev Mex. 2007; 51(3):121-23 59. Mutalik S. Digital Clinical Photography: Practical Tips. J Cutan Aesthet Surg. (2010, Abril), [Consultado el 1 de noviembre de 2011]; 3(1): 48-51. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=22&sid=16ce1a6f-d16d-4375-b28a7c17bb4abbf1%40sessionmgr104&hid=122&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=57310556 60. Courage-Khazaka. Catálogo: Information and operating instructions for the skin pigmentation analyzer ® SPA 99. Alemania. Diciembre 2003. 61. Heisterberg M, Menné T, Johansen J. Contact allergy to the 26 specific fragrance ingredients to be declared on cosmetic products in accordance with the EU cosmetics directive. Contact Dermatitis [revista en internet]. (2011, Noviembre), [Consultado el 1 de marzo de 2013]; 65(5): 266-275. Disponible http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=4&sid=e2a85772-2ffe-4278-bf2d7a8e80bcd99f%40sessionmgr113&hid=120&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=66395004 95
62. Firooz A, Nassiri-Kashani M, Khatami A, Gorouhi F, Babakoohi S, Dowlati Y, et al. Fragrance contact allergy in Iran. J Eur Acad Dermatol Venereol [revista en internet]. (2010, Dec), [Consultado el 1 de marzo de 2013]; 24(12): 14371441. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/detail?vid=4&sid=e2a85772-2ffe-4278-bf2d7a8e80bcd99f%40sessionmgr113&hid=120&bdata=Jmxhbmc9ZXMmc2l0ZT1la G9zdC1saXZl#db=a9h&AN=55050050 63. Heisterberg M, Menné T, Andersen K, Avnstorp C, Kristensen B, Johansen J, et al. Deodorants are the leading cause of allergic contact dermatitis to fragrance ingredients. Contact Dermatitis [revista en internet]. (2011, Mayo), [Consultado el 1 de marzo de 2013]; 64(5): 258-264. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=e2a85772-2ffe-4278bf2d-7a8e80bcd99f%40sessionmgr113&vid=5&hid=120 64. Norma Venezolana Desodorante, Antitranspirante y Desodorante / Antitranspirante Requisitos, COVENIN 2079:1998 2 da Edición. (09/09/98)
96
ANEXOS
ANEXO I. APROBACIÓN DEL PROYECTO POR PARTE DEL COMITÉ DE BIOÉTICA DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO DE CARACAS:
97
ANEXO II. PROPUESTA DE ENCUESTA PARA EVALUACIÓN DE EFICACIA DESODORANTE ANTITRANSPIRANTE A continuación se listan unas cortas preguntas que tienen como finalidad identificar la satisfacción que usted tuvo del desodorante/antitranspirante que se empleó para este estudio. Favor responder con la mayor sinceridad, pues su opinión será de gran ayuda para este trabajo de investigación. No coloque ninguna información que le pueda identificar.
1. Por favor indique el rango de edad al que pertenece: 18 a 23 años 24 a 29 años 30 a 35 años 2. En cuanto al desodorante/antitranspirante utilizado por usted para este estudio, indique según su opinión, el grado de satisfacción para la forma cosmética roll on: Muy buena Buena Regular Mala Muy mala 98
4. En cuanto al desodorante/antitranspirante utilizado por usted para este estudio, indique según su opinión, la eficacia desodorante (control del mal olor axilar). Muy buena Buena Regular Mala Muy mala
5. En cuanto al desodorante/antitranspirante utilizado por usted para este estudio, indique según su opinión, la eficacia antitranspirante (disminución de la sudoración axilar). Muy buena Buena Regular Mala Muy mala
99
6. ¿Estaría dispuesto a usar este producto como su desodorante antitranspirante de uso diario? Si. Indique la razón de su afirmación:
No. Indique la razón de su negativa:
100
ANEXO Nº III ENCUESTA VALIDADA PARA EVALUACIÓN DEL PRODUCTO DESODORANTE ANTITRANSPIRANTE Somos estudiantes del postgrado de Ciencia y Tecnología Cosmética de la Facultad de Farmacia UCV y solicitamos su colaboración para el estudio de un producto Desodorante/Antitranspirante, del cual se les está entregando una muestra, con la finalidad de evaluar su grado de satisfacción y su opinión acerca del mismo. Favor responder con la mayor sinceridad, pues su opinión será de gran ayuda para este trabajo de investigación. No coloque ninguna información que le pueda identificar. Agradecemos unos minutos de su tiempo para responder las siguientes preguntas, y así lograr los objetivos de nuestro trabajo especial de grado:
1. Indique el rango de edad al que pertenece: 18 a 23 años 24 a 29 años 30 a 35 años
2. Señale con una X en la escala del 1 al 5 en la cual, 1 es el mínimo y 5 es el máximo,
para
los
atributos
correspondientes
al
desodorante/antitranspirante utilizado por usted durante el estudio.
101
producto
Atributos
1. Muy
2. Malo
malo
desodorante (control del mal olor axilar) Eficacia antitranspirante (disminución de sudoración
axilar) Funcionamiento del
4. Bueno
5. Muy bueno
Eficacia
la
3. Regular
aplicador
(roll on) Practicidad del envase
102
3. Indique si el producto mancha su ropa. Si.
No.
4. Indique si el producto le ocasionó irritación axilar. Si.
No.
5. ¿Estaría dispuesto a usar este producto como su desodorante antitranspirante de uso diario? Si.
No.
¿Por qué?
¿Por qué?
103
ANEXO Nº IV. CONSENTIMIENTO INFORMADO
Universidad Central de Venezuela Facultad de Farmacia Escuela “Jesús María Bianco”
Postgrado de Ciencia y Tecnología Cosmética
Consentimiento Informado Su firma en este consentimiento informado indica que comprende el contenido de la hoja de información al participante que acompaña este formulario y que acepta su participación en la investigación bajo la modalidad de voluntario. Yo, _______________________________, Nro. C.I. _________________ de ____ años de edad, he leído y comprendido el contenido de la hoja de información al participante del proyecto de investigación denominado: “Evaluación de la eficacia aclarante de un desodorante antitranspirante
dirigido a personas con hiperpigmentación axilar” . Aclarando todos las dudas que he tenido al respecto, en forma satisfactoria.
En este sentido, por medio la presente proporciono mi CONSENTIMIENTO para participar en la referida investigación en los procedimientos indicados con una X en la siguiente tabla:
104
Procedimiento
Acepto
No Acepto
Llenado de encuesta sobre efectividad antitranspirante Evaluación dermatológica axilar Evaluación fotográfica anónima de la zona axilar Determinación del índice de melanina en la zona axilar
En la calidad de voluntario, reconozco que no estoy obligado a firmar este consentimiento, y aún habiéndolo firmado, puedo retirarme en cualquier momento durante la ejecución de los procedimientos previamente aceptados por mi persona, sin prejuicio alguno. Con mi firma certifico, que este consentimiento lo acepto de manera voluntaria sin presión de ningún tipo, y que mi participación se realizara el día: __________________________. Además reconozco recibir el acto de esta firma, una copia del presente CONSENTIMIENTO y de la hoja de información al paciente. Nombre del Participante: ______________________ Firma del Participante: ________________________ Nombre del Investigador Responsable: ___________________ Firma del Investigador Responsable: _____________________ 105
Nombre del Testigo: __________________ Firma del Testigo: ____________________ Fecha: _______________
106
ANEXO Nº V HOJA DE INFORMACIÓN AL PARTICIPANTE DEL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN: “Evaluación de la eficacia aclarante de un desodorante antitranspirante dirigido a personas con hiperpigmentación (manchas) axilar”.
Usted ha sido seleccionado al azar para formar parte de una investigación que se llevará a cabo por las estudiantes del Postgrado de Ciencia y Tecnología Cosmética las Ftcas. Luisana Marcano y Jessica Rivera. De usted necesitar información adicional a la expuesta en esta hoja, debe solicitarla al investigador responsable del proyecto: Prof. Susana Misticone, quien aclarará cualquiera duda que pudiera tener al respecto, su número telefónico es 0416-618-75-86.
Propósito del Proyecto El objetivo del estudio es Evaluar la eficacia aclarante de un desodorante antitranspirante dirigido a personas con hiperpigmentación axilar (manchas oscuras en las axilas).
Procedimiento De usted aceptar participar en el estudio, se le hará entrega de un producto desodorante antitranspirante y cumplido el uso del mismo por el tiempo recomendado (1 vez al día durante 4 semanas) se harán pruebas no invasivas por medio un equipo que mide la cantidad de melanina presente y a través de
107
fotografías (solo en la zona axilar) para evaluar la efectividad del producto usado.
Riesgos El único riesgo que pudiera existir es irritación de la zona axilar, pero la formulación tendrá los ingredientes necesarios para evitar dicha irritación.
Beneficios La participación en esta investigación tiene como beneficio el uso de un producto que aclara sus axilas.
Confidencialidad La información que usted proporcione es totalmente confidencial. Sólo se utilizará a los fines de esta investigación sustentada en la encuesta que usted realizará y en las fotografías no se devela el rostro ni la identidad. Su nombre y otros datos personales no serán refrendados.
Participación Voluntaria Su participación es voluntaria y usted puede retirarse del estudio después de haber dado su conformidad para participar. Puede negarse a responder cualquier pregunta de la encuesta.
108
ANEXO Nº VI. DÍPTICO INFORMATIVO PARA LAS VOLUNTARIAS. Por favor no olvide asistir a las citas establecidas y en caso de presentar algún inconveniente no dude en comunicarse con nosotros en cualquier momento.
UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA FACULTAD DE FARMACIA ESCUELA JESÚS MARÍA BIANCO
Indicaciones a seguir para la prueba de eficacia aclarante Si presenta cualquier reacción desfavorable, suspenda el uso del producto y comuníquese con nosotros.
de un desodorante antitranspirante dirigido a pacientes con hiperpigmentación axilar.
Puede contactar a:
Dra. Susana Misticone Cel: 0416-618-XX-XX.
Investigadoras:
Ftica. Jessica Rivera
Ftica. Luisana Marcano
Cel: 0424-151-XX-XX
Ftica. Jessica Rivera
Ftica. Luisana Marcano Cel: 0416-618-XX-XX
Caracas, septiembre de 2012
Oficina: 0212-718-XX-XX
109
Antitranspirante blanqueador
Productos entregados: Desodorante Antitranspirante Aclarante de la zona axilar y un Desodorante antitranspirante (control).
La presente investigación tiene como objetivo evaluar la eficacia aclarante o blanqueadora del desodorante antitranspirante formulado.
Instrucciones para la aplicación:
Se le hará entrega de un producto desodorante antitranspirante y deberá ser usado por un lapso de 4 semanas, luego de usar el producto por el tiempo recomendado se harán pruebas por medio un equipo que mide la cantidad de melanina presente y a través de fotografías (solo en la zona axilar) se evaluará la efectividad del producto usado. Adicionalmente al final del tiempo transcurrido de usar el producto se le aplicará una encuesta para evaluar el mismo.
Luego de asear sus axilas después del baño, usar en la axila derecha el desodorante antitranspirante aclarante entregado. En la axila izquierda deberá usar el producto desodorante antitranspirante (control). La aplicación del producto debe realizarse 1 vez al día.
Brevemente queremos recordarles que un desodorante antitranspirante es un producto utilizado para eliminar el mal olor y disminuir la sudoración, en este caso será utilizado para las axilas manchadas ya que el objetivo del estudio es evaluar el poder aclarante del producto entregado, además el mismo deberá cumplir con el propósito de ser desodorante antitranspirante.
En este instructivo se le explicará detalladamente todos los pasos a seguir para la aplicación del producto y el tiempo de uso del mismo. El estudio durará 1 mes, nosotros estaremos en contacto continuo con usted.
110
ANEXO Nº VII. VALORES DE LOS INDICES DE MELANINA Y ERITEMA PARA LA AD Y LA AI ndice de melanina AD
Eritema AD
ndice de melanina AI
Eritema AI
Voluntaria Nº
t0'
t1'
t2'
t0'
t1'
t2'
t0'
t1'
t2'
t0'
t1'
t2'
1
35 28 38 34 28 27 30 28 36 46 39 40 33 31 31 32 36 38 30 35 56 45 51 51
38 38 25 34 30 31 29 30 42 37 42 40 39 37 36 37 35 36 34 35 62 55 53 57
38 33 33 35 37 37 33 36 48 47 46 47 38 39 34 37 35 32 30 32 56 44 52 51
35 28 38 34 28 27 30 28 36 46 39 40 33 31 31 32 36 38 30 35 56 45 51 51
46 40 34 40 43 35 35 38 47 39 41 42 45 40 38 41 45 43 42 43 59 56 54 56
42 33 36 37 39 39 37 38 51 50 43 48 41 40 37 39 43 41 34 39 58 53 53 55
35 28 38 34 28 27 30 28 36 46 39 40 33 31 31 32 36 38 30 35 56 45 51 51
41 34 27 34 30 33 31 31 41 36 45 41 37 37 37 37 32 21 34 29 68 53 54 58
39 34 35 36 30 39 38 36 45 39 39 41 37 36 33 35 30 30 29 30 64 51 46 54
35 28 38 34 28 27 30 28 36 46 39 40 33 31 31 32 36 38 30 35 56 45 51 51
50 42 35 42 42 41 37 40 51 40 43 45 39 41 42 41 42 44 39 42 61 57 62 60
42 38 35 38 39 48 39 42 49 44 40 44 39 40 38 39 40 42 35 39 59 59 52 57
PROMEDIO 2
PROMEDIO 3
PROMEDIO 4
PROMEDIO 5
PROMEDIO 6
PROMEDIO
111
7
PROMEDIO 8
PROMEDIO 9
PROMEDIO 10
PROMEDIO 11
PROMEDIO 12
PROMEDIO 13
PROMEDIO
84 86 84 85 62 62 52 59
87 94 87 89 56 57 47 53
99 99 85 94 54 51 48 51
84 86 84 85 62 62 52 59
63 66 63 64 61 56 56 58
61 61 60 61 62 55 51 56
84 86 84 85 62 62 52 59
72 77 79 76 65 61 51 59
85 94 76 85 56 63 59 59
84 86 84 85 62 62 52 59
61 62 62 62 58 54 58 57
63 63 63 63 52 61 55 56
53 57 49 53 49 47 51 49 43 42 39 41
51 56 48 52 50 51 50 50 44 38 34 39
55 50 48 51 44 46 44 45 47 46 37 43
53 57 49 53 49 47 51 49 43 42 39 41
51 55 48 51 47 42 46 45 49 45 37 44
55 50 46 50 45 42 42 43 48 49 39 45
53 57 49 53 49 47 51 49 43 42 39 41
54 56 48 53 45 48 48 47 38 44 44 42
45 48 48 47 46 42 47 45 38 40 44 41
53 57 49 53 49 47 51 49 43 42 39 41
55 54 52 54 47 43 45 45 44 36 44 41
51 48 48 49 47 48 44 46 44 47 43 45
35 35 34 35
28 23 24 25
30 28 26 28
35 35 34 35
36 34 35 35
35 46 33 38
35 35 34 35
28 28 27 28
30 29 27 29
35 35 34 35
36 31 30 32
38 44 34 39
50 50 42
48 53 50
59 52 49
50 50 42
59 53 48
58 52 52
50 50 42
44 47 47
57 52 55
50 50 42
50 53 52
59 55 54
47
50
53
47
53
54
47
46
55
47
52
56
112
32
30
33
32
49
45
32
32
32
32
49
46
32 39 34 43 37 40 40 34 29 31 31 66 62 53 60
28 30 29 37 33 40 37 31 26 30 29 76 61 73 70
35 36 35 40 33 40 38 33 33 32 33 67 58 66 64
32 39 34 43 37 40 40 34 29 31 31 66 62 53 60
49 42 47 51 39 46 45 43 40 37 40 63 58 59 60
55 47 49 49 36 43 43 46 48 40 45 61 53 57 57
32 39 34 43 37 40 40 34 29 31 31 66 62 53 60
29 31 31 38 32 40 37 34 30 30 31 62 58 61 60
28 33 31 35 35 40 37 32 31 30 31 72 59 57 63
32 39 34 43 37 40 40 34 29 31 31 66 62 53 60
54 57 53 47 37 43 42 50 40 35 42 57 54 54 55
57 46 50 44 39 43 42 44 44 37 42 61 54 54 56
14
PROMEDIO 15
PROMEDIO 16
PROMEDIO 17
PROMEDIO
113
ANEXO Nº VIII. Comparación fotográfica de las voluntarias durante las tres captaciones realizadas
DAC- AI Foto Arriba DAA - AD Foto Abajo
Voluntaria N°1
114
Voluntaria N°2
Voluntaria N°3
115
Voluntaria N°4
Voluntaria N°5
116
Voluntaria N°6
Voluntaria N°7
117
Voluntaria N°8
Voluntaria N°9
118
Voluntaria N°10
Voluntaria N°11
119
Voluntaria N°11
Voluntaria N°13
120
Voluntaria N°14
Voluntaria N°15
121
Voluntaria N°16
Voluntaria N°17
122
ANEXO
Nº
IX.
EVALUACIÓN
DEL
PRODUCTO
DESODORANTE
ANTITRANSPIRANTE ACLARANTE Somos estudiantes del postgrado de Ciencia y Tecnología de los Cosméticos de la Facultad de Farmacia UCV y solicitamos su colaboración para el estudio de un producto Desodorante/Antitranspirante, del cual se les está entregando una muestra, con la finalidad de evaluar su grado de satisfacción y su opinión acerca del mismo. Favor responder con la mayor sinceridad, pues su opinión será de gran ayuda para este trabajo de investigación. Agradecemos unos minutos de su tiempo para responder las siguientes preguntas, y así lograr los objetivos de nuestro trabajo especial de grado:
1. Indique el rango de edad al que pertenece: 18 a 23 años 24 a 29 años 30 a 35 años
2. Señale con una X en la escala del 1al 5 en la cual, 1 es el mínimo y 5 es el máximo,
para
los
atributos
correspondientes
al
desodorante/antitranspirante utilizado por usted durante el estudio:
123
producto
Atributos
1. Muy
2. Malo
malo
desodorante (control del mal olor axilar) Eficacia antitranspirante (disminución de sudoración
axilar) Funcionamiento del
4. Bueno
5. Muy bueno
Eficacia
la
3. Regular
aplicador
(roll on) Practicidad del envase
124
3. Indique si el producto mancha su ropa. Si.
No.
4. Indique si el producto le ocasiono irritación axilar. Si.
No.
5. ¿Estaría dispuesto a usar este producto como su desodorante antitranspirante de uso diario? Si. ¿Por qué? No. ¿Por qué?
125
