0
FACULDADE PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS
GESIANE GONÇALVES FERREIRA
RELATÓRIO DE ESTÁGIO SUPERVISIONADO EM HEMATOLOGIA CLÍNICA DO CURSO DE FARMÁCIA
IPATINGA 06 DE JULHO DE 2011
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1
SUMÁRIO
1
INTRODUÇÃO........................ INTRODUÇÃO.................................. .................. .................. .................... .................... .................. .................. .................. .................. ................. ....... ....3
2 CARACTERIZAÇÃO DO LOCAL DE ESTÁGIO...................... ESTÁGIO................................ .................... .................. .................. .............4 ...4 3 ATIVIDADES REALIZADAS...............................................................................................5 3.1 HEMOGRAMA....................................................................................................................5 3.1.1 Processo Manual................................................................................................................ 5 3.1.2 Esfregaço de sangue................... sangue........................... .................. ................. ................. .................. .................. .................. .................. .................. ............ .......5 3.1.3 Série Vermelha.................... Vermelha.............................. .................. ................. ................. .................. .................. .................. .................... .................... .................. ........ ....6 3.1.3.1 Hematócrito (Ht).............................................................................................................6 3.1.3.2 Número de glóbulos vermelhos (Hematimetria ± Hc)....................................................6 3.1.3.3 Dosagem de hemoglobina...............................................................................................7 3.1.3.4 Volume Corpuscular Médio (VCM)...............................................................................7 3.1.3.5 Hemoglobina Corpuscular Média (HCM) .....................................................................8 3.1.3.6 Concentração C oncentração de Hemoglobina Corpuscular Média (CHCM)........................ (CHCM).................................. ...............8 .....8 3.1.3.7 Contagem de Reticulócitos....................... Reticulócitos.............................. ................. ................. ....... ................... ........................... .................. ...................8 .........8 3.1.4 Série branca ......................................................................................................................9 3.1.4.1 Contagem de Leucócitos................ Leucócitos.......................... .................. ............. ..... ................. ......................... .................. .................. .................. ............... ..... 9 3.1.4.2 Contagem diferencial de Leucócitos.................... Leucócitos............................ .................. .................. .................. .................... .................... ............ 10 3.1.5 Série Plaquetária..............................................................................................................
11
3.2 TEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIALMENTE ATIVADA .................... .............................. ............ 11 3.3 TEMPO DE ATIVIDADE DA PROTROMBINA PROTR OMBINA (TAP) ...................................... ................................................ ............ 12 3.4 TEMPO DE SANGRAMENTO................... SANGRAMENTO.......................... ................. .................. ............. ..... ................. ......................... .................. ............... ..... 13 4 RESULTADOS E DISCUSSÃO DISCUS SÃO ............................... ......................................... .................... .................. .................. .................. ............ .... ......... 14 5 CONCLUSÃO...................... CONCLUSÃO................................ .................. .................. .................. .................. .................... .............. .................. ............................ .................... ............ 17 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS................... BIBLIOGRÁFICAS............................ ................. .................. .................. .................. .................... ................. ....... ..... 18
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2
1 INTRODUÇÃO
A Hematologia estuda os elementos figurados do sangue: hemácias (glóbulos vermelhos), leucócitos (glóbulos brancos) e plaquetas. Além disso, avalia também o estado de normalidade dos elementos sangüíneos, dos órgãos hematopoiéticos e as doenças a eles relacionados. (TERRA, 2000 2000)) O hemograma é o exame que avalia as células sanguíneas de um paciente e é requerido pelo médico para diagnosticar ou controlar a evolução de uma doença. Vale salientar que a expressão "Hemograma Completo" é de certa maneira redundante, já que todo e qualquer Hemograma avalia a série vermelha, branca e plaquetária. As células circulantes no sangue são divididas em três tipos: células vermelhas (hemácias ou eritrócitos), células brancas (ou leucócitos) e plaquetas (ou trombócitos). No laboratório de Hematologia outros testes como TTP, TP, VHS e reticulócitos também são realizados. A coleta de material é o primeiro passo para todas as análises efetuadas no Laboratório Clínico e dela dependem todas as etapas seguintes, por isso se faz necessário o correto procedimento na coleta das amostras. Toda aparelhagem selecionada deverá estar calibrada e mantida dentro dos limites de utilização. É evidente a necessidade de certos cuidados, tanto na manipulação quanto na limpeza. Os materiais de vidro utilizados para a realização das técnicas exigem uma lavagem bem rigorosa, qualquer resíduo poderá provocar falsos resultados nas análises. Mas para que todos estes fatores sejam contornados é essencial que o analista esteja apto e preparado a realizar os ensaios e consciente da responsabilidade do trabalho realizado, além de ter um ambiente de trabalho sadio que ofereça todas as condições necessárias de trabalho. (MOURA et. al , 2006) Este relatório descreve as atividades desenvolvidas no estágio de Análises Clínicas no setor de Hematologia do Laboratório de Hematologia na Faculdade Presidente Antônio Carlos, assim como as principais atribuições do profissional farmacêutico no setor.
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3
2 CARACTERIZAÇÃO DO LOCAL DE ESTÁGIO
O estágio de hematologia foi realizado no laboratório
111
no andar térreo da
Universidade Presidente Antônio Carlos, C ampus ampus Ipatinga, localizado na Rua Salermo, 299 Bairro Bethânia. As atividades foram instruídas e supervisionadas pela professora Míriam Oliveira. O laboratório onde foram feitas as atividades do estágio é amplo, disposto com bancadas, outra bancadas onde estão dispostos os microscópios, cadeiras, televisor, lousa branca, armários com equipamentos e materiais para a realização de análises diversas, pias, refrigeradores para o armazenamento dos kits para os testes e as substâncias termolábeis. t ermolábeis. As atividades transcorreram transc orreram nos dias 9,10, 16 e 17 do mês de junho sendo nas quintasfeiras das 9:30h às 13:30h, e nas sextas-feiras das 7:30h às 13:30h, totalizando uma carga horária de 20 horas.
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3
ATIVIDADES REALIZADAS
As atividades foram dividas parte teórica, quando foi apresentado o laboratório, a localização dos equipamentos, os materiais de utilização rotineira para as análises, procedimentos de segurança dentro do laboratório e durante as práticas com os materiais e amostras, também, foram apresentadas as finalidades, os princípios e a metodologia dos testes realizados; E em parte prática, quando foram realizados os testes a partir de amostras com a posterior obtenção dos resultados finais. A seguir, estão descritos os testes hematológicos realizados durante o período do estágio em hematologia. hematologia.
3.1
HEMOGRAMA
3.1.1 Processo Manual
Contagens manuais do número de hemácias, plaquetas e leucócitos podem ser feitas em câmara de Neubauer, após uma diluição prévia do sangue. O método dificilmente é usado, sendo usado em poucos casos de dúvidas da metodologia automática.
3.1.2
Esfregaço de sangue O esfregaço de sangue é usado para fazer uma diferenciação entre os leucócitos, isto é,
fazer uma contagem do número de neutrófilos, linfócitos, monócitos, eosinófilos e basófilos. Chegando-se a uma porcentagem de cada célula encontrada. Usado também para avaliar a série vermelha e as plaquetas. É feito com uma pequena gota de sangue sendo colocada sobre uma lâmina de vidro , onde o técnico fará um esfregaço, arrastando a gota de sangue com uma
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A vantagem de se fazer um esfregaço é que algumas células podem ser contadas erradamente pelos processos automáticos. Alguns aparelhos não contam células imaturas e podem levar a um erro quanto a um diagnóstico de leucemia.
3.1.3
Série Vermelha
3.1. 3.1 Hematócrito (Ht)
É um índice, calculado em porcentagem, definido pelo volume de todas as hemácias de uma amostra sobre o volume total desta amostra (que contém, além das hemácias, os leucócitos, as plaquetas e o plasma). O Ht depende não somente do número de hemácias, mas também do volume destas. Os valores variam com o sexo e com a idade.
Valores de referência: Homem de 39 - 50% e Mulher de 35 - 45%. Princípio: O processo de centrifugação do sangue separa as unidades da composição sanguínea de acordo com suas densidades. A força centrífuga atua sobre as hemácias, mais densas que os sobre os leucócitos e as plaquetas, aquelas são compactadas no fundo do capilar.
3.1. 3.2
Número de glóbulos vermelhos (Hematimetria ± Hc)
A hematimetria é a contagem do número de hemácias em determinado volume de sangue. Os valores normais variam de acordo com o sexo e com a idade.
Valores de referência:
Homem 3,9 ± 5,0 milhões fQL Mulher 4,3 ± 5,7 milhões fQL
Princípio: A partir da diluição de um volume conhecido de sangue total em um líquido diluente (Líquido de Gower), faz-se a contagem do número de células em área de volume conhecido em câmara de contagem (câmara de Neubauer), obtem-se o número de
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HcfQ L = nr de células contadas x 200 5 x 0,04 x 0, 1 Quando se utilizam valores acima, obtém-se o fator de correção da cãmara para contagem de hemácias: HcfQ L = nr de Hc contadas x 10 000
3.1. 3.3
Dosagem de hemoglobina
A dosagem de hemoglobina determina a sua concentração no sangue e é dada pela massa de hemoglobina em gramas presente nas hemácias contidas em
1
dL de sangue.
Princípio: A hemoglobina é uma cromoproteína em grande concentração, sua dosagem por espectrofotometria é sensível, mas, por ser muito instável fora da hemácia, a hemoglobina deve ser transformada em cianometahemoglobina, através do reativo de Drabkin. A cianometahemoglobina é um cromógeno estável com absorção máxima da luz de 540 nm. Hbf dL= A amostra x C padrão A padrão
Valor de referência: Homem 12,3 ± 16,9 gf dL Mulher 11,2 ± 15,0 gf dL
3.1. 3.4 Volume C orpuscular orpuscular
Médio (V C C M)
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Valores de referência: 82 -98 fl (ou 3).
3.1. 3.5 Hemoglobina C orpuscular orpuscular
Média (H C C M)
O HCM expressa a quantidade de hemoglobina que cada hemácia contém. Este índice pode ser determinado através da fórmula: fór mula: HCM= Hb (g%) x 10 Hc (106f mm3) As unidades para este est e valor são: picogramas (pg) ou micromicrogramas (g) Através deste índice é possível classifica as hemácias em: Normocrômicas, hipocrômicas ou hipercrômicas.
Valores de referência: 26-34 pg; ou 28 ± 32 micromicrogramas ± g,
3.1. 3.6 C oncentração oncentração
de Hemoglobina
C orpuscular orpuscular
Média ( C C H C C M)
O CHCM é a relação entre o valor da hemoglobina contida em um determinado volume de sangue e o volume globular, ou seja, a concentração de hemoglobina média nas hemácias em um volume de sangue conhecido. E pode ser determinado pela fórmula: CHCM= Hb(g%) x 100 Ht (%)
Valores de referência: 32-36%
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A contagem de reticulócitos possui os objetivos de auxiliar na distinção entre anemias hipoproliferativas e hiperproliferativas além de auxiliar na avaliação de perda sangüínea, resposta da medula óssea à anemia e terapia terapia para anemia.
Princípio: A extensão hematológica é submetida a ação de um fixador e duas soluções corantes, por meio de imersões de 5 segundos em cada, e ao final da última imersão encontrase pronta para a leitura.
Valores de referência: De 0,5 a 1,5% de reticulócitos , ou de 20.000 a 75.000/mm3 de sangue. Em bebês, a contagem normal de reticulócitos varia de 2 a 6% ao nascimento, diminuindo para níveis de adulto em
3.1.4
1
a 2 semanas.
Série branca
ontagem 3.1.4.1 C ontagem
de Leucócitos
Leucograma é o estudo da série branca (ou leucócitos), faz-se uma contagem total dos leucócitos e uma contagem diferencial contando-se
100
células. O adulto normalmente
apresenta de 5.000-10.000 leucócitos por 1 mm³ de sangue.
Princípio: A partir da diluição de um volume conhecido de sangue total em um líquido diluente (Líquido de Turk) contam-se as células na área de volume conhedico em câmara de contagem (câmara de Neubauer), obtém-se o número de células por microlitro de sangue.
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3.1.4.2 C ontagem ontagem
diferencial de Leucócitos
Em um paciente normal as células encontradas são: Monócitos: uma das maiores células da série branca, têm citoplasma azulado, núcleo
irregular (indentado, lobulado, em C ou oval) podem ter vacúolos (pela recente fagocitose). Quando estão aumentados usa-se o termo monocitose e ocorre em infecções virais, leucemia mielomonocítica mielomonocítica crônica e após quimioterapia. Linfócitos: se pequenos têm citoplasma escasso, núcleo redondo; se grandes têm
citoplasma um pouco mais abundante. Podem ter grânulos. É a célula predominante nas crianças. Seu aumento é chamado de linfocitose. Em adultos, seu aumento pode ser indício de infecção viral ou leucemia linfocítica crônica. crônica. bas ofílico que não é visualizado por causa da presença de Eosinófilos: citoplasma basofílico grânulos específicos (de coloração laranja-avermelhada), com núcleo com 2-3 lóbulos. Quando seu número aumenta é chamado de eosinofilia, e ocorre em casos de processos alérgicos ou parasitoses. Basófilos: citoplasma cheio de grânulos preto-purpúreos que cobrem o citoplasma. Em
um indivíduo normal, só é encontrado até uma célula (em termos percentuais), seu aumento causa processos alérgicos. Neutrófilos Segmentados Segmentados : citoplasma acidófilo (róseo), núcleo com vários lóbulos (2-5
lóbulos) conectados com filamento estreito. É a célula mais encontrada em adultos. Seu aumento pode indicar indicar infecção bacteriana, ba cteriana, mas pode estar aumentada em infecção viral. Bastonetes Neutrofílico: citoplasma acidófilo, núcleo em forma de S ou C. Não é
comum seu achado em grandes quantidades em sangue de pacientes normais, mas aparecem
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3.1.5
Série Plaquetária Plaquetas são observadas em relação à quantidade e a seu tamanho. Seu número
normal é de 150.000 à 400.000 por microlitro de sangue. O tamanho de uma plaqueta varia entre 1 a 4 micrometros. A contagem de plaquetas é feita pelo método automático. A maioria dos laboratórios usam aparelhos cuja contagem de plaquetas se faz no mesmo canal de contagens de hemácias, sendo que a diferenciação de ambas se dá pelo volume (plaquetas são menores que 20 fl e hemácias maiores que 30 fl). Devido ao grande volume de exames feito por um laboratório ficou inviável a contagem manual de todas as plaquetas, mas a contagem manual não foi totalmente abandonada sendo que a contagem automática pode ser confirmada pela observação das plaquetas no esfregaço ou pela contagem manual feita em câmara de Neubauer. Os erros mais comuns em uma contagem automática são: aparelhos mal calibrados e problemas na coleta do sangue. A coleta correta é muito importante. Uma coleta muito lenta, agitação errada do sangue colhido, entre outros problemas, podem fazer com que as plaquetas se agrupem e, ao realizar a contagem em aparelhos, seu número se torne diminuído. O agrupamento de plaquetas não é um sinal clínico.
3.2
TEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIALMENTE ATIVADA Também conhecida pelas siglas KTTP, PPT, TTPA ou TTPa, Tempo de
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11
o
Fator XII
Fatores da vía comum:
o
Fator II
o
Fator V
o
Fator X
Ele é prolongado em casos de:
Déficit de pré-calicreína
Déficit de Cininogênio de Alto Peso P eso Molecular
Presença de aticoagulante lúpico
Princípio: Mistura do PPP do paciente à uma mistura ativadora de contato e um tromboplastina exógena (a cefalina) que substitui a superfície da plaqueta mas não é capaz de ativar a via extrínseca.
Valores de referência: 26 a 35 segundos
3.3
TEMPO DE ATIVIDADE DA PROTROMBINA (TAP)
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12
Valor de referência: 12-13 segundos.
3.4
TEMPO DE SANGRAMENTO A técnica é realizada para se avaliar o tempo de sangramento capilar, com a
capacidade das plaquetas agirem contra o extravasamento extravas amento sanguíneo. A técnica é simples e rápida, realizada através da punção da ponta de um dos dedos previamente limpo com álcool 70%. Após a punção, a cada 30 segundos encosta-se um papel filtro no local para se avaliar o sangramento. Não se deve apertar a ponta do dedo, a intenção é avaliar o tempo em que não mais haverá sangramento.
Valor de referência: 1- 6 minutos.
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13
4
RESULTADOS E DISCUSSÃO
AMOSTRA 1 (sexo feminino, adulto) - Hc: 623 x 10 000 = 6 230 000 (VR: 3,88-4,99 milhões/ QL) - Contagem diferenciada de leucócitos: Valor achado (%) Valor de referência (%) Eosinófilos 4 0-5 N. Bastonestes 3 0-5 N. Segmentados 57 50-70 Linfócitos 36 20-40
- Tempo de sangramento: 5 minutos (VR: 1-6 minutos) O valor de Hc calculado está acima do valor de referência, mas isso pode ser devido a diversos fatores, por este motivo, provavelmente, provavelmente, seria recomendável r ecomendável uma uma recontagem. A representação da série branca sanguínea diferenciada, dada logo acima, está dentro dos parâmetros da normalidade. E quanto ao tempo t empo de sangramento, sangramento, também está adequado
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AMOSTRA 3 (sexo masculino, adulto) - Hematócrito: 44% (VR: 40-54%) - Hematimetria: 6 300 000 (VR: 4,32- 5,66 milhões fQL) - Plaquetas: 472 500 (VR: 150 000 ± 400 000 QL) - Contagem geral de Leucócitos: 5 250 (VR: 4 500 ± 10 500f mm3) - Contagem diferenciada de Leucócitos: Valor achado (absoluto) 157,5 52,5
Valor achado (%) Eosinófilos 3 N. Bastonetes 1 N. Segmentados Linfócitos 35 Monócitos 7
54 838 368
1
Valor de referência (%) 0-5 0-5 2835 50-70 20-40 0-7
Todos os valores estão dentro dos parâmetros normais estabelecidos. esta belecidos.
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AMOSTRA 6 (sexo feminino, adulto) Absorbância x Fator de de correção - Hb: Hb = Absorbância Hb = 0, 372 x 39,33 = 14, 63 gf dL (VR: 11,2 ± 15,0 gf dL) - Hc: 45 100 000 milhões fQL (VR: 4,3 ± 5,7 milhões fQ L) - Ht: 42% (VR: 35 - 45%) - VCM = (42 x 10) ÷ 4,51 = 93 fl (VR:82 -98 fl) - HCM= (14, 63 x 10) ÷ 4,5 1 = 32 pg (VR: 26-34 pg) - CHCM= ( 14, 63 x 100) ÷ 42 = 34,8% (VR: 32-36%) - Leucócitos (global)= 8 497 (5 000- 10 000 mm³) - Contagem de Leucócitos diferenciada: Valor achado (%) Basófilo 1 Eosinófilos 2 N. Bastonetes N. Segmentados Linfócitos 31 12 Monócitos
Valor achado (absoluto) 85 170 0
Valor de referência (%) 0-5 0 4588
54 2634 1020
0-5 50-70 20-40 0-7
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5
CONCLUSÃO
O setor de Hematologia, como qualquer outro setor do Laboratório de Análise Clínicas, é um setor onde precisa trabalhar com muita atenção e precaução, usando adequadamente os equipamentos de proteção individual (EPI¶s) devido o manuseio com amostras de sangue. sangue. Os procedimentos dos testes devem ser realizados r ealizados cuidadosamente, cuidadosamente, analisando analisa ndo cada passo e observando possíveis interferentes como sangue hemolisados, lipêmicos, coagulados, sujidade e calibração dos parelhos e outros, os quais podem vir a levar alteração no resultado
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
LORENZI, T. F. Manual de Hematologia ± Propedêutica e Clínica. 2 ed. Rio de Janeiro: Medsi, 1999. MOURA, Robeto de Almeida. WADA, Carlos S. PURCHIO, Adhemar. ALMEIDA, Therezinha Verrastro de. Técnicas de Laboratório.3 ed. São Sã o Paulo: Editora Atheneu, 2006. ROSENFELD, Ricardo. Fundamentos do hemograma : do laboratório à clínica. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2007. 2007. TERRA, P. Coagulação ± Interpretação Clínica dos Testes Laboratoriais de Rotina. São