MEDIA SELEKTIF
Media Media yang yang termasu termasuk k dalam dalam selekti selektiff media media yaitu yaitu Tauroc aurochol holate ate Citrate Citrate Broom Thymul, Blue Suchrose Salt Agar (TCBS), Mac Conkey (MC), Salmonella Shigella Agar Agar (SSA), Endo Agar (EA).
1. Taurochola Taurocholate te Citrate Broom Thymul, Blue Blue Suchrose Suchrose Salt Salt Agar (TCBS
(TCBS) adalah media selektif untuk Virio Virio Cholera. A. !om" !om"os osis isii # $east $east e%tract & ' gram • Bacteriological e"tone & * gram • Sodium thiosul"hate & * gram • Sodium Citrate & * gram • +% ile & gram • Sucrose & -* gram • Sodium Chloride & * gram • Broom Thymol Thymol Blue & *,* gram • Thymol Blue & *,* gram • Agar & gram • A/uadest & ***m0 • 1 & ,2 • B. Alat # Timangan Timangan analitik analit ik • 3elas ukur • Erlen Meyer • Sendok reagen • Alat emanas •
C.
rosedur !er4a # 5itim 5itimang ang gram gram dehyd dehydrate rate medium medium kemudi kemudian an masuk masukkan kan ke • •
dalam erlenmeyer dan larutkan ***m0 a/uadest. Bila elum larut "anaskan di atas nyala a"i sam"ai suhunya '6'*
•
dera4at celcius. 7ang 7angan an meng menggu guna naka kan n "etridisk.
auto autocl cla8 a8e, e,
kemu kemudi dian an
tuan tuangk gkan an
"ada "ada
Medium TCBS +%id sem"urna dan tidak memutuhkan ahan tamahan atau tamahan darah steril, dan media ini leih menguntungkan dari media lanryl sul"hate tellurite agar yang memutuhkan tamahan leih lan4ut setelah "ensterilisasian "enam"akan koloni dari organisme. ada media TCBS setelah - 4am inkuasi "ada suhu 9' dera4at celcius.
Bakteri !oloni # Virio "arahaemolyticus kuning, ti"is • Virio Alginiliticus iru, kekuning6kuningan • Virio Metchnico8in kuning(9,'mm) • Virio :lufialis kuning (9,mm) • Virio Vulni8icus iru, kehi4auan (-,9mm) • Virio mimicus iru, kehi4auan (mm) • 7enis Entrococcus # 7enis "roteus kuning, kehi4auan (mm) • 7enis seudomonas iru, kehi4auan (mm) • !ontrol !ualitas # !ontrol ositif # Virio Colera • !ontrol ;egatif # Eschericia coli di hamat "ertumuhannya •
!. Mac Co"#ey Agar (MCA
emenihan
ini
ersifat
selektif
untuk
hasil
gram
negatif,
aik
Enteroacteriateae mau"un yang non fermented asilgram negati8e, sedangkan akteri lain umumnya tidak tumuh < tumuh dengan tidak suur. ersenya=aan utama dalam media ini adalah laktosa, garam em"edu dan nerah netral. Media ini menghamat "ertumuhan akteri garam "ositif yang diseakan oleh garam em"edu dan kristal 8iolet, akteri gram negatif yang tumuh di edakan dalam kemam"uannya
memfermentasekan
aktosa.
!oloni
dari
akteri
yang
memfermentasekan laktosa er=arna merah ata dan di kelilingi oleh enda"an garam em"edu. Enda"an ini di seakan oleh "enguraian laktosa men4adi asam
yang ereaksi dengan garam em"edu. Bakteri yang tidak memfermentasekan laktosa iasanya ersifat "athogen. 3olongan akteri ini tidak mem"erlihatkan "eruahan "ada media. >arna koloni di lihat "ada agian koloni ter"isah. A. !om"osisi # e"tone $east e%tract & ? gram • Agar & 9,' gram • rotease e"ton & 9 gram • ;etral @ed & *,*9 gram • 0actosa & * gram • Crystal Violet & *,**gram • Bile salt no 9 & ,' gram • A/uadest & ***ml • Sodium Cloride & ' gram • 1 & ?, • B. Alat # Erlen Meyer • Sendok tanduk • 3elas ukur Taung @eaksi • Taung 5urham • Beaker 3elas • Botol sem"rot • •
C. rosedur !er4a# Timang ahan terseut di atas, masukkan dalam eaker gelas '* m0 • •
dan larutkan dengan a/uadest dan masukkan dalam Erlen meyer. 1omogenkan dengan cara di "anaskan di dalam "emanas selama ' menit, kemudian mulut Erlenmeyer di sumat dengan menggunakan ka"as, yang dila"isi kertas, kemudian sumatan terseut di tutu"
•
kemali dengan menggunakan kertas, lalu di ikat. Sterilkan media terseut di dalam autocla8e "ada suhu - dera4at
•
celcius selama ' menit 5inginkan dengan tuangkan ke dalam "etridish dan sim"an dalam lemari es.
Media dalam MCA ini mem"unyai keistime=aan memilih akteri enteric gram negati8e yang memfrementasekan laktosa, karena media ini mengandung laktosa,
crystal
8iolet
memfregmentasekan
dan
laktosa
netral
rerile
menyeakan
salt.
!emam"uan
"enurunan
1,
Ecoli
sehingga
mem"ermudah asorsi netral red untuk menguah koloni men4adi merah ata.Mikroa lain yang da"at tumuh "ada media ini antara lain # Enteroacter, "roteus, salmonella, shigella, aeroacter, enterococcus.
$. E"%o Agar
ersenya=aan utama dalam media ini adalah laktosa, ;a6sulfat dan fiksin6 usa. A. Sifat "ertumuhan koloni "ada EA(Endo Agar) adalah # a. Bakteri yang tidak memfregmentasikan laktosa Terlihat seagai koloni yang terang temus, tidak er=arna dan di kelilingi oleh media yang er=arna merah muda. !elom"ok media ini menyeakan indicator fuksin6fuksin yang er=arna. . Bakteri yang memfregmentasikan laktosa Terlihat seagai koloni yang er=arna merah metalik dan di kelilingi oleh media yang er=arna kemerahan. eruahan =arna media di sekeliling koloni akteri ukan di seakan oleh "engiraian asam, teta"i oleh reaksi "enengahnya yaitu asetaldehida dengan ;a6 dulfiat, akteri gram "ositif dihamat "ertumuhannya oleh sulfiat dan fuksin. B. Beera"a "ertumuhan koloni "ada agar ini.
!oloni Mikro organisme # Tidak er=arna, ening lactosa6negati8e, salmonella, shigella Merah dengan kilau logam lactosa6"ositif, E.coli(Metallic Sheen ) • Merah mudam mukoid Enteriacter, klesiella, citroacter • C. !om"osisi # 5i"otassium "hus"ate & 9,' gram • e"tic digest of animal tissuerotease & * gram • Agar & ' gram • 0actosa & * gram • Sodium sulfite & -,' gram • Basic :uchsin & *,' gram • •
5. Alat # !ertas timang • ;eraca analitik • Sendol • Ca=an etri • Erlenmeyer • 3elasukur • E. rosedur !er4a # Timang Endu Agar seanyak -*, ?' gram • 5ilarutkan dalam Erlenmayer dengan a/uadest sam"ai '**m0, • •
kemudian "anaskan kurang leih ' menit Tuang dalam ca=an etri yang sudah di sterilkan kemudian di inkuasi selama - 4am dengan suhu - dera4at celcius
4.
Salmo"ella Shigella Agar (SSA
erenihan ini miri" MCA, hanya "enggunaanya leih khusus lagi untuk asil gram negati8e "athogen enteric, sehingga di "akai untuk isolasi dari s"ecimen yin4a terutama salmonella shigella yang keduanya mem"erlihatkan "ertumuhan koloni yang tidak er=arna. Seagai ahan "enghamat utama adalah garam em"edu dan rilliant green yang tidak hanya menghamat akteri asam "ositif sa4a teta"i menekan "ertumuhan asil "athogen non enteric lainnya. A. !om"osisi#
Ekstrak sa"i & ' gram roteose "e"tone & ' gram • 0aktosa & * gram • 3aram ile no.9 & ,' gram • ;atrium sitart & ,' gram • :errik sitrat & gram • Agar & 9,' gram • Merah netral & *,*-' gram • 1i4au rilliant & *,99 gram • A/uadest & ***m0 • 1 • B. Alat # Taung reaksi • etridisk • Sendok tanduk • Autocla8e • Erlenmeyer • 3elas ukur • Timangan analitik • C. rosedur !er4a # Timang ahan terseut, kemudian masukkan dalam eaker glass • •
'* ml dan larutkan dengan a/uadest, lalu masukkan ke dalam •
Erlenmeyer 1omogenkan dengan cara di "anaskan diatas "emaas selama '
•
menit Sterilkan media terseut di dalam autocla8e "ada suhu - dera4at
•
celcius selama ' menit 5iingimgan dan tuang ke dalam "etridish dan sim"an dalam lemari
es 5. !ontrol !ualitas # !ontrol ositif # •
Salmpnella typhimurium Salmonella enteridis
•
!ontrol ;egatif #
Enterococcus raecallis
5A:TA@ STA!A htt"#<
SAccess!eyDd&A!DA7'2TG7@T>SMT;EAHE%"ires&'?22?I2HSigna ture&a2+"184t8;DAhaI$cV/"=sJ95Hres"onse6content6 dis"osition&attachmentJ9BJ-*filenameJ95ME5DA!E3;AA;;$A.doc%
