Konsentrasi enzim

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA PANGAN ENZIM I Konsentrasi Enzim Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Tugas Praktikum Biokimia Pangan

Oleh : Nama NRP Kelompok

: Nazir Siddiq : 113020080 :D

e!a 1 ::"Sat#$ %sisten O&' (an!#n& )i&elar (an&&al Per*o+aan : 13 %pril 2013

LABORATORIUM BIOKIMIA PANG AN JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN FAKULTAS TEKNIK UNIVERSITAS PASUND AN BANDUNG 2013

LAPORAN PR AKTIKUM BIOKIMIA PANGAN ENZIM Konsentrasi Enzim Nazir Siddiq : 113020080 o*h Rizal R : 1130200,8 -en' S : 113020083 INTISARI Tujuan percobaan Uji Konsentrasi Enzim adalah untuk mengetahui pengaruh konsentrasi enzim terhadap aktifitas enzim dan kecep atan reaksi Prinsip percobaan Uji Konse ntrasi Enzim adalah berdasarkan pada perbedaan konsentrasi enzim !ang dapat mempengaruhi kecepatan reaksi Berdasarkan hasil percobaan semakin pekat maka konsentrasi enzim semakin aktif" dimana hasiln!a pada sampel kedelai memiliki konsentrasi paling pekat dengan #$ tetes ekstrak % urea" sampel kentang memiliki konsentrasi paling pekat dengan #$ tetes ekstrak % katekol" dan sampel pisang memiliki konsentrasi paling pekat dengan #$ tetes ekstrak % katekol

I PENDAHULUAN .a+ ini men&#raikan men&enai : "1$ /atar .elakan& "2$ (#!#an Per*o+aan "3$ Prinsip Per*o+aan dan "$ Reaksi Per*o+aan 1.1. Latar Bea!a"# S#at# reaksi kimia kh#s#sn'a antara sen'aa or&anik 'an& dilak#kan dalam la+oratori#m memerl#kan s#at# kondisi 'an& ditent#kan oleh +e+erapa 4aktor seperti s#h# tekanan akt# dan lain5lain %pa+ila salah sat# kondisi tidak ses#ai den&an apa 'an& sehar#sn'a di+#t#hkan maka reaksi tidak dapat +erlan&s#n& den&an +aik (#+#h kita mer#pakan la+oratori#m 'an& san&at r#mit se+a+ di dalamn'a ter!adi reaksi kimia 'an& +eraneka ra&am Reaksi ata# proses kimia 'an& +erlan&s#n& dalam ini dim#n&kinkan karenaden&an adan'a+aik katalis 'an& t#+#h dise+#tkita enzim "Poed!iadi hal : 10 2006$

Enzim meskip#n han'a mer#pakan komponen tam+ahan "minor$ +an'ak makanan meme&an& peranan #tama dan +erma*am5ma*am dalam makanan Enzim 'an& terdapat se*ara alami dalam makanan dapat men&#+ah s#s#nan makanan terse+#t Dalam +e+erapa kas#s per#+ahan seperti it# dikehendaki tetapi dalam se+a&ian +esar kas#s hal it# tidak dikehendaki sehin&&a enzim har#s dinon5akti4kan "dean hal : 38 177,$ 1.2. T$%$a" Per&'(aa" (#!#an per*o+aan !i Konsentrasi Enzim adalah #nt#k men&etah#i pen&ar#h konsentrasi enzim terhadap akti4itas enzim dan ke*epatan reaksi 1.3. Pr)"*)+ Per&'(aa" Prinsip per*o+aan

!i

Konsentrasi

Enzim

adalah

+erdasarkan pada per+edaan konsentrasi enzim 'an& dapat mempen&ar#hi ke*epatan reaksi

1., Rea!*) Per&'(aa" E + E S

S

E S E +

P

9am+ar 1 Reaksi Konsentrasi Enzim II TINJAUAN PUSTAKA .a+ ini men&#raikan men&enai Enzim dan "2$ Si4at dan 4#n&si

: "1$ Klasi4ikasi

2.1 . Ka*)-)!a*) E")/ .erdasarkan &omission on Enz!mes of the 'nternational Union of Biochemistr!  enzim di+a&i dalam enam &olon&an +esar terse+#t didasarkan atas reaksi kimia dimanaPen&&olon&an enzim meme&an& peranan Enam &olon&an terse+#t adalah oksidored#ktase trans4erase hidrolase liase isomerase dan li&ase

Enzim5enzim 'an& termas#k dalam &olon&an oksidored#ktase dapat di+a&i dalam d#a +a&ian 'ait# dehidro&enase dan oksidase Dehidro&enase +eker!a pada reaksi5reaksi dehidro&enase 'ait# reaksi pen&am+ilan atom hidro&en dari s#at# sen'aa "donor$ idro&en 'an& dilepas diterima oleh sen'aa lain "akseptor$ Reaksi pem+ent#kan aldehida dari alkohol adalah *ontoh reaksi dehidro&enase Enzim5enzim oksidase !#&a +eker!a se+a&ai katalis pada reaksi pen&am+ilan hdro&en dari s#at# s#+strat Dalam reaksi ini 'an& +ertindak selak# akseptor hidro&en adalah oksi&en Se+a&ai *ontoh enzim &l#kosa oksidase +eker!a se+a&ai katalis pada reaksi oksidsi &l#kosa men!adi asam &l#konat  Enzim 'an& termas#k &olon&an trans4erase +eker!a se+a&ai katalis pada reaksi pemindahan s#at# &#&#s dari s#at# sen'aa kepada sen'aa lain .e+erapa *ontoh enzim 'an& termas#k &olon&an ini ialah metiltrans4erase kar+oksiltrans4erase hidroksimetiltrans4erase asiltrans4erase dan amino trans4erase ata# dise+#t !#&a transaminase Enzim metiltrans4erase +eker!a pada reaksi pem+ent#kan kreatin dari asam &#anidino asetat Pem+ent#kan &lisin dari serin mer#pakan reaksi pemindahan &#&#s hidroksi metil 9#&#s ini dilepaskan dari molek#l serin den&an di+ant# oleh enzim hidroksimetil trans4erase Enzim transminase +eker!a pada reaksi transaminasi 'ait# s#at# reaksi pemindahan &#&#s amino dari s#at# asam amino kepada sen'aa lain Enzim 'an& termas#k dalam kelompok hidrolase +eker!a se+a&ai katalis pada reaksi hidrolisis %da ti&a !enis hidrolase 'ait# 'an& meme*ah ikatan ester meme*ah &likosida dan 'an& meme*ah ikatan peptida .e+erapa enzim se+a&ai *ontoh ialah esterase lipase 4os4atase amilase amino peptidase dan lain5lain ialah enzim 'an& meme*ah ikatan ester den&an *araEsterase hidrolisis /ipase ialah enzim 'an& meme*ah ikatan ester pada lemak sehin&&a ter!adi asam lemak dan &liserol -os4atase adalah enzim 'an& dapat

meme*ah ikatan 4os4at pada s#at# sen'aa Enzim amilase dapat meme*ah ikatan5ikatan pada amil#m hin&&a ter+ent#k maltosa Enzim 'an& +eker!a se+a&ai katalis dalam reaksi peme*ahan molek#l protein den&an *ara hidrolisis dise+#t enzim proteoitik ata# protease Oleh karena 'an& dipe*ah adalah ikatan pada rantai peptida maka enzim terse+#t dinamakan !#&a peptidase %da d#a ma*am peptidase 'ait# endopeptidase dan eksopeptidase Endopeptidase meme*ah protein pada tempat5tempat tertent# dalam molek#l protein dan +iasan'a tidak mempen&ar#hi &#&#s 'an& terletak di #!#n& molek#l Eksopeptidase +eker!a terhadap ked#a #!#n& molek#l protein Kar+oksipeptidase dapat melepaskan asam amino 'an& memiliki &#&#s ;5di4os4at men!adi d#a molek#l triosa 'ait# dihidroksi aseton 4os4at dan &liseraldehida5354os4at %dap#n enzim 4#marat hidratase +erperan dalam reaksi pen&&a+#n&an sat# molek#l  2O kepada molek#l asam 4#marat dan mem+ent#k asam malat Enzim 'an& termas#k &olon&an isomerase +eker!a pada reaksi per#+ahan intramolek#ler misaln'a reaksi per#+ahan &l#kosa men!adi 4r#ktosa
&olon&an isomerase antara lain ialah ri+#losa4os4at epimerase dan &l#kosa4os4at isomerase Enzim ri+#losa epimerase mer#pakan katalis +a&i reaksi epimerisasi ri+#losa Enzim 'an& termas#k &olon&an li&ase +eker!a pada reaksi5reaksi pen&&a+#n&an d#a molek#l Oleh karenan'a enzim5enzim terse+#t !#&a dinamakan sintetase
3.2. Aat 4a"# )#$"a!a" %lat5alat 'an& di&#nakan pada Konsentrasi Enzim adalah ta+#n& reaksi dan pipet tetes 3.3. Met'e +er&'(aa"

9am+ar 2 Prosed#r Konsentrasi Enzim IV HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN .a+ ini men&#raikan men&enai : "1$ asil Pen&amatan dan "2$ Pem+ahasan ,.1. Ha*) Pe"#a/ata" (a+el 1 asil Pen&amatan Konsentrasi Enzim Konsentrasi Sampel S#+strat )arna asil Enzim 16 tetes Pinkt#a @@@ Kedelai 6 tetes rea Pink s#s# @@ tetes 1 Pink @ "%$ 16 tetes
m#da Keteran&an : "@@@$ Enzim akti4 +eker!a "@@$ Enzim k#ran& akti4 +eker!a "@$ Enzimtidak akti4 +eker!a "S#m+er : Nazir Siddiq dan o*h Rizal R Kel D e!a 1 2013$

9am+ar 3 asil Pen&amatan Konsentrasi Enzim ,.2. Pe/(aa*a" asil per*o+aan didapatkan +aha setiap ekstrak memiliki arna palin& pekat pada penam+ahan ekstrak 16 tetes al ini mem+#ktikan adan'a pen&ar#h konsentrasi enzim 'an&arna akan mempen&ar#hi reaksienzim Dari per+edaan terse+#t dapat ke*epatan kita ketah#idari keakti4an dari tiap5tiap reaksi Dari data di atas dapat ditarik kesimp#lan +aha semakin +an'ak enzim maka ke*epatan reaksi akan semakin tin&&i Seperti pada katalis lain ke*epatan s#at# reaksi 'an& men&&#nakan enzim ter&ant#n& pada konsentrasi enzim terse+#t Pada s#at# s#+strat tertent# ke*epatan reaksi +ertam+ah den&an +ertam+ahn'a konsentrasi enzim "Poed!iadi hal : 168 2006$ Pen&ar#h konsentrasi enzim pada la!# akti=itas enzim den&an enzim 'an& dera!at kem#rniann'a tin&&i Didalam +atas5+atas tertent# terdapat s#at# h#+#n&an linear antara !#mlah enzim dan tara4 akti=itasn'a %kti=itas enzim

mer#pakan #k#ran len'apn'a reaktan ata# m#n*#ln'a prod#k dari reaksi 'an& dikatalisis Konsentrasi enzim mer#pakan per*o+aan 'an& dilak#kan #nt#k mempela!ari pen&ar#h konsentrasi enzim terhadap ke*epatan reaksi Dari hasil per*o+aan konsentrasi enzim dapat diketah#i +aha semakin +esar konsentrasi enzim maka ker!a enzim semakin akti4 Seperti pada katalis lain ke*epatan s#at# reaksi 'an& men&&#nakan enzim ter&ant#n& pada konsentrasi enzim terse+#t Pada s#at# konsentrasi s#+strat tertent# ke*epatan reaksi +ertam+ah den&an +ertam+ahn'a konsentrasi enzim -#n&si penam+ahan pheno4ltalein pada #rease +ert#!#an se+a&ai indikator arna dan !#&a #nt#k memper!elas ter!adin'a per#+ahan arna Selain it# dapat p#la di&anti den&an indikator 'an& lain asalkan indikator terse+#t +ersi4at +asa seperti metil +ir# Kem#dian pada ekstrak setelah dimas#kkan kedalam ta+#n& reaksi +ert#!#an #nt#k men'era&amkan s#h# a&ar tah# keakti4an dari enzim terse+#t Per*o+aan #!i konsentrasi enzim apa+ila ekstrak 'an& di&#nakan sedikit tetapi s#+stratn'a +an'ak akan men'e+a+kan ker!a enzim k#ran& optimal dan s#+strat akan !en#h %dap#n t#!#an pen&kondisian dari per*o+aan ini selama 6 menit dimaks#dkan a&ar ekstrak 'an& di *amp#rkan den&an s#+strat terse+#t dapat men'es#aikan den&an kondisi s#h# kamar kem+ali 'an& kem#n&kinan ter!adi karena per+edaan setelah ekstrak dipindahkan ke ta+#n& reaksi lain Seperti pada katalis lain ke*epatan s#at# reaksi 'an& men&&#nakan enzim ter&ant#n& pada konsentrasi enzim terse+#t Pada s#at# konsentrasi s#+strat tertent# ke*epatan reaksi +ertam+ah den&an +ertam+ahn'a konsentrasi enzim "Poed!iadi hal : 168 2006$

9am+ar  Pen&ar#h konsentrasi enzim terhadap akti=itas enzim Enzim +erma*am5ma*am !enisn'a danreaksi sem#an'a +er&#na dalam proses #nt#k memper*epat dalam t#+#h karena enzim it# dapat men#r#nkan ener&i akti=asi pada proses emzimatis (in&kat *epat lam+atn'a s#at# reaksi dalam t#+#h dipen&ar#hi oleh +an'ak hal Si4at5si4at 'an& disoroti misaln'a +an'akn'a s#+strat +an'akn'a enzim serta s#h# Semakin +an'ak !#mlah s#+strat maka reaksi terse+#t akan semakin *epat !#&a Semakin +an'ak enzim !elas akan semakin *epat p#la reaksi kimia 'an& +erlan&s#n& "Ni*hola 2010$ rease dise+#t !#&a #rea amidohidrolases reases mer#pakan enzim 'an& men&katalis hidrolisis dari #rea men!adi kar+on dioksida dan ammonia rease adalah se+#ah protein 'an& ditem#kan dalam +akteri kapan& dan +e+erapa tanaman tin&kat tin&&i Karakteristikn'a 'ait# p optim#m , s#h# optim#m > *el*i#s den&an spesi4ikasi enzimatis : #rea dan hidroksi #rea .e+erapa tanaman meman4aatkan #reases #nt#k keperl#an 'an& sama reases ditem#kan dalam !#mlah 'an& +esar pada jack bean ka*an& kedelai dan +e+erapa +i!i tanaman lainn'a reases !#&a terdapat pada +e+erapa !arin&an +inatan& dan pen*ernaan mikroor&anisme reases pentin& dalam se!arah enzimolo&i se+a&ai enzim pertama 'an& dim#rnikan dan dikristalkan Karakteristik enzim #rease 'ait# : 1 (empat akti4n'a metal : nikel "AA$

2 3  6

.erat molek#l : 80 kDa ata# 66 kDa dari Ba*k .ean rease "kalk#lasi massa dari ran&kaian asam amino$ Ph Optim#m : , (emperat#r optim#m : >0 0< spesi4ik enzim : #rea dan 'droC'#rea

>

Anhi+itor : /o&am +erat "N#rsiam 2010$

V KESIMPULAN DAN SARAN .a+ ini men&#raikan men&enai : "1$ Kesimp#lan dan "2$ Saran 5.1. Ke*)/+$a" .erdasarkan hasil

per*o+aan

semakin

pekat

maka

konsentrasi enzim semakin akti4 palin& dimanapekat hasiln'a sampel kedelai memiliki konsentrasi den&anpada 16 tetes ekstrak @ #rea sampel kentan& memiliki konsentrasi palin& pekat den&an 16 tetes ekstrak @ katekol dan sampel pisan& memiliki konsentrasi palin& pekat den&an 16 tetes ekstrak @ katekol 5.2. Sara" Saran 'an& di+erikan pada praktikan adalah har#s le+ih siap materi 'an& akan di #!i dan teliti serta +eker!a sama den&an +aik den&an rekan sat# me!a a&ar per*o+aan dapat terlaksana den&an +aik dan hasiln'a p#n akan le+ih ak#rat

DAFTAR PUSTAKA dean Bohn  "177,$ K)/)a Ma!a"a". Pener+it A(.? .and#n& Ni*hola "2010$ Me"#a/at) Ker%a E")/  http:idsh=oon&*omeCa*ts*ien*es+io*hemistr'2081

275kata+olisme5men&amati5ker!a5enzim 1,02013

diakses

N#rsiam "2010$ Pe"#$%)a" A!t)6)ta* E")/  http:intann#rsiam+lo&spot*om2010062pen&#!ian akti=itas enzimhtml diakses 1,02013 Poed!iadi %nna "2006$ Da*ar 7 Da*ar B)'!)/)a  A5 PressBakarta