Grupo ABO, Rh. Discrepancias hemático-séricas. Lic. Ernesto Choc Licda. Carolina Figueroa Gabriel Programa de Medicina Transfusional y Bancos de Sangre Ministerio de Salud Pública y A.S
Historia de las pruebas de compatibilidad pre-transfusional
1900 Landsteiner: sistema ABO
Karl Landstainer 1868-1943
Día mundial del donante de sangre 14 de Junio
Historia de las pruebas de compatibilidad pre-transfusional
Ottemberg: compatibilidad ABO (P. cruzada salina) 1945 Coombs: Prueba de antiglobulina Robert Coombs 1921 - 2006
Historia de las pruebas de compatibilidad pre-transfusional 1951: Prueba en medio albuminoideo y prueba de antiglobulina indirecta en enfermos poli-sensibilizados 1962 AABB: se universaliza la prueba cruzada salina, albúmina y anti-globulina 1980: controversia respecto a la necesidad de: Prueba cruzada menor Autocontrol Uso de enzimas en la detección de anticuerpos Supresión de la fase de incubación a Tª ambiente Uso de antiglobulina específica IgG en lugar de poliespecífica IgG+ C3
Historia de las pruebas de compatibilidad pre-transfusional
1990: nuevos métodos de detección de anticuerpos: Microcolumna Supresión de la lectura tras incubación a 37ºC
Grupo Sanguíneo ABO Se conocen cuatro grupos sanguíneos con las letras O, A, B y AB. En cada uno de los grupos descubiertos,, los eritrocitos tienen descubiertos en su superficie una sustancia (antígeno), que es diferente a cada grupo.
Composición de grupos sanguíneos ABO Grupos ABO
Grupo A Grupo B Grupo AB Grupo O Antígeno A
Antígeno B
Anti-B
Anti-A
Antígenos AB
No tiene antígenos
Eritrocitos
Plasma
Anti-A y Anti-B No tiene anticuerpos
Composición de grupos sanguíneos ABO Si se exponen las células a anticuerpos contra su antígeno, se aglomeran los eritrocitos.
Importancia del grupo ABO en la medicina transfusional Los anticuerpos anti-A o anti-B en el receptor casi siempre son capaces de causar una rápida destrucción (hemólisis) de los glóbulos rojos incompatibles transfundidos tan pronto como estos entran en circulación. Una transfusión de glóbulos rojos que no ha sido sometida a pruebas de compatibilidad c ompatibilidad acarrea un alto riesgo de causar una reacción hemolítica aguda. Los anticuerpos anti-A y anti-B aparecen ‘naturalmente’.
Determinación del grupo ABO Determinación exacta del tipo de sangre Determinación ABO, se requiere dos tipos de pruebas diferentes: Grupo hemático directo: Para los antígenos que hay sobre los eritrocitos utilizando antisuero reactivo. Grupo sérico (inverso): Para anticuerpos esperados en el suero/plasma utilizando eritrocitos con grupo ABO conocido
Determinación del grupo ABO Grupo hemático directo: Anti-suero conocido
Suspensión al 5% de células del paciente
Aglutinación: Grupo idéntico al anti-suero
No Aglutinación: Grupo distinto al antisuero
Determinación del grupo ABO Grupo sérico (inverso): Suspensión al 5% de células ABO conocidas
Suero o plasma del paciente
Aglutinación: Grupo inverso a las células
No Aglutinación: Grupo idéntico a las células
Discrepancias en el tipaje ABO hemático-sérico En 1911 se demostró que el grupo A podría dividirse en dos subgrupos A1 y A2 Podrían interferir en la determinación correcta del grupo. 80%
A1
20%
A2
Discrepancias en el tipaje ABO hemático-sérico Ocasionalmente se pueden encontrar discrepancias hemático-sérico. Fundamentalmente se observa en personas con subgrupos débiles de A, con diferencias cuantitativas y cualitativas del antígeno A 1 y que pueden producir antiA. Asegurar 1º que no existe:
Incorrecta identificación de la muestra Error en la técnica Contaminación de la muestra Sobre-centrifugación o centrifugación insuficiente No valoración de la hemólisis como reacción Ag-Ac positivo
Problemas de las muestras para la interpretación ABO Hematíes Transfusión-Trasplante Variantes A y B Leucemias-Neoplasias (expresión antigenica atenuada)
Poliaglutinación Soluciones macromoleculares Gelatina de Wharton (cordón umbilical)
Crioaglutininas
Suero Coagulo-fibrina Concentración proteínas Niveles inmunoglobulinas bajas Recambios plasmáticos Lactantes menores 4-6 meses Trasplante ABO compatible pero no idéntico Transfusión componentes plasmáticos
Problemas de las muestras para la interpretación ABO
Ejemplo: Transfusión ABO compatible pero no isogrupo
Sistema Rh(D) En el año 1940, se detecta la existencia de un nuevo antígeno en la membrana de los hematíes de la mayoría de la población. Este antígeno es llamado Rh Hay 3 genes que componen el antígeno rhesus: C, D y E, que se encuentran en el cromosoma 1, con 2 posibles alelos cada uno: C / c, D / d, E / e.
Factor Rh (D) Persona hereda el gen D, sus glóbulos rojos reaccionan con los anti-D y es Rh positiva. Si no hereda el gen D es Rh negativa
Grupos ABO
Rh(D)
Rh(D)
Positivo Negativo Antígeno D
No tiene antígeno D
No tiene anticuerpos
No tiene anticuerpos
Eritrocitos
Plasma
Imcompatibilidad Rh(D)
Determinación Determina ción del Factor Rh(D) Grupo hemático directo: Suero anti-D conocido
Suspensión al 5% de células del paciente
Aglutinación: Factor Rh(D) Positivo
No Aglutinación: Pasar a confirmación Du
Confirmación del Factor Du La prueba inicial del Factor Rh(D) es negativa o débil (Du) El antígeno se expresa en una cantidad reducida Es necesaria la confirmación con prueba de antiglobulina humana (Reactivo de Coombs) Las personas con D débil no producen anti-D Como donantes y receptores deben considerarse con D positivo Los antisueros actuales suelen detectar el D débil con una prueba positiva (aglutinación) (aglutinación)
Confirmación del Factor Du Prueba de Coombs directa: Anti-D + Albúmina al 22%
Aglutinación: Factor Rh(D) Positivo
Incubar a 37°C X 30 minutos Suspensión al 5% de células del paciente AntiD Negativo o positivo débil
Lavar 3 veces
Rvo. Coombs No Aglutinación: Factor Rh(D) Negativo
Resumen ABO y Rh Positivo Grupo O positivo
A positivo
B positivo
AB positivo
Anti-A
Anti-B Anti-AB Anti-D Control
Resumen ABO y Rh Negativo Grupo O positivo
A positivo
B positivo
AB positivo
Anti-A
Anti-B Anti-AB Anti-D Control
Otros antígenos y anticuerpos de glóbulos rojos Hay muchos otros antígenos menores en los glóbulos rojos humanos Pueden, como los antígenos Rh(D), llevar al desarrollo de anticuerpos Por ejemplo, si una persona que no posee el antígeno es sensibilizada por una transfusión de estos antígenos . Estos anticuerpos pueden causar reacciones transfusionales severas, Entre ellos están los sistemas: Rhesus: C, c, E, e Kell Duffy Lewis
Otros antígenos y anticuerpos de glóbulos rojos Se han encontrado 29 sistemas de grupos sanguíneos. Algunos sistemas presentan anticuerpos que ocurren naturalmente La mayoría de estos se s e originan en isoanticuerpos, anticuerpo s, los cuales resultan de transfusiones incompatibles y embarazo.
Sistema Kell Principales antígenos: K (Kell) K (Cellano)
Tras el ABO y D, el K es el tercero mas inmunógeno Se detecta por anti-globul anti-globulina ina indirecta Frecuencia Fenotipo K +kK+k+ K–k+ K–k-
0’2% 8’8% 91% Muy raro
Antígeno K k
9% 99’8%