LAPORAN PRAKTIKUM FARMAKOTERAPI SEMESTER GENAP 2015 – 2016 2016 DETEKSI BAKTERI PATOGEN PADA KULIT
Hari / Jam Praktikum : KAMIS, 13.00-16.00 Tanggal Praktikum
: 26 Mei 2016
Kelompok
: 1 (satu)
Asisten
: 1. MOCHAMMAD INDRA P. 2. RAISSA DWI
Anggota Kelompok
Ayu Apriliani
260110140078 260110140078 Pembahasan
Putri Raraswati
260110140079 260110140079 Tujuan, prinsip, alat dan bahan, prosedur dan editor
Ummi Habibah
260110140080 260110140080 Pembahasan
Ayyu Widyazmara
260110140081 260110140081 Teori Dasar
LABORATORIUM FARMAKOTERAPI SISTEM SARAF FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS PADJADJARAN PADJADJARAN JATINANGOR 2016
I. Tujuan
1.1 Untuk mengetahui teknik isolasi bakteri pada kulit. 1.2 Untuk mengetahui keberadaan bakteri patogen pada kulit.
II. Prinsip 2.1 Kulit
Kulit adalah organ terbesar tubuh. Beratnya kurang lebih 4,5 kg dan menutupi area seluas 18 kaki persegi (1,67 m 2). Adapun fungsi kulit adalah untuk perlindugan, pengatur suhu tubuh dan eksrkresi (Sloane, 1995).
2.2 Bakteri patogen
Bakteri Patogen adalah materi atau organisme yang dapat menyebabkan penyakit pada inang misalnya bakteri. Bakteri dapat merusak sistem pertahanan inang dimulai dari permukaan kulit, saluran pencernaan, saluran respirasi, saluran urogenitalia. Sedangkan Patogenesis sendiri adalah mekanisme infeksi dan mekanisme perkembangan penyakit. Infeksi merupakan invasi inang oleh mikroba yang memperbanyak dan berasosiasi dengan jaringan inang. Infeksi berbeda dengan penyakit (Pleczar, 1986). Bakteri yang sering ditemukan pada kulit adalah Staphylococcus aureus dan Cyanobacteri pada jaringan epitel (Irianto, 2006).
2.3 Teknik Isolasi
Isolasi adalah salah satu cara untuk memisahkan atau memindahkan mikroba tertentu dari lingkungan, sehingga diperoleh kultur murni atau biakkan murni. Kultur murni merupakan kultur yang sel-sel mikrobanya berasal dari
pembelahan dari satu sel tunggal. Beberapa cara yang
dilakukan untuk mengisolasi mikrooraganisme yaitu goresan (streak plate), taburan/tuang (pour plate), sebar (spread plate), pengenceran (dilution plate) serta micromanipulator (Pleczar, 1986).
2.4 Teknik aseptis
Proses tanpa kontaminasi untuk menjamin preparasi bebas dari mikroba kontaminan, teknik aseptis digunakan sepanjang percobaan berlangsung, baik alat, bahan, lingkungan sekitar maupun praktikan (Anton, 2008).
III. Teori Dasar Bakteri merupakan salah satu makhluk hidup yang jumlahnya banyak
disekitar kita. Bakteri pun berada di mana-mana. Di tempat yang paling dekat dengan kita pun juga terdapat bakteri contohnya saja tas, buku, pakaian, dan banyak hal lainnya. Maka dari itu bakteri merupakan penyebab penyakit yang cukup sering terjadi. Karena banyaknya manusia yang mengabaikan penyakit tersebut karena terkadang gejala awal yang diberikan ada gelaja awal yang biasa saja. Maka
dari itu alangkah baiknya jika kita masyarakat dapat
mengetahui bagaimana cara bakteri itu menginfeksi dan gejala-gejala apa yang akan dberikannya (Lay dan Sugoyo, 1992). Banyaknya manusia yang mulai tidak begitu peduli dengan gejala awal terjangkitnya bakteri salah satunya adalah pada saluran pencernaan. Saluran pencernaan adalah saluran yang sangat berperan dalam tubuh. Jika saluran pencernaan terganggu akan cukup mengganggu aktivitas tubuh saat itu. Tapi banyak masyarakat yang tidak peduli dengan penyakit yang ditimbulkan. Misalnya saja penyakit yang dapat ditimbulkan oleh bakteri ada diare, gejala awalnya ada kondisi perut yang tidak enak gejala awalnya cukup biasa tetapi jika terlalu didiamkan akan membuat kondisi itu menjadi akut dan fatal. Maka dari itu, bakteri merupakan penyebab penyakit yang cukup banyak pada saat ini (Wheller dan Volk, 1990). Pada dasarnya dari seluruh mikroorganisme yang ada di alam, hanya sebagian kecil saja yang merupakan patogen. Patogen adalah organism atau mikroorganisme Kemampuan
yang
menyebabkan
penyakit
pada
organism
lain.
pathogen untuk menyebabkan penyakit disebut dengan
patogenisitas. Dan patogenesis disini adalah mekanisme infeksi dan mekanisme perkembangan penyakit. Infeksi adalah invasi inang oleh mikroba
yang memperbanyak dan berasosiasi dengan jaringan inang. Infeksi berbeda dengan penyakit. Sebagaimana kita ketahui sebelumnya mikroorganisme adalah organisme hidup yang berukuran mikroskopis sehingga tidak dapat dilihat dengan mata telanjang. Mikroorganisme dapat ditemukan disemua tempat yang memungkinkan terjadinya kehidupan, disegala lingkungan hidup manusia. Mereka ada di dalam tanah, di lingkungan akuatik, dan atmosfer ( udara ) serta makanan, dan karena beberapa hal mikroorganisme tersebut dapat masuk secara alami ke dalam tubuh manusia, tinggal menetap dalam tubuh manusia atau hanya bertempat tinggal sementara. Mikroorganisme ini dapat menguntungkan inangnya tetapi dalam kondisi tertentu dapat juga menimbulkan penyakit (Lay dan Sugoyo, 1992). Bakteri Patogen adalah materi atau organisme yang dapat menyebabkan penyakit pada inang misalnya bakteri. Bakteri dapat merusak sistem pertahanan inang dimulai dari permukaan kulit, saluran pencernaan, saluran respirasi, saluran
urogenitalia. Sedangkan Patogenesis sendiri
mekanisme infeksi dan
adalah
mekanisme perkembangan penyakit. Infeksi
merupakan invasi inang oleh mikroba yang memperbanyak dan berasosiasi dengan jaringan inang. Infeksi berbeda dengan penyakit (Wheller dan Volk, 1990). Kapasitas bakteri menyebabkan penyakit tergantung pada patogenitasnya. Dengan kriteria ini, bakteri dikelompokan menjadi 3, yaitu agen penyebab penyakit, patogen oportunistik, nonpatogen. Agen penyebab penyakit adalah bakteri patogen yang menyebabkan suatu penyakit (Salmonella spp.). Patogen oportunistik adalah bakteri yang berkemampuan sebagai patogen ketika mekanisme pertahanan inang diperlemah (contoh E. coli menginfeksi saluran urin ketika sistem pertahanan inang dikompromikan (diperlemah). Bakteri nonpatogen adalah bakteri yang tidak pernah menjadi
patogen. Namun
bakteri nonpatogen dapat menjadi patogen karena kemampuan
adaptasi
terhadap efek mematikan terapi modern seperti kemoterapi, imunoterapi, dan mekanisme resistensi. Bakteri tanah Serratia marcescens yang semula nonpatogen, berubah menjadi patogen yang menyebabkan pneumonia, infeksi
saluran urin, dan bakteremia pada inang terkompromi (Wheller dan Volk, 1990). Bakteri Non Patogen merupakan bakteri yang terdapat di dalam tubuh inang tetapi
tidak menimbulkan gangguan yang berarti. Contoh : Fasiola
gigantea itu patogen
terhadap sapi tetapi bersifat non-patogen terhadap
kambing dan domba (Wheller dan Volk, 1990). Dalam kulit terdapat beberapa bakteri, diantaranya adalah: 1. Streptococcus pyogenes Jenis bakteri ini biasanya menjajah daerah kulit dan tenggorokan tubuh. Bakteri ini menghasilkan racun yang merusak sel-sel tubuh (Kimball, 1983). 2. Propionibacterium acnes Bakteri ini berkembang biak di permukaan yang berminyak di kulit dan folikel rambut. Bakteri ini berkontribusi pada jerawat dan mereka berkembang biak karena produksi minyak yang berlebih serta pori-pori tersumbat (Kimball, 1983). 3. Corynebacterium Bakteri diphteriae menghasilkan racun yang menyebabkan penyakit difteri. Difteri adalah infeksi yang biasanya mempengaruhi tenggorokan dan selaput lendir hidung, biasanya ditandai dengan luka pada kulit yang kemudian berkembang sebagai bakteri yang menjajah kulit (Kimball, 1983). 4. Staphylococcus epidermidis Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri yang membentuk biofilm tebal (zat berlendir yang melindungi bakteri dari antibiotic, bahan kimia, dan zat atau kondisi lain yang berbahaya) penghalang yang dapat menempel pada permukaan polimer (Kimball, 1983). 5. Staphylococcus aureus Bakteri ini adalah jenis umum dari bakteri kulit yang dapat ditemukan di daerah
kulit,
seperti
rongga
hidung
dan
saluran
pernapasan.
Staphylococcus aureus biasanya menular melalui kontak fisik dan akan menembus kulit yang luka sehingga menyebabkan infeksi (Kimball, 1983).
Dan ada beberapa contoh sediaan topical untuk mengatasi bakteri pathogen pada tubuh manusia, diantaranya adalah 1.
Eritromisin Eritromisin berikatan dengan ribosom 50S bakteri dan menghalangi translokasi molekul peptidil-tRNA dari akseptor ke pihak donor, bersamaan dengan pembentukan rantai polipepetida dan menghambat sintesis protein. Eritromisin juga memiliki efek anti-inflamasi yang membuatnya memiliki kegunaan khusus dalam pengobatan akne (Bonner, 2008).
2.
Klindamisin Klindamisin adalah antibiotika linkosamid semisintetik yang diturunkann dari
linkomisin.
Mekanisme
kerja
antibiotika
ini
serupa
dengan
eritromisin, dengan mengikat ribosom 50S dan menekan sintesis protein bakteri. Efek samping berupa kolitis pseudomembran jarang dilaporkan pada pemakaian klindamisin secara topical (Bonner, 2008). 3.
Asam Azelaik Asam Azelaik adalah suatu asam dikarboksilik yang ditemukan pada makanan (sereal whole-grain dan hasil hewan). Mekanisme kerja obat ini adalah menormalisasi proses keratinisasi (menurunkan ketebalan stratum korneum, menurunkan jumlah dan ukuran granul keratohialin, dan menurunkan jumlah filagrin (Bonner, 2008).
4.
Mupirosin Mupirosin, yang dahulu dikenal sebagai asam pseudomonik A adalah antibiotika yang diturunkan dari Pseudomonas fluorescens. Obat ini secara reversibel mengikat sintetase isoleusil-tRNA dan menghambat sintesis protein bakteri. Aktifitas mupirosin terbatas terhadap bakteri gram positif, khususnya staphylococcus dan streptococcus (Bonner, 2008).
5.
Basitrasin
Basitrasin topikal efektif untuk pengobatan infeksi bakteri superfisial pada kulit seperti impetigo, furunkolosis, dan pioderma. Obat ini juga sering dikombinasikan dengan polimiksin B dan neomisin sebagai salep antibiotika tripel yang dipakai beberapa kali sehari untuk pengobatan dermatitis atopi, numularis, atau stasis yang disertai dengan infeksi sekunder (Bonner, 2008).
IV. Alat dan Bahan 4.1 Alat
1. Cawan petri 2. Cottonbud steril 3. Erlenmeyer 4. Korek api 5. Pembakar spiritus
4.2 Bahan
1. NaCl fisisologis 2. Media agar darah
4.3 Gambar Alat
Cawan petri
Cottonbud steril
Erlenmeyer
Korek api
Pembakar spiritus
V. Prosedur
Disiapkan cottonbud steril kemudian dilakukan swap pada bagian telapak kaki dan dicelupkan pada labu erlenmeyer yang berisi Na Fisiologis 0,85 %. Selanjutnya homogenkan dengan cara diaduk dengan cottonbud steril tersebut. Setelah homogeny diambil suspensi bakteri kulit tadi dengan menggunakan cottonbud steril tadi dan menggoreskannya pada media agar darah dengan metode gores zig – zag kemudian diinkubasi selama 18-24 jam.
VI. Data Pengamatan
No 1
Perlakuan
Hasil
Disiapkan alat bahan yang akan
Tersedia alat bahan yang akan
digunakan dalam percobaan kali
digunakan
ini 2
Dinyalakan lampu spirtus karena dalam percobaan ini haruus
Lampu spirtus siap digunakan
dilakukan dengan aseptis 3
Cotton bud steril dioleskan pada
Diperoleh hasil dari sweep
bagian telapak kaki (deteksi
bakteri
bakteri pathogen kulit) 4
Dimasukan kedalam Erlenmeyer
Diperoleh larutan bakteri
NaCl Fisiologi 5
6
7
Digoreskan secara zigzag
Diperoleh hasil dari goresan
kedalam media agar darah
secara zigzag
Diinkubasi pada inkubator
Diperoleh hasil dari goresan
selama ± 24 jam
bakteri
Dilihat hasil inkubasi
Terjadi hemolisis
Hasil Inkubasi
UJI
KONTROL
Terjadi Hemolisis Pada Media Agar Darah Uji
VII. Pembahasan
Pada praktikum ini bertujuan untuk mengetahui teknik isolasi bakteri pada kulit dan mengetahui keberadaan bakteri patogen pada kulit. Isolasi bakteri pada kulit adalah mengambil mikroorganisme yang terdapat pada kulit dan menumbuhkannya dalam suatu medium buatan. Prinsip dari isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis mikroba dengan mikroba lainnya yang
berasal dari campuran bermacam-macam mikroba. Hal ini dapat dilakukan dengan menumbuhkannya dalam media padat sel-sel mikroba akan membentuk suatu koloni sel yang tetap pada tempatnya. Isolasi bakteri atau biakan yang terdiri dari satu jenis mikroorganisme (bakteri) dikenal sebagai biakan murni atau biakan aksenik. Biakan yang berisi lebih dari satu macam mikroorganisme (bakteri) dikenal sebagai biakan campuran, jika hanya terdiri dari dua jenis mikroorganisme, yang dengan sengaja dipelihara satu sama lain dalam asosiasi, dikenal sebagai biakan dua-jenis. Metode yang digunakan dalam praktikum kali ini adalah metode gores atau streak plate menggunakan kapas yang terdapat sampel bakteri dan menggoreskannya ke permukaan media pertumbuhan dengan pola tertentu dengan harapan pada ujung goresan. Media pertumbuhan yang digunakan adalah agar darah . Agar darah digunakan sebagai media pertumbuhan bertujuan untuk isolasi dan pertumbuhan mikroorganisme,terutama yang phatogen dan menetapkan bentuk hemolisa dari bakteri-bakteri tersebut. Prinsip kerja media
kultur ini kaya nutrient yang menyediakan kondisi
pertumbuhan yang optimal untuk semua mikroorganisme yang relefan Ph 6,8 menstabilkan sel darah merah dan menyokong bentuk zona hemolisa yang jelas. Darah kambing yang di defibrinasi yang segar adalah yang paling cocok untuk menentukan bentuk hemolisis.
Hemolisis (atau haemolysis dalam
bahasa Inggris) adalah kerusakan sel darah merah. Dalam dunia mikrobiologi hemolisis digunakan untuk mengklasifikasikan mikroorganisme tertentu, dengan cara mengamati kemampuan koloni bakteri untuk menginduksi hemolisis bila ditanam pada agar darah (blod agar).. Sebuah zat yang menyebabkan hemolisis adalah hemolisin. Prosedur pertama adalah menentukan lokasi yang akan diperiksa. Lokais yang diperiksa adalah telapak kaki. Melakukan swab pada bagian tersebut menggunakan kapas steril yang terdapat dada ujung lidik. Dimasukkkan kapas tadi ke dalam tabung yang berisi Na Fisiologis.
Kemudian
dihomogenkan dan digoreskan pada media agar darah dengan metode gores zig – zag lalu menginkubasi selama 18-24 jam. pada suhu 37 C supaya
bakteri dapat tumbuh secara optimal. Pengaturan suhu dijaga agar tetap pada suhu 37 C
karena pada suhu tersebut merupakan suhu optimum bakteri
untuk tumbuh . Pada saat inkubasi, cawan petri tidak boleh dibalik karena ditakutkan sampel bakteri yang ada di dalamnya bisa tumpah sehingga tidak terdifusi sempurna pada daerah sekitarnya. Hasil yang didapat setelah dilakukan inkubasi selama 1 hari didapat pertumbuhan bakteri yang banyak. Kaki termasuk salah satu bagian paling bau pada tubuh manusia sehingga dapat membuat bagian kaki mengalami bau karena memang ada sekitar 1 triliun bakteri yang bersarang di kaki dan ditambahkan
dengan
keringat
yang
keluar
berlebihan
saat
orang
menggunakan alas kaki. Pada kaki yang berkeringat dapat menyebabkan bakteri tumbuh dengan cepat karena lingkungan yang lembab merupakan tempat yang optimal untuk pertumbuhan bakteri. Dari hasil pengamatan didapat bakteri yang dapat menghemolisis agar darah sebagai media. Hal ini dapat diamati dari zona bening yang yang muncul disekitar koloni bakteri. Bakteri yang dapat menghemolisis agar darah disebut beta hemolisis yang merupakan lisis lengkap sel darah merah dan hemoglobin. Darah secara lengkap digunakan oleh mikroba. Media yang ada koloninya menjadi tidak berwarna Bakteri hemolitik beta menghasilkan zona bening di sekitar koloni hemolisis mereka. Mereka menghasilkan extotoxin yang radial berdifusi keluar dari koloni (atau koloni) menyebabkan kerusakan lengkap dari sel darah merah dalam denaturasi menengah dan lengkap hemoglobin dalam sel untuk produk berwarna. Ini menyebabkan zona bening hemolisis untuk membentuk sekitar koloni-koloni berkembang. Tidak ada puing-puing selular akan ditemukan di sekitar cells. eksotoksin hemolyzed disebut hemolisin beta yang menyebabkan hemolisis beta terjadi dicawan agar darah. Selain ditemukan bakteri hemolysis beta, didapatkan juga bakteri hemolysis lain yaitu alfa dan gamma. Ini dapat pula dilihat dari kemampuannya dalam menghemolisis dengan cara kemampuan membeningkan daerah agar darah pertumbuhan. Keberadaan bakteri-bateri tersebut bisa disebabkan karena kelembaban pada kaki sehingga banyak bakteri yang tumbuh di sekitar daerah
kaki dan juga kaki merupakan pijakan yang sering bersentuhan dengan tanah dan alas kaki lainnya yang dapat menyebabkan banyak masalah yang timbul pada bagian kaki.
VIII. Kesimpulan
1. Untuk mengetahui bakteri pada kulit dapat dilakukan dengan teknik isolasi dengan media pertumbuhan cawan agar darah metode gores. Ini digunakan untuk mengetahui jenis bakteri hemolysis pada kulit. 2. Untuk mengetahui keberadaan bakteri pathogen yang terdapat pada kulit (bagian telapak kaki) dapat diamati dengan cara melihat daerah bening atau zona bening yang muncul disekitar goresan pertumbuhan bakteri pada cawan agar darah. Hemolysis alfa jika terdapat zona berwarna hijau, hemolysis beta jika terdapat zona bening disekitar bakteri, dan hemolysis gamma dapat diketahui dengan tidak adanya zona bening yang artinya bakteri tersebut tidak menyebabkan lisis pada darah di manusia. Tipe yang dapat berbahaya pada darah manusia adalah tipe beta hemolysis.
DAFTAR PUSTAKA
Anton, W. 2008. Mikrobiologi Umum. Malang : Universitas Brawijaya. Bonner M, Benson P, James W. 2008. Topical Antibiotics. Fitzpatrick’s Dermatology in general medicine, 7th ed. New York: McGraw-Hill. Irianto, K. 2006. Mikrobiologi: Menguak Dunia Mikroorganisme Jilid 2. Bandung : CV. Yrama Widya. Kimball, W John.1983. Biologi. Bogor: Pernerbit Erlangga. Lay, Bibiana. W, dan Hastowo Sugoyo 1992. Mikrobiologi. Jakarta : CV Rajawali. Pelczar, J M dan Chan E C S. 2008. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta : UIPress. Sloane, ethel. 2003. Anatomi dan Fisiologi untuk Pemula. Jakarta : EGC. Wheller dan Volk. 1990. Mikrobiologi Dasar Edisi Kelima Jilid 2. Jakarta : P.T. Gelora Aksara Pratama.
