LABORATORIO N° 3 COMPUESTOS NITROGENADOS NO PROTEICOS EN 24 HORAS
ANDREA CECILIA ALVAREZ GRANADOS 09171046
UNIVERSIDAD DE SANTANDER BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CUCUTA-2013
LABORATORIO N° 3 COMPUESTOS NITROGENADOS NO PROTEICOS EN 24 HORAS LABORATORIO N° 3 COMPUESTOS NITROGENADOS NO PROTEICOS EN 24 HORAS 1. Realice un glosario de los términos más importantes encontrados en el estudio de los Compuestos Nitrogenados no Proteicos ò Intermediarios metabólicos.
R/:
NITROGENO: es un elemento químico, de número atómico 7, símbolo N y que en condiciones normales forma un gas diatómico (nitrógeno diatómico o molecular) que constituye del orden del 78% del aire atmosférico. En ocasiones es llamado ázoe —antiguamente se usó también Az como símbolo del nitrógeno. NITROGENO UREICO: es la cantidad de nitrógeno circulando en forma de urea en el torrente sanguíneo. La urea es una sustancia secretada a nivel del hígado, producto del metabolismo proteico, a su vez, es eliminada a través de los riñones UREA: La urea es un compuesto químico cristalino e incoloro; de fórmula CO (NH2)2. Se encuentra abundantemente en la orina y en la materia fecal. Es el principal producto terminal del metabolismo de proteínas en el hombre y en los demás mamíferos. La orina humana contiene unos 20g por litro, y un adulto elimina de 25 a 39g diariamente. AMONIACO: El amoníaco (NH4+) es producido por células que se encuentran en todo el cuerpo, especialmente en los intestinos, hígado y los riñones. En los riñones, el NH4+ juega un papel menor en el equilibrio ácido-básico, pero por lo demás es un residuo metabólico (principalmente el resultado del metabolismo de proteínas). La mayor parte del amoníaco que el organismo produce es utilizado por el hígado en la producción de urea. Ésta también es un residuo, pero es mucho menos tóxico que el amoníaco. El amoníaco es especialmente tóxico para el cerebro aun en concentraciones 100 veces menor que las concentraciones normales de urea El amoníaco es especialmente tóxico para el cerebro y puede producir confusión, letargo y en algunas ocasiones coma. AMINOACIDO: Un aminoácido es una molécula orgánica con un grupo amino (NH2) y un grupo carboxilo (-COOH). Los aminoácidos más frecuentes y de mayor interés son aquellos que forman parte de las proteínas. Dos aminoácidos se combinan en una reacción de condensación entre el grupo amino de uno y el carboxilo del otro, liberándose una molécula de agua y formando un enlace amida que se denomina enlace peptídico; estos dos "residuos" de aminoácido forman un dipéptido. Si se une un tercer aminoácido se forma un tripéptido y así,
sucesivamente, hasta formar un polipéptido. Esta reacción tiene lugar de manera natural dentro de las células, en los ribosomas. PROTEINAS: Las proteínas son moléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos.as proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y son las biomoléculas más versátiles y más diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan: Estructural. Esta es la función más importante de una proteína (Ej: colágeno),Inmunológica (anticuerpos),Enzimática (Ej: sacarasa y pepsina),Contráctil (actina y miosina), Homeostática: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actúan como un tampón químico),Transducción de señales (Ej: rodopsina) Y Protectora o defensiva (Ej: trombina y fibrinógeno). TRANSAMINACION: La primera es la reacción entre un aminoácido y un alfacetoácido, en la que el grupo amino es transferido de aquel a éste, con la consiguiente conversión del aminoácido en su correspondiente alfa-cetoácido. Después de la formación de glutamato, éste transfiere su grupo amino directamente a una variedad de alfa-cetoácidos por varias reacciones reversibles de transaminación: donación libremente reversible de un grupo amino alfa de un aminoácido al grupo ceto alfa de un alfa-cetoácido, acompañado de la formación de un nuevo aminoácido y un nuevo alfa-cetoácido. Un ejemplo importante de transaminación se presenta entre glutamato y oxaloacetato, que produce alfacetoglutarato y aspartato, el que puede transferir su grupo amino a otros alfacetoácidos para formar aminoácidos diferentes por reacciones de transaminación. DESAMINACION OXIDATIVA: La desaminación oxidativa es una reacción química que se caracteriza por la ruptura de un grupo amino. Esta reacción es muy importante a nivel biológico en la degradación de los aminoácidos.El glutamato es desaminado oxidativamente en la mitocondria por la glutamato deshidrogenasa, la única enzima conocida que al menos en algunos organismos, puede trabajar con NAD+ o NADP+ como coenzima redox. Se piensa que la oxidación ocurre con la transferencia de un ion hidruro del carbono a del glutamato al NAD(P)+ formando a-iminoglutarato el cual es hidrolizado a a-cetoglutarato y amonio. CICLO DE LA UREA: El ciclo de urea es un proceso en el cual los desechos (amoníaco) son eliminados del cuerpo. Cuando uno consume proteínas, el cuerpo las descompone en aminoácidos. El amoníaco se produce a partir de los aminoácidos sobrantes y se tiene que eliminar del cuerpo.El hígado produce varios químicos (enzimas) que convierten el amoníaco en una forma llamada urea, que el cuerpo puede eliminar en la orina. Si este proceso se altera, los niveles de amoníaco empiezan a elevarse. ACIDO URICO: Es un químico creado cuando el cuerpo descompone sustancias llamadas purinas, las cuales se encuentran en algunos alimentos y bebidas, como el hígado, las anchoas, la caballa, las judías y arvejas secas, y la cerveza. PURINAS: La purina es una base nitrogenada, un compuesto orgánico heterocíclico aromático. La estructura de la purina está compuesta por dos anillos fusionados, uno de seis átomos y el otro de cinco. En total estos anillos presentan cuatro nitrógenos, tres de estos son básicos, ya que tienen el par de electrones sin
compartir en orbitales sp2 en el plano del anillo, el nitrógeno restante no tiene carácter básico ya que el par de electrones no compartidos que posee, es parte del sistema de electrones π del sistema aromático, por lo cual se encuentran
deslocalizados e incapaces de captar un protón. FOSFATO DE CREATINA: Fosfocreatina, también conocido como creatina fosfato o PCr, es una molécula de creatina fosfolizada la cual es una importante almacenadora de energía en el músculo esquelético. Es usado para generar, de forma anaeróbica, ATP del ADP, formando creatina para los 2 o 7 segundos seguidos de un intenso esfuerzo. Hace eso al donar un grupo fosfato, y esta reacción es catalizada por creatinquinasa (la presencia de creatinquinasa en el plasma es un indicador de tejido dañado y es usado en el diagnostico de un infarto del miocardio. Esta reacción es reversible y por tanto actúa como un espacio y amortiguador temporal de la concentración de ATP. En otras palabras, la fosfocreatina es parte de un par de reacciones; la energía que se libera en una reacción es usada para regenerar otro compuesto – siendo el ATP. La fosfocreatina juega un papel particularmente importante en tejidos que tienen una alta y fluctuante demanda de energía como el cerebro o el músculo. CREATINA: La creatina (también denominada α -metilguanido-acético y frecuentemente abreviado en la literatura como Cr) es un ácido orgánico nitrogenado que se encuentra en los músculos y células nerviosas de algunos organismos vivos. Es un derivado de los aminoácidos muy parecido a ellos en cuanto a su estructura molecular. Se sintetiza de forma natural en el hígado, el páncreas y en los riñones a partir de aminoácidos como la arginina, la glicina y la metionina a razón de un gramo de creatina por día.1 Constituye la fuente inmediata y directa para regenerar ATP y proveer de energía a las células musculares. DEPURACION ENDOGENA DE LA CREATININA:El examen de depuración de creatinina compara el nivel de creatinina en la orina con su nivel en la sangre. (La creatinina es un producto de la descomposición de la creatina, que es una parte importante del músculo.) El examen ayuda a suministrar información sobre la función renal. 2. Elaborar un Cuadro diferencias y semejanzas entre estos Compuestos, con referencia a la determinación en el laboratorio, utilidad clínica, y otras.
R/:
COMPUESTOS NITROGENADOS NO PROTEICOS
ACIDO URICO
DETERMINACION EN EL LABORATORIO
UTILIDADCLINICA
OTROS
El ácido úrico es oxidado por la enzima específica uricasa generándose alantoína y H2O2, el cual en una reacción mediada por la enzima peroxidasa (POD), reacciona con el ácido 3,5-Dicloro-2HidroxiBencensulfónico y 4-AAP produciéndose un compuesto coloreado con un máximo de absorción a 505nm., en cantidad proporcional a la cantidad de ácido úrico presente en la m uestra.
Este examen se puede hacer para diagnosticar la causa de cálculos renales. También se puede hacer para vigilar a personas con gota, ya que muchos de estos pacientes desarrollan cálculos renales por ácido úrico.
Los valores normales van desde 250 a 750 miligramos por 24 horas.
Este examen se realiza para ver qué tan bien funcionan los riñones. La creatinina es eliminada del cuerpo completamente por los riñones. Si la función renal es anormal, los niveles de creatinina se incrementarán en la sangre, debido a que se elimina menos creatinina a través de la orina.. El examen de nitrógeno ureico en sangre (BUN) con frecuencia se hace para evaluar la función renal.
Un resultado normal es de 0.7 a 1.3 mg/dL para los hombres y de 0.6 a 1.1 mg/dL para las mujeres.
Se puede analizar en sangre y orina de 24 H.
CREATININA
La reacción química de Jaffé no es específica para la creatinina. También reacciona principalmente con las proteínas, bilirrubina y hemoglobina. Es por esta razón que la muestra debe ser desproteinizada al mismo tiempo que se diluye. Suero desproteinizado + Ácido Pícrico Picrato de creatinina (formador de picrato) (cromógeno naranja a λ= 50
Se hace en sangre y orina para hacer la depuración endógena de la creatinina.
NITROGENO UREICO (BUN)
Basado en el siguiente esquema reaccionante: Urease
Usted no debe comer ni beber nada durante cuatro horas antes del examen, a menos que le hayan indicado algo diferente. El médico también puede pedirle que deje de tomar cualquier fármaco que pueda afectar los resultados del examen, pero NUNCA suspenda ningún medicamento sin consultarlo con él.
Las mujeres generalmente tienen niveles de creatinina más bajos que los hombres, debido a que ellas normalmente tienen menor masa muscular.
El resultado normal generalmente es de 6 a 20 mg/dL Una elevación de la concentración sérica de urea, se interpreta generalmente como una posible disfunción renal. Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valores séricos de urea se encuentran íntimamente relacionados con la dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier alteración en estas variables se traducirá en un cambio de la concentración de urea en suero.
3. Elabore un resumen que evidencie su conocimiento acerca del tema en general.
R/: ACIDO URICO
El ácido úrico es un compuesto orgánico de carbono, nitrógeno, oxígeno e hidrógeno. Es un producto de desecho del metabolismo de nitrógeno en el cuerpo humano (el producto de desecho principal es la urea), y se encuentra en la orina en pequeñas cantidades. En algunos animales, como aves, reptiles y muchos artrópodos, es el principal producto de desecho, y se expulsa con las heces; los animales que excretan mayoritariamente ácido úrico se denominan uricotélicos. En la sangre humana, la concentración de ácido úrico comprendida entre 2,5 a 6 para la mujer y hasta 7,2 para el hombre mg/dl es considerada normal por la Asociación Médica Americana, aunque se pueden encontrar niveles más bajos en los vegetarianos.
3. Elabore un resumen que evidencie su conocimiento acerca del tema en general.
R/: ACIDO URICO
El ácido úrico es un compuesto orgánico de carbono, nitrógeno, oxígeno e hidrógeno. Es un producto de desecho del metabolismo de nitrógeno en el cuerpo humano (el producto de desecho principal es la urea), y se encuentra en la orina en pequeñas cantidades. En algunos animales, como aves, reptiles y muchos artrópodos, es el principal producto de desecho, y se expulsa con las heces; los animales que excretan mayoritariamente ácido úrico se denominan uricotélicos. En la sangre humana, la concentración de ácido úrico comprendida entre 2,5 a 6 para la mujer y hasta 7,2 para el hombre mg/dl es considerada normal por la Asociación Médica Americana, aunque se pueden encontrar niveles más bajos en los vegetarianos. La gota en el ser humano está asociada con niveles anormales de ácido úrico en el sistema. La saturación de ácido úrico en la sangre humana puede dar lugar a un tipo de cálculos renales (litiasis) cuando el ácido cristaliza en el riñón. Un porcentaje considerable de enfermos de gota llegan a tener cálculos renales de tipo úrico. El aumento de los niveles de ácido úrico en la sangre no sólo puede estar relacionado con la gota, sino que puede ser simplemente una hiperuricemia, que presenta algunos de los síntomas anteriores o puede ser asintomática. Sin embargo cuanto mayor es el aumento de ácido úrico en sangre mayores son las posibilidades de padecer afecciones renales, artríticas, etc. CREATININA
La creatinina (anhídrido de la creatina) es uncompuesto orgánicode desecho, generado a partir de ladegradación de lacreatina(que es un nutriente útil para losmúsculos). Es producida por el cuerpo enuna tasa muy constante (dependiendo de la masa y función muscular), normalmente filtrada por losriñonesy excretada en laorina La Creatinina es un producto de desecho que se forma en el músculo por la degradación de la fosfo-creatina, en cantidad proporcional a la masa y función muscular. La Creatinina es eliminada delorganismo por vía renal, siendo retirada del plasma por filtración glomerular. Su medición es útil en eldiagnóstico de diversas nefropatías, y su control permanente es de gran utilidad en aquellos pacientesque requieren de diálisis. La DEPURACION ENDOGENA DE LA CREATININA compara el nivel de creatinina en la orina con su nivel en la sangre.El examen ayuda a suministrar información sobre la función renal.
Esta prueba se utiliza para valorar la función renal en individuos debilitados, para vigilar larespuesta al tratamiento y la progresión de muchas enfermedades renales para ajustar la dosis demedicamentos Los estadíos tempranos de la enfermedad renal crónica son silenciosos, y solamente pueden ser detectados por los exámenes de laboratorio. La evaluación de la enfermedad renal crónica depende delnivel actual de la función renal. La velocidad de filtración glomerular es considerada la prueba standardde oro para identificar el nivel de función renal tanto en individuos sanos como afectados LA DEPURACION DE CREATININA DISMINUYE EN: •Alteraciones de la función renal, enfermedades renales intrínsecas, glomerulonefritis,
píelonefritis, síndrome nefrótico, disfunción tubular aguda, amiloidosis. •Choque •Hemorragia •Insuficiencia cardiaca congestiva •Insuficiencia hepática
LA DEPURACION DE CREATININA SE LEVA EN: •Gasto cardiaco elevado •Embarazo •Quemaduras •Intoxicación por monóxido de carbono
LA CREATININA URIANRIA SE LEVA EN: •Acromegalia •Gigantismo •Diabetes sacarina •Hipotiroidismo
LA CREATININA URIANRIA DISMINUYE EN: •Hipertiroidismo •Anemia •Distrofia muscular •Poliomiositis, atrofia neurogénica •Enfermedad vascular inflamatoria muscular • Nefropatia avanzada, estenosis renal •Leucemia
NITROGENO UREICO
El nitrógeno ureico mide la cantidad de nitrógeno contenido en la urea. La urea es un producto de deshecho principalmente del metabolismo de las proteínas. La urea, que es formada en el hígado, es llevada por la sangre a los riñones quienes la expulsan en la orina. Por esta razón la medición del nitrógeno ureico se usa para valorar el funcionamiento de los riñones. Si por algún motivo los riñones no son capaces de excretar, el nitrógeno ureico comienza a acumularse en la sangre (sus niveles aumentan). El nitrógeno ureico, a diferencia de la creatinina, si es influenciado por varios factores. Problemas cardíacos, la deshidratación y una dieta con alto contenido de proteínas pueden elevar falsamente el resultado de la medición del nitrógeno ureico. No obstante, el nitrógeno ureico tiene una ventaja: puede ayudar a detectar un daño renal más tempranamente que la creatinina. Es por eso que corrientemente, junto al análisis de nitrógeno ureico, se solicita el de creatinina. Ambos en conjunto componen lo que se conoce en el laboratorio clínico como función renal. La causa más común para un BUN elevado, azotemia, es una disminución en la función renal, aunque en ese sentido, los niveles elevados de creatinina son más específicos para evaluar la función renal. Un BUN muy elevado (>60mg/dl) generalmente indica un daño moderado-severo en la función renal. La disminución en la excreción renal de urea, puede deberse a condiciones temporales como deshidratación o shock, o también puede tener un carácter agudo o crónico según la enfermedad de trasfondo. Un BUN elevado con valores normales de la creatinina puede ser el reflejo de una respuesta fisiológica a la disminución del flujo sanguíneo hacia los riñones ( como en aquellos casos en donde existe una baja de presión, deshidratación o falla cardiaca) sin que esto signifique un daño orgánico en los riñones. El aumento en la producción de urea es visto en casos de sangramiento a nivel del tracto gastrointestinal ( por ejemplo en las úlceras). Los compuestos nitrogenados de la sangre son reabsorbidos por el resto del tracto digestivo, llegando al hígado y aumentando la producción de urea. El aumento del metabolismo de las proteínas también puede aumentar la producción de urea, como se puede observar en dietas hiperprotéicas, uso de esteroides, quemados o personas afiebradas Cuando la relación del BUN/CREA es mayor a 20, se debe sospechar que el paciente tiene una falla prerenal, llevando el análisis a las posibles causas de la disminución del flujo hacia los riñones. 4. Describa a través de un diagrama de flujo como se realiza el procedimiento para la determinación en el laboratorio de BUN/UREA, Creatinina y Ácido Úrico.
R/:
DETERMINACION DE BUN/UREA Tomar 5 tubos y marcarlos como Bl, St, Mx,CN y CP.
DETERMINACION BUN 24 HORAS
Se mide el volumen de la orina del paciente y se toman 15 ml en un tubo
Agregar a los 5 tubos 25µl de ureasa Se hace una dilucion a la orina segun la densidad 1005-1015: 1/10
Adicionar 10 µl de Standar al tubo St, 10 µl del suero dle paciente al tubo Mx y 10 µl de CN y 10 µL CP
Mezclar y dejar 5 min a 37°C y ahi mismo agregar 0.5 cc de reactivo 1 y reactivo 2.
1016-1020: 1/20 Mayor 1020: 1/40
Se toman 4 tubos. Bl. St, Mx dil y Bl Mx diluida.
mezclar por inversion y dejar 5 minutos a 37° C y agregar 5 cc de agua destilada. Agregar 25µl de ureasa a los 4 tubos, adicionar 10µl de Standar al tubo St y 10 µl de la Mx orina diluida al tubo Mx diluida.
sacar del baño, mezclar por inversion y dejar 10 min a T° amnb.
Leer a 540 nm contra blanco reactivo por absorbancia y realizar calculos.
Mezclar y dejar 5 min a 37C y agregar 0.5 cc reactivo 1 a todos los tubos; 10 µl de Mx orina diluida al Bl Mx diluida y 0.5 cc reactivo 2
mezclar y dejar 5 min a 37°C y agregar 5 cc de agua destilada.
mezclar y sacar del baño. Dejar 10min a T° amb y leer a 540 nm.
DETERMINACION CREATININA Prepara el picrato alcalino 1 parte de NaOH + 4 parte Acido picrico.
DETERMINACION ACIDO URICO EN 24 H. Mide volumen d eorina se saca una alicuota
Diluir la orina 1/50 diluir orina 1/11 con agua destilada. Tomar 4 cubetas una Bl, St, Mx 1 y Mx 2. Agregar a las 4 un ml del reactivo preparado.
Agregar 100µl del standar al tubo St, 100µl Mx suero y 100µl de la Mx orina diluida.
Tomar 3 tubos Bl, St, Mx orina diluida.
Agregar 1 cc reactivo enzimatico a los 3 tubos, 20 µl St y 20µl de la orina diluida.
Leer a 505 nm por canal.
DETERMINACION ACIDO URICO
Tomar 4 tubos Bl, St,Mx,CN y CP.
Agregar 1 ml de reactivo enzimatico a los 4 tubos,20µl de St, 20µl Mx suero,20µl de CN y 20µl CP.
Mezclar y dejar 5 min a 37°C y leer a 505 nm contra Blanco reactibo por canal.
Mezclar y dejar 5 min a 37°C y leer a 505 nm por canal.
5. Construya un mapa Conceptual que explique claramente la formación de estos Intermediarios metabólicos
R/: FORMACION DE COMPUETSOS NITROGENADOS NO PROTEICOS
Hidrolisis de acidos nucleicos a mononucleotidos
Inicio de la biosintesis: Carbomoil fosfato sintetasa I
Mononucleotidos degradados a nucleotidos
Formacion de citrulina
Desaminacion adenosin
Formacion de argininosuccinato
Nucleosido fosforilasa actua en la inosina
Formacion de arginina y fumarato
hipoxantina y guanina forma xantina
Formacion de ornitina
ACIDO URICO
Fosfato de creatina
Convierte en energia ATP
Degradarse
CREATINA
UREA
6. Elabore un gráfico que explique La Azoemias Prerrenal, Renal y Posrenal
R/:
-causada
AZOEMIA PRERRENAL
por una disminución del volumen expulsivo cardiaco. -La relación BUN: Crea es superior a 20.
I.F.G Disminuido y BUN y CREATININA Aumentado
-Causas
AZOEMIA RENAL
falla glomerulonefritis, tubular aguda, y otros.
renal, necrosis
-La relación BUN: Crea es inferior a 10.
AZOEMIAS
Causada por anormalidades congénitas como reflujo vésicoureteral, bloqueo de los uréteres por cálculos renales. -
AZOEMIA POSRENAL
-La relación BUN:Cr en la azotemia posrenal es normal en el rango de 10-20.
7. Identifique las Patologías que se asocian con el estudio de los Compuestos nitrogenados No Proteicos.
R/: Algunas patologías asociadas a los compuestos nitrogenados no proteicos son:
Insuficiencia renal
Shock
Obstrucción de las vías urinarias
Daño o enfermedad graves en los riñones
Cálculo renal
Insuficiencia cardíaca
Deshidratación
Pérdida excesiva de sangre que causa choque
Gota o afecciones musculares (gigantismo, acromegalia, distrofia muscular y
7. Identifique las Patologías que se asocian con el estudio de los Compuestos nitrogenados No Proteicos.
R/: Algunas patologías asociadas a los compuestos nitrogenados no proteicos son:
Insuficiencia renal
Shock
Obstrucción de las vías urinarias
Daño o enfermedad graves en los riñones
Cálculo renal
Insuficiencia cardíaca
Deshidratación
Pérdida excesiva de sangre que causa choque
Gota o afecciones musculares (gigantismo, acromegalia, distrofia muscular y polimiositis)
Insuficiencia cardíaca congestiva
Niveles excesivos de proteínas en el tubo digestivo
Sangrado gastrointestinal
Hipovolemia
Ataque cardíaco
Glomerulonefritis, pielonefritis y necrosis tubular aguda
8. Elabore un Caso Clínico que permita explicar la Correlación clínico patológica de estos compuestos.
R/: Paciente de 22 años de edad, residente en Cuero y Salado, Atlántida, con embarazo de 25 semanas de gestación y antecedente de nefrectomía, quien fue trasladada al Hospital Escuela por presentar síndrome anémico y cardiopatía hiperquinética secundaria. Fue Manejada con la transfusión de dos unidades de sangre completa previo a su traslado. Fue recibida en Emergencia de Obstetricia del Hospital Materno Infantil, Tegucigalpa. Se le pidieron exámenes de laboratorio los cuales reportaron hematocrito de 21%, hemoglobina de 6.8 g/dL, ácido úrico de 12.1 mg/dL nitrógeno ureico de 95 mg/dL y creatinina de 9.4 mg/dL, por lo que fue presentada al Servicio de Nefrología como un caso de insuficiencia renal quienes indicaron ultrasonido abdominal, el cual reportó hidronefrosis, esplenomegalia, hipertensión portal y nefromegalia. Se le indicó eritropoyetina 4000 unidades subcutánea dos veces por semana, se le colocó catéter de hemodiálisis la cual se realizó tres veces a la semana. La paciente fue manejada de esta forma por nueve semanas logrando disminuir el nitrógeno ureico a 14 mg/dL y la
creatinina hasta 1.2 mg/dL, por lo que se retiró el catéter de hemodiálisis. A las 34 semanas de gestación se le realizó ultrasonido obstétrico que reportó placenta posterior grado II, índice de líquido amniótico normal, peso estimado fetal de 2443 gramos y edad gestacional de 34 semanas por biometría. La evaluación de bienestar fetal se hizo a través de la prueba sin estrés (NST) la cual fue reactiva. En base a estos hallazgos y de acuerdo al plan completar el embarazo a 34 semanas, se decidió interrumpir el mismo por vía vaginal con oxitocina (ya que paciente tenia puntaje de Bishop mayor de seis). No hubo respuesta a la oxitocina por lo que se realizó cesárea y nació producto de 2260 gramos con APGAR de 8 y 8 al primer y quinto minuto respectivamente y 36 semanas por examen físico. Madre e hijo evolucionaron satisfactoriamente y fueron dados de alta a los cinco días postcesarea, la paciente se fue con niveles de nitrógeno ureico de 18 mg/dL y creatinina de 2.6 mg/dL. Actualmente la madre es manejada por el servicio de Nefrología del Hospital Escuela, y se mantiene clínica y laboratorialmente compensada 9. Investigue que innovaciones, avances que se han presentado en el estudio de estos Compuestos.
R/: AVANCES EN LA INVESTIGACIÓN DE LA ENFERMEDAD RENAL CRÓNICA
En los últimos años, a raíz de la publicación de las Guías KDOQI (Kidney Disease Outcome Quality Iniciative), se ha establecido una clasificación y una definición de la enfermedad renal crónica o ERC basándose en unos estadios según el nivel de filtrado glomerular, que se considera que debería aplicarse de igual manera a toda la población. Basándose en estas guías, la prevalencia de ERC es tan elevada, sobre todo en la población anciana, que se ha llegado a considerar una epidemia en los últimos años, de manera que se hace hincapié en el diagnóstico precoz para evitar llegar a la nefropatía terminal, cuando los riñones ya no ejercen las funciones mínimas necesarias para la vida. Sin embargo, la principal herramienta en la que se basa esta clasificación de ERC es el nivel de filtrado glomerular (el volumen de plasma sanguíneo que filtran los glomérulos del riñón) y algunos profesionales consideran que no es un buen indicador, sobre todo porque se tienen en cuenta los mismos criterios para personas jóvenes y ancianas, de manera que podría haber demasiados casos diagnosticados sin motivo. Así lo creen el investigador Manuel Heras y su equipo y por eso han desarrollado un seguimiento de un grupo de 80 pacientes a lo largo de cinco años en un intento de encontrar herramientas diagnósticas más adecuadas. "Nuestra idea es hacer una nueva clasificación de los pacientes (o evitar usar la clasificación actual KDOQI en los ancianos) y no considerar enfermos a personas ancianas que puedan tener un filtrado glomerular disminuido de forma fisiológica y sin presentar otras manifestaciones de enfermedad renal", explica.
De hecho, otros indicadores, como la cantidad de creatinina, una sustancia que se elimina por medio de los riñones, tienen una mejor correlación con otros parámetros de enfermedad renal (hipocalcemia, hiperpotasemia). Según los expertos, cada vez parece más claro que la valoración debe ser individualizada y no a través de fórmulas matemáticas genéricas de estimación del filtrado glomerular. Parámetro importante
Por otra parte, transcurridos los cinco años de este estudio, que se ha llevado a cabo con pacientes que tenían una media de edad de 83 años, los científicos han relacionado otro parámetro con la mortalidad: el ácido úrico (AU), hasta el punto de que consideran que puede ser un buen marcador pronóstico en esta patología. De los 80 pacientes, que habían sido seleccionados en las consultas de geriatría y nefrología, 39 sobrevivieron pasado el lustro y 41 habían fallecido. ―Los datos indican que los que tenían mayores niveles de ácido úrico presenta ron mayor mortalidad‖, comenta.
Sin embargo, esta correlación plantea una duda: los investigadores no saben si el ácido úrico en sí mismo es tóxico para el riñón y provoca un menor nivel de filtración glomerular o si, por el contrario, su incremento en sangre es la consecuencia de la isquemia renal. En cualquier caso, parece que el AU puede ser un marcador de mortalidad significativo. Para progresar en esta línea de investigación, se plantean estudios prospectivos, tanto en población general como en enfermos con insuficiencia renal a través de medidas que tratarían de disminuir los niveles de ácido úrico. Un aspecto importante es que este elemento también parece ser un factor de riesgo cardiovascular y, de hecho, entre los pacientes con insuficiencia cardiaca, el AU era significativamente mayor. Asimismo, quienes tenían un mayor nivel de ácido úrico en el periodo basal presentaban un filtrado glomerular menor y una mortalidad a cinco años más elevada. Estas investigaciones han sido publicadas recientemente en distintos artículos de la revista científica Nefrología. 10. Investigue y elabore en su cuaderno como realiza la curva para la determinación de proteínas en 24 horas
R/: La curva para la determinación de proteínas de 24 horas en muchas determinaciones se cumple una relación proporcional entre la magnitud o intensidad de color que da una reacción y la cantidad del reactivo que la provoca. Por ejemplo: si la presencia de 10 ug de proteínas en una solución genera la aparición de un color azul pálido cuando es agregada a una mezcla reactiva, la presencia de 20 ug de proteína dará lugar a que la solución se torne azul más oscuro y así sucesivamente.
MÉTODO
Tubo 1: agua destilada 0.5ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 2 a y 2 b: Muestra proteica 0.5ml + Reactivo de biuret 2ml Tubo 3: Solución estándar 0.5 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml
Tubo 4: Solución estándar 1.0 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 5: Solución estándar 2.5 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 6: Solución estándar 5.0 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 7: Solución estándar 7.5 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 8: Solución estándar 10.0 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml
El paso más importante en esta etapa es el agregado del reactivo de Biuret que solo se agrega cuando todos los tubos estén con su disolución lista ya que a partir de que se coloca comienza la reacción, y deben comenzar todas las soluciones al mismo tiempo. Mezclamos y agitamos los tubos durante 10 a 30 segundos en el Vórtex Dejamos incubar los tubos a temperatura ambiente durante 15 minutos y comienza la etapa de la utilización del espectrofotómetro. Para ello tuvimos que elegir 10 cubetas para espectrofotómetro que estuvieran en buen estado, esto es dentro del rango de error permitido de +/- 0,015 absorbancia. Después de esto con nuestra muestra blanco lo calibramos a cero para comenzar con nuestro último paso práctico que corresponde a la lectura de la absorbancia. Llenamos las 10 cubetas elegidas con las respectivas soluciones de los tubos kahan hasta ¾ de su capacidad total, cuidando de limpiarlas después de haber vaciado el contenido. Luego introducimos cada cubeta en el espectrofotómetro, anotando los datos de absorbancia de cada muestra y a partir de estos datos se construyó una curva de calibración RESULTADOS
Se prepararon seis disoluciones de 500µl, cada una con distinta concentración de BSA, a partir de una solución madre 10mg/ml. Para esto se utilizó la igualdad: Cinicial . Vinicial = Cfinal . Vfinal Donde C = Concentración de la solución (mg/ml) V = Volumen de la solución (µl) Ejemplo para calcular el volumen del tubo nº 1: Cinicial = 10mg/ml (concentración de la solución madre) Vinicial = X Cfinal = 0,5mg/ml (concentración de la solución que se obtendrá después de la dilución) Vfinal = 500µl (volumen de la solución obtenida) Luego, reemplazando los valores en (1) tenemos:10mg/ml . X = 0,5mg/ml . 500µl Multiplicamos la expresión por 1/10mg/ml 1/10mg/ml . (10mg/ml . X ) = (0,5mg/ml . 500µl) . 1/10mg/ml Simplificando llegamos a:
25µl Si el volumen total de la solución es 500µl, necesitaremos 500µl – 25µl = 475µl de agua destilada para completar la dilución.
Luego, usando el espectrofotómetro, se midió la absorbancia del blanco reactivo, de la muestra problema y de los estándares. Se obtuvieron los siguientes resultados:
Se realizaron dos diluciones iguales a partir de la M.P. nº 5, al medir la absorbancia de cada una de estas soluciones problema, se obtuvo 0,180 y 0,195 lo que promedia 0,188. Éste valor será el utilizado para calcular la concentración de la solución. Luego, a partir de la tabla nº 2, se realiza el gráfico de la curva: Gráfico de la curva (realizado en papel milimetrado)
De acuerdo a la ecuación de la recta del Gráfico I, calculamos la concentración de la muestra. y = Valor de la absorbancia de la solución. = 0,188 x = Concentración de la solución en mg/ml Luego: 0,188 = 0,0339. x à x1 = 5,546mg/m
BIBLIOGRAFIA
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