Tecnología del Café
13 de Abril 2015.
Cafeína, y su determinación cromatográfíca Caffeine, and chromatographic determination RESUMEN
La cafeína es una sustancia que se encuentra en ciertas plantas naturales y puede producirse sintéticaente sintéticaente en laboratorio. !e locali"a en cantidades #ariables en las seillas$ las %o&as y los frutos de algunas plantas$ donde act'a coo un pesticida natural que parali"a y ata ciertos insectos que se alientan de las plantas. !e encuentra en el café$ té$ c%ocolate$ yoco$ cacao y$ en bebidas de cola y energéticas. (l café es una de las fuentes de cafeína consuidas con ayor frecuencia aunque los e)pertos recoiendan generalente liitar la ingesta en torno a 300 g al día. La seilla de cafeto contiene un 2* de cafeína. (n 1+,3 se coprob- que un grao diario de cafeína equi#alente a 10 ta"as de café e)press o a 5 de café filtrado por goteo/$ absorbido durante una seana basta para inducir un cuadro carencial o síndroe de abstinencia. ependiendo ependiendo del procesado al que es soetido el café$ se obtiene una ayor o enor cantidad de cafeína. or lo general los cafés con tostado natural o e"cla son los que tienen una ayor cantidad de cafeína$ seguidos de los cafés instantneos. Los que enos cantidad tienen son los cafés naturales o e"clas descafeinados$ seguidos de los cafés instantneos descafeinados que son los que enos tienen de todos. Calle$ !./ La deter deterina inacici-n n de la cafeín cafeínaa se suele suele lle#a lle#arr a cabo cabo edian ediante te técnic técnicas as de separa separacici-n n coo coo LC LC Croatografía líquida de alta eficiencia/$ C( (lectroforesis capilar/$ TLC Croatografía de capa fina/ o 4C Croatografía de gases/. A continuaci-n se pone en anifiesto inforaci-n relacionada con el concepto de café y cafeína así coo su deterinaci-n y anlisis croatogrfico. Palabras clave: Café, cafeína, análisis cromatográfic cromatográfico. o.
ABSTRACT
Caffeine is a substance found in soe natural plant and can be produced synt%etically in t%e laboratory. s found in #arying quantities in t%e seeds$ lea#es and fruit of soe plants$ 6%ere it acts as a natural pesticide t%at paraly"es and 7ills certain insects t%at feed on plants. t is found in coffee$ tea$ c%ocolate$ yoco$ cacao and in colas and energy. Coffee is one of t%e sources of caffeine consued ore frequently alt%oug% e)perts usually recoend liiting inta7e about 300 g per day. Coffee seed contains 2* caffeine. Already in 1+,3 it 6as found t%at one gra daily of caffeine equi#alent to 10 cups of espresso or coffee filter 5 drip/$ absorbed for a 6ee7 is sufficient to induce a deficiency bo) or 6it%dra6al. epending on t%e processing t%at is sub&ected to coffee$ a larger or saller aount of caffeine is obtained. 8sually natural roasted coffees or i)ture are t%ose 6%ic% %a#e %ig%er aounts of caffeine$ follo6ed by instant coffees. T%e least aount t%ey are natural or decaffeinated coffee blends$ follo6ed decaffeinated instant coffees t%at are t%e less fortunate of all. T%e deterination of caffeine is usually carried out t%roug% separation tec%niques suc% as LC %ig% efficiency liquid c%roatograp%y/$ C( capillary electrop%oresis/$ TLC t%in layer c%roatograp%y/ and 4C gas c%roatograp%y/. 9elo6 is underlined related to t%e concept of coffee and caffeine inforation and its deterination and c%roatograp%ic analysis. Keywords: Coffee, caffeine, chromatographic analysis.
INTRODUCCIÓN
(l prier café instantneo fue in#entado y patentado por el quíico &aponés !atori :ato$ en C%icago$ %acia el a;o 1+00. Algunos a;os después el inglés 4eorge C.
se desarroll- la técnica de tostar y oler los granos de café y el consuo de los productos con cafeína se e)pandi- rpidaente por todo el undo.
El Café soluble (l café soluble se obtiene por e)tracci-n industrial del café tostado y olido$ para fabricar este iportante producto de la industria cafetera$ se prepara un e)tracto e"clando con agua caliente el café tostado y olido de fora tosca. Acto seguido se separa el agua del e)tracto. (l producto se en#asa al #acío en frascos de #idrio o latas que cerradas al #acío conser#arn intactas sus cualidades de aroa y sabor por largos periodos de tiepo. (l ayorente consuo es el de la priera #ariedad? secado o des%idratado. onde seg'n su fabricante o procesador le agrega a"'car y otros copuestos para resaltar alguna característica de su sabor.
ara crear el café instantneo$ se selecciona los granos s adecuados$ se tuestan$ uelen y se infusionan %asta producir un tanque gigante de café tostado y olido recién elaborado. (ntonces e)traeos las partículas del café$ y el líquido restante se e#apora ediante el étodo de secado por congelaci-n o liofili"aci-n$ que es superior$ ya que produce un café de e&or calidad y gusto s sua#e.
Cafeína La cafeína es uno de los principales alcaloides del café cuya f-rula es C@102B, denoinada 1$ 3$ $ trietil =antina$ y participa en la característica del sabor aargo del café y se encuentra en ayor proporci-n en los café de Dobustas.
Propiedades uímicas de la cafeína La cafeína por ser alcaloide del grupo de las )antinas$ concretaente pertenece a la failia de las etil)antinas. Las bases )nticas o p'ricas son alcaloides deri#ados de la purina. Concretaente$ pro#ienen del anillo de la purina que se fora a tra#és de la condensaci-n de una piriidina con un iida"ol. oseen una estructura cristalina y su f-rula olecular es C3,B2. (s soluble en agua y es funci-n directa de la teperatura. A 25 EC se disuel#en 22 g de cafeína en 1 l de agua$ ientras que a @0 EC se diluyen 1@0 gFl y a 100 EC lo %acen G0 gFl. (s uy soluble en agua %ir#iendo en la que cristali"a coo ono%idrato$ ya que #a perdiendo progresi#aente la olécula de agua$ %asta que lo %ace totalente a los 100 EC. La cafeína puede forar cobinaciones estables con sales alcalinas de cidos débiles$ coo el ben"oato y silicato de sodio$ pero su reacci-n con cidos da lugar a copuestos uy inestables. !e descopone fcilente por la acci-n de lcalis calientes y por cloro. Causa una agloeraci-n de finos con las gotitas líquidas que con#ierten los finos en el pol#o grueso.
!a determinación de cafeína (sta %a adquirido uc%a iportancia$ debido a su uso en la industria faracéutica y en la industria de alientosH ya sea coo ingrediente en la elaboraci-n de refrescos y bebidas energéticas o por su presencia en productos coo el té$ el ate$ el cacao y el café. (n todos estos casos$ el control de calidad del paretro cafeína es necesario en los productos que la contienen. or esta ra"-n$ se %an desarrollado nue#os étodos instruentales para su deterinaci-n en di#ersas atrices$ especialente en alientos. ara elegir una técnica de separaci-n de la cafeína$ ades de tener en cuenta los criterios econ-icos y de accesibilidad. Las técnicas analíticas s epleadas en la actualidad pueden englobarse en dos grandes grupos? técnicas de separaci-n y técnicas espectrosc-picas. Las técnicas espectrosc-picas proporcionan$ para cada copuesto anali"ado$ una inforaci-n cople&a$ relacionada con sus características estructurales específicas$ por otro lado las técnicas de separaci-n se utili"an para resol#er los coponentes de una e"cla y la se;al obtenida puede utili"arse con fines analíticos cuantitati#os o cualitati#os.
"étodo Cromatográfico
La croatografía no solo perite la separaci-n de los coponentes de una e"cla$ sino tabién su identificaci-n y cuantificaci-n. (l anlisis cualitati#o est basado en la edida de paretros croatogrficos tiepos y #ol'enes de retenci-n/ ientras que el anlisis cuantitati#o est basado en la edida de alturas o reas de picos croatogrficos que se relacionan con la concentraci-n. La coluna croatogrfica y la fora con la que se dise;a$ constituye el cora"-n de la separaci-n. (l detector$ situado al final de la coluna es el que garanti"a la respuesta de los coponentes que se separan. 8n rasgo característico de la croatografía es la presencia de dos fasesH dispuestas de tal anera que ientras una peranece estacionaria dentro del sistea fase estacionaria/$ la otra se despla"a a lo largo de él fase -#il/. La cla#e de la separaci-n en croatografía es que la #elocidad con la que se ue#e cada sustancia depende de su afinidad relati#a por abas fases equilibrio de distribuci-n/. (sta técnica es uy usada en di#ersos anlisis que se aplican al café$ a continuaci-n se enuncian dos de las practicas reali"adas a ni#el industrial s iportantes. La etodología de croatografía para este anlisis$ es ultiresiduo$ deterina 1, plaguicidas de anera siultnea$ los cuales representan el ayor riesgo y la ayor iportancia en el caso del café$ ellos tienen un principio acti#o y generalente son organofosforados$ organoclorados y piretroides en café #erde. (n el procediiento coo tal se usan tres técnicas croatogrficas$ las cuales son selecti#as$ precisas y e)actas allos Corredor I 4uerrero allas$ 2005/. La elecci-n de la técnica a usar depende del problea a resol#er$ el #oluen de la uestra y su concentraci-n. La croatografía se utili"a en la e)tracci-n con di#ersos fines$ se usa entonces la Croatografía de gases acoplada a un detector selecti#o de asas$ para la e)tracci-n y el anlisis cualitati#o de los #oltiles del aceite de café.
Clasificación de los métodos cromatográficos La croatografía es un étodo de separaci-n y anlisis basado en el uso de una fase estacionaria y una -#il. Los coponentes de una uestra se %acen pasar por una fase estacionaria ediante el flu&o de una fase -#il de anera que las sustancias se distribuyen entre las dos fasesH aquellos solutos cuya relaci-n de distribuci-n sea fa#orable a la fase estacionaria quedan retenidos por ésta$ ientras que los solutos que se encuentran preferenteente en la fase -#il sern los prieros en arrastrar. e esta fora los solutos sern separados en orden creciente a sus coeficientes de distribuci-n con respecto a la fase estacionaria. (l con&unto de técnicas que se #alen de una fase -#il que se despla"a a lo largo del sistea y una fase estacionaria que peranece fi&a reciben el nobre de croatografía.
1. !eg'n el dispositivo utili"ado para conseguir poner en contacto la fase estacionaria y fase -#il? J Croatografía en coluna? Consiste en colunas %uecas de longitud y dietro #ariable en cuyo interior %allaos la fase estacionaria. La fase -#il se %ace pasar por ellas ya sea por gra#edad o aplicaci-n de presi-n. J Croatografía plana? la fase estacionaria se encuentra su&eta por una placa plana o en papel croatografía en capa fina y en papel$ respecti#aente/ y la fase -#il se despla"a por ella ediante capilaridad o influenciada por la gra#edad.
2. !eg'n los estados de las fases iplicadas$ en especial de la fase -#il? J Croatografía de gases? (n este caso la fase -#il es un gas inerte %elio o nitr-geno/ y la fase estacionaria es un s-lido croatografía gasKs-lido/ o un líquido sostenidoM por un s-lido inerte croatografía gasKlíquido/. (ste tipo de croatografía siepre es en coluna$ ya que es la 'nica anera de que la fase -#il gaseosa se antenga fluyendo$ confinada dentro del sistea. La coluna puede estar rellena con la fase estacionaria$ en fora see&ante a la croatografía líquida$ o bien la fase estacionaria puede depositarse sobre las paredes de un tubo uy delgado 0.25 de dietro/ y largo %asta 100/. (ste tipo de colunas se conocen coo colunas capilares y proporcionan la ayor capacidad de separaci-n. J Croatografía de líquidos? La fase -#il es un disol#ente o e"cla de disol#entes y la fase estacionaria un s-lido que interact'a con las sustancias que se desea separar croatografía líquidoKs-lido/$o bien un líquido iniscible con la fase -#il$ depositado en la superficie de un s-lido croatografía líquidoKlíquido/. La croatografía de líquidos siepre la fase -#il es un líquido/ puede reali"arse con diferentes arreglos e)perientales? J Croatografía en coluna$ la fase estacionaria se encuentra rellenando un tuboH en la croatografía en papel$ la fase estacionaria es la soluci-n acuosa contenida en el interior de las celdas foradas por las fibras de la celulosa$ y es por tanto una fora de croatografía líquido K líquidoH en la croatografía en capa fina$ se dispersa sobre una lina de #idrio o aluinio forando un lec%o de espesor unifore. J Croatografía de fluidos supercríticoscualquier sustancia que se %alle en condiciones de presi-n y teperatura superiores a su punto crítico/.
!a cromatografía líuida
J Croatografía de reparto o partici-n? se #ale de una fase estacionaria líquida que fora una película sobre un soporte s-lido. La distribuci-n del soluto #ienen dada por el equilibrio entre la fase estacionaria y -#il. !e utili"a para especies poco polares pero no i-nicas de asa olecular enor de 10, gFol. J Croatografía de adsorci-n o croatografía líquidoKs-lido? el soluto presente en una fase -#il líquida o gaseosa se adsorbe a las partículas s-lidas de la fase estacionaria. La separaci-n de los diferentes solutos se debe al equilibrio entre las fases estacionaria y -#il. !e utili"a para especies no polares$ is-eros estructurales y grupos de copuestos de asa olecular enor de 10, gFol. J Croatografía de intercabio i-nico? Consiste en %acer pasar una fase -#il líquida sobre una fase estacionaria que presenta grupos i-nicos en su superficie de odo que los iones de signo opuesto quedarn retenidos por fuer"as electrostticas. !e utili"a para especies i-nicas de asa olecular enor de 10, gFol. J Croatografía de e)clusi-n por taa;o o croatografía en gel? !e basa en la %abilidad de ateriales de porosidad controlada para separar los coponentes de una e"cla de acuerdo al taa;o y fora de las oléculas. !e utili"a para solutos con asa olecular ayor de 10, gFol. J Croatografía de afinidad? (plea interacciones específicas entre una clase de oléculas de soluto y una segunda olécula unida co#alenteente a la fase estacionaria.
CONCENTRACIÓN
esde el punto de #ista del proceso industrial$ el café soluble se obtiene a partir del e)tracto de café. ara retirar el agua que %ace parte del e)tracto se requieren fundaentalente de procesos industriales. Consiste en reducir el contenido de agua en el e)tracto de café$ típicaente desde un @5* a +0* %asta un 55* a G0* de agua. ay di#ersos sisteas para retirar agua$ y los s utili"ados en la industria son la e#aporaci-n$ reali"ada al #acío para que el agua se e#apore a unos ,5EC. (n este proceso se usan intercabiadores de calor especiales donde se busca conser#ar las propiedades del café$ calentndolo el enor tiepo posible y en fora uy %oogénea. Nederaci-n Bacional de Cafeteros de Colobia$ 2010/ Como producir café soluble sin tener un concentrador? Tal y coo se obser#- en el artículo anterior$ para reali"ar el proceso de concentraci-n en la producci-n del café soluble$ e)isten otras dos operaciones diferentes a la concentraci-n que generalente es reali"ada por e#aporaci-n. Las otras dos operaciones son la Crioconcentraci-n y el uso de tecnología de ebranas. #ecnología de membranas
(sta tecnología est basada en la pereabilidad selecti#a de uno o s coponentes del sustrato líquido a tra#és de una ebrana y gracias a un gradiente de presi-n %idrosttica. (ntre estas tecnologías se encuentran? icrofiltraci-n ON/$ ultrafiltraci-n 8N/$ nanofiltraci-n BN/$ -sosis in#ersa / y electrodilisis (/. (l uso de estas tecnologías en la industria alientaria$ ades de e&orar notableente índices de calidad y producti#idad$ es una %erraienta #aliosa para los planes de producci-n s lipia. Destrepo$ O./ 8sando esta técnica$ se eliina la ayor parte del contenido en sales del agua? 1. (l agua fluye desde una coluna con ba&o contenido en s-lidos disueltos a una coluna con alto contenido en s-lidos disueltos. 2. La presi-n os-tica es la presi-n necesaria para ipedir que el a gua fluya a tra#és de la ebrana$ con el ob&eto de obtener un equilibrio. 3. Aplicando una presi-n superior a la presi-n os-tica$ el agua fluir en sentido in#ersoH el agua fluye desde la coluna con ele#ado contenido en s-lidos disueltos %acia la coluna con ba&o contenido en s-lidos disueltos. Lenntec%$ 2015/.
A continuaci-n un e&eplo de deterinaci-n de Cafeína$ algunos equipos y ateriales iportantes?
$eterminación de cafeína en café normal y descafeinado %método cromatografia &plc' Euipos y "ateriales
Croat-grafo de fase liquida de alta resoluci-n LC Agilent 12G0 copuesto de boba para gradiente con desgasificador en línea $ bande&as para sol#entes$ autouestreador $%orno de colunas $ detector de arreglo de diodos $ detector de flourescencia $ soft6are LC penlab. P Coluna croatogrfíca para LC$ "orba)$ eclipse =9 C1@ ,.G=150$ taa;o de partícula 5 . P 9alan"a digital analítica con precisi-n de 0.0001 g. P Oolino para café #erde DO(D serie DA!. P Oolino para café tostado.
P (quipo para purificaci-n de agua. P (quipo para filtraci-n de #acío. P (sptula P >asos de precipitados de 50 y100 l P Cilindro graduado de 250 y 500 l P (budos de filtraci-n$ #stago corto. P 9alones #oluétricos de 100 l$ y 1 L$ clase$ CNCA certificado por lote/$ fondo plano$ cuello anc%o eserilado y tapa de #idrio. P Qeringas desec%ables de 5 o 10 l. P Niltros ille) de 0.,5 icras tipo durapore. P apel filtro de 150 P ipetas #oluétricas de 0.5 $1$ 2$ 5$ 10$ 20$ y 50 l P >iales de #irio con "ona de escritura de 2 l. P Deacti#os. P Oetanol ++.@ * grado LC P Cafeína patr-n priario para LC. P )ido de agnesio 4rado analítico. P (stndar cafeína pura$ an%ídrida. P Agua$ grado Oilli RS. P Oebranas de filtraci-n de 0.,5 icras. (ariables de Control
P Tiepo de retenci-n. P Café noral y descafeinado LC Agilent 1100/ P Cafeína? inutos 10FK 2 P resi-n )ia en bobas LC Agilent 1100 ,00 bar LC Agilent 12G0 G00 bar P Teperatura del %orno? 25EC P Tiepo de corrida 13 in P Nlu&o ? 1.0 l Fin P >oluen de inyecci-n 10ul P Longitud de onda ? 23FK 2n P Nase -#il 2? Oetanol $ A?9 @0?20 P eso de la uestra 1 K 0.1 g .
Preparación de las curvas
Krepare 5 puntos para cada cur#a de calibraci-n. (l rango de concentraciones recoendado para café noral es de 25 gFL a 500 g FL . KTrasfiera de la soluci-n stoc7 para café noral? 5 L $ 10 L y 50 L en balones aforados de 100 L. K(nrasar a #oluen con agua grado OilliKS. P Las concentraciones finales de las soluciones son de 25 gFL $ 50 gFL $ 100 gFL $ 250gFL y 500 gFL . (l rango de concentraciones recoendado para café descafeinado es de 5 a 100 gFL para cafeína. P Trasfiera de la soluci-n stoc7 para café noral? 5 L $ 10 L 20 l y 50 L en balones aforados de 100L. P (nrasar a #oluen con a gua grado OilliKS. P Las concentraciones finales de las soluciones son de 5 gFL $ 10 gFL $ 20 gFL $ 50 gFL y 100 gFL.
Preparación de la muestra Para café verde
Kese 1 g K 0$1 de café #erde olido en un bea7er o erleneyer de #idrio de 250 l$ y adicione 5g de )ido de agnesio$ coplete con agua ultrapura %asta 100g .Tenga en cuenta el peso total p1/ KCaliente apro)iadaente a +0 EC durante 5 in agitando peri-dicaente. Kde&e enfriar y adicione agua ultrapura %asta recuperar el peso total inicial 1/ y filtre la soluci-n con papel filtro. KNiltre a tra#és de una ebrana de 0$,5 icras o filtro ille" en un #ial y coloque lo en el inyector autotico.
Para café tostado
KOuela la uestra de café tostado. Kese 1 g K 0$1 de café tostado y olido en un bea7er o erleneyer de #idrio de 250 l$ y adicione 5g de )ido de agnesio$ coplete con agua ultrapura %asta 100g .Tenga en cuenta el peso total p1/ KCaliente apro)iadaente a +0 EC durante 5 in agitando periodicaente. Ke&e enfriar y adicione agua ultrapura %asta recuperar el peso total inicial 1/ y filtre la soluci-n con papel filtro. KNiltre a tra#és de una ebrana de 0$,5 icras o filtro ille" en un #ial y coloque lo en el inyector autotico.
Para e)tractos de café
P ese en un bal-n aforado 100 l $ 1g de e)tracto concentrado $ 0 3 graos de e)tracto diluido . P Adicione 15 l de agua ultrapura caliente +0 EC /. Agite y de&e enfriar %asta teperatura abiente y coplete el #oluen a 100 l con agua ultrapura . P Niltre a tra#és de una ebrana de 0$,5 icras o filtro ille" en un #ial y coloque lo en el inyector autotico. ara café soluble . P ese 1g K 0$1 g de café soluble en bal-n aforado 250 l . P Adicione 50 l de agua ultrapura caliente +0 EC /. Agite y de&e enfriar %asta teperatura abiente y coplete el #oluen con agua ultrapura . P Niltre a tra#és de una ebrana de 0$,5 icras o filtro ille" en un #ial y coloque lo en el inyector autotico. E)presión de los resultados
KCroatografía de la separaci-n por la técnica LC de cafeína. KA partir de la construcci-n de las cur#as de calibraci-n en los inter#alos de concentraciones preparadas$ aplique el étodo de los ínios cuadrados a los resultados obtenidos y obtenga los #alores de la pendiente y de los interceptos. K8tilice las ecuaciones de las rectas para calcular la concentraci-n de cafeína e)presadas en gFL . Kel contenido de cafeína en la uestra se e)presa coo porcenta&e en peso gF100g / epleo la siguiente ecuaci-n . <) Uc > 100U c 0$01 1000 s s onde c es la concentraci-n de cafeína obtenida de las cur#as de calibraci-n$ e)presada en gFL. s es el peso de la uestra en graos . > es el #oluen del e)tracto de la uestra$ e)presado en L coo esta #U0$1 L /. KToe coo resultado la edia aritética de dos deterinaciones independientes de la uestra. KLos coeficientes de e#aluaci-n de los resultados en base seca de las dos réplicas de cada uestra de café no deben superar el criterio establecido por las buenas prcticas de laboratorio estndar 4L/$ que dic%o coeficiente debe ser enor o igual a 5*. CONCLUSIONES
La cafeína es el estiulante le#e psicoacti#o s consuido en el undo y se encuentra en bebidas no alco%-licas coo el café$ Aunque s débil que otros estiulantes$ la cafeína puede producir síntoas de into)icaci-n$ tolerancia y abstinencia causados por esta sustancia en algunos indi#iduos. La deterinaci-n de cafeína %a adquirido uc%a iportancia$ debido a su uso en la industria faracéutica y en la industria de alientosH ya sea coo ingrediente en la elaboraci-n de refrescos y bebidas energéticas o por su presencia en productos coo el té$ el ate$ el cacao y el café. (n todos estos casos$ el control de calidad del paretro cafeína es necesario en los productos que la contienen. or esta ra"-n$ se %an desarrollado nue#os étodos instruentales para su deterinaci-n en di#ersas atrices$ especialente en alientos. La etodología analítica epleada para cuantificar la cafeína$ consiste pues en separar por sisteas tradicionales de e)tracci-n líquidoKlíquido el principio acti#o y #alorarla después por técnicas croatogrficas y espectrofotoétricas$ teniendo en cuenta la e)actitud y precisi-n de los étodos epleados. La croatografía no solo perite la separaci-n de los coponentes de una e"cla$ sino tabién su identificaci-n y cuantificaci-n. (l anlisis cualitati#o est basado en la edida de paretros croatogrficos tiepos y #ol'enes de retenci-n/ ientras que el anlisis cuantitati#o est basado en la edida de alturas o reas de picos croatogrficos que se relacionan con la concentraci-n. La coluna croatogrfica y la fora con la que se dise;a$ constituye el cora"-n de la separaci-n. (l detector$ situado al final de la coluna es el que garanti"a la respuesta de los coponentes que se separan. La deterinaci-n de la cafeína se suele lle#ar a cabo ediante técnicas de separaci-n coo LC Croatografía líquida de alta eficiencia/$ C( (lectroforesis capilar/$ TLC Croatografía de capa fina/ o 4C Croatografía de gases/. (stos étodos reali"an la detecci-n ediante técnicas electroquíicas potencio étricas$ conductiétricas$ aperoétricas$ etc./$ -pticas espectrofotoétricas$ fluoriétricas$ etc./ y otras teroquíicas/. La elecci-n de una u otra técnica depende del problea a resol#er$ del #oluen de uestra y de su concentraci-n.
REFERENCIAS
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