BIOSEGURIDAD Y ESTERILIZACION EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA.
2013-2.
BIOSEGURIDAD Y ESTERILIZACION EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA. 1 1
Zambrano, A. 1120104 ; Libreros, C. 112058 1 Ingeniería Agronómica. Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira
RESUMEN La práctica realizada se basó en reconocer las diferentes técnicas que se aplica para realizar una adecuada esterilización de los implementos del laboratorio de microbiología, además de las medidas de bioseguridad que siempre deben ser tomadas para permitir un uso adecuado de los espacios y que permita la seguridad ante los riesgos o peligros latentes cuando se entró en contacto con los utensilios. Con base a lo anterior, la esterilización se pudo realizar por diversas metodologías tales como: calor húmedo, calor seco, filtrado; las cuales se llevaron a cabo por la utilización de equipos como Autoclave y Hornos. La utilización en conjunto de las medidas y técnicas conllevó a una completa eliminación de microorganismos permitiendo la utilización de los instrumentos, seguros que no representa ningún foco de contaminación. Palabras claves:
Bioseguridad, metodologías, esterilización, instrumentos.
INTRODUCCIÓN La bioseguridad hace referencia a medidas preventivas que pretenden disminuir el riesgo de contaminación del área de trabajo y proteger la salud de las personas que laboran e ingresan al laboratorio, las cuales están expuestas a microorganismos patógenos infecciosos para la salud; por esta razón es de vital importancia la esterilización de los materiales a utilizar y el uso adecuado de los mismos. Muchos de los patógenos causantes de enfermedades en las plantas se pueden aislar y cultivar in vitro, razón por la cual se han llevado múltiples investigaciones en reconocimiento y clasificación de estos Fitopatógenos. Cuando se hacen cultivos in vitro se debe tener un campo libre de microorganismos que puedan contaminar los cultivos, por lo cual es tan importante la esterilización y desinfección. El objetivo de la práctica fue conocer los aspectos básicos de bioseguridad y reconocer las metodologías existentes para la esterilización, así como aplicar algunos métodos para
esterilizar medios de cultivo y materiales de laboratorio.
MATERIALES Y METODOS. Se utilizaron 5 cajas de Petri, 5 tubos de ensayo, 5 pipetas de 1mL, 2 Erlenmeyer, papel kraft, algodón, 1 mecheros de bunsen o de alcohol, estufa eléctrica, 2 tubos con solución glucosa, frasco de vidrio de boca ancha, cinta de enmascarar, asas bacteriológicas y micológicas, tijeras, encendedor, isotopos, baja lenguas,1 autoclave, horno de calor húmedo y calor seco.
Se aplicaron los métodos de esterilización para los diferentes materiales a utilizar. Se desinfecto el espacio de trabajo, utilizando alcohol y luego se limpió con una toalla de papel. Se recortó el papel kraft para envolver las cajas de Petri para su respectiva esterilización.
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Se esterilizo las asas micológicas y bacteriológicas, primero desinfectándolas con alcohol y luego sometidas a calentamiento a través del mechero de bunsen o de alcohol. Se introdujeron los isotopos en un tubo que posteriormente se ajustó muy levemente, para luego ser llevado a la autoclave. Las tijeras se introdujeron al frasco de vidrio, e igual procedimiento se hizo con el Erlenmeyer y las asas, las cuales se cubrieron los bordes con el papel kraft.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN. Al someter cada uno de los materiales de laboratorio a su respectivo método de esterilización, se obtuvo la destrucción completa y una posterior inhibición de los microorganismos presentes, obteniendo como resultado materiales completamente desinfectados. Para evitar cualquier tipo de contaminación, se utilizo diferentes técnicas de esterilización que garanticen una completa eliminación de agentes patógenos Presentes en los materiales utilizados en la práctica de laboratorio. Un aspecto importante a tener en cuenta con los microorganismos es conocer la naturaleza de estos para saber cuál es el método que favorece su eliminación; de esa manera se obtienen muestras con alta confiabilidad. La desinfección del espacio de trabajo, se logro eficientemente, aunque cabe recordar que este método no elimina completamente los microorganismos. Las normas básicas de bioseguridad son de vital importancia para la protección del personal de laboratorio. En esta ocasión se empleó principalmente la esterilización para eliminar
condiciones de utilizar el laboratorio, así como los objetos que se utilizaron con mayor frecuencia puedan estar limpios y adecuados para su uso.
CUESTIONARIO 1. Liste al menos tres microorganismos representativos para cada uno de los cuatro niveles de contingencia en los laboratorios de microbiología, mencionando la importancia que representa para su área de formación. R / Nivel 1: Fijación de nitrógeno Rhizobium, descomposición completa de materia orgánica Nitrobacter , la producción de ácido láctico, Lactobacillus Nivel 2: Hepatitis B, Hepatitis A y Salmonella. Microorganismos de riesgo moderado humano y veterinario. Nivel 3: Mycobacterium tuberculosis, virus Brucella, oncogánicos. Microorganismos que pueden causar la muerte o altos riesgos de infección. Nivel 4: Virus Lassa, Machupo, Junín. Microorganismos exóticos y/o altamente peligrosos. Saccharomyces cerevisiae
2. ¿Qué medidas podría tomar usted para verificar la efectividad de la esterilización en autoclave? R/ Con calor húmedo en autoclave tener los objetos a 121ºC durante 20 minutos y a una presión superior a la atmosférica, también se podría realizar con el indicador biológico Bacillus Estearothermophilus si la muestra presenta un cambio de coloración de amarillo a violeta está indicando que la esterilización fue incorrecta. 3. ¿Defina liofilización? R / Es el proceso que remueve el agua y/o solventes de un producto a través de una sublimación y desorpción, en donde las propiedades biológicas o quimias del producto se mantienen de forma intacta. 4. ¿Defina sonicación? R / Consiste en la aplicación de ultrasonidos a
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las estructuras subcelulares e incluso solubilizar complejos proteicos. 5. ¿Qué metodología de esterilización es la adecuada para cada una de las siguientes muestras ambientales? ( I) Medio de cultivo sólidos contaminados con Salmonella sp. (II) Muestras de agua residual domestica, (III) Hisopos utilizados en muestreo de manipuladores de alimentos, (IV) Tejidos de procedencia animal y origen desconocido, (V) suelo, (VI) suelo inoculado con patógenos de plantas y (VII) antibióticos.
R/ (I) (AUTOCLAVADO) (II) (RADIACIONES ULTRAVIOLETA) (III) (CALOR SECO-HORNO) (IV) (AUTOCLAVADO) (V) (CALENTAMIENTO, ADICIÓN DE SUSTANCIAS QUÍMICAS COMO BROMURO DE METILO O LUZ ULTRAVIOLETA) (VI) (AUTOCLAVADO) (VII) (FILTRACIÓN)
BIBLIOGRAFÍA Libros
Madigan, et al. 2004. Biología de los microorganismos. Pearson educación S.A. 234p. Rojas, A. 2011. Conceptos y prácticas de microbiología general. Universidad Nacional de Colombia, sede Palmira. 13 – 22p. Schlegel H.G. 1997. Microbiología general. Edición omega S.A., Barcelona.222. Prats, G. 2005. Microbiología clínica. Edición panamericana S.A. Madrid 219220p.
Pagina web
Organización Mundial de la Salud 2005, Manual de Bioseguridad en el Laboratorio. [En línea]. Ginebra- Suiza. Ediciones de la OMS. [Consultado Agosto, 2012]. Disponible Disponible en internet internet
