LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DAN VIROLOGI PRAKTIKUM VI UJI KEPEKAAN ANTIBIOTIK : PENENTUAN KADAR HAMBAT MINIMAL (KHM) ANTIBIOTIK SECARA DILUSI PADAT
Oleh: Anak Agung Ayu Trisna Diantari
(161200011) (161200011)
A. A. Nila Cahya Putri
(161200012) (161200012)
Angga Mahendra Putra
(161200013)
Ayu Mega Mustika Dewi
(161200014)
Dewa Ketut Kharisma Pratama
(161200015)
A1A Farmasi Klinis Kelompok I Hari, Tanggal Praktikum Praktikum : Rabu, 10 Januari Januari 2018 Dosen Pengampu : I Wayan Martadi Santika, S. Farm., 1 M. Sc., Apt.
PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DAN VIROLOGI PROGRAM STUDI FARMASI KLINIS INSTITUT ILMU KESEHATAN MEDIKA PERSADA BALI DENPASAR 2018
PRAKTIKUM VI UJI KEPEKAAN ANTIBIOTIK: PENENTUAN KADAR HAMBAT MINIMAL (KHM) ANTIBIOTIK SECARA DILUSI PADAT I.
TUJUAN
Menentukan Kadar Hambat Minimal (KHM) dari suatu antibiotik secara dilusi padat. II. TINJAUAN PUSTAKA
Meskipun sejak awal abad 20 antibiotik sebagai agen kemoterapi telah sukses dalam memerangi penyakit infeksi oleh bakteri, namun penyakit infeksi mas ih menjadi penyebab utama kematian di seluruh dunia. Bakteri penyebab infeksi telah mengembangkan perlindungan terhadap senyawa biokimia lingkungan, dan untuk resisten terhadap antibiotic yang berbahaya bagi mereka. Resistensi Resis tensi mikroorganisme pathogen tersebut memberikan me mberikan perlindungan terhadap intervensi kemoterapi antibiotic dan dapat menyebabkan infeksi yang menjadi lebih sulit untuk disembuhkan (Tri Umiana, 2015). Bakteri merupakan mikroba uniseluler. Bakteri umumnya berukuran kecil dengan berat jenis 1,05 – 1,05 – 1,1 1,1 g cm -3 dan berat sekitar 10-12 g sebagai paktikel kering. Umumnya, bakteri berukuran lebar 0,5 – 0,5 – 1 1 mikron dan panjang hingga 10 mikron ( 1 mikron = 10 -3 mm). Dinding sel bakteri mengandung kompleks karbohidrat dan protein yang disebut peptidoglikan. Bakteri bereproduksi dengan cara membelah diri menjadi dua sel yang berukuran sama yang disebut dengan pembelahan biner. (Rosana, Ika Rinda. 2015) 2015)
2
Kadar Hambat Minimal (KHM) adalah konsentrasi antibiotik terendah yang masih dapat menghambat pertumbuhan organisme tertentu. Prosedur ini digunakan untuk menentukan konsentrasi antibiotik yang masih efektif untuk mencegah pertumbuhan patogen dan mengindikasikan dosis antibiotik yang efektif untuk mengontrol infeksi pada pasien. Inokulum mikroorganisme yang telah distandarisasi ditambahkan ke dalam tabung yang mengandung seri enceran suatu antibiotika, dan pertumbuhan mikroorganisme akan termonitor dengan perubahan
kekeruhan. Dengan cara ini, KHM antibiotik yang dapat mencegah pertumbuhan mikroorganisme secara in vitro dapat ditentukan (Rahayu, 2013). Kadar Bunuh Minimal (KBM) adalah kadar atau konsentrasi minimal yang mampu membunuh bakteri uji, yang ditunjukkan dengan tidak adanya koloni atau jumlah koloni < 0,1% dari Original Inoculum. Original Inoculum adalah control kuman yang berisi bakteri uji dan media. Selain control kuman digunakan juga control bahan yang berisi bahan uji dan aquades steril untuk mengetahui ada tidaknya mikroba yang tumbuh pada bahan uji. (Rosana, Ika Rinda. 2015) Antibakteri adalah zat yang dapat mengganggu pertumbuhan atau bahkan mematikan bakteri dengan cara mengganggu metabolism mikroba yang merugikan. Mikroorganisme dapat menyebabkan bahaya karena kemampuan menginfeksi dan menimbulkan penyakit serta merusak bahan pangan. Antibakteri termasuk kedalam antimikroba yang digunakan untuk menghambat pertumbuhan bakteri. Kemampuan antimikroba anti mikroba tergantung pada konsentrai, pH, molaritas molarit as dan konsentrasi dalam bentuk tidak terdisosiasi. (Juniawati, 2014) Antibiotik adalah bahan hayati yang pada kadar rendah dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Dengan demikian, antibiotik merupakan salah satu jenis antibacterial. Apapun mekanisme kerja antibakteri yaitu (Juniawati, 2014) : 1. Menghambat sintesis dinding sel bakteri, 2. Mengganggu permeabilitas membrane sel bakteri, 3. Membawa fungsi transport aktif dan kemudian mengkontrol komposisi internal sel, 4. Menghambat sintesis protein sel bakteri, 5. Menghambat sintesis atau merusak asam nukleat bakteri. Berdasarkan aktivitasnya, antibakteri digolongkan sebagai berikut : 1. Bakteriostatik,
merupakan
zat
antibakteri
yang
memiliki
aktivitas
menghambat
pertumbuhan bakteri (menghambat perbanyakan perbanyakan populasi bakteri) namun tidak dimatikan, 2. Bakterisida, merupakan zat antibakteri yang memiliki aktivitas membunuh bakteri.
3
Namun, ada beberapa zat antibakteri yang bersifat bakteriostatik pada konsentrasi rendah dan bersifat bakterisida pada konsentrasi tinggi (Juniawati, 2014) Mekanisme resistensi bakteri dapat terjadi dengan mekanisme sebagai berikut: 1. Pengurangan akses antibiotik ke target porin pada membran luar 2. Inaktivasi enzimatis laktamase-ß (ß-laktamase) 3. Modifikasi/proteksi target resistensi terhadap ß-laktam, tetrasiklin, dan kuinolon kuinolon 4. Kegagalan aktivasi antibiotik 5. Efluks aktif antibiotik Pada prinsipnya tes kepekaan terhadap antimikroba adalah penentuan terhadap bakteri penyebab penyakit yang yang kemungkinan kemungkinan menunjukkan menunjukkan resistensi terhadap suatu antimikroba atau
kemampuan suatu antimikroba untuk menghambat pertumbuhan bakteri yang tumbuh in vitro, sehingga dapat dipilih sebagai antimikroba yang berpotensi untuk pengobatan. Uji kepekaan antimikroba (antimicrobial susceptibility testing) dilakukan pada isolat mikroba yang didapatkan dari spesimen pasien untuk mendapatkan agen antimikroba yang tepat untuk mengobati penyakit infeksi yang disebabkan oleh mikroba tersebut. Pengujian dilakukan di bawah kondisi standar, dimana kondisi standar berpedoman kepada Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Standar yang harus dipenuhi yaitu konsentrasi inokulum bakteri, media perbenihan (Muller Hinton) dengan memperhatikan pH, konsentrasi kation, tambahan darah dan serum, kandungan timidin, suhu inkubasi, lamanya inkubasi, dan konsentrasi antimikroba (Tri Umiana, 2015) Walaupun kondisi penting untuk pemeriksaan in vitro telah distandarkan, namun tidak ada kondisi in vitro yang mengambarkan kondisi yang sama dengan keadaan in vivo tempat yang sebenarnya bakteri tersebut menginfeksi. Dengan demikian ada beberapa faktor yang memegang peranan penting dari pasien disamping hal-hal yang dapat mempengaruhi hasil uji kepekaan yang telah diperhitungkan pada metode uji. Faktor tersebut antara lain, yaitu (Tri Umiana, 2015): 1.
Difusi antimikroba pada sel dan jaringan hospes
2.
Protein serum pengikat antimikroba
3.
Gangguan dan interaksi obat
4.
Status daya tahan dan sistem imun imun pasien
5.
Mengidap beberapa penyakit secara bersamaan
6.
Virulensi dan patogenitas bakteri yang menginfeksi
7.
Tempat infeksi dan keparahan penyakit.
Kemampuan antimikroba dalam melawan bakteri dapat diukur menggunakan metode yang biasa dilakukan, yaitu: 1.
4
Metode Dilusi Metode ini menggunakan antibakteri dengan konsentrasi yang berbeda-beda dimasukkan
pada media cair (Rosana, Ika Rinda. 2015). Metode dil usi terdiri dari dua teknik pengerjaan, yaitu teknik dilusi perbenihan cair dan teknik dilusi agar yang bertujuan untuk penentuan aktivitas antimikroba secara kuantitatif, antimikroba dilarutkan kedalam media agar atau kaldu, yang kemudian ditanami bakteri yang akan dites. Setelah diinkubasi semalam, konsentrasi terendah yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri disebut dengan MIC (minimal inhibitory concentration). Nilai MIC dapat pula dibandingkan dengan konsentrasi obat yang didapat di serum dan cairan tubuh lainnya untuk mendapatkan perkiraan respon klinik (Tri Umiana, 2015).
a. Dilusi perbenihan cair Dilusi perbenihan cair terdiri dari makrodilusi dan mikrodilusi. Pada prinsipnya pengerjaannya sama hanya berbeda dalam volume. Untuk makrodilusi volume yang digunakan lebih dari 1 ml, sedangkan mikrodilusi volume yang digunakan 0,05 ml sampai 0,1 ml. Antimikroba yang digunakan disediakan pada berbagai macam pengenceran biasanya dalam satuan µg/ml, konsentrasi bervariasi tergantung jenis dan sifat antibiotik, misalnya sefotaksim untuk uji kepekaan terhadap Streptococcus pneumonia, pengenceran tidak melebihi 2 μg/ml, sedangkan seda ngkan untuk Escherichia coli pengenceran dilakukan pada 16 µg/ml atau lebih. Secara umum untuk penentuan MIC, pengenceran antimikroba dilakukan penurunan konsentrasi setengahnya misalnya mulai dari 16, 8, 4, 2, 1, 0,5, 0,25 µg/ml konsentrasi terendah yang menunjukkan hambatan pertumbuhan dengan jelas baik dilihat secara visual atau alat semiotomatis dan otomatis, disebut dengan konsentrasi daya hambat minimum/MIC (minimal inhibitory concentration) (Tri Umiana, 2015). b.
Dilusi agar Pada teknik dilusi agar, antibiotik sesuai dengan pengenceran akan ditambahkan ke dalam agar, sehingga akan memerlukan perbenihan agar sesuai jumlah pengenceran ditambah satu perbenihan agar untuk kontrol tanpa penambahan antibiotik, konsentrasi terendah antibiotik yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri merupakan MIC antibiotik yang diuji. Salah satu kelebihan metode agar dilusi untuk penentuan MIC. Dasar penentuan antimikroba secara in vitro adalah MIC (minimum inhibition concentration) dan MBC (minimum bactericidal concentration). MIC merupakan konsentrasi terendah bakteri yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri dengan hasil yang dilihat dari pertumbuhan koloni pada agar atau kekeruhan pada pembiakan cair. Sedangkan MBC adalah konsentrasi terendah antimikroba yang dapat membunuh
5
99,9% pada biakan selama waktu yang ditentukan. Absorpsi obat dan distribusi antimikroba akan mempengaruhi dosis, rute dan frekuensi pemberian antimikroba untuk mendapatkan dosis efektif di tempat terjadinya infeksi. Penentuan konsentrasi minimum antibiotik yang dapat membunuh bakteri/ minimum bactericidal concentration (MBC) dilakukan dengan menanam bakteri pada perbenihan cair yang digunakan untuk MIC ke dalam agar kemudian diinkubasi semalam pada 37⁰C. MBC adalah ketika tidak terjadi pertumbuhan lagi pada agar. Keuntungan dan kerugian metode dilusi memungkinkan penentuan kualitatif dan kuantitatif dilakukan bersama-sama. MIC dapat membantu dalam penentuan tingkat resistensi dan dapat menjadi petunjuk penggunaan antimikroba. Kerugiannya metode
ini tidak efisien karena pengerjaannya yang rumit, memerlukan banyak alat-alat dan bahan serta memerlukan ketelitian dalam proses pengerjaannya termasuk persiapan konsentrasi antimikroba yang bervariasi (Tri Umiana, 2015). 2.
Difusi Metode yang paling sering digunakan adalah metode difusi agar. Cakram kertas saring ,
yang berisi sejumlah obat tertentu ditempatkan pada permukaan medium padat yang sebelumnya telah diinokulasikan bakteri uji pada permukaannya. Setelah inkubasi, diameter zona hambat sekitar cakram dihitung sebagai ukuran kemampuan penghambatan obat terhadap organism uji (Rosana, Ika Rinda. 2015). Tingginya konsentrasi dari antimikroba ditentukan oleh difusi dari cakram dan pertumbuhan organisme uji dihambat penyebarannya sepanjang difusi antimikroba (terbentuk zona jernih disekitar cakram), sehingga bakteri tersebut merupakan bakteri yang sensitif terhadap antimikroba. Ada hubungan persamaan yang hampir linear (berbanding lurus) antara log MIC, seperti yang diukur oleh metode dil usi dan diameter zona daya hambat pada metode difusi. Ukuran zona jernih tergantung kepada kecepatan
difusi
antimikroba,
derajat
sensitifitas
mikroorganisme,
dan
kecepatan
pertumbuhan bakteri (Tri Umiana, 2015). Prinsip metode ini adalah mengukur zona zon a hambat pertumbuhan bakteri yang terjadi terj adi akibat difusi zat yang besifat sebagai antibakteri didalam media padat (Rosana, Ika Rinda. 2015). Zona hambat cakram antimikroba pada metode difusi berbanding terbalik dengan MIC. Semakin luas zona hambat, maka semakin kecil konsentrasi daya hambat minimum MIC. Untuk derajat kategori bakteri dibandingkan terhadap diameter zona hambat yang berbeda beda setiap antimikroba, sehingga dapat ditentukan kategori resisten, intermediate atau sensitif terhadap antimikroba uji (Tri Umiana, 2015).
6
III. ALAT DAN BAHAN Alat :
1) Cawan Petri sebanyak 6 buah 2) Mikropipet 3) Tabung reaksi 4) Erlemeyer 5) Beaker glass 6) Batang Pengaduk 7) Lampu bunsen Bahan :
1) Media NA 2) Larutan suspensi bakteri uji 3) Antibiotik Ampicilin dengan konsentrasi 6,25 mg/ml ;3,125 mg/ml;1,5625 mg/ml 4) Aqua Destilata 5) Alumunium Foil
IV. SKEMA KERJA
1. Pembuatan Larutan antibiotic dengan variasi konsentrasi Untuk konsentrasi 6,25 mg/ml. Siapkan serbuk ampicillin, kemudian ditimbang sesuai bobot yang diperlukan. diperlukan.
Dimasukkan ke dalam beaker glass, kemudian ditambahkan aqua destilata sebanyak 10 ml, aduk hingga larut
7 Ulangi langkah tersebut untuk konsentrasi selanjutnya (3,125 mg/ml dan 1,5625mg/ml)
2. Pembuatan Media NA (Nutrien Agar)
Timbang serbuk NA sebanyak 3,36 gram. Siapkan aqua destilat a 120 ml.
Masukkan NA ke dalam erlemeyer dan aqua destilata, di larutkan. Kemudian dipanaskan.
3. Pembuatan Kontrol Kontaminasi Media Secara aseptis ambilah 15 ml NA, tuangkanlah ke dalam cawan petri dan ratakan secara merata digoyangkan cawan perti di atas meja. Biarkan memadat dan berikan label atau keterangan
Bungkus dengan alumunium foil, diinkubasikan di inkubator selama 24 jam
4. Pembuatan Kontrol Pertumbuhan Bakteri Uji Secara aseptis ambilah 15 ml NA, tuangkanlah ke dalam tabung reaksi, ambil 1 ml suspensi bakteri uji menggunakan mikropipet lalu tuangkanlah ke dalam tabung reaksi yang mengandung media NA, goyangkan tabung agar campuran merata
Tuangkanlah larutan dalam tabung reaksi ke cawan petri, dan ratakan secara merata dengan di goyangkan cawan perti di atas meja. Biarkan memadat dan berikan label atau keterangan
Bungkus dengan alumunium foil, diinkubasikan di inkubator selama 24 ja m
5. Pembuatan Kontrol Negatif Secara aseptis ambilah 15 ml NA, tuangkanlah ke dalam tabung reaksi, ambil 1 ml suspensi bakteri uji menggunakan mikropipet lalu tuangkanlah 8 ke dalam tabung reaksi yang mengandung media NA, goyangkan tabung agar campuran merata
Tambahkan 1 ml aqua destilata steril pelarut antibiotik ke dalam tabung tersebut.
Tuangkanlah larutan dalam tabung reaksi ke cawan petri, dan ratakan secara merata dengan di goyangkan cawan perti di atas meja. Biarkan memadat dan berikan label atau keterangan
Bungkus dengan alumunium foil, diinkubasikan di inkubator selama 24 j am 6. Pengujian Potensi Antibiotik secara dilusi padat. Secara aseptis, siapkan 3 tabung reaksi, tuangkanlah 15 ml NA pada masing-masing tabung reaksi, ambil 1 ml suspensi bakteri uji menggunakan mikropipet lalu tuangkanlah pada masing-masing tabung reaksi yang mengandung mengandung media NA, goyangkan tabung agar campuran merata
Tambahkan tiap larutan antibiotik yang telah dibuat sesuai dengan konsentrasi, Dimana Tabung I untuk konsentrasi 6,25 mg/ml; Tabung II untuk 3,125 mg/ml dan Tabung II untuk konsentrasi 1,5625mg/ml. 1,5625mg/ml.
Tuangkanlah 3 larutan dalam tabung reaksi ke 3 cawan petri, dan ratakan secara merata dengan di goyangkan cawan perti di atas meja. Biarkan memadat dan berikan label atau keterangan
Bungkus dengan alumunium foil, diinkubasikan di inkubator selama 24 jam 7. Pembacaan Hasil
Setelah masa inkubasi, kekeruhan media yang menunjukkan kepadatan pertumbuhan bakteri uji diamati dan diberi penilaian menggunakan notasi (+) untuk media yang tampak keruh dan (-) jika tidak ada kekeruhan yang berarti tidak ada pertumbuhan bakteri uji dalam media agar tersebut.
9
Hasil pengamatan dianalisis untuk mendapatkan konsentrasi atau kadar hambat minimal senyawa antibiotik. Kadar Hambat Minimal (KHM) adalah konsentrasi minimal senyawa antibiotik yang menunjukkan adanya penghambatan pertumbuhan bakteri uji
Perhitungan Bahan 1. Perhitungan NA ( Nutrient Agar ) = 2,8/1000ml = x/ 120 ml x ( NA) = 3,36 gram 2. Masaa antibiotik yang ditimbang Konsentrasi 6,25 mg/ml = 6,25 mg/ml x 10 ml = 62,5 mg Konsentrasi 3,125 mg/ml = 3,125 mg/ml x 10 ml = 31,25 mg Konsentrasi 1,5625 mg/ml = 1,5625 mg/ml x 10 ml = 15,625 mg V. HASIL PENGAMATAN NO
1.
HASIL PENGAMATAN
KETERANGAN
Pengamatan Kontrol Kontaminasi Media Terdapat bakteri tumbuh pada kontrol kontaminasi media sehingga menandakan bahwa media yang digunakan telah terkontaminasi.
2.
Pengamatan control pertumbuhan bakteri uji. Terdapat banyak pertumbuhan Bakteri 10 pada media. Hasil : +++ (sangat keruh)
3.
Pengamatan Uji Kontrol Negatif
Terdapat banyak pertumbuhan bakteri. Hasil : ++ (keruh)
4.
Pengamatan Uji Potensi Antibiotik (Petri I) dengan konsentrasi 6,25 mg/ml Terdapat sedikit pertumbuhan bakteri. Hasil : + (agak keruh)
5.
Pengamatan Uji Potensi Antibiotik (Petri II) dengan konsentrasi 3,125 mg/ml Terdapat sedikit pertumbuhan bakteri. Hasil : ++ (keruh)
11
6.
Pengamatan Uji Potensi Antibiotik (Petri III) dengan konsentrasi 1,5625 mg/ml Terdapat sedikit pertumbuhan bakteri. Hasil : + (agak keruh)
VI. PEMBAHASAN
Praktikum mikrobiologi yang telah dilakukan uji kepekaan antibioti k dengan penentuan kadar hambat minimal (KHM) antibiotik secara dilusi padat. Prinsip dari pratikum ini yaitu untuk mengetahui konsentrasi terendah antibiotik untuk menghambat pertumbuhan mikroba. Sebelum melaksanakan pratikum, pratikum, menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan digunakan dalam pratikum seperti cawan petri steril, tabung reaksi steril, gelas ukur steril, mikro pipet steril, baker glass (semua alat disterilisasi dalam autoklaf pada suhu 1210C selama 15 menit dibungkus menggunakan aluminium foil), dan penangas air. Media agar yang digunakan yaitu media agar NA yang dibuat dengan cara menimbang NA sebanyak 3,36 gram dilarutkan dalam 120 ml aqua destilata dalam erlenmeyer, panaskan di penangas penangas air aduk sampai larut. Media NA yang sudah larut dimasukan dimasukan kedalam kedalam 6 tabung reaksi masing-masing tabung berisi 15 ml NA selanjutnya tutup mulut tabung menggunakan kapas dan bungkus dengan aluminium foil (disterilisasi dalam autoklaf pada suhu 121 0C selama 15 menit). Pembuatan kontrol kontaminasi media yaitu dengan cara ambil tabung reaksi yang mengandung media NA yang sudah steril, jika suhu sudah hangat kuku 45-50 OC masukan kedalam cawan petri steril secara aseptis dan biarkan hingga memadat. Inkubasi didalam incubator dengan
12
O
suhu 37 C selama 24 jam. Pembuatan kontrol pertumbuhan bakteri uji yaitu dengan cara ambil tabung media NA yang sudah steril, jika suhu sudah hangat kuku 45-50 OC masukan 1 ml suspensi bakteri uji kedalam tabung tersebut lalu la lu di goyangkan sedikit agar a gar tercampur. tercam pur. Tuang kedalam petri steril secara aseptis, goyangkan petri agar bakteri uji merata dalam cawan petri dan biarkan memadat.. Pembuatan kontrol negatif yaitu dengan cara ambil tabung yang mengandung mengandung media NA yang sudah steril, jika suhu sudah hangat kuku 45-50 OC masukan 1 ml suspensi bakteri uji kedalam tabung tersebut serta menambahkan 1 ml air steril dan goyangkan goyangkan sedikit tabung agar tercampur. Tuang Tuang kedalam petri steril secara aseptis, goyangkan petri agar bakteri uji merata dalam cawan petri dan biarkan memadat.
Pengujian Potensi Antibiotik secara dilusi padat. Antibiotik yang digunakan pada praktikum ini yaitu penisilin yang merupakan kelompok antibiotika Beta Laktam dan memiliki spectrum luas. Langkah selanjutnya yaitu pembuatan pengenceran antibiotic, secara aseptis timbang 62,5 mg ampicillin serbuk dilarutkan dalam 10 ml air steril (beaker glass 1 konsentrasi antibiotik 6,25 mg/ml), ditimbang 31,25 mg ampicillin serbuk dilarutkan dalam 10 ml air steril, konsentrasi (beaker glass 2 antibiotik 3,125 mg/ml) dan ditimbang 15,625 mg ampicillin serbuk dilarutkan dalam 10 ml air steril, konsentrasi (beaker glass 3 antibiotik 1,5625 mg/ml). Ambil 3 tabung media NA yang sudah steril tambahkan 1 ml suspensi bakteri uji ke masing-masing tabung tambahkan larutan antibiotik yang sudah dibuat sebelumnya masing-masing sebanyak 1 ml dengan konsentrasi 6,25 mg/ml (beaker glass 1), 3,125 mg/ml (beaker glass 2), 1,5625 mg/ml (beaker glass 3). Tuang masing-masing preparat kedalam cawan petri steril, goyangkan petri agar bakteri uji merata dalam cawan petri dan biarkan memadat. Setelah seluruh perlakuan percobaan pratikum dalam cawan petri memadat, kemudian seluruh cawan petri dibungkus dengan alumunium foil. Kemudian diinkubasikan dalam inkubator dengan suhu 37 OC selama 24 jam. Setelah 24 jam, hasil perlakuan dalam cwan petri dikeluarkan dari inkubator dan langsung melaukan pengamatan,
Hasil yang didapat setelah pengamatan uji diinkubasi selama 24 jam, yaitu pada uji Penggamatan Kontrol Kontaninasi Media terdapat bakteri yang tumbuh pada petridish sehungga menandakan media yang digunakan telah terkontaminasi bakteri, pada Pengamatan Kontrol Kontrol Pertumbuhan Bakteri Uji hasil yang didapat positif karena media yang ditananami bakteri terlihat sangat keruh sehingga menandakan adanya bakteri
13
yang tumbuh pada media, pada Pengamatan Uji Kontrol Negatif hasil yang didapat positif karena media yang ditanami terlihat keruh yang menandakan adanya bakteri yang tumbuh pada media, selaanjutnya pada Pengamatan Uji Potensi Antibiotik pada petri I (Konsentrasi antibiotik 6,25 mg/ml) hasil yang didapat positif karena media yang ditanami bakteri dan senyawa uji terlihhat sedikit keruh sehungga disimpulkan adanya sedikit pertumbuhan bakteri, pada petri II (Konsentrasi antibiotik 3,125 mg/ml) hasil yang didapat positif karena media yang ditanami bakteri dan senyawa uji terlihat keruh sehingga disimpulkan adanya sedikit pertumbuhan bakteri, pada petri III (Konsentrasi antibiotik 1,5625 mg/ml) hasil yang didapat positif karena media yang ditanami bakteri
dan senyawa uji terlihhat sedikit keruh sehingga disimpulkan adanya sedikit pertumbuhan bakteri
VII. KESIMPULAN
1.Antibiotic adalah suatu zat yang berasal dari bakteri, jamur, fungi, yang dilemahkan yang digunakan untuk menghambat pertumbuhan bakteri. 2.KHM
adalah
kadar
minimal
yang
diperlukan
untuk
menghambat
pertumbuhan mikroba. 3. Metode yang digunakan adalah metode difusi yaitu merupakan metode paling sering digunakan untuk menentukan kepekaan antimikroba 4. Hasil pengamatan yang didapat pada pengamatan senyawa uji rata-rata memiliki hasil posittif karena media yaang ditanami bakteri dan senyawa uji terlihat sedikit adanya pertumbauhan bakteri
14
DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 2017. Panduan 2017. Panduan Pratikum Mikrobiologi. Mikrobiologi . Denpasar: Institut Ilmu Kesehatan Medika Persada Bali. Juniawati, Miskiyah. 2014. Kemampuan Cuka Air Kelapa Dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Eschericia coli dan Staphylococcus aureus. Bogor : Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Pascapanen Pertanian. Rahayu, Wisti. 2013. Penentuan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Ekstrak Buah Melur ( Brucea ( Brucea Bakteri Escherichia coli Dan javanica L. javanica L. Merr) Terhadap Bakteri Escherichia coli Dan Staphylococcus aureus Secara aureus Secara In Vitro. Sumatera Barat : Universitas Negeri Padang Rosana, Ika Rinda. 2015. Aktivitas Antibakteri Jamu “Empot Super” Terhadap Bakteri Staphylococcus saprophyticus saprophyticus Dan Escherichia coli. coli. Malang : Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim. Soleha, Tri Umiana. 2015. “Uji Kepekaan Terhadap Antibiotik” Volume 5 . Jurnal Kesehatan Universitas Lampung. Lampung
15
LAMPIRAN
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
LAMPIRAN JURNAL
32
33
34
35
36
37
38
39
