4 Informe Aislamiento Por El Metodo de Estriado

“ AÑO De la integración nacional del reconocimiento de nuestra diversidad

”

EAP: INGENIERÍA AMBIENTAL

tema:

CULTIVO DE MICROORGANISMO Catedra: MICROBIOLOGIA GENERAL

Catedratico: Bglo. Mg CORDERO AZABECHE, Jorge

Itegrate!: • • • • • • •

AG"#$%N BALDEON GAB& H"I#A AL$ AL$AMIRANO DEI#& MOLINA 'ILCA# IMELDA ORELLANA CERR(N PAMELA #)EZ LANA#CA R"$H #ALAZAR H")N"CO JOEL. CAMARGO COL*"E CHAG"A .NEHEM%A#

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS MICROORGANISMOS

CULTIVO DE

E!te 1re!ete tr tra2a3o e e!!t4 dedicado a e!tro! 1adre! 1or la a2egada la2or 5e de!arrolla de!arrolla e 2ie de !! 6i3o! 7 a e!tro doce docet te e 1or 1or 2r 2rida idarro! o! ! !! coocimieto!.

Indice: +. Itrodcc Itrodcci- i-        ../0

MICROBIOLOGÍA MICROBIOLOGÍA GENERAL

+

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

+.+.

O23eti8o!

MICROORGANISMOS

CULTIVO DE

geerale!./0. +.0. O23eti8o! e!1eci9co!../0 0. Marco teorico  e!trillado ../0 0.+. Materiale! ./0 0.0. Procedimieto /0 0.;. Re!ltado ../0 0.<. Re!ltado de di!c!ioe!/0 0.=. Cocl!ioe! /0 ;. Marco teorico  di!emiacio ../0 ;.+. Materiale! ./0 ;.0. Procedimieto /0 ;.;. Re!ltado /0 ;.<. Re!ltado de di!c!ioe!/0 ;.=. Cocl!ioe! ./0 <. Marco teorico  e!trillado ./0 <.+. Materiale! /0 <.0. Procedimieto ../0 <.;. Re!ltado ./0 <.<. Re!ltado de di!c!ioe!./0 <.=. Cocl!ioe! ./0 BIOGRA>IA# ./0

MICROBIOLOGÍA GENERAL

0

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

o

ANE?O# ./0

CULTIVO DE MICROORGANISMOS

INTRODUCCIÓN:

El crecimieto de lo! microorgai!mo! o !e 1ede e!tdiar idi8idalmete de2ido a ! tama@o ta 1e5e@o, 1or lo 5e e! ece!ario recrrir a medio! triti8o! arti9ciale!, dode !e 1eda

de!arrollar

r41idamete

7

1rodcir

grade!

1o2lacioe!. E e!ta! codicioe! !e 1ede mai1lar

7

eectar la! i8e!tigacioe! !edeada!. Mc6a!

e!1ecie!

2acteriaa!

!o

ta

1arecida!

morol-gicamete 5e e! im1o!i2le diereciarla! !olo co el !o de micro!co1ioB e e!te ca!o, 1ara ideti9car cada ti1o de 2acteria, !e e!tdiara !! caracterC!tica! 2io5Cmica! !em2r4dola! e medio! de clti8o! e!1eciale!. Algo! medio! cotiee  1rodcto 5e i6i2e el crecimieto de la ma7orCa de la! e!1ecie!. Lo! medio! triti8o! dode !e de!arrolla 7 mlti1lica lo! microorgai!mo cotiee

triete! ece!ario! 1ara !

crecimieto, 7 !e deomia medio! de clti8o, c7o! com1oete! !o m7 8ariado!.


;

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

E geeral lo! medio! !o rico! e 1roteCa! o e!1ecC9ca!, co

el

9

de

e!timlar

el

crecimieto

de

lo!

microorgai!mo!.

OBJETIVO GENERAL: Ai!lar 2acteria! 1or el mDtodo de e!triado, di!emiaci- 7 di!i-.

OBJETIVO ESPECIFICO: ∗

Em1lear la metodologCa adecada 1ara cada ti1o de me!tra.

∗

Diereciar 2acteria! Gram F 7 Gram .

MARCO TEORICO I.

CULTIVO DE MICROORGANISMOS

El clti8o de microorgai!mo co!i!te e 1ro1orcioarle! la! codicioe! !ica! 5mica! 7 triti8a! adecada! 1ara 5e 1eda mlti1licar!e de orma cotrolada. E geeral 1odemo! di!tigir clti8o! l5ido! 7 !-lido! e ci- a la! caracter!tica! del medio 7 clti8o! di!cotio! 7 cotio! e ci- a ! di!1oi2ilidad de triete!.

1.-SIEMBRA  AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS Gracia! a la a1licaci- de lo! medio! de clti8o, !e 6a llegado a coocer am1liamete el com1ortamieto cltral 7 9!iol-gico de la 8ariada Iora micro2iaa 5e 1lla e lo! am2iete!, 1ermitido!e la ideti9caci- e!1ecC9ca. !.- Sie"#$! % Ai&'!"ien() de Mic$))$*!ni&")&. C)nce+() de Sie"#$!: acodicioamieto de  microorgai!mo e  medio de clti8o Ai&'!"ien(): 1ermite la !e1araci- de microorgai!mo! al e!tado de 1reJa a 1artir de a M"E#$RA PROBLEMA.


<

CULTIVO DE


CULTIVO DE

T$!&+'!n(e: la !e1araci- 1rimaria de Ka ce1a a  medio de clti8o a1ro1iado e t2o, 5e 1ede !er lC5ido o !-lido. #e co!er8a la ce1a 1ra 7 1or tato tra!1late! e medio! e!1eciale!, !e logra coocer la! 1ro1iedade! cltrale! 7 2io5Cmica! 7 como re!ltado, la ideti9caci- e!1ecC9ca.

Lo! tra!1late! 1ede !er:    

De lC5ido a lC5ido De lC5ido a !-lido De !-lido a lC5ido De !-lido a !-lido

Re,e$enci!& #i#'i)*$c!& "!n/!' de "ic$)#i)')*0! C/'(i)& de Mic$) )$*!ni&")

C/'(i) "ic$)#i!n) " clti8o e! el crecimieto de 1o2lacioe! micro2iaa! de orma cotrolada e  medio arti9cial. Medi) de c/'(i) #o1orte 5e 8a a coteer lo! triete! ece!ario!, a! como a! codicioe! -1tima! de 1H 7 6medad 5e 1ermite el de!arrollo 7 crecimieto de microorgai!mo!. C'!&ic!ci2n de ')& "edi)& de c/'(i)& En ,/nci2n de &/ c)n&i&(enci! •

#-lido!: al medio de clti8o !-lido !e le a@ade  agete geli9cat o !olidi9cate. #e 1re1ara e Erleme7er, !e de3a eriar 7 lego !e 1ede 1a!ar o 2ie a a 1laca o 2ie a  t2o.

Lo! geli9cat! m4! 6a2itale! !o: 

A*!$ A*!$: e!  alga 5e !e caracteria 1or !er ierte rete a lo! microorgai!mo! 7 1or5e e! l5ido a la tem1eratra de e2llici- 7 !olidi9ca etre lo! <==/C.



L03/id)& ) c!'d)& : cotiee lo! triete! 7, e lgar de a@adir el agar, tiee el aga 5e !e tilia 1ara dilir el medio de clti8o. #e 1re1ara e t2o.



Se"i&2'id)&: c)n(ienen !*!$ =+/. #e tilia cado 5eremo! o2!er8ar mo8ilidad 2acteriaa. #e 6ace e t2o 7 !e tilia la !iem2ra e 1icadra co a!a recta.



Caldo triti8o: etracto de care F 1e1toa F aga

Agar triti8o: etracto de care F 1e1toa F aga F agar.


=

CULTIVO DE


CULTIVO DE

En ,/nci2n de' /&) 3/e &e 'e d! 

En$i3/ecid)&: !o a5ello! medio! e lo! cale! a  medio 2a!e !e le a@ade determiada! !!tacia! triti8a! 5e !o ece!aria! 1ara el crecimieto de  microorgai!mo eigete. E3em1lo: !*!$&!n*$e.



De en$i3/eci"ien(): !e tilia !olamete cado !e !o!1ec6a 5e el microorgai!mo de la me!tra !e ecetra e  Qmero m7 1e5e@o. #e le a1orta lo! triete! 7 !e e!1era 5e creca de  a  6ora!. E!to !e tilia, 1or e3em1lo, cado !e !o!1ec6a la cotamiaci- e alimeto! 1or #almoella.



Di,e$enci!'e&: icor1ora determiada! !!tacia! 5e o! 1ermite diereciar etre do! ti1o! de microorgai!mo!. E3. El agar de !al 7 maitol: o! 1ermite diereciar e el ca!o de lo! !ta167lococo!, lo! 5e tilia el maitol e ! meta2oli!mo de lo! 5e o. #i lo tilia origia 4cido!, co lo 5e el 1H di!mi7e 7 el idicador cam2ia de color.



Se'ec(i)&: lle8a icor1orada! determiada! !!tacia! 5e i6i2e el crecimieto de  microorgai!mo 7 acilita el crecimieto del microorgai!mo 5e o! itere!a. E3. Agar de !al 7 maitol: el NaCl = i6i2e el crecimieto de cierto! m.o 7 acilita el de!arrollo de otro! 5e crece me3or e e!e medio.



T$!n&+)$(e % "!n(eni"ien() : !e tilia cado la me!tra o !e 1ede 1roce!ar imediatamete de!1! de 6a2erla tomado.

C)ndici)ne& de !'"!cen!"ien() de ')& "edi)& de c/'(i) L! "!%)$0! de ')& "edi)& de c/'(i) &e enc/en($!n de&4id$!(!d)& % 5&()& &e de#en c)n&e$!$ de '! &i*/ien(e ,)$"!: 4((+:66In,)$"e-7-Bi)3/i"ic!-Medi)&-de-C/'(i)

M5()d) de e&($i!d): E! el mtodo m4! 4cil 7 la m4! !ada 1ata o2teer clti8o!. Para ello, co a aa de !iem2ra !e toma a me!tra de la 1o2laci- mita 7 a cotiaci- !e 6ace e!tra! !o2re la !1er9cie de  medio !olido 1re1arado e 1laca Petri. Coorme !e 8a 6aciedo igag co el a!a, de2e teer a !e1araci- a! de otra! de +; mm 1ara 5e cada 8e !e de1o!ite e la !1er9cie del medio meo! microorgai!mo. La di!tri2ci- 1ede !er 1or e!tra! !im1le!  !olo 1lao 1or todo el medio el Qmero de e!tra! de1ede la catidad de ioclo. E!triado !im1le: e!terilia el 9lameto del aa de !iem2ra 7 toma la 1arte de la ca3a de Petri 5e cotiee el medio de clti8o !em2rado. Cerca! del mec6ero e!1era 5e !e eri el aa 7 toma a coloia de la 1laca. Regre!a la ca3a a ! ta1adera, a6ora, toma  1laca co agar e!tril 7 co cidado de o rom1er el gar, iocla la me!tra e  etremo de la




CULTIVO DE


CULTIVO DE

1laca 7 co el aa e 1o!ici- ligeramete 6oriotal realia la! e!tra! m7 3ta!.

SIEMBRA DE MICROORGANISMOS

P!$! '! &ie"#$! de e&()& "ic$))$*!ni&")& /(i'i8!")& '! (5cnic! de' ISO PAGO9 BUCAL ')& "!(e$i!'e& 3/e /(i'i8!")& &)n /n I&)+) e&(e$i'i8!d)9 /n! +'!c! Pe($i % n/e&($! "/e&($! ! &e"#$!$ #!c(e$i!& 3/e &e enc/en($! en '! 8)n! #/c!';


S

CULTIVO DE


CULTIVO DE

T5cnic! de '! &ie"#$e '! #!c(e$i!& #/c!'e&9 $e!'i8!")& e' +!&) de' I&)+) en ,)$"! de &ic &!c en ($e& +!$(e& de '! +'!c! Pe($i 1 =/n() > &e"i =/n() % e' 7 de "!ne$! &e+!$!d!

M/e&($! de #!c(e$i!& #/c!'e&9 $)(/'!d!& % de#id!"en(e !i&'!d! +!$! &/ $e&+ec(i) c$eci"ien()

MATERIALES

P'!c!& !*!$

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CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

L+i8 +'/"2n

*$!&)

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

)

MATERIALES PARA REALI?AR EL AISLAMIENTO POR EL METODO DE ESTRIADO

PROCEDIMIENTO @AISLAMIENTO POR EL METODO DE ESTRIADO Reco1ilar

la!

me!tra!

re!1ecti8a!

de

lo!

di8er!o!

microorgai!mo! ei!tete!: e la mao, cara 7 oa 2cal co 6i!o1o! re!1ecti8amete.

Rec)+i'!ci2n de '!& "/e&($!&


T

CULTIVO DE


CULTIVO DE

$omar co la mao i5ierda la 1laca Petri co agar, de!ca!ado la 2a!e !o2re lo! dedo!, medio, aglar o me@i5e el dice actQa de 2i!agra 7 co el 1lgar le8atar la ta1a lo !9ciete 1ara el 1a!o del 6i!o1o cargado. e!ta o1eraci- !e realia a la altra del mec6ero ecedido.

C)*iend) '! +'!c! +e($i

Co lo! 6i!o1o! !e di!tri27e el ioclo 1or e!tra! e ZIGZAG co e!ca!a !e1araci- a! de otra!.

Di&($i#/%end) e' in)c/')

De3ar caer la ta1a co el cotrol de lo! dedo! 1lgar e dice.

M/e&($!


+/

CULTIVO DE


CULTIVO DE

Rotlar lo! dato! !o2re el dor!o de la 1laca 1etri !em2rada a! mero de gr1o ti1o de !iem2ra 7 ec6a.

R)(/'!nd)

Ic2ar a ;SUC 1or 0< 6ora!. Colocar la! 1laca! e la e!ta e 1o!ici- i8ertida.

Inc/#!$ ! 7C


++

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

RE#"L$ADO# >AL$A

MICROORGANISMOS

CULTIVO DE

AISLAMIENTO POR DISEMINACION @LEC
#e 1ractica mediate la 1i1eta de Pa!ter e!tril 1ara la toma del ioclo. E!ta 1or ca1ilaridad 1ermite el a!ce!o del ioclo a di!creci- el cal e! de1o!itado !o2re el medio !olido coteido e la 1laca , a a!ada o a gota de la me!tra a !em2rar 5e lego !e eteder4 1or toda la !1er9cie del medio de clti8o co a e!14tla de Drigal!V7. La 1laca Petri del clti8o de2e de!ta1ar!e lo !9ciete como 1ara 1ermitir la e!trec6a 1eetraci- de la e!14tla de !iem2ra, a! !e e8ite la cotamiaci-.

MATERIALES: INSTRUMENTOS DE LABORATORIO


+0

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

ESPATULA DE DRIGALS

PIPETA PASTEUR

PLACA PETRI MUESTRA

LEC
PROCEDIMIENTO: AISTLAMIENTO POR DISEMINACION @LEC
1

$omar el ioclo de la me!tra 1ro2lema co la 1i1eta Pa!ter 7 de1o!itar a gota !o2re el medio de la 1laca Petri, 5e de!ca!a e 1o!ici- ormal !o2re la me!a.

2

De8ol8er el !o2rate al t2o o al em2a!e de la me!tra.

Rotlar: Qmero de gr1o, ti1o de !iem2re 7 ec6a. +; MICROBIOLOGÍA GENERAL 45

3

Ic2ar igal a lo! mtodo! ateriore!. 6

CULTIVO DE


CULTIVO DE

De!ec6ar la e!14tla e el ra!co 2acteriao.

Itrodcir la e!14tla de drigal!V7 7 di!emiar la gota 1or la !1er9cie del medio, o 1a!ado do! 8ece! 1or el mi!mo 1lao.

AISLAMIENTO POR DIFUSION

El mtodo 5e 8amo! a tiliar co!i!te e realiar dilcioe! !ce!i8a! de la me!tra e codicioe! de e!terilidad co o23eto de !em2rar de!1! catidade! coocida! de la! mi!ma! e a !erie de 1laca! de Petri. Co!iderado 5e alga de la! dilcioe! !er4 tal 5e al di!tri2ir a 1arte de ella e la 1laca, origiar4 coloia! ai!lada!. Cotado el Qmero de coloia!, el 8olme !em2rado e la 1laca 7 la dilci- corre!1odiete, 1odremo! calclar el Qmero de idade! ormadora! de coloia! 1re!ete! e la me!tra iicial. $cica 5e co!i!te e o2teer a !!1e!i- de la mecla de microorgai!mo! 7 6acer dilcioe! !eriada! 5e !e 8ierte e


+<

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

CULTIVO DE

MICROORGANISMOS

a 1laca Petri 6a!ta co!egir coloia! ai!lada!. #e de2e tra2a3ar, como !iem1re, e codicioe! e!trile!, ameado la 2oca de lo! t2o! ate! 7 de!1! de itrodcir la 1i1eta, e la! 1roimidade! del mec6ero. Mediate a 1i1eta e!tril, tomar a me!tra del clti8o mito, 7 de1o!itar +ml e el 1rimer t2o dilci- +/ +. Agitar 6a!ta co!egir

a

!!1e!i-

6omogea.

$omar

otra

1i1eta

e!tril, 7 tra!erir de e!ta 1rimera dilci- /,+ml al !igiete +/ , 7 a! !ce!i8amete. A 1artir del t2o co dilci- +/0 7 +/<, co

0

a 1i1eta e!tril, ioclar e 1laca Petri tra! ic2ar !e 1odr4 o2teer coloia! ai!lada!.

MATERIALES: EUIPOS:

!o di!1o!iti8o! elctrico! tiliado! 1ara e!teriliaci- 5e orma 1arte del e5i1amieto de la2oratorio


+=

CULTIVO DE


#e tilia 1ara 1e!ar 1e5e@a! catidade! de BALAN?A ma!a, e e!te ca!o ELCTRICA 1ara determiar el la ma!a de la tierra agrcola.

VORTE

E!  di!1o!iti8o !im1le 5e !e !a comQmete e lo! la2oratorio! 1ara agitar 1e5e@o! t2o! o ra!co! de l5ido

MATERIALES DE VIDRIO:

LUNA DE RELOJ

VARILLA DE VIDRIO

PLACAS PETRI

TUBOS DE ENSAO

E!te i!trmeto e e!te ca!o o! a7d- 1ara 1oder 1e!ar la me!tra.

La 8arilla de 8idrio e! de gra gro!or 7 de 8idrio 5e !ir8e 1ara mo8er, remo8er, e e!te ca!o o! !ir8i- 1ara 6omogeiar la me!tra co la 1e1toa. Ca3a! cildrica!, !e em1lea como reci1iete! de medio! de clti8o. #o de orma cildrica! de 8idrio 1or lo geeral, cerrado 1or  etremo, 6a7 de 8ario! tama@o! e e!te ca!o o! !ir8i- 1ara la !olcioe! de +/+,+/0,+/;,+/<


+

CULTIVO DE

CULTIVO DE


$2o! cildrico! delgado! PIPETAS termiado! !e em1lea e la medici- de 1e5e@a! ESTERILES catidade! de l5ido!, e e!te ca!o o! !ir8i- 1ara tomar me!tra 7 a! de1o!itarla! a cada !olcioe! 5e !e ecetra e lo! t2o! d e!a7o E!  reci1iete 5e e!t4 6ec6o de 8idrio gradado. #e !a 1rici1almete VASO PRECIPITADO 1ara la 1re1araci- de di!olcioe!, e e!te ca!o tiliamo! 1ara la mecla.

Solución:

•

PEPTONA

Muestra: TIERRA AGRÍCOLA •

Traer 1 !ra"os

PROCEDIMIENTO


+S

CULTIVO DE

CULTIVO DE


CULTIVO DE

+.H Pe!ar e la 2alaJa aaltica +/ g de tierra agrcola

0.H Colocar e el 8a!o de 1reci1itaci- , 1oco de 1e1toa 7 l,ego ec6ar la tierra agrcola +/ g 7 di!ol8er.

;.H Co a7,da de ,a 1i1eta e!teril !acamo! del 8a!o de 1reci1itaci- Em,e!tra origialG + ml de lo di!,elto 7 ec6ar a ,o de lo! t,2o! de e!a7o 5,e !e ec,etra co la 1e1toa de T ml 7 6omogeiJar E+/ H+G.

<.H Agitamo! 2ie el t,2o de +/ H+ co la a7,da del 8-rteO 7 co ,a ,e8a 1i1eta e!tDril tra!erir +ml a , !eg,do t,2o co Tml de la !ol,cio +/ H+. marcardo como la dil,ci- +/ H0

=.H Agitamo! 2ie el t,2o +/ H0 co la a7,da del 8-rteO 7 co ,a ,e8a 1i1eta e!tDril tra!erir + ml a , t,2o co T ml de la !olc,i- +/ H0. Marcado co la dil,ci- +/ H;

P.H >ialmete agitamo! 2ie el t,2o +/ H; co la a7,da del 8-rteO 7 co ,a ,e8a 1i1eta e!teril tra!erir +ml a , t,2o co Tml de la !ol,cio +/ H;. marcado co la dil,cio +/ H<


+

CULTIVO DE


CULTIVO DE

S.H Preder el Mec6ero de B!e 7 a2rir la 1laca Petri coteido el agar tricio 7 colocar 0 gota! de la dilci- +/ ; 7 +/ < 7 e!1arcirlo co la e!14tla 1ara lego !er ic2ada 1or 0< H < 6ora!

.

Re!ltado!:


+T

CULTIVO DE


CULTIVO DE

CONCLUSION : 



E!ta tcica co!i!te e o2teer a !!1e!i- de la mecla de microorgai!mo! 7 6acer dilcioe! !eriada! 5e !e 8ierte e a 1laca Petri 6a!ta co!egir coloia! ai!lada!. $ra! ic2amo! 1odremo! o2teer coloia! ai!lada!. El receto de e!ta! coloia! o! 1ermitir4 coocer el Qmero de clla! ei!tete! e el clti8o origial.


0/

4 Informe Aislamiento Por El Metodo de Estriado

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