Transporte a Traves de La Membrana

TRANSPORTE A TRAVES DE LA MEMBRANA

INTRODUCCIÓN Las membran membranas as celular celulares es cumple cumplen n dos importa importante ntess funcio funciones nes,, la primera es aislarse del ambiente en sí misma, dándole el control sobre las condiciones intracelulares, y la seunda es !ue ayudan a las c"lu c"lula lass a ora orani ni#a #arr ruta rutass intr intrac acel elul ular ares es en comp compar arti timi mien ento toss sub sub celulares diferenciados, incluyendo oránulos$ La separaci%n de los procesos tambi"n re!uiere mecanismos especí&cos de transferencia de mol"culas a tra'"s de las membranas ()oyes*$ )uc+ )uc+os os proc proceso esoss celu celula lare ress depe depend nden en de la capa capaci cida dad d de mo'e mo'err mol"culas a tra'"s de las membranas$ Las c"lulas deben ser capaces de obtener nutrientes y epulsar productos &nales a tra'"s de sus membranas plasmáticas$  Todas  Todas las c"lulas animales deben ser capaces de mo'er iones especí&cos a tra'"s de su membrana plasmática para controlar sus propiedades i%nicas y osm%ticas (-c+ulte*$ La membrana celular act.a como barrera semipermeable impidiendo la entrada de la mayor parte de mol"culas, de/ando pasar sar relati'amente a otras (0ro1n y 2oldstein* La %smosis %smosis se conoce conoce al fen%meno fen%meno de difusi%n difusi%n de aua a tra'"s tra'"s de una membrana membrana semiperme semipermeable$ able$ La presi%n presi%n osm%tica se de&ne como la presi%n +idrostática necesaria para detener el 3u/o neto de aua a tra'"s de una membrana semipermeable !ue separa soluciones de compos composici ici%n %n difer diferent ente$ e$ La presi presi%n %n osm%ti osm%tica ca es una propi propieda edad d de tipo coliati'a, es decir, depende del n.mero de partículas$ 4sí por e/emplo una soluci%n de NaCl 5,6 ), si estu'iera totalmente disociada en Na7y Cl8, sería e!ui'alente a una soluci%n de lucosa 9)$ Las Las solu solucio cione ness +ipe +ipert rt%n %nic icas as son son a!ue a!uell llas as,, !ue !ue con con refe refere renc ncia iass al interior de la c"lula, contienen mayor cantidad de solutos (y por lo tanto menor potencial de aua*$ Las Las +ipo +ipot% t%ni nica cass son son a!ue a!uell llas as,, !ue !ue en camb cambio io cont contie iene nen n meno menorr cantidad de solutos (o, en otras palabras, mayor potencial de aua*$ Las soluci solucione oness isot%n isot%nica icass tienen tienen concen concentrac tracion iones es e!ui'a e!ui'alen lentes tes de solutos y, en este caso, al eistir iual cantidad de mo'imiento de aua +acia y desde el eterior, el 3u/o neto es nulo$

:n esta práctica tu'imos el ob/eti'o principal de conocer c%mo se lle'a a cabo el transporte de sustancias a tra'"s de la membrana, así  como tambi"n obser'ar y tomar nota a las reacciones y respuestas de eritrocitos a diferentes soluciones +ipert%nicas, isot%nicas e +ipot%nicas$

)4T:RI4L:- ; )
Prueba de Difusión

>ara la primera prueba, seleccionamos uno de los me/ores buc+es de pollo (buc+e n?9*, con una ti/era procedimos a cortar uno de los etremos del buc+e para poder introducir mediante una pipeta de 95 ml, 95 ml de aua destilada y con una pipeta de >asteur, @ otas de fenolftaleína dentro del buc+e, lueo amarramos el etremo cortado con pabilo, y se aito el buc+e con la &nalidad de me#clar los lí!uidos$ Lueo en un 'aso de precipitaci%n de capacidad de 655 ml, se llen% aua de caAo a una capacidad de B55 ml, se are% con una pipeta de 95 ml, 95 ml de NaO 9 ) y se me#cl% estas sustancias, mo'iendo el 'aso de precipitaci%n en forma circular$ :l paso siuiente fue amarrar con pabilo los etremos del buc+e a una 'arilla aitadora de 'idrio, la cual fue posteriormente colocada sobre el 'aso de precipitaci%n de 655 ml, de tal manera !ue el buc+e !uedo sumerido parcialmente en la soluci%n dentro del 'aso de precipitaci%n, se de/% reposar por un tiempo aproimado de @5 min$ >ara 'er las reacciones$ >ara la seunda prueba se seleccion% el siuiente buc+e de pollo (buc+e n?B*, al cual se le +i#o un corte en un etremo mediante una ti/era, y se introdu/o mediante una pipeta de 95ml, 95 ml de almid%n al 9 , lueo se procedi% a amarrar el etremo cortado con pabilo$ Lueo en un 'aso de precipitaci%n de 655 ml, se llen% B55 ml de aua de caAo, y mediante una pipeta de >asteur se are% B5 otas de

luol, se procedi% a mo'er el 'aso con la &nalidad de me#clar las soluciones$ 4l iual !ue en la primera prueba se procedi% a amarrar los etremos del buc+e de pollo a una 'arilla me#cladora de 'idrio y colocarla sobre el 'aso de precipitaci%n de tal manera !ue el buc+e !uede parcialmente sumerido en la soluci%n$

Prueba de eritrocitos

Osmosis

(Permeabilidad

en

:n esta prueba se etra/o una muestra de sanre a un compaAero de estudio, para ello se us% una au/a descartable EB5  9 F, pre'iamente se prepar% un frasco pe!ueAo con +eparina, en el cual fue introducida la muestra sanuínea y fue aitado durante unos @ minutos$ Lueo se rotulo G tubos de ensayos con 5$B  de NaCl, 5$H  de NaCl, 9$G  de NaCl y BO destilada y fueron colocados en una radilla de metal$ Lueo mediante una pipeta de 95 ml se 'erti% 95 ml de aua destilada en un matra# de capacidad de 955 ml$ -e repiti% este procedimiento B 'eces más, con la &nalidad de tener @ matraces listos para preparar las soluciones con sus concentraciones correspondientes$ Lueo se procedi% al pesado de NaCl, para lo cual usamos una balan#a milim"trica, y sobre un papel pesamos 5$5B, 5$5H y 5$9G ramos de NaCl, y se 'erti% sobre sus matraces correspondientes$ Lueo con una 'arilla me#cladora de 'idrio se me#claron cada una de las soluciones$ Con una pipeta de 9 ml, se coloc% 9 ml de sanre en cada uno de los G tubos de ensayo pre'iamente rotulados, y mediante G pipetas de B ml, se 'erti% 5$G ml de cada soluci%n preparada y aua destilada en cada tubo de ensayo se.n su concentraci%n en el rotulado$ Lueo mediante una pipeta de >asteur colocamos una ota de sanre en un portaob/etos y enseuida se coloc% un cubreob/etos sobre la

ota, e inmediatamente se obser'% la muestra en un microscopio con un aumento de 95 y lueo de G5$ :ste mismo procedimiento se lle'% a cabo para las G soluciones preparadas en los tubos de ensayo, durante este procedimiento se fue obser'ando una por una las soluciones conforme se fue preparando las muestras, ya !ue la e'aporaci%n del aua afecta la osmolaridad de la soluci%n alterando los resultados$

R:-ULT4DOPrueba de difusión

>ara el buc+e n?9, al cabo de unos 96 minutos obser'amos !ue la soluci%n dentro del buc+e tomo un color rosado, esto fue por!ue el buc+e de pollo actu% como membrana selecti'a permitiendo el paso de iones Na7 !ue se encontraban en la soluci%n eterna al buc+e, esta soluci%n contenía NaCl y aua de caAo, el NaCl se disocio en sus partículas racias al aua y mediante proteínas presentes en el buc+e permiti% el paso dentro del buc+e, cambiando el p dentro y permitiendo la acci%n de la fenolftaleína, la fenolftaleína es un indicador de p, !ue en soluciones ácidas permanece incoloro, pero en soluciones básicas tiene el color rosado$ >ara el buc+e n?B, no se obser'aron cambios en la coloraci%n de sustancias dentro o fuera del buc+e, y esto fue por!ue el almid%n !ue estaba dentro del buc+e no pudo pasar a tra'"s de la membrana como mol"cula en sí, si no, pas% como partículas de lucosa, y el luol no reacciona con a#ucares simples como la 2lucosa$

Prueba de Osmosis (Permeabilidad en eritrocitos

>ara esta prueba reali#a en laboratorio epondremos los resultados en la siuiente tabla$

ROTI-

DI0UJ: LO O0-:RK4DO

)OROLO2I4 D: :RITROCITO-

-4N2R: -OL4

 Tenían formas o'aladas, aplanadas, unas /untas a otras formando &las$

:RITROCIT O:>U:-TO -4 -OLUCION I-OTONIC4 (5$H  NaCl*

 Tenían formas redondeadas, distribuidos casi parcialmente en toda la muestra$

:RITROCIT O:>U:-TO -4 -OLUCION I>OTONI C4 (5$B  NaCl* :RITROCIT O:>U:-TO -4 -OLUCION I>:RTONI C4

4 MU: 4TRI0U;: :-T4 )OROLO2I4 >or!ue carecen de n.cleo y mitocondrias, y este diseAo es %ptimo para el intercambio de oieno con el medio !ue lo rodea$ -e debe a !ue la concentraci%n de NaCl dentro del eritrocito es de 5$H , iual al de la soluci%n epuesta, es por eso !ue la forma del eritrocito se mantu'o normal ya !ue no eisti% 3u/o de aua$

-e +inc+o debido a !ue los solutos  Tenían formas (NaCl* dentro del redondeadas, eritrocito eran más randes, mayores !ue los de +inc+adas, fuera del eritrocito, aluna con  /alando aua presencia de dentro del una abertura, eritrocito y todas muy permitiendo !ue se  /untas$ +inc+aran, aluna re'entaba$  Tenían formas :n este caso fue al similares al de re'"s, los las pasas, todas eritrocitos tenían  /untas$ menor concentraci%n de soluto !ue la soluci%n fuera del

(9$G  NaCl*

:RITROCIT O:>U:-TO - 4 42U4 D:-TIL4D 4

 Tenían formas redondeadas, randes, +inc+adas, alunas con presencia de una abertura$

eritrocito, por tanto eisti% un 3u/o de aua del eritrocito +acia fuera del eritrocito, causando !ue estos !ueden con forma de pasas$ :ste caso fue similar al del medio +ipot%nico, ya !ue fuera del eritrocito +abía menor concentraci%n de soluto !ue dentro del eritrocito, captando aua, y permitiendo la forma +inc+ada de los eritrocitos$

DI-CU-IÓN

•

Durante las pruebas de difusi%n, los resultados dieron positi'o a lo epuesto por 0ro1n y 2oldstein donde nos indican !ue la membrana celular act.a como barrera semipermeable impidiendo la entrada de la mayor parte de mol"culas, de/ando pasar relati'amente a otras, esto se cumple con ambos buc+es,

ya !ue en el primer buc+e solo permite el paso de iones Na7 por medio de proteínas en la membrana y en el seundo buc+e ya !ue no permiti% pasar una mol"cula rande como el almid%n, sino sus mol"culas más simples como la lucosa$ •

•

Durante la reali#aci%n de la prueba de difusi%n con el buc+e n? 9, lueo de esperar durante uno @5 minutos, y obser'ar la reacci%n, comen#% a salir un poco de la soluci%n de fenolftaleína a fuera del buc+e, esto no tu'o mayor percance ya !ue obser'amos los resultados antes de este incidente$ :n la prueba de >ermeabilidad de :ritrocitos, durante la preparaci%n de soluciones con el NaCl, se desconocía la concentraci%n de este, ya !ue +ubo percances en cuanto a la obtenci%n del NaCl, destinado para la práctica$ -in más preámbulos, los resultados fueron obtenidos se.n lo pre'isto$

R::R:NCI4- 0I0LIO2R4IC4-

• • • •

•

+ttp=PP111$bioloia$edu$arPcelQeucaPtransporte$+tm +ttps=PPes$1iipedia$orP1iiP)embrana +ttps=PPes$1iipedia$orP1iiP:ritrocito Donald Koet, (B55S*, undamentos de 0io!uimica= la 'ida a ni'el molecular, Bda edici%n, pá$ @G$ Cristop+er D$ )oyes y >atricia )$ -c+ulte, (B55S*, >rincipios de isioloía 4nimal, 9ra edici%n, pá$ , H, HB y H@$

4N:O-

OTO 9$ 0uc+e colocado dentro precipitaci%n$

n? 9 reci"n del 'aso de

OTO B$ 0uc+e n? 9, apreciando los resultados$

OTO @$ 0uc+e n?B apreciando resultados$

OTO G$ Resultados de la primera prueba de difusi%n$

OTO 6$ Obtenci%n de muestra sanuínea$

OTO $ Kertiendo 9 ml de sanre en cada tubo de ensayo rotulado$

OTO S$ )uestras sanuíneas listas para re'isar al microscopio$

OTO $ Kista a microscopio (G5* de sanre$

OTO H$ Kista al microscopio (G5* de sanre con soluci%n isot%nica$

OTO 95$ Kista al microscopio (G5* de sanre con soluci%n +ipot%nica$

OTO 99$ Kista al microscopio (G5* de sanre con soluci%n +ipert%nica$

OTO 9B$ Kista al microscopio (G5* de sanre con aua destilada$