Teknik Biologi Molekuler



Search



Home



Saved

1.0K views

0



Sign In

Upload

Join

RELATED TITLES

0

Teknik Biologi Molekuler Uploaded by Christine Alfiani Hana Saragih



Top Charts



Books



Audiobooks



Magazines



News



Documents



Sheet Music



Teknik Bilogi Molekuler mengenai berbagai macam metode yang dapat digunakan dalam menganalisis sediaan hayati









Save

Embed

Share

Print

Download

1

of 4

pengertian biologi molekuler

 

Makalah Biomol

Sejarah perkembangan

 Search document



Teknik Biologi Molekuler


Sejak akhir 1950-an dan awal 1960-an, ahli biologi molekuler telah belajar untuk mengkarakterisasi, meng

dan memanipulasi komponen molekul sel dan organisme. Komponen-komponen ini mencakup DNA, reposit informasi genetik; RNA, kerabat dekat DNA yang fungsinya melayani sebagai berkisar dari copy pekerjaan

sementara DNA untuk fungsi struktural dan enzimatik aktual serta bagian fungsional dan struktural dari apa translasi, dan protein, jenis struktural dan enzimatik utama dari molekul dalam sel.

Ekspresi kloning

Salah Sala h satu teknik yang paling dasar biologi molekuler untuk mempe mempelajar lajarii fungs fungsii prote protein in adala adalah h klonin kloning g eksp

Dalam teknik ini, DNA coding untuk suatu protein bunga kloning (menggunakan PCR dan / atau enzim restr

dalam sebuah plasmid (dikenal sebag sebagai ai vekto vektorr ekspr ekspresi). esi). Plasmid ini mungkin memili memiliki ki elemen promotor kh untuk mendorong produksi protein yang menarik, dan mungkin juga memiliki penanda resistensi antibiotik membantu mengikuti plasmid.

Plasmid ini dapat dimasukkan ke dalam sel-sel bakteri baik atau hewan. Memperkenalkan DNA ke dalam se

dapat dilakukan dengan transformasi (melalui penyerapan DNA telanjang), konjugasi (melalui kontak sel-se

dengan transduksi (melalui vektor virus). Memperkenalkan DNA ke dalam sel eukariotik, seperti sel hewan,

cara fisik atau kimia yang disebut transfeksi. Beberapa teknik transfeksi berbeda tersedia, seperti transfeks fosfat, fosfa t, elektr elektropora oporasi, si, injeks injeksii dan transfeksi transfeksi liposo liposom. m. DNA juga dapat diperkenalkan diperkenalkan ke dalam sel eukar eukariotik iotik

menggunakan virus atau bakteri sebagai pembawa, yang terakhir ini kadang-kadang disebut bactofection d

khususnya menggunakan Agrobacterium tumefaciens. Plasmid dapat diintegrasikan ke dalam genom, meng transfeksi stabil, atau mungkin tetap independen dari genom, yang disebut transfeksi sementara.

Dalam kedua kasus, DNA coding untuk suatu protein yang menarik sekarang di dalam sel, dan protein seka

dapat dinyatakan. Berbagai sistem, seperti promotor diinduksi dan spesifik sel-sinyal faktor, yang tersedia u

membantu mengekspresikan protein kepentingan di tingkat tinggi. Jumlah besar protein kemudian dapat di

dari sel bakte bakteri ri atau eukariotik. eukariotik. Prote Protein in dapat diuji untuk aktiv aktivitas itas enzimatik bawah berbagai situasi, protein

mengkristal sehingga struktur tersier yang dapat dipelajari, atau, dalam industri farmasi, aktivitas obat bar terhadap protein dapat dipelajari.

Polymerase chain reaction (PCR)

Master your semester with telah dit memungkinkan urutan DNA tunggal untuk Scribd disalin (jutaan kali), atau diubah dengan cara-cara yang Read Free Foron 30this Days Sign up to vote title  contoh, PCR dapat digunakan untuk memperkenalkan situs enzim restriksi, atau untuk bermutasi & TheSebagai New York Times Useful  Not useful  (mengubah) basa tertentu DNA, yang terakhir adalah metode disebut sebagai "perubahan Cepat". PCR juga

Reaksi berantai polimerase adalah teknik yang sangat serbaguna untuk menyalin DNA. Secara singkat, PCR

Cancel anytime.

Special offer for students: Only $4.99/month. digunakan untuk menentukan apakah suatu fragmen DNA tertentu ditemukan di perpustakaan cDNA. PCR m

banyak variasi, seperti PCR transkripsi terbalik (RT-PCR) untuk amplifikasi RNA, dan, baru-baru ini, real-tim





Home



Saved



Top Charts



Books



Audiobooks



Magazines



News



Documents



Sheet Music

Master your semester with Scribd & The New York Times Special offer for students: Only $4.99/month.



Upload

Sign In

Read Free For 30 Days Cancel anytime.

Join





Search



Home



Saved

1.0K views

0



Sign In

Upload

RELATED TITLES

0




Top Charts



Books



Audiobooks



Magazines



News



Documents



Sheet Music

Join












Save

Embed

Share

Print

Download

1

of 4


 

Makalah Biomol


 Search document




noda''''utara sebenarnya tidak menggunakan istilah itu. Kombinasi lebih lanjut dari teknik ini menghasilkan

istilah-istilah seperti''southwesterns''(protein-DNA hybridizations),''northwesterns''(untuk mendeteksi prote interaksi) dan farwesterns''''(interaksi protein-protein), yang semuanya saat ini ditemukan dalam literatur.

Southern blotting

Dinamai setelah penemunya, biologi Edwin Selatan, Selatan Blot adalah metode untuk menyelidiki keberada

sekuens DNA tertentu dalam sampel DNA. DNA sampel sebelum atau setelah pencernaan enzim restriksi dip

dengan elektroforesis gel dan kemudian ditransfer ke membran dengan blotting melalui aksi kapiler. Memb

tersebut kemudian terkena probe DNA berlabel yang memiliki urutan basa pelengkap untuk urutan DNA pad

bunga. Kebanyakan protokol asli yang digunakan label radioaktif, namun non-radioaktif alternatif yang seka tersedia. Southern blotting kurang umum digunakan dalam ilmu laboratorium karena kapasitas teknik lain,

PCR, untuk mendeteksi urutan DNA spesifik dari sampel DNA. Bercak ini masih digunakan untuk beberapa a

bagaimanapun, seperti mengukur jumlah salinan transgen pada tikus transgenik, atau rekayasa gen sel ind KO embrio.

Northern blotting

Blot utara digunakan untuk mempelajari pola ekspresi dari jenis tertentu molekul RNA sebagai perbandinga

antara set sampel yang berbeda dari RNA. Ini pada dasarnya adalah kombinasi dari denaturasi RNA elektrof

gel, dan sebuah noda. Dalam proses ini RNA dipisahkan berdasarkan ukuran dan kemudian ditransfer ke me

yang kemudian diperiksa dengan pelengkap berlabel urutan kepentingan. Hasilnya dapat digambarkan mela

berbagai cara tergantung pada label yang digunakan, namun hasil yang paling dalam penyataan band yang

mewakili ukuran RNA terdeteksi dalam sampel. Intensitas band-band ini berkaitan dengan jumlah RNA targ

sampel yang dianalisis. Prosedur ini umumnya digunakan untuk mempelajari kapan dan berapa banyak eks

You're Reading a Preview

yang terjadi dengan mengukur berapa banyak bahwa RNA hadir dalam sampel yang berbeda. Ini adalah sa alat yang paling dasar untuk menentukan pada waktu apa, dan kondisi apa, gen-gen tertentu yang Unlock full access with dalam a free trial. dinyatakan dalam jaringan hidup.

Western blotting

Download With Free Trial

Antibodi terhadap protein yang paling dapat dibuat dengan menyuntikkan sejumlah kecil protein menjadi bi seperti mouse, kelinci, domba, atau keledainya (antibodi poliklonal) atau diproduksi dalam kultur sel (anti monoklonal). Antibodi ini dapat digunakan untuk berbagai teknik analisis dan preparatif.

Master your semester withdipisahkan Scribd  pelat Di barat blotting, protein yang pertama oleh ukuran, dalam gel tipis terjepit di antara dua Read Free Foron 30this Days Sign up to vote title  Prot teknik yang dikenal sebagai SDS-PAGE (natrium sulfat dodesil poliakrilamida elektroforesis gel). & Thedalam New York Times Useful  Not useful  dalam gel kemudian ditransfer ke PVDF, nitroselulosa, membran nilon atau dukungan lainnya. Membran ini Cancel anytime.

Special offer for students: Only $4.99/month. kemudian bisa dideteksi dengan solusi antibodi. Antibodi yang secara khusus mengikat protein yang menar





Home



Saved



Top Charts



Books



Audiobooks



Magazines



News



Documents



Sheet Music




Upload

Sign In


Join





Search



Home



Saved

1.0K views

0



Sign In

Upload

Join

RELATED TITLES

0




Top Charts



Books



Audiobooks



Magazines



News



Documents



Sheet Music












Save

Embed

Share

Print

Download

1

of 4


 

Makalah Biomol


 Search document




Sebuah array DNA adalah kumpulan bintik-bintik melekat pada dukungan solid seperti slide mikroskop dim masing-masing berisi satu atau lebih beruntai tunggal oligonukleotida fragmen DNA. Array memungkinkan

meletakkan jumlah besar bintik-bintik yang sangat kecil (100 diameter micrometre) pada slide tunggal. Set

tempat memiliki molekul DNA fragmen yang melengkapi urutan DNA tunggal (mirip dengan blotting Selatan

Sebuah variasi dari teknik ini memungkinkan ekspresi gen dari suatu organisme pada tahap tertentu dalam

pembangunan yang berkualitas (profiling ekspresi). Dalam teknik ini RNA dalam jaringan adalah terisolasi d

diubah menjadi cDNA berlabel. Ini cDNA ini kemudian hibridisasi dengan fragmen di array dan visualisasi hi

dapat dilakukan. Sejak beberapa array dapat dilakukan dengan posisi yang sama persis fragmen mereka sa

berguna untuk membandingkan ekspresi gen dari dua jaringan yang berbeda, seperti jaringan sehat dan ka

Juga, kita dapat mengukur apa gen disajikan dan bagaimana perubahan ekspresi yang dengan waktu atau d

faktor lain. Sebagai contoh, ragi roti yang umum itu,''Saccharomyces cerevisiae'', mengandung sekitar 7000

dengan microarray, orang dapat mengukur secara kualitatif bagaimana gen masing-masing dinyatakan, dan bagaimana bahwa perubahan ekspresi, misalnya, dengan perubahan suhu. Ada banyak cara yang berbeda untuk mengarang mikroarray; yang paling umum adalah chip silikon, mikro slide dengan bercak ~ 100 diameter micrometre, array kustom, dan array dengan bercak yang lebih besar membran berpori (macroarrays). Ada bisa dimana saja dari 100 spot ke lebih dari 10.000 pada array yang diberikan.

Array juga dapat dibuat dengan molekul lain dari DNA. Sebagai contoh, sebuah array antibodi dapat diguna untuk menentukan apa yang protein atau bakteri yang hadir dalam sampel darah.

Oligonukleotida spesifik alel Oligonukleotida alel spesifik (ASO) adalah teknik yang memungkinkan deteksi mutasi basa tunggal tanpa memerlukan elektroforesis PCR atau gel. Pendek (20-25 nukleotida panjang), probe berlabel terkena DNA You're Reading a Preview

non-terfragmentasi. Hibridisasi terjadi dengan kekhususan tinggi karena panjang pendek dari probe dan ba full access a free trial. perubahan basa tunggal akan menghambatUnlock hibridisasi. DNAwith target kemudian dicuci dan probe label yang tid

berhibridisasi dihapus. DNA target kemudian dianalisa untuk kehadiran probe melalui radioaktivitas atau flu Dalam percobaan ini, seperti dalam kebanyakan teknik biologi molekular, Download With Free Trial kontrol harus digunakan untuk

memastikan percobaan berhasil. Illumina Metilasi Assay adalah contoh dari sebuah metode yang mengamb keuntungan dari teknik ASO untuk mengukur satu perbedaan pasangan basa secara berurutan.

Teknologi kuno

Master your with Scribd Dalam biologisemester molekular, prosedur dan teknologi yang terus-menerus dikembangkan dan teknologi yang Read Free Foron 30this Days Sign up to vote title  Misalnya, sebelum munculnya gel elektroforesis DNA (agarosa atau Polyacrylamide), ukuran m & Theditinggalkan. New York Times Useful  Not useful  DNA biasanya ditentukan oleh tingkat sedimentasi di gradien sukrosa, teknik lambat dan padat karya yang Cancel anytime.

Special offer for students: Only $4.99/month. membutuhkan instrumentasi mahal; sebelum gradien sukrosa, viscometry digunakan .





Home



Saved



Top Charts



Books



Audiobooks



Magazines



News



Documents



Sheet Music




Upload

Sign In


Join





Search



Home



Saved

0

1.0K views



Sign In

Upload

RELATED TITLES

0




Top Charts



Books



Audiobooks



Magazines



News



Documents



Sheet Music

Join












Save

Embed

Share

Print

Download

1

of 4


 

Makalah Biomol


 Search document




Peringatan: Halaman ini adalah terjemahan mesin halaman ini aslinya dalam bahasa Inggris. Harap

diperhatikan karena terjemahan yang dihasilkan oleh mesin, tidak semua terjemahan akan sempurna. We

ini dan halaman web yang dimaksudkan untuk dibaca dalam bahasa Inggris. Setiap terjemahan dari webs

dan halaman web yang mungkin tidak tepat dan tidak akurat secara keseluruhan atau sebagian. Terjema disediakan sebagai kenyamanan.

You're Reading a Preview Unlock full access with a free trial.

Download With Free Trial


Read Free Foron 30this Days Sign up to vote title



 Not useful Cancel anytime.

Useful

 





Home



Saved



Top Charts



Books



Audiobooks



Magazines



News



Documents



Sheet Music




Upload

Sign In


Join



Teknik Biologi Molekuler

Recommend Documents