Squash Akar bawang merah

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM MIKROTEKNIK  PEMBUAT PEMB UATAN AN PREPARAT PR EPARAT AKAR BAWANG BAWANG MERAH ME RAH METODE  SQUASH 

Disusun Oleh: Nama NIM Kelas Kel!m(!)

: Wiji Set! Utami : K"#$%&'% :B :*

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI +AKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNI,ERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA %&$* PEMBUATAN PREPARAT AKAR BAWANG MERAH METODE  SQUASH  ITU.UAN 1. Meng Mengeta etahu huii pros prosed edur ur pembu pembuat atan an prep prepara aratt akar akar bawa bawang ng merah merah melal melalui ui

metode squash metode squash dengan pewarnaan aceto-orsein 2. Menganalisis Menganalisis hasil pengam pengamatan atan preparat preparat akar bawang bawang merah menggu menggunakan nakan metode squash metode squash dengan pewarnaan aceto-orsein II-

ALAT DAN BAHAN

A- Alat:

1. Mikroskop 2. Beaker glass 3. Object glass 4. Cover glass / deg glass 5. Kertas saring 6. Pipet tetes 7. Botol flakon 8. Stopatch !. Kuas "#. Penjepit kau "". Bunsen "2. Kaki tiga "3. !ermometer "4. Karet penghapus $/B- Bahan:

1. %#"/*'-

III-

"jung akar bawang merah # $ll%u& cepa$ %&uades %%' ()* +rsein %ceto-orsein ,l 1  'liserin . PRINSIP KER.A 0. Melakukan penanaman bawang merah sampai tumbuhna akar selama 13 hari. %kar bawang ang sudah tumbuh dipotong sepanjang ) mm dari ujung akar. Pengambilan ujung akar dilakukan pada pukul 13.33 45B. "jung akar bawang merah lalu dimasukkan ke dalam botol flakon. %kar difiksasi dengan larutan %%' ()* kemudian disimpan di dalam kulkas selama 2 6 2(  jam. %&uades dipanaskan dengan bunsen dan diukur suhuna dengan termometer. %kar hasil fiksasi dicuci #ash%'g $ dengan cara mengganti larutan fiksatif dengan a&uades ang dilakukan sebanak tiga kali pengulangan masing-masing selama 2 menit. 7elanjutna dilakukan hidrolisis dengan menambahkan ,l 1  sebanak 1-2 tetes. Botol flakon berisi akar bawang merah ditutup rapat dan dimasukkan ke dalam air bersuhu 83 3 selama 2 menit. Kemudian akar dicuci kembali #ash%'g $ dengan cara mengganti larutan ,l dengan a&uades ang dilakukan sebanak tiga kali pengulangan masing-masing selama 2 menit. %kar bawang merah difiksasi dengan pewarna aceto-orsein selama ) menit. Squash%'g   dilakukan dengan cara mengambil akar menggunakan kuas dan meletakkanna di object glass.  Preparat akar  ditetesi dengan gliserin dan ditutup cover glass kemudian ditekan dengan karet penghapus. Preparat akar bawang merah diamati di bawah mikroskop

I,-

dan hasil pengamatan didokumentasikan. 13. 11. 12. 19. 1(. 1). 18. 1. DATA PENGAMATAN

1.

91. 92.

10.

99.

23.

9(.

21.

9).

22. 29. 2(. 2). 28. 2. 2. dinding sel

nukleus

20. 93. 98.

,asil pengamatan preparat squash akar  9.

,-

 bawang merah di bawah mikroskop #perbesaran 136$

9. PEMBAHASAN 90. Metode squash merupakan teknik pembuatan preparat dengan cara menekan bahan ang akan digunakan sampai terbentuk lapisan ang sangat tipis sehingga bagian sel ang ingin diamati terlihat dengan jelas. Bahan ang sering digunakan dalam metode ini adalah anther bunga kembang sepatu ataupun akar dari bawang merah. Metode  squash lebih mengarah pada  pembelahan sel ang terjadi pada ujung akar. "jung akar ang sering digunakan adalah bagian akar ang baru tumbuh atau bagian apeksna aitu  bagian ang berwarna putih. Pada bagian tersebut seringkali terjadi  pembelahan mitosis #7antoso 2332$. (3. 7etiap tahapan dalam prosedur metode  squash  mempunai tujuan tertentu. Pengambilan ujung akar dilakukan pada pukul 13.33 45B karena selsel akar bawang merah melakukan mitosis pada inter:al waktu tersebut. Pembuatan preparat metode  squash dimulai dengan tahap fiksasi ang dilakukan dengan larutan %%' ()*. ;iksasi bertujuan untuk mempertahankan komponen dari sel-sel ujung akar bawang merah sehingga tetap dalam

keadaan hidup. !ahap pencucian #ash%'g $ dilakukan dengan cara mengganti larutan fiksatif dengan a&uades sebanak tiga kali pengulangan. (ash%'g   bertujuan untuk menghilangkan larutan fiksatif di dalam flakon agar  memudahkan praktikan dalam proses selanjutna. ,idrolisis dengan ,l  bertujuan untuk melisiskan lamella tengah. ,< ang digunakan saat hidrolisis digunakan sebagai katalisator ang dapat menghilangkan lignin dan hemiselulosa. Perendaman dalam air ang dipanaskan bertujuan untuk  melunakkan sel akar bawang supaa lebih mudah saat menekan sel akar   bawang sehingga mudah hancur. !ahap pewarnaan dengan aceto-orsein  bertujuan untuk mewarnai kromosom sehingga dapat diamati dengan jelas di  bawah mikroskop. %ceto orcein merupakan pewarna ang dibuat dengan menggunakan bubuk orcein dan asam asetat 00*. Squash%'g   #pemencetan$  bertujuan untuk menipiskan sel agar sel menebar sehingga tampak jelas ketika pengamatan preparat. 7ebelum dilakukan  squash%'g  object glass ditetesi dengan gliserin terlebih dahulu. Pemberian gliserin bertujuan untuk  memudahkan proses  squash%'g dan menjaga kesegaran bahan karena sifat gliserin ang kental dan licin serta sulit menguap. Pengambilan sampel akar   bawang dilakukan di pagi hari dikarenakan mitosis akar bawang merah terjadi di pagi hari. "$- !eknis pelaksanaan metode s&uash harus sesuai dengan prosedur  ang ada karena kesalahan teknis akan mempengaruhi tahapan selanjutna dan keberhasilan pembuatan preparat akar bawang merah. 7etiap prosedur harus dicermati dengan baik demikian pula ketepatan waktu ang diperlukan pada masing-masing tahapan. Pengambilan ujung akar dari botol flakon ke object   glass dilakukan dengan bantuan kuas agar meminimalisir terjadina kontaminasi

dari

tangan

praktikan.

Penekanan

akar

bawang

tidak 

menggunakan ujung pensil atau pulpen melainkan karet penghapus. "jung  pensil atau pulpen terlalu keras sehingga dapat menebabkan cover glass  pecah sementara karet penghapus lebih lunak dari ujung pensil sehingga dapat memudahkan squash%'g  preparat tanpa menebabkan cover glass pecah. (2. Mitosis adalah proses pembagian genom ang telah digandakan oleh sel ke dua sel identik ang dihasilkan oleh pembelahan sel. Mitosis

umumna diikuti oleh sitokinesis #pembagian sitoplasma dan membran sel$. Proses ini menghasilkan dua sel anak ang identik dan bertujuan untuk  mempertahankan pasangan kromosom ang sama melalui pembelahan inti secara berturut-turut. Proses mitosis terjadi di dalam sel somatik ang bersifat meristematik aitu sel-sel ang hidup terutama sel-sel ang sedang tumbuh misalna di ujung akar #Muhlisah et al 231($. (9. Bawang merah # $ll%u& cepa$ memiliki komposisi dinding sel ang tersusun dari lapisan senawa-senawa ang relatif mudah ditembus oleh larutan fiksatif dan pewarna #7astrosumarjo 2338$. !anaman bawang merah  bersifat diploid dengan jumlah kromosom sebanak 2n = 18 ang dapat dikelompokkan menjadi  pasangan kromosom. ,al ini sangat membantu dalam mempelajari analisis mitosis pada tanaman karena jumlahna ang tidak terlalu banak ukuran kromosom ang besar dan pembuatan preparat ang

cukup

 berdasarkan

mudah

#7tack

100$. Menurut

posisi

sentromerna

7ulistaningsih #233($

kromosom-kromosom

tersebut

dikelompokkan menjadi 9 macam aitu metasentrik #( pasang kromosom> kromosom nomor 1 9 ) dan $ submetasentrik #9 pasang kromosom> kromosom nomor 2 ( dan $ dan subtelosentrik dengan satelite kecil #1  pasang kromosom> kromosom nomor 8$. ((. rowder #2338$ menatakan bahwa mitosis pada tanaman terjadi selama 93 menit sampai beberapa jam. Mitosis pada akar bawang merah terjadi melalui beberapa fase aitu profase metafase anafase dan telofase. a. Profase merupakan transisi dari fase '2 ke fase pembelahan inti atau mitosis #M$ dari siklus sel. !ahap profase merupakan tahap awal dalam mitosis. ;ase ini ditandai dengan hilangna nukleus dan mulai tampak   pilinan-pilinan kromosom ang terlihat tebal. 7elaput inti #nukleolus$ mulai berdegenerasi kemudian perlahan-lahan inti tidak tampak dan terjadilah pembentukan spindel mikrotubul.  b. Metafase merupakan fase mitosis dimana kromosom mulai berjajar di  bidang e&uator. 7elama metafase sentromer dari setiap kromosom  berkumpul pada bagian tengah spindel pada bidang e&uator. Pada tempattempat ini sentromer-sentromer diikat oleh benang-benang spindel ang

terpisah dimana setiap kromatid dilekatkan pada kutub-kutub spindel ang berbeda. Kadang-kadang benang spindel tidak berasosiasi dengan kromosom dan merentang secara langsung dari satu kutub ke kutub ang lain. Pada saat metafase sentromer-sentromer diduplikasi dan setiap kromatid

menjadi

Penggunaan

kromosom

metode

tanpa

ang pra

berdiri

perlakuan

sendiri

#independen$.

#metode

sederhana$

mengakibatkan kromosom pada metafase tidak dapat menebar dengan  baik sehingga jumlah kromosom tidak dapat dihitung dengan tepat. c. %nafase ditandai dengan terjadina pemisahan  s%ster chro&at%ds membentuk anak kromosom ang bergerak menuju kutub spindel ang  berlawanan. Kromosom nampak mengalami penebalan sehingga dapat dilihat secara jelas dengan mikroskop. d. !elofase merupakan fase terakhir pada mitosis. Pada fase ini nampak  adana dinding pemisah ang berupa sekat ang belum sempurna dan memisahkan kromosom-kromosom ang telah mencapai kutub. 7ekat  belum sempurna dan sel belum benar-benar terpisah tetapi tanda akan terbentukna dua sel sudah mulai tampak. Penampakan kembali nukleus merupakan tanda bahwa mitosis sudah berakhir #7chult?-7chaeffer 103$. (). 7itokinesis pada dinding sel tumbuhan tingkat tinggi melibatkan :esikula-:esikula ang berasal dari badan 'olgi dan mikrotubul-miktotubul ang tersusun paralel dan disebut fragmoplas. @esikula-:esikula ang berasal dari

badan

golgi

berasosiasi

dengan

mikrotubula

fragmoplas

dan

ditranslokasikan sepanjang mikrotubula ke arah e&uator. @esikula-:esikula tersebut selanjutna terakumulasi pada daerah dimana mikrotubula fragmoplas mengalami overlap. Kemudian berfusi satu sama lain membentuk lempeng sel #cell plate$.
merah tidak dapat diketahui. %lasanna karena perbesaran ang digunakan untuk

mengamati

preparat terlalu

lemah #perbesaran

136$ sehingga

keberadaan kromosom maupun benang-benang kromatin tidak terlihat. (. ,I-KESIMPULAN (. Metode squash merupakan teknik pembuatan preparat dengan cara menekan bahan ang akan digunakan sampai terbentuk lapisan ang sangat tipis sehingga bagian sel ang ingin diamati terlihat dengan jelas. Prinsip kerja  pada metode  squash  secara umum aitu penanaman akar bawang fiksasi ash%'g  hidrolisis pewarnaan pemberian gliserin dan squash%'g . Pewarnaan  pada preparat squash menggunakan pewarna aceto-orcein. (0. Metode  squash pada pembuatan preparat akar bawang merah dilakukan untuk mengetahui terjadina mitosis. ;ase-fase pembelahan mitosis aitu> - 5nterfase )3. ukleus tampak keruh dan benang-benang kromatin ang halus -

terlihat Profase )1. %dana pemadatan benang-benang kromatin ang sangat halus

-

membentuk struktur berbentuk batang #kromosom$ Metafase )2. iri khas fase ini adalah kromosom-kromosom menempatkan diri

-

di bidang ekuatorial %nafase )9. !erjadi pemisahan  s%ster chro&at%ds membentuk anak kromosom

-

ang bergerak menuju kutub spindel ang berlawanan !elofase )(. 7el-sel membentuk sekat dan hampir membelah menjadi dua )). Pengamatan preparat akar bawang merah metode squash di bawah

mikroskop memperlihatkan bahwa preparat dapat dikatakan berhasil dari segi anatomis karena bagian-bagian sel ujung akar bawang merah dapat terlihat dengan jelas. amun fase pembelahan mitosis ang terjadi pada akar bawang merah tidak dapat diketahui. %lasanna karena perbesaran ang digunakan untuk

,II-

mengamati

preparat terlalu

lemah #perbesaran

136$ sehingga

keberadaan kromosom maupun benang-benang kromatin tidak terlihat. )8. DA+TAR PUSTAKA

).

rowder <. @. #2338$.  )e'et%ka *u&buha'. Aoakarta> 'ajah Mada

).

"ni:ersit Press. Muhlisah . Muthiadin . 4ahidah B. ;. %?i? 5. . #231($. Preparasi Kromosom ;ase Mitosis Markisa "ngu # +ass%,lora edul%s$

/0-

@arietas Cdulis 7ulawesi 7elatan. B%oge'es%s. 2#1$> (-)). 7antoso ,. B. #2332$. Baha' -ul%ah *ek'%k aborator%u&. etrie:ed

83.

from http>//maa.scribd.com/903102. 7astrosumarjo 7. Audiwanti 7. 5. %isah 7. 7ujiprihati M. 7ukur . Aunianti. #2338$. +a'dua' aborator%u&. /ala& S. Sastrosu&arjo

81.

01d. S%toge'et%ka *a'a&a'. Bogor> 5PB Press. 7chul?-7chaeffer D. #103$. Ctoge'et%cs +la'ts $'%&als u&a's.

82.

 ew Aork> 7pringer-@erlag. 7tack 7. M. E F. C. omings. #100$. !he romosomes and F% of 

89.

 $ll%u& cepa. Chro&oso&a. 3> 181-11. 7ulistaningsih C. #233($. ;ertilitas !anaman Bawang Merah /oubled   aplo%d . ur'al l&u +erta'%a'. 11#1$> 1-8. 8(.

,III-

LAMPIRAN 65. 1 lembar dokumentasi hasil pengamatan preparat squash

88. 8. 8. *0- LAMPIRAN

3. 1. 2. 9. (.