Rendimiento del bloque celular en muestras citológicas

Rendimiento del bloque celular en muestras citológicas Carmen Beorlegui, Sonia Beltrán, Isabel Jáuregui, Mercedes Santamaría

Limitaciones del material citológico Muestras con escasa celularidad:    N     Ó    I    C    C    U    D    O    R    T    N    I

 – Órgano y naturaleza de la lesión  – Componentes no diagnósticos

Extensión gruesa: acúmulos Técnicas complementarias sobre PAP no adherentes y/o limitado número de extensiones

Razones para el bloque celular La inclusión en parafina p arafina consigue:    N     Ó    I    C    C    U    D    O    R    T    N    I

 – Material fijado y conservado  – Cortes de 4 µm sin superposiciones  – Portas adherentes para IHQ  – Fondo más limpio (interpretación)

Objetivo    N     Ó    I    C    C    U    D    O    R    T    N    I

Determinar la contribución del BC al diagnóstico definitivo de la lesión mediante la comparación de su diagnóstico con el de su correspondiente correspondiente citología.

MATERIAL  Y MÉTODOS

Material 1265 muestras:  – 763 PAAF    A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

 – 502 derrames

186 BC (14.7%):  – 112 (61%) PAAF - 74 (39%) derrames •Ganglio

(15.6%) •Hígado (10.2%) •Pulmón (9.7%)

•Pleural (22.6%) • Ascítico  Ascítico (4.8%) •Pericárdico (4.3%)

Material: Coágulo

   A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

Grumos celulares, coágulos sanguíneos o material precipitado espontáneamente Se recogen sobre filtro de biopsia Fijación en formol e inclusión en parafina 174 (93.5%) de los BC  – 63% procedentes de PAAF

Material: Citobloque Kit comercial: Shandon Cytoblock® Cell Block Preparation System    A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

12 (6.5%) de los BC  – 67% procedentes de derrames

Métodos

   A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

Citología • Fijación en alcohol 96º • PAP • IHQ a criterio del patólogo

BC • Fijación en formol • Inclusión en parafina • Cortes de 4 µm • HE • IHQ a criterio del

patólogo

Métodos Diagnósticos aplicados:  – Insuficiente  – Negativo / Benigno

   A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

 – Sospecha  – Positivo para células neoplásicas

El BC aporta al diagnóstico citológico  – cuando lo confirma mediante IHQ  – cuando lo posibilita

Consulta de base de datos electrónica  Análisis con SPSS v.15.0

RESULTADOS    A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

Comparación de:  – Diagnósticos  –  Técnicas realizadas Contribución del BC al diagnóstico

 1. Diagnósticos Citología vs. BC    S    O    D    A    T    L    U    S    E    R

Citología

BC

Insuficiente Insuficiente

40 (21%)

35 (19%)

Neg. / Benigno Sospecha

60 (33%) 17 (9%)

71 (38%) 5 (3%)

Positivo

69 (37%)

75 (40%)

Citología Insuficiente Suficiente Insuficiente

15

Suficiente

26 40

BC

   S    O    D    A    T    L    U    S    E    R



20 (57%) 125 145

35 (19%) 151 186

Citología valorable, BC insuficiente  



Material agotado en citología Coágulo espontáneo de material no valorable BC agotado durante el desbastado

Citología

Insuficiente

Insuficiente

Suficiente

15

20

35

26 (65%)

125

151

40 (21%)

145

186

BC Suficiente

   S    O    D    A    T    L    U    S    E    R



Citología insuficiente, BC valorable 



Muestra poco celular, celular, requiere concentración Coágulo espontáneo que engloba las células

 1. Diagnósticos Citología vs. BC    S    O    D    A    T    L    U    S    E    R

Citología

BC

Insuficiente Insufici ente

40 (21%)

35 (19%)

Neg. / Benigno

60 (33%)

71 (38%)

Sospecha

17 (9%)

5 (3%)

Positivo

69 (37%)

75 (40%)

Concordancia = 64% p = ns; Χ2

1. Diagnósticos Coágulo vs. Citobloque    S    O    D    A    T    L    U    S    E    R

Insuficiente Neg. / Benigno Sospecha Positivo

Coágulo Citobloque 33 (19%) 2 (17%) 69 (40%) 2 (17%) 4 (2%)

1 (8%)

68 (39%)

7 (58%) p = ns; Χ2

 2. Comparación de técnicas Citología 9 (5%)    S    O    D    A    T    L    U    S    E    R

BC 71 (38%) p <0.001; Χ2

Coágulo 69 (40%)

Citobloque 2 (17%) p = 0.135; Χ2

3. Contribución del BC al diagnóstico Lo precisa Lo determina

   S    O    D    A    T    L    U    S    E    R

TOTAL

13 (7%)

54 (29%)

36%

Derrame

2 (3%)

25 (34%)

37%

PAAF

11 (10%)

29 (26%)

36%

Coágulo

13 (8%)

51 (29%)

37%

0

3 (25%)

25%

Citobloque

Conclusiones

   S    E    N    O    I    S    U    L    C    N    O    C

1. La recolección de coágulos precipitados de forma espontánea es muy sencilla y da resultados similares al citobloque respecto a idoneidad del material, realización de técnicas y aporte al diagnóstico. 2.  El 82% de los BC contenían celularidad suficiente para realizar técnicas IHQ (38% vs. 5% Citología) 3. Los bloques celulares contribuyeron al diagnóstico final del 36% de las muestras, posibilitándolo en un 29%.

¡MUCHAS GRACIAS!

Citobloque Centrifugar (1500 rpm, 5’)

   A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

Decantar o aspirar el sobrenadante

Citobloque  Añadir el reactivo espesante espesante al botón celular 2:1    A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

Citobloque

   A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

Se añaden 3 gotas de reactivo coagulante en la cajita Se monta con el embudo y el citoclip

Citobloque  Añadir la suspensión al embudo Citocentrifugar 5 min a 1500 rpm    A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

Citobloque

   A     Í    G    O    L    O    D    O    T    E    M

Desmontar el citoclip  Añadir 1 gota gota de coagulante Cerrar la cajita Fijar en formol Incluir en parafina