PROYECTO DE TESIS I.
GENERALIDADES
1. Titulo
Formulación y control de calidad del gel a base de extracto de Ortiga ( Urtica dioica l) para dolores reumáticos.
2.
Autores Polo Jacobo Mainé. Tinoco Padilla Sintia Analid. Zurita Sarango Neptali.
3. Asesores 3.1 3.2 3.3
Nombre: Sonia Marleny Sánchez Minchola Grado Académico: Bachiller en Farmacia y Bioquímica Título Profesional: Químico Farmacéutica
4. Tipo de investigación 4.1
De acuerdo al fin que lo persigue : Aplicada
4.2
De acuerdo al diseño de investigación: Explicativa
5. Localidad e instituciones donde se desarrollara el proyecto 5.1
Institución:
Instituto Superior Privado “Pablo Casals”
5.2
Localidad Psje. Comercio 162-168 Urb. Huerta Grande (Espalda del Colegio San Juan). Trujillo
6. Duración de la ejecución del proyecto (en meses) 4 meses
7. Cronograma de trabajo HORAS ETAPA
FECHA DE INICIO
FECHA DE TERMINO
SEMANALES DEDICADAS
Recolección de datos
01/08/2016
01/09/2016
10 HORAS
Análisis
02/09/2016
02/11/2016
15 HORAS
Redacción
03/11/2016
03/12/2016
6 HORAS
8. Recursos 8.1
Personal 8.1.1 Autores Polo Jacobo Mainé. Tinoco Padilla Sintia Analid. Zurita Sarango Neptali. 8.1.2 Asesores Sonia Marleny Sánchez Minchola
8.2
Bienes 8.2.1 De consumo
Materiales de laboratorio e insumos . Alcohol de 96° Hojas de urtica dioca Trietanolaamina Carbopol Agua destilada Colorante Guantes descartables Envases de plástico Probetas 100 ml Pipetas 5 ml Vasos beakers 300 ml Capsulas
Materiales de escritorio Plumón marcador Lapiceros Lápices Borradores Resaltadores Papel bond Cinta adhesiva Regla metálica Cuadernos de apuntes Fólderes manila
8.2.2 De inversión
Materiales y equipos:
Balanza Mettler Cap. 200g., Estufa Memeert Agitador Homogeneizador Oster Lixiviador o percolador
8.3
Servicios Impresiones Fotocopias Empastado de informe final Internet Movilidad local Alimentación Fotografías .
9. Presupuesto 9.1 Materiales de Laboratorio Cód. Part.
Tipo de servicio
2.3.10.21 2.3.10.21 2.3.10.21
Alcohol de 96° 1 frasco Hojas de urtica dioca 2 kg Trietanolaamina 1 lt
15.00 5.00 25.00
15.00 10.00 25.00
2.3.10.21 2.3.10.21 2.3.10.21 2.3.10.21
Carbopol Agua destilada Colorante Guantes descartables Envases de plástico
2 kg 1 galón 10 ml 1 caja
150.00 9.00 20.00 20.00
300.00 9.00 20.00 20.00
100
1.00
100.00 499.00
2.3.10.21 SUB TOTAL
Cantidad
Unitario (s/.)
Total (s/)
9.2 Servicios Terceros Cód. Part.
Tipo de servicio
2.3.21.21 2.3.21.21 2.3.21.21
Impresiones Fotocopias Empastado informe final Internet Movilidad local Alimentación Fotografías
2.3.21.21 2.3.21.21 2.3.21.21 2.3.21.21 SUB TOTAL
Cantidad
Unitario (s/.)
Total (s/)
300 150 01
0.30 0.10 25.00
90.0 15.00 25.00
1 moden 70 36 dias 10
200.00 4.00 15.00 0.50
200.00 280.00 540.00 5.00 1,155.00
9.3 Servicios Limpieza Cód. Part.
Tipo de servicio
2.3.16.31 2.3.16.31 2.3.16.31
Esponja Detergente Agua destilada
2.3.16.31 2.3.16.31 SUB TOTAL
Papel toalla Franela
Cantidad
Unitario (s/.)
Total (s/)
1 caja 1 unid 2 lt
20.00 5.00 15.00
20.00 5.00 30.00
2 paquetes 3 mts
15.00 5.00
30.00 15.00 100.00
9.4 Material de escritorio Cód. Part.
Tipo de servicio
2.3.16.12 2.3.16.12 2.3.16.12
Papel periódico Plumones Lapiceros
2.3.16.12 2.3.16.12 SUB TOTAL
Resaltado Corrector
Cód. Part. 2.3.16.31 2.3.10.21 2.3.16.12 2.3.21.21 SUB TOTAL
10.
Cantidad
Unitario (s/.)
Total (s/)
2% 3 unid 10 unid
3.00 2.00 0.50
6.00 6.00 5.00
1 1
3.00 3.00
3.00 3.00 23.00
Denominación de la partida Materiales de limpieza Materiales de laboratorio Materiales de escritorio Servicios Terceros
Monto (s/.)
Financiamiento El proyecto es autofinanciado por los propios alumnos.
100.00 499.00 23.00 1155.00 1,777.00
II PLAN DE INVESTIGACIÓN 1. Antecedentes y justificación del problema La curiosidad del hombre hacia el hallazgo de una alternativa para el alivio de sus enfermedades, lo han llevado a utilizar diferentes medios a su alcance empleando la mayoría de las veces plantas, pues poseen una gran cantidad de riquezas medicamentosas con actividades muy diversas unidas a material inerte. Se conocen numerosas especies de plantas reconocidas por sus virtudes medicinales y cuyo uso se ha extendido desde la antigüedad hasta nuestros días. Tal es el caso de la Urtica dioica L., (Urticaceae), comúnmente conocida como "Ortiga" o "Pringamosa", que se caracteriza por estar cubierta de pelos urticantes, cada uno de los cuales contiene: ácido fórmico y además sustancias histamínicas, resina, silicio, acetilcolina, potasio, vitamina A, provitamina C, taninos, glucoquininas y una gran cantidad de clorofila. Se reporta también dentro de la composición de la planta ácido gálico, serotonina, mucílago, minerales (S, Si, Fe, Ca, K, P), betacarotenos, flavonoides y pectina (aurasalud.com, 2001)
Taxonomía La taxonomía de la ortiga mayor en el género Urtica ha sido confusa, y las fuentes antiguas eran dadas a usar una gran variedad de nombres sistemáticos para estas plantas. Anteriormente, eran reconocidas más especies de las que son actualmente aceptadas. Sin embargo hay al fin cinco claras subespecies, algunas clasificadas anteriormente como especies: Urtica dioica subsp. dioica (ortiga mayor europea). Europa, Asia, África del Norte Urtica dioica subsp. afghanica. Sudoeste y Asia central. Urtica dioica subsp. gansuensis C.J.Chen Este de Asia (China) Urtica dioica subsp. gracilis (Aiton) Selander (ortiga mayor americana). Norteamérica Urtica dioica subsp. holosericea (Nutt.) Thorne (ortiga pilosa). Norteamérica. (1)
Descripción Hierba anual, monoica, erecta o ascendente de 15-50 cm de alto. Tallo simple, poco ramificado, recubierto de pelo urticantes. Hojas, inciso dentadas, apretadas, apiñadas, ovales de 2-5 cm de longitud por 0,6 – 3,0 cm de ancho raramente más largas, redondeadas o agudas en el ápice. Inflorescencia en glomérulas. Flores unisexuales, subsésiles. Las masculinas con perigonio de 4 tépalo calicinos y con pelos en la cara exterior, 5 estambres opuestos a los tépalos, filamentos elásticos, encorvados o en capullos hacia el centro de la flor. Anteras biloculares Pistilodio cupuliforme. Las flores femeninas con perigonio de 4 tépalos sepaloides desiguales 2 grandes y 2 pequeños, ovarios unilocular,
uniovular, estigma penicelado, sésil o subsésil. El fruto es un aquenio de 1,5 – 2,0 cm de longitud. Fuertemente aplanados.
Hábitat Especie propia de Europa, introducida y ampliamente distribuida en América. En el Perú se ha llegado a naturalizar en toda la región costeña y andina, donde frecuenta las comunidades lomales y comunidades ruderales en los escombros, basurales, alrededor de los corrales de ganado, es decir en lugares de alta concentración de materia orgánica en descomposición, ricas en nitrógeno y lugares sombríos de las laderas rocosas, o de laderas abiertas o de pastizales. (2) Clima: Cálido, templado, frío a muy frío. Temperatura (°C), 8-26. Precipitación (mm): 500-1200. Humedad Atmosférica (%): 50-80. (2) Composición química Propiedades y usos La ortiga fue una planta muy utilizada en la antigüedad. El término latino urtica deriva de la palabra ob urendo, que significa quemante. El efecto urticante y rubefaciente de sus hojas al ser frotada en todo el cuerpo proporcionaba el calor y abrigo necesario para soportar las inclemencias invernales. Los romanos sacudían las articulaciones dolorosas con ramas de ortiga para aliviar sus dolores, costumbre que se mantuvo hasta finales del siglo pasado. La realización de un baño en donde se ha añadido un litro de infusión de ortiga relaja el nervio ciático y disminuye el dolor. Otras solución más drástica, aunque más efectiva, consiste en pasar por la zona dolorida una ramita de ortiga fresca con la finalidad de que los principios urticantes produzcan una reacción en el organismo que, por un lado enmascaren el dolor ciático, y por el otro , desinflamen y anulen el dolor de la zona afectada al cabo de unos días. Por otro lado existen numerosos estudios de investigación realizados anteriormente donde se ha demostrado diversas propiedades de esta planta entre los cuales destaca uno que es materia de nuestro interés donde la ortiga sería útil en el tratamiento de la artritis reumatoide. El estudio revela el efecto de extractos de hojas de ortiga (Urtica dioica L.) sobre la activación de NF-kB el cual es un factor de transcripción crítico para la expresión inducible de muchos genes implicados en las respuestas inflamatorias se ha demostrado que los extractos de Urtica inhiben la expresión de varias citoquinas, así como la formación de eicosanoides en células estimuladas de sangre periférica , lo que sugiere que al menos parte del efecto antirreumático de extracto de Urtica se puede atribuir a su capacidad de inhibir los factores de transcripción proinflamatorio. (2) Parte usada de la planta: Raíz, tallo, hojas, flores.
Forma de preparación Infusión, tintura, jugo. Usos etnomedicinales: Componentes: Acido gálico, ácido fórmico, caroteno, vitamina C, tanino, potasio, hierro, calcio, silicio. Usos: Afecciones de la vejiga, astrigente, caída del cabello, cefalalgia, cólicos, cosmética, depurativa, diaforética, diurética, enfermedades del riñón, estomáquica, hemorragias uterinas, hemorroides, hemostática, hidragoga, hidropesía, hipertensora, inflamación, lumbago, luxaciones, menstruación, neumonía, pectoral; promueve la eliminación del ácido úrico, prurito, remineralizante, revulsiva; sales minerales: hierro, soroche, tónica, tuberculosis, urticante, várices, vesicante. Empleado como para preparar exquisitas ensaladas, previa ebullición. Sirve para la extracción de una alta proporción de clorofila. De los tallos se extraen fibras para la confección de tejidos y cuerdas de gran resistencia. Forraje adecuado para numerosas especies animales. La raíz posee acción litóntrica, las semillas favorecen las reglas y son antienurésicas en los niños. Se golpea con la planta en la zona de dolores reumáticos, esto es eficaz, aunque doloroso. (2) La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad inflamatoria sistémica de curso crónico, de causa multifactorial y origen autoinmune, cuya mayor caractrización es dolor y daño articular con progresiva discapacidad. Es causa de una alta tasa de morbimortalidad que puede llevar al deterioro de la calidad de vida del individuo como paciente, a su familia y a la sociedad en la que se desenvuelve. Como expresión de factores ambientales, mestizaje étnico y carga genética que esto conlleva, las características epidemiológicas y clínicas de la artritis reumatoide varían en algunos aspectos en las diferentes regiones del continente latinoamericano, donde sigue siendo considerada un pr oblema mayor de salud pública y creemos que todavía no es bien reconocida en esa dimensión por las entidades pertinentes. Los resultados de prevalencia de enfermedades reumatológicas en una área urbana marginal de población homogéneamente mestiza de Perú en el año 2012 da como resultado que la prevalencia de Artrititis Reumatoide en la población fue de 0,51 (3)
GELES. Los geles son formas farmacéuticas de consistencia semirrígida, generalmente no tienen aceites grasos, destinados a aplicarse sobre las membranas mucosas, no tienen poder de penetración, por eso se utilizan para ejercer acción tópica (de superficie).
VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS GELES. Ventajas -
Son bien tolerados Fácilmente lavables Producen frescor
Desventajas - Incompatibilidad con numerosos principios activos - Tendencia a la desecación - Bajo poder de penetración (indicados para tratamientos superficiales)
Características De Un Gel Las características principales que posee un gel son: a)
Estos tienen una consistencia semisólida o fluida.
b) c) d) e)
Su aspecto puede ser un transparente o turbio. Presentan una estructura de tipo continua. Comportamiento pseudoplástico. El pH está entre 4,5 y 8,5. (24)
MECANISMO DE FORMACIÓN DE UN GEL. Los productos gelificantes se pueden agrupar del siguiente modo: -
Polímeros que dan lugar a un gel dependiente del pH del medio.
-
Polímeros que dan lugar a un gel por sí mismo, independiente del pH del medio.
Los primeros dan lugar a soluciones ácidas que al neutralizar con las bases adecuadas, aumentan la viscosidad y disminuyen la turbidez del medio. El mecanismo por el cual se forma el gel es el siguiente: a bajos valores de pH, se disocia una pequeña proporción de grupos carboxílicos del polímero, formando una espiral flexible. La adición de una base produce la disociación de grupos carboxílicos, ionizándose, creando repulsión electrostática entre las regiones cargadas, expandiéndose la molécula, haciendo más rígido el sistema, gelificándolo. Se pasa de una estructura espiralada a una desenrollada o extendida, ejemplo Carbomer. Si se agrega un exceso de base puede producir una pérdida de viscosidad al neutralizarse los grupos carboxílicos.
DETERMINACIÓN DE LAS CANTIDADES Y TIPOS DE EX CIPIENTES ADECUADOS PARA LA FORMULACIÓN DE LOS GELES ANTIMICÓ TICOS. Preparación Del Gel Sin Antioxidante. Para la preparación de un lote de un litro de gel a ntimicótico al 25 % partimos de la siguiente fórmula: INGREDIENTES Carbopol 940 NF
CANTIDADES 20,8 g
MPB ( Metil parabeno sódico) NF
0. 800g
PPB (Propil parabeno sódico) NF
0.080g
TEA (trietanolamina)
26 g
Dimeticona
10,0
Agua Extracto fluido (Manzanilla,Matico,Marco)
960 mL de 25 g
Proceso de preparación del gel.
Calentar 960 mL de agua destilada a 80ºC e incorporar el propilparabeno y el metil parabeno, agitar hasta completa disolución y enfriar a temperatura ambiente.
Adicionar carbopol 940 con agitación constante hasta formación de un gel homogéneo el cual se deja en reposo 24 horas de anticipación para lograr una buena
hidratación, esta solución coloidal tiene un pH de 3.0.
Seguidamente añadir Dimeticona.
Adicionar TEA con movimiento lento procurando no incorporar burbujas de aire hasta que adquiera características de gel o pH de 6.5.
Finalmente se incorpora el extracto antimicótico al 25%.
Envasar en envases de plástico y aluminio y etiquetar.
Preparación Del gel con antioxidante. Para la preparación de un lote de un litro de gel a ntimicótico al 25 % partimos de la siguiente fórmula:
INGREDIENTES Carbopol 940 NF
CANTIDADES 20,8 g
MPB ( Metil parabeno sódico) NF
0. 800g
PPB (Propil parabeno sódico) NF
0.080 g
TEA (trietanolamina) Dimeticona
26 g 10,0
Agua
960 mL
EDTA Extracto fluido de (Manzanilla, Matico, Marco)
0.500g 25 g
Proceso de preparación del gel. El proceso de la preparación del gel antimicótico c la preparación del gel antimicótico sin antioxidant en este caso EDTA (Edetato Disódico). Con antioxidante es similar al expuesto en e pero con la adición de un antioxidante.
CONTROL DE CALIDAD DE LOS PRODUCTOS TERMINADOS Control de calidad del gel. El control de calidad de producto terminado tiene como propósito determinar si una forma farmacéutica posee los atributos de calidad previamente establecidos. Estos atributos buscan poder conseguir en último término que el medicamento cumpla el objetivo para el cual fue diseñado de manera segura y eficaz.
Determinación Organoléptica Del Gel Al gel se procede a analizar el aspecto, color, olor, sabor. Aspecto: Es un gel homogéneo untuoso al tacto, libre de grumos. al ser analizada mediante visualización directa. Color: verde que se determina por el tinte que presenta el gel Olor: Característico a la plantas Determinación de la presencia de grumos en el gel
Tomar una pequeña cantidad de crema con los dedos y aplicar suavemente en el dorso de la mano y observar si hay la presencia o ausencia de grumos
Determinación de untuosidad al tacto del gel. Tomamos una pequeña cantidad de gel con los dedos y aplicamos suavemente en el dorso de la mano y observamos si hay la presencia de arenosidad.12 , cúrcuma , árnica, etc. pero no existe en nuestro medio un gel a base de ortiga por lo que conociendo la bondades terapéuticas de esta especie vegetal es que nos hemos propuesto la obtención de un formulación tópica a base del extracto de la planta, que pueda ser estudiada y evaluada clínicamente en dolores reumáticos en posteriores trabajos experimentales. 2. PROBLEMA ¿Es posible formular un gel a base de extracto de Urtica dioica L que cumpla con los estándares de calidad para tratar dolores reumáticos? 3. OBJETIVO
3.1 OBJETIVO GENERAL:
Formular el gel a base de extracto de Urtica dioic a L
3.2 OBJETIVO ESPECIFICO
Obtener el extracto de la Urtica dioic a L Elabora un gel con concentración y dosis APROPIADA Realizar CONTROL DE CALIDAD de la formulación
4. HIPÓTESIS Alterna: Es posible formular UN gel A BASE DE Urtica dioic a L .
Nula: No es posible formular el gel de
Urtica dioic a L .
5. DISEÑO DE INVESTIGACIÓN 5.1 OBJETO DE ESTUDIO : Hojas de Urtica dioic a L . ( Ortiga)
5.2 Instrumento y materiales
Hojas de ortiga Todos los compontes del proceso
5.3 Método y técnicas 5.3.1 Recolección de muestra La planta deberá recogerse desde principios de primavera hasta otoño; con la ayuda de guantes gruesos para evitar el contacto directo con la planta y tijeras se procederá a cortar el tallo con sus respectivas hojas
5.3.2 Selección Se separarán las hojas verdes de las hojas maltratadas y secas, con la ayuda de guantes para evitar el contacto directo con la planta, las hojas viejas no se deben usar debido a que son muy irritantes.
5.3.3 Secado El secado se realizara lo más rápido posible; se pondrá a secar a la sombra, en un lugar seco y bien ventilado o en un horno o secador a temperatura máxima de 60°C, para luego guardarse en un recipiente hermético
5.3.4 Molido Se colocará las hojas secas en un mortero, para seguidamente ser molidas, hasta obtener una muestra – especie – sustancia – droga – extracto - harinosa y finalmente continuar con el procedimiento.
5.3.5 Control de calidad de la especie vegetal: 5.3.5.1 Determinacion de humedad 5.3.5.2 Determinacion de cenizas totales 5.3.5.3Determinación de residuo seco o sustancias solubles 5.3.6 Extracción Procedimiento L (Lixiviación): Mezclar el p. a. o la mezcla molida de los p. a. con una cantidad suficiente de la mezcla de solventes o solvente indicados para mojarlo uniformemente, dejar en reposo durante 15 minutos, transferirlo a un percolador apropiado y empacar el p. a. firmemente. Verter cantidad suficiente de mezcla de solventes o solvente indicados para saturar el p.a, cubrir la parte superior del percolador y cuando el líquido llega al fondo del mismo, cerrar el orificio inferior y dejar que el p. a. se macere durante 24 hrs o por el tiempo especificado.
5.3.7 Análisis fitoquímico: una vez obtenido el extracto se realizará el siguiente tamizaje fitoquímico. Ensayo de alcaloides : Reactivo de draggendorf, Mayer y Wagner Ensayo de Baljet para grupos lactónicos , cumarinas Ensayo de Borntrager para quinonas Ensayo de Lieberman- Buchard para triterpenos Ensayo de Fehling para azucares reductores Ensayo de tricloruo férrico para taninos Ensayo de espuma para saponinas Ensayo de shinoda para flavonoides
5.3.8 Elaboración del gel a) Elaboración: Formula para - Extracto hidroalcoholico - Carbopol - Glicerina farmacéutica - Trietranolamina - Colorante / aromatizantes - Agua destilada c.s.p
100 g. 90 g. 1g. 2g. 4gts. 4gts. 100g
Si la formulación del gel es de 200g. se adicionara el doble de materiales para la preparación de dicho gel. b) Preparación 1. Colocar el extracto junto con el carbopol en un vaso de precipitación y agitar, dejar macerar por 24 horas si el necesario. 2. Agregar Trietranolamina y glicerina farmacéutica. 3. Agitar hasta tener la consistencia del gel 4. Envasar 5. Acondicionar
Análisis de control de calidad
Características organolépticas: aspecto color olor textura , pH Identificación del principio activo: taninos El cual se identificara cualitativamente con tricloruro férrico Estudios de estabilidad: luego de envasar el gel se dejara en reposo por 1 semana y se observara si este se conserva homogéneo
Control de calidad del gel. El control de calidad de producto terminado tiene como propósito determinar si una forma farmacéutica posee los atributos de calidad previamente establecidos. Estos atributos buscan poder conseguir en último término que el medicamento cumpla el objetivo para el cual fue diseñado de manera segura y eficaz.
- Determinación Organoléptica Del Gel Al gel se procede a analizar el aspecto, color, olor, sabor.
Aspecto: Es un gel homogéneo untuoso al tacto, libre de grumos. al ser analizada mediante visualización directa. Color: verde que se determina por el tinte que presenta el gel Olor: Característico a la planta s - Determinación de la presencia de grumos en el gel Tomar una pequeña cantidad de crema con los dedos y aplicar suavemente en el dorso de la mano y observar si hay la presencia o ausencia de grumos.
- Determinación de untuosidad al tacto del gel. Tomamos una pequeña cantidad de gel con los dedos y aplicamos suavemente en el dorso de la mano y observamos si hay la presencia de arenosidad.
- Determinación del pH Se mide en el medidor del pH previamente calibrado con soluciones tampón de pH 4 y 7. Sacar el electrodo del tampón lavar con agua destilada y secar con papel filtro. En otro vaso se coloca la muestra (gel) e introducir el electrodo limpio homogenizar y determinar el pH. Anotar los resultados.
- Determinación de la Extensibilidad del gel. Bajo la denominación de extensión o extensibilidad de un gel se entiende su capacidad para ser aplicado y distribuido uniformemente sobre la piel. Se pesa 0.2- 0.02 g de muestra a 25ºC se presiona entre dos superficies de vidrio sobre las cual se adiciona una pesa de 100 g durante 1 minuto. El área originada es la variable respuesta (Extb.)
- Determinación de la viscosidad del gel. Tomamos una muestra representativa del gel e introducimos en el viscosímetro, sometemos a la acción de la temperatura del baño maría a 25ºC y tomar el tiempo desde el punto de partida hasta la señal indicada en el viscosímetro.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (1)
Wikipedia Consultado el 05-06-17. Disponible en: https://es.wikipedia.org/wiki/Urtica_dioica#Taxonom.C3.ADa (2) Riehemann, K., Behnke, B., Schulze-Osthoff, K. Plant extracts from stinging nettle (Urtica dioica), an antirheumatic remedy, inhibit the proinflammatory transcription factor NF- κB. FEBS letters, (Germany) 1999 ;442 (1), 89-94.
(3)
Acevedo-Vásquez, E. M. Algunos aspectos de la artritis reumatoide en Perú. Rev Soc Peru Med Interna 2012 ; 25 (1), 31-37.
(4)
Dr. José Mostacero Plantas Medicinales del Perú. Trujillo – Perú.