TITULO: PROTOCOLO DE VALIDACION DE METODOLOGIA ANALITICA CODIGO: VAL-LPF-MA FECHA: 18/07/2011 1.- Objetivos:
1. Demostrar que el método propuesto para cuantificar Acetaminofén en Laproter jarabe es selectivo para esta sustancia activa.
2. Garantizar que los resultados obtenidos con el método para cuantificar Acetaminofén en Laproter jarabe son confiables. 3. Demostrar que el método propuesto es reproducible siempre que se utilicen las mismas condiciones en el sistema. 4. Comprobar que el método propuesto para cuantificación de Acetaminofén en Laproter jarabe es exacto, preciso y lineal, siempre que se traba je ba jo las mismas condiciones propuestas en este traba jo.
2.- Alcance: Determina c i ó n d e l a c o n c entra c i ó n d e A c etaminofén e n L a p roter
j arabe 3 .-Responsabilidad:
A s e g u ramiento c alidad: R ealizar todas l a s p r u ebas analíti c a s n e c esarias p a r a l a valida c i ó n d e este método . Dire cc i ó n T é c n i c a : A nalizar estadísti c amente l a data y r e p ortar e n c o n ju j u n c i ó n c o n aseg u ramiento d e c alidad e l r e s u ltado d e l a valida c i ó n .
4 .-
Materiales, equipos y documentación: Instructivo de trabajo : A nálisis M etri c o l N Ó v u l o s Materiales : L o s q u e s e indi c a n e n e l instr u c tivo . Equipos : E s p e c trofotómetro HACH D R/4000U. S t a t u s : E n c alibra c i ó n
5.- Procedimiento:
IT-LPF-APT-AC-023
R ealizar determina c iones de l a c on c entra c i ó n de Ac etaminofén en L a p roter j arabe e qu ivalentes al 70 , 8 0 , 9 0 , 100 , 110 , 120 y 130%. L as determina c iones se h arán p or tri p l i c ado . Determinar l a linealidad, re p etibilidad, p re c i s i ó n y exa c ti t u d del método
6 .-
Evaluación de los resultados:
V alores obtenidos p ara las diferentes c on c entra c iones de Ac etaminofén en L a p roter j arabe . C on c entra c ió n (%) 70 80 90 100 110 120 130
6 .1
A bsorban c ia 1 5 42.00 612.00 672.00 7 5 6.00 824.00 907.00 987.00
Linealidad:
C on c entra c i ó n (%) 70 80 90 100 110 120 130
A bsorban c i a p romedio 5 41.67 611.33 678.67 7 5 4.00 822.67 908.67 98 5 .67
A bsorban c i a 2 5 41.00 610.00 682.00 7 55 .00 822.00 909.00 98 5 .00
A bsorban c ia 3 5 42.00 612.00 682.00 7 5 1.00 822.00 910.00 98 5 .0 0
941.7
y = 7.3952x + 18 R² = 0.9987
891.7 841.7 m o r 791.7 P s 741.7 b A
691.7 641.7 591.7 541.7
70.00
80.00
90.00
100.00
110.00
120.00
130.00
Conc. %
6 .2
Repetibilidad:
Para el parámetro de Repetibilidad se efectuaron 10 lecturas de la misma muestra y los resultados se observan en la tabla.
C on c. T eóri c a 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 P romedio Desv . S td . % CV
A bs . 7 5 6.00 7 5 5 .0 0 7 5 1.00 7 5 7.00 763.00 760.00 760.00 7 5 8.00 748.00 761.00
100.84 0.6 5 0.64
C on c entra c i ón A bs . S td . % 7 5 0.00 7 5 0.00 7 5 0.00 7 5 0.00 7 5 0.00 7 5 0.00 7 5 0.00 7 5 0.00 7 5 0.00 7 5 0.00
100.80 100.67 100.13 100.93 101.73 101.33 101.33 101.07 99.73 101.47
6. 3
Precisión:
L os res u ltados p ara estable c er el p erfil de p r e c isión se des c riben a c ontin u a c ión h abiéndose c al cu l a d o el p romedio, desvia c ión estándar y c oefi c iente de varia c i ón p ara l as tres l e c t u ras de c a da c on c entra c ión .
Concentracion
Absorbancia
70.00 70.00 70.00 80.00 80.00 80.00 90.00 90.00 90.00 100.00 100.00 100.00 110.00 110.00 110.00 120.00 120.00 120.00 130.00 130.00 130.00
542.00
Promedio
Desviacion std.
Coeficiente de variacion (%)
541.67
0.58
0.11
611.33
1.15
0.19
675.33
5.77
0.85
754.00
2.65
0.35
822.67
1.15
0.14
908.67
1.53
0.17
986.33
1.15
0.12
541.00 542.00
612.00 610.00 612.00 672.00 682.00 672.00 756.00 755.00 751.00 824.00 822.00 822.00 907.00 909.00 910.00 987.00 985.00 987.00
4
Exactitud:
E l p arámetro de exa c tit u d se determinó a través del p or c enta j e de re cup era c ión, se u tilizaron 6 c o n c entra c iones diferentes, tres re p et i c iones de c ada u na . Conc. Teorica
Abs
Abs Std
conc. Detectada
70.00 70.00 70.00 80.00 80.00 80.00 90.00 90.00 90.00 100.00 100.00 100.00 110.00 110.00 110.00 120.00 120.00 120.00 130.00 130.00 130.00
542.00
750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00 750.00
72.27 72.13 72.27 81.60 81.33 81.60 89.60 90.93 89.60 100.80 100.67 100.13 109.87 109.60 109.60 120.93 121.20 121.33 131.60 131.33 131.60
Promedio Desv. Std. % C. V.
541.00 542.00
612.00 610.00 612.00 672.00 682.00 672.00 756.00 755.00 751.00 824.00 822.00 822.00 907.00 909.00 910.00 987.00 985.00 987.00
% Recuperacion
103.24 103.05 103.24 102.00 101.67 102.00 99.56 101.04 99.56 100.80 100.67 100.13 99.88 99.64 99.64 100.78 101.00 101.11 101.23 101.03 101.23
101.07 1.16 1.14
7.-Discusión de los resultados:
S e eval u aron l as si g u ientes c ara c terísti c as: linealidad, rango, re p etibilidad, p re c isión y exa c tit u d . Linealidad :
E l método demostró se r lineal, y a qu e l u ego de eval u ar l as c on c entra c iones de
70 , 8 0 , 9 0 , 100 , 110 , 120 y 130 %; tres re p eti c iones de c ad a u na, se ob t u v o la e cu a c i ó n de la re c ta: y = 7.39 5 2 x + 18 R= 0.9993 R² = 0.9987 E sto dem u estra qu e se cu m p l e l a L e y de B eer, la cu al indi c a qu e debe existir u na rela c i ó n dire c tamente p ro p or c ional entre la absorban c ia y la c on c entra c i ón . P or lo tanto se pu ede de c ir qu e en u n rango entre 70-130% de l a dosis de c larada el método es lineal . E sto p ermite de c i r qu e dentro del rango 90110% del a c tivo, qu e se mane j a en l as farma c o p eas p a ra Ac etaminofén j arabe el método es lineal, y si se ne c esita am p liar el rango c omo es el c as o del ensa y o de u niformidad de c ontenido q u e se a c e p ta u n rango de 8 5 -11 5 % del a c tivo el método se mantiene lineal . 941.7
y = 7.3952x + 18 R² = 0.9987
m 841.7 o r P s 741.7 b A 641.7 541.7
70.00
80.00
90.00 100.00 110.00 120.00 130.00 Conc. %
S e c onfirma qu e la rela c i ón entre la c o n c entra c ión y la absorban c ia g u ardan u n a rela c ión dire c tamente p ro p or c ional qu e pu e de ser re p resentada c on u na re c ta .
Repetibilidad:
Se analizó un estándar de concentra ción conocida (100 %); las muestras f ueron realizadas por el mismo analista, el mismo día y en el mismo equipo. Se obtuvo un promedio de 100.84; una desviación estándar de 0.65 y un coeficiente de variación de 0.64. Para métodos espectrofotométri cos se considera aceptable un coeficiente de variación del 3%; por lo que se puede decir que el método cumple con el parámetro de repetibilidad. Precisión:
Se estableció que el coeficiente de variación para el método debía ser menor al 3% y tal y como se puede observar en la gráfica el método es preciso de un rango de concentración de 70 a 130 % ya que presenta un coeficiente de variación menor al 3%.
Perfil de precisión e l t i T s i x A
4.00 2.00
% CV
1
0.85
0.19
0.11
0.00
2
3
0.35 4
0.17
0.14 5
6
0.12
Maximo
7
Exactitud : E l p arámetro de exa c ti t u d se determinó a través del p or c enta j e de re cu p era c ión, se u tilizaron 6 c on c entra c iones diferentes, tres re p eti c iones de c ada u na . S e obt u v o u n p romedio de re cup e ra c i ón de 101.70 % c o n u na desvia c ió n estándar de 1.16 y u n c oefi c iente de v a r i a c ión de 1.14%.
8.Conclusiones : 1. S e c o n c l uy e qu e el método analíti c o es p e c trofotométri c o p ara la
2.
3. 4.
5.
6.
cu antifi c a c i ó n de A c etaminofén en L a p roter j arabe, cu m p l e c on los re qu erimientos de valida c ión de métodos analíti c os: linealidad, rango, re p etibilidad, p re c isión y e xa c ti t u d . L a linealidad del método se dem u estra estadísti c amente, c onfirmado qu e el método de análisis es c a p az es u n intervalo determinado de obtener res u ltados dire c tamente p r o p or c ionales a la c on c entra c ión de Ac etaminofén S e cu m p l e c o n la l e y de B eer y a qu e existe u na rela c ión dire c tamente p ro p o r c ional entre l a absorban c ia y l a c on c entra c ión . A l u tilizar la media estadísti c a en el ensa y o , se dem u estra qu e el método de análisis p ro pu esto es p re c iso, existiendo u na c on c ordan c i a entre las medi c iones al h a c erlas re p etidas ve c es , obteniendo u n c oefi c iente de varia c ió n menor al 3% p ara l as c on c entra c iones de u n 70 % h asta 130% p or óv u l o . E l método de análisis dem u estra qu e es exa c to p ara l as c on c entra c iones de 70 a 130% del j arabe, definiendo así la c on c ordan c i a entre el valor medio y el valor real . S e demostró qu e l a metodología u tilizada es re p rod uc ible, siem p re y cu ando se u tili c en e n l as mismas c ondi c iones estable c idas .
F e ch a de la V alida c ión: _____________________________
A nalistas:
_______________________________
________________________________
A se g u ramiento C alidad: __________________________
Dire cc i ón T é c n i c a : _______________________
