UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO
PRUEBA DE RPR (R (Reagina eagina Plasmática Rápia!
ALUMNA: Cinthia Gonzales Domínguez
Nº15.
DOCENTE: D!a. Celin"a Us#uiano Ma!#uez D!. E"inson Mo!ales Cha$ez Li%. &lga. onia 'iestas (u!iza%a CU)O: Mi%!o*iología + (a!asitología C,CLO: -, Nº DE MEA: I.
INTROD UCCIÓN
La sífilis es una enfermedad de transmisión sexual (ETS), producida por un espiroqueta, el Treponema pallidum un bacilo gramnegativo, muy delgado, móvil y de apariencia espiralada El tama!o aproximado de la bacteria es de "# $ por #,% $& es por ello que no puede observarse con el condensador 'abitual del microscopio y debe recurrirse a la observación con condensador de fondo oscuro dems, pueden utili*arse coloraciones como la inmunofluorescencia o la impregnación arg+ntica para poder visuali*arlo ara el diagnóstico de la sífilis, tradicionalmente, se cuenta con tres grupos de pruebas or examen directo mediante microscopía en campo oscuro y por fluorescencia directa, mediante serología y por cultivo en c+lulas epiteliales de cone-o or serología se tienen dos tipos de pruebas, las pruebas no trepon+micas como ./0L y 00 (0apid plasma reagin) y las pruebas trepon+micas como 1T2S (1luorescent treponemal antibody absorption) o como 345T (3icro'emaglutinación para T pallidum) Las nuevas pruebas diagnósticas para la sífilis, incluyen en*imo inmunoensayo (EL6S), 7estern bloty 0eacción en cadena a la polimerasa (80) Los criterios utili*ados para el diagnóstico son9 el rea geogrfica, las manifestaciones clínicas, la observación al microscopio de campo oscuro y las reacciones serológicas Las pruebas serológicas que se utili*an son9 ruebas diagnósticas para sífilis9 a 3icroscopía con campo oscuro9 se reali*a con un microscopio con condensador de campo oscuro directamente de las lesiones (c'ancro o ros+olas) observndose los treponemas móviles brillantes sobre un fondo negro b Serología9 El diagnóstico de sífilis en la mayoría de los pacientes se reali*a mediante pruebas serológicas de las cuales existen dos tipos principales9 inespecíficas (pruebas no trepon+micas) y las pruebas trepon+micas (específicas) c ruebas no trepon+micas9 permiten detectar los anticuerpos inespecíficos 6g: e 6g3 (anti5cuerpos tipo reagina), desarrollado a partir de los lípidos contra las c+lulas da!adas durante la fase temprana de la enfermedad mbas pruebas de floculación permiten cuantificar en el suero del paciente los anticuerpos dirigidos contra el antígeno cardiolipina, derivada de la carne de cora*ón Las dos pruebas a ruebas ;o Trepon+micas Estas pruebas son usadas como procedimiento de screening ueden ser cualitativas o cuantitativas Estas pueden dar reacciones cru*adas entre las enfermedades producidas por las diferentes especies de Treponema ) La prueba ms usada es el ./0L (.en+real /isease 0esearc' Laboratory), que es la ms sensible, pero la menos específica 2)
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II.
COMPETENCIAS:
l finali*ar la presente prctica el alumno de medicina ser capa* de9
/esarrollar una prueba macroscópica de floculación no trepon+mico utili*ada para la detección rpida de reaginas (anticuerpos circulantes en suero) contra Treponema pallidum III.
MATERIAL DE LABORATORIO: •
IV.
3TE06LES /E L 0>8T68 ? antígeno 009 Suspensión micropartícluas de carbón Suero problema Suero control positivo y negativo Tar-etas de reacción 2aguetas y pipetas serológicas
suspensión
carbolipina
conteniendo
FUNDAMENTOS
rueba cualitativa en microplaca (fondo plano) Equilibrar los reactivos y muestras a temperatura ambiente 3ediante una pipeta automtica depositar @# $L de cada muestra en un pocillo distinto de la microplaca Emplear una punta nueva para cada muestra y desec'arla tras su empleo En dos pocillos adicionales, depositar " gota de cada uno de los sueros control /osificar " gota de antígeno en cada pocillo de la microplaca que contienen las muestras a ensayar /epositar la tar-eta en el agitador rotatorio 'ori*ontal, previamente a-ustado a %## A @# rpm, durante %# minutos
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0eactivo9 presencia de aglutinación visible en forma de grumos negros sobre el fondo claro que indica presencia de BreaginasB en la muestra ;o reactivo9 aspecto gris 'omog+neo que indica ausencia de BreaginasB en la muestra Las reacciones positivas se titulan usando solución salina #CD
1;/3E;T< •
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El antígeno 005carbon es un preparado no trepon+mico especialmente dise!ado para la detección y semi5cuantificación por loculación macroscópica en porta o microplaca de reaginas plasmticas, un grupo de anticuerpos dirigidos contra componentes tisulares producidos por los pacientes infectados por T pallidum La determinación rpida de las reaginas plasmticas, presentes en el suero de individuos infectados con Treponema pallidum, se efect=a ensayando el antígeno Funa asociación de lípidos comple-os (caqrdiolipina, lecitina y colesterol) absorbidas sobre partículas de carbón frente a las muestras problema La presencia o ausencia de una aglutinación visible es indicativa de la presencia o ausencia e reaginas plasmticas en las muestras ensayadas favorecidas por las partículas de carbón
RESULTADOS DE PRUEBA CUALITATIVA
METODO CUANTITATIVO
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oner " gota de cada dilución en la placa !adir a cada una de esas muestras una gota de antígeno
RESULTADOS DE PRUEBA CUANTITATIVA
Lect"#a C$m$ en la P#"e%a c"alitati&a' El tt"l$ e la m"est#a c$##esp$ne a la má)ima il"ci*n +"e p#esenta #eacti&ia' La il"ci*n sig"iente e%e se# negati&a El tt"l$ esta#á a$ p$# la in&e#sa e la ,l tima il"ci*n
CONCLUSIONES •
/esarrollamos una prueba macroscópica de floculación no trepon+mico utili*ada para la detección rpida de reaginas (anticuerpos circulantes en suero) contra Treponema pallidum
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICA: •
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3edic 0eagina lasmtica 0pida (en línea) 1ec'a de acceso9 %G de 3ar*o del %#"@ /isponible en9 'ttp9HHIIItuotromedicocomHtemasH L 0E2 /E 00'tm LabTests
