INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS UNIDAD STO. TOMÁS
PRÁCTICA N°12 DETERMINACIÓN DE LA TOXICIDAD DE MUESTRAS DE AGUA POR UN MÉTODO BACTERIOLÓGICO
UNIDAD DE APRENDIZAJE: ECOLOGÍA MICROBIANA
PROFESORA:
IRMA GABRIELA MARTINEZ GOMEZ
ALUMNOS:
BERNAL MORALES HECTOR ENRIQUE NAVA MONROY MAXIMA MONSERRAT SEGURA LÓPEZ MICHELLE SOTO MONTES ELIZABETH
FECHA DE ENTREGA
21/NOVIEMBRE/2017
Página 1
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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL RESULTADOS.
Formula: %I= (A-B)-(A-C)/(A-B) (A-B)-(A-C)/(A-B)
Estación 1 2 3 5 6 7
% Inhibición -4.76 -21.97 33.84 68.75 -26.66 105.55
Interpretación
120
105.55
100 80 N Ó I C I B I H N I %
68.75
60 33.84
40 20 0 -4.76 -20 -21.97
-26.66
-40 Estación 1
Estación 2
Estación 3
Estación 5
Estación 6
Estación 7
Fig.1 Grafica de los % de Inhibición de las diferentes estaciónes
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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL OBJETIVOS:
Determinar la toxicidad de un cuerpo de agua midiendo el efecto el efecto sobre la actividad deshidrogenasa de una cepa tipo
RESULTADOS DISCUSIONES: es productora productor a de toxinas que pueden causar caus ar dos tipos t ipos de enfermedades: enf ermedades: una caracterizada por diarrea y la otra, denominada toxina emética, por causar náuseas y vómitos. Es por ello que es de gran interés diagnóstico, Bacillus cereus es anaerobia facultativa f acultativa y utiliza el la enzima deshidrogenasa para reducir el NAD a NADH y llevar a cabo su actividad respiratoria, por otro lado, cuando existe presencia de Cloruro de Trifenil Tetrazolio (TTC) este actúa como inhibidor competitivo del NAD, reduciendo así hasta TPF, dando un color rojo, que indica la estimulación respiratoria del TTC a TPF gracias a la Deshidrogenasa En el medio de TTC la maltosa y la lactosa son utilizados por los enterococos con producción de acido, mientras que los demás son suprimidos por la azida de sodio, por lo cual el TTC es selectivo, ya que los enterococos tienen la habilidad de reducir el tetrazolio a formazano, los derivados del tetrazolio son sustancias incoloras que al reaccionar con azucares se trasforman en compuestos poco solubles de color rojo (formazanos) Bacillus
cereus
En estaciones con un porcentaje de inhicion negativo podemos decir que el TTC no inhibió completament e la reduccion de NAD a NADH, por el contrario, en las estaciones que se obtuvo un porciento de inhibicion, positivo podemos decir que existió un grado de competicencia entre el NAD y el TTC por reducirse hasta sus compuestos NADH y TPF respectivamente Con respecto a los valores de toxicidad proporcionados en clase por la profesora Irma (figura 1) podemos decir que los valores negativos tienen un efecto toxico ligeramente inhibitorio o incluso estimulante, mientras que los valores positivos pueden ser desde no toxicos (0-5%) hasta ligeramente toxico (5-50%) o toxico (50-100%) para la respiración de Baccillus cereus
CONCLUSIONES
El Cloruro de Trifenil Tetrazolio (TTC) utiliza la enzima deshidrogenasa para reducirse a APF Bacillus cereus utiliza el NAD para su actividad respiratoria respirator ia a través de su reducción de NAD a NADH, a través de la enzima deshidrogenasa.
CUESTIONARIO: 1- En las normas mexicanas, ¿qué organismos se se utilizan para para determinar toxicidad? La presente Norma Mexicana establece el método para el análisis biológico de calidad del agua mediante pruebas de toxicidad aguda utilizando al organismo dulcecuícola Daphnia magna Straus 1820 (Crustacea-
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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL REFERENCIAS:
NMX-AA-003 Aguas residuales - Muestreo. NMX-AA-007 Aguas - Determinación de la temperatura. NMX-AA-008 Aguas - Determinación del pH. NMX-AA-014 Cuerpos receptores - Muestreo. NMX-AA-072 Análisis de agua - Deteminación de la dureza -Método del E.D.T.A.(Acido E.D.T.A.(Aci do etilen etilen diamino tetraacético). NMX-AA-093 Protección del ambiente - Contaminación del agua agua - Determinación de la conductividad eléctrica. Daphnia magna Es un microcrustáceo del orden
Cladocera de 1 mm a 1,5 mm de longitud los neonatos, y de 4 mm a 6 mm los adultos (ambos, visibles a simple vista). Es un representante importante de las comunidades dulceacuícolas con gran sensibilidad a una amplia gama de compuestos tóxicos, siendo ésta una de las características principales para que sea usado internacionalmente en pruebas de toxicidad. Asimismo, su ciclo de vida corto y fácil cultivo en laboratorio, permite realizar pruebas rápidas y económicas (ver figura ).
Bacillus cereus utilizó
el TTC como una estimulación (Toxicidad
estimulatoria) FIGURA
.- Hembra adulta Daphnia magna Straus
BIBLIOGRAFÍAS :
https://espanol.foodsafety.gov/intoxicaci%C3%B3n/causas/bacteriasvirus/bcereus/xki/%C3% ADndice.html ADndice. html (consultado 19/11/17) http://legismex.mty.itesm.mx/normas/aa/aa087.pdf (consultado 19/11/17)
