Practica #11 Acidos nucleicos

IDENTIFICACIÓN IDENTIFICACIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE RNA Elaboró: Romero Picazo Luisa Gabriela

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OBJ ETIV O

ESPECÍFIC O: O:

a) Identificar y cuantificar el RNA mediante espectrofotometría de la solución problema, en base a una coloración verde esmeralda.

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FUNDAMENT O ESPECÍFIC O

En esta práctica se cuantificará la cantidad de RNA m ediante espectrofotometría, donde las lecturas de la densidad óptica se toman a longitudes de onda de 600 nm.

Esta lectura te permite calcular la concentración del ARN en la muestra. La practicidad del uso del espectrofotómetro permite fácilmente el cálculo de la cuantificación de ARN, sin embargo, la única desventaja aparente está en la cantidad de ARN necesario para su buen funcionamiento, es decir, debe ser mayor a 1 µg/mL. La presencia de RNA puede ser detectada y su cantidad determinada mediante reacción con orcinol. Esta es una reacción general para las pentosas en el transcurso de la cual se forman derivados deshidratados de las mismas denominados furfurales. La reacción coloreada implica producción de pentosas a partir del ácido nucleico; conversión de éstas en furfurales por calentamiento en presencia de ácido fuerte; y reacción del furfural con el orcinol para rendir una mezcla de pro ductos de condensación de color verde. -

CUESTI ONARI O

1.- Anote los resultados en la tabla tabla siguiente

2.- Grafique D.O. en función de la concentración de RNA en mg/ml 3.- Interpole el valor de D.O de la solución problema y obtenga la concentración de RNA en mg/mL, de la solución problema

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DISCUSIÓN 

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C ONCLUSIÓN