LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM
Pengujian Efek Analgetika
1 April 2014 Kelompok 2 SELASA, 10.00-13.00 FARMASI A Siti Marfuah Niva Bachri R. Jamelia Andeska Paska Tri Aprilia S. Novi Afifah
260110120006 260110120007 260110120008 260110120009 260110120010
Pembahasan Pembahasan Alat Bahan, Prosedur Teori Dasar, Grafik Editor
LABORATORIUM LABORATORIUM FARMAKOLOGI F ARMAKOLOGI ORGAN FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS UNIVERSITAS PADJAJARAN 2014
Nilai
Asisten
Pengujian Efek Analgetika
I. TUJUAN PERCOBAAN
1. Mengenal berbagai cara untuk mengevaluasi secara eksperimental efek analgetik suatu obat. 2. Memahami dasar-dasar perbedaan daya analgetik berbagai obat analgetika. 3. Mampu memberikan pandangan mengenai kesesuaian khasiat yang dianjurkan untuk sediaan-sediaan farmasi analgetika.
II. PRINSIP
1. Analgetik narkotik Analgetik narkotik adalah senyawa yang dapat menekan fungsi sistem saraf pusat secara selektif. Digunakan untuk mengurangi rasa sakit yang moderat ataupun berat. Aktivitas analgetik narkotik jauh lebih besar dibandingkan golongan analgetik non-narkotik sehingga disebut juga analgetik kuat. 2. Analgetik non-narkotik Analgetik non-narkotik digunakan untuk mengurangi rasa sakit yang ringan sampai moderat, sehingga sering disebut analgetik ringan. 3. Induksi kimia Penginduksian asam asetat 0,7% pada mencit menimbulkan rasa nyeri yang ditunjukkan dengan respon geliat yang dapat diinhibisi oleh obat analgetik. III. TEORI DASAR
Terdapat perbedaan mencolok antara analgetika dengan anastetika umum yaitu meskipun sama-sama berfungsi sebagai zat-zat yang mengurangi atau menghalau
rasa
nyeri,
namun
analgetika
bekerja
tanpa
menghilangkan
kesadaraan. Nyeri sendiri terjadi akibat rangsangan mekanis, kimiawi, atau fisis yang memicu pelepasan mediator nyeri. Intensitas rangsangan terendah saat seseorang merasakan nyeri dinamakan ambang nyeri (Tjay, 2007).
Nyeri
adalah suatu gejala
yang berfungsi untuk melindungi dan
memberikan tanda bahaya tentang adanya gangguan-gangguan pada tubuh; seperti peradangan, infeksi-infeksi kuman, dan kejang otot. Sehingga sesungguhnya rasa nyeri berguna sebagai “alarm” bahwa ada yang salah pada tubuh. Misalnya, saat seseorang tidak sengaja menginjak pecahan kaca dan kakinya tertusuk, maka ia akan merasakan rasa nyeri pada kakinya dan segera ia memindahkan kakinya. Tetapi adakalanya nyeri yang merupakan pertanda ini
dirasakan sangat
menggangu apalagi bila berlangsung dalam waktu yang lama, misalnya pada penderita kanker (Mutschler, 1991). Adanya rangsangan-rangsangan mekanis/kimiawi (kalor/listrik) yang dapat menimbulkan kerusakan-kerusakan pada jaringan dan melepaskan zat-zat tertentu yang disebut mediator-mediator nyeri. Mediator nyeri antara lain: histamin, serotonin, plasmakinin-plasmakinin, prostaglandin-prostaglandin, ion-ion kalium. Zat-zat ini merangsang reseptor-reseptor nyeri pada ujung saraf bebas di kulit, selaput lendir, dan jaringan lalu dialirkan melalui saraf sensoris ke susunan syaraf pusat (SSP) melalui sumsum tulang belakang ke talamus dan ke pusat nyeri di otak besar (rangsangan sebagai nyeri) (Katzung, 1997). Rasa nyeri dapat diberantas dengan beberapa cara, yaitu: a. Merintangi pembentukan rangsangan dalam reseptor nyeri perifer, oleh analgetika perifer atau anestetika lokal. b. Merintangi penyaluran rangsangan nyeri dalam syaraf-syaraf sensoris oleh anestetika lokal. c. Blokade pusat nyeri pada SSP dengan analgetika sentral (narkotika) atau anestetika umum (Goodman & Gilman, 2006). Analgetik adalah obat atau senyawa yang dipergunakan untuk mengurangi rasa sakit atau nyeri tanpa menghilangkan kesadaran. Kesadaran akan perasaan sakit terdiri dari dua proses, yakni penerimaan rangsangan sakit di bagian otak besar dan reaksi-reaksi emosional dan individu terhadap perangsang ini. Obat penghalang nyeri (analgetik) mempengaruhi proses pertama dengan mempertinggi ambang kesadaran akan perasaan sakit, sedangkan narkotik menekan reaksi-reaksi psychis yang diakibatkan oleh rangsangan sakit (Anief, 2000).
Penggunaan analgetika perifer mampu meringankan atau menghilangkan rasa nyeri, tanpa mempengaruhi SSP atau menurunkan kesadaran, juga tidak menimbulkan ketagihan. Kombinasi dari dua atau lebih analgetika sering kali digunakan, karena terjadi efek potensiasi (Tjay, 2007). Analgetika narkotik merupakan kelompok obat yang memiliki sifat-sifat seperti
opium
atau
morfin.
Meskipun
memperlihatkan
berbagai
efek
farmakodinamik yang lain, golongan obat ini terutama digunakan untuk meredakan atau menghilangkan rasa nyeri yang hebat. Meskipun terbilang ampuh, jenis ini dapat menimbulkan ketergantungan pada si pemakai. Seiring berjalannya waktu, ditemukannya obat yang bersifat campuran agonis dan antagonis jenis ini yang mampu meniadakan ketergantungan fisik, maka penggunaan istilah analgesik narkotik untuk pengertian farmakologik tidak sesuai lagi (Anief, 2000). A. Analgetika Sentral/Analgetika Narkotika Analgetik narkotika atau analgetika opiat merupakan golongan obat yang memiliki sifat seperti opium/morfin. Sifat dari analgesik opiat yaitu menimbulkan adiksi: habituasi dan ketergantungan fisik. Analgetik opiat mempunyai daya penghalang nyeri yang sangat kuat dengan titik kerja yang terletak di susunan syaraf pusat (SSP). Umumnya dapat mengurangi kesadaran dan menimbulkan perasaan nyaman (euforia). Analgetik opioid ini merupakan pereda nyeri yang paling kuat dan sangat efektif untuk mengatasi nyeri yang hebat (Mutschler, 1991). B. Analgetika Perifer / Analgetika Non-Narkotika Secara kimiawi, analgetika perifer dapat dibagi dalam beberapa kelompok, yakni: a. Parasetamol b. Salisilat: asetosal, salisilamida dan benorilat c. Menghambat prostaglandin (NSAIDs): ibuprofen, dan lain-lain d. Derivat-antranilat: mefenaminat, glafenin e. Derivat-pirazolinon: propifenazon, isopropilaminofenazon dan metamizol f. Lainnya: benzidamin (tantum) (Tjay, 2007)
1. Aspirin Aspirin atau asam asetil salisilat (asetosal) adalah sejenis obat turunan dari
salisilat yang sering digunakan sebagai senyawa analgesik (penahan rasa sakit atau nyeri minor), antipiretik (terhadap demam), dan antiinflamasi (peradangan). Asprin juga memiliki efek antikoagulan dan dapat digunakan dalam dosis rendah dalam tempo lama untuk mencegah serangan jantung. Kepopuleran penggunaan aspirin sebagai obat dimulai pada tahun 1918 ketika terjadi pandemik flu di berbagai wilayah dunia. Mekanisme Kerja Aspirin
Menurut kajian John Vane, aspirin menghambat pembentukan hormon dalam tubuh yang dikenal sebagai prostaglandin. Siklooksigenase, sejenis enzim yang terlibat dalam pembentukan prostaglandin dan tromboksan, terhenti tak berbalik apabila aspirin mengasetil enzim tersebut. Prostaglandin ialah hormon yang dihasilkan di dalam tubuh dan mempunyai berbagai efek di dalam tubuh termasuk proses penghantaran rangsangan sakit ke otak dan pemodulatan termostat hipotalamus. Tromboksan pula bertanggung jawab dalam pengagregatan platelet. Serangan jantung disebabkan oleh penggumpalan darah dan rangsangan sakit menuju otak. Oleh karena itu, pengurangan gumpalan darah dan rangsangan sakit ini disebabkan konsumsi aspirin pada kadar yang sedikit dianggap baik dari segi pengobatan. Namun, efeknya darah lambat membeku menyebabkan pendarahan berlebihan bisa terjadi. Oleh karena itu, mereka yang menjalani pembedahan
atau
mempunyai
masalah
pendarahan
tidak
diperbolehkan
mengonsumsi aspirin (Cerner Multum, 2009). 2. Asam Mefenamat
Asam mefenamat adalah termasuk obat pereda nyeri yang digolongkan sebagai NSAID (Non Steroidal Antiinflammatory Drugs). Asam mefenamat biasa digunakan untuk mengatasi berbagai jenis rasa nyeri, namun lebih sering diresepkan untuk mengatasi sakit gigi, nyeri otot, nyeri sendi, dan sakit ketika atau menjelang haid. Seperti juga obat lain, tentunya asam mefenamat dapat menyebabkan efek samping. Contoh yang sering terjadi adalah merangsang dan merusak lambung. Sebab itu, asam mefenamat sebaiknya tidak diberikan pada
pasien yang mengidap gangguan lambung dan sebaiknya diberikan pada saat lambung tidak dalam kondisi kosong atau setelah makan. Berikut penjelasannya: Indikasi:
Dapat menghilangkan nyeri akut dan kronik, ringan sampai sedang sehubungan dengan sakit kepala, sakit gigi, dismenore primer, termasuk nyeri karena trauma, nyeri sendi, nyeri otot, nyeri sehabis operasi, nyeri pada persalinan. Dosis:
Digunakan melalui mulut (peroral), sebaiknya sewaktu makan. Dewasa dan anak di atas 14 tahun: Dosis awal yang dianjurkan 500 mg kemudian dilanjutkan 250 mg tiap 6 jam. Dismenore 500 mg 3 kali sehari, diberikan pada saat mulai menstruasi ataupun sakit dan dilanjutkan selama 2-3 hari. Menoragia 500 mg 3 kali sehari, diberikan pada saat mulai menstruasi dan dilanjutkan selama 5 hari atau sampai perdarahan berhenti. Efek samping:
Dapat terjadi gangguan saluran cerna, antara lain iritasi lambung, kolik usus, mual, muntah dan diare, rasa mengantuk, pusing, sakit kepala, penglihatan kabur, vertigo, dispepsia. Pada penggunaan terus-menerus dengan dosis 2000 mg atau lebih sehari dapat mengakibatkan agranulositosis dan anemia hemolitik. Interaksi obat:
Asam mefenamat akan bereaksi dengan obat-obat antikoagulan oral seperti warfarin; asetosal (aspirin) dan insulin (Penunjang Medis, 2010).
IV. ALAT BAHAN
4.1 Alat 1. Alat suntik 1 ml 2. Sonde oral mencit 3. Stopwatch
4. Timbangan mencit 5. Wadah penyimpanan mencit 4.2 Bahan 1. Asam asetat 0,7 % 2. Obat analgesik standar (asam asetil salisilat) 3. Obat analgesik yang diuji (asam mefenamat) 4. Suspensi Gom Arab (PGA) 1-2 % 4.3 Gambar alat
Syringe
Sonde
Jarum suntik
KawatPenutupKandan
KandangMencit
Kapas
PGA 1-2 %
Asam asetat 0,7 %
Asam mefenamat
Asetosal
V. PROSEDUR
Pada percobaan kali ini dilakukan pengujian efek analgetika yang mana hewan percobaan yang digunakan adalah mencit jantan sebanyak 3 ekor. Metode pengujian yang dilakukan adalah metode induksi kimia. Alat yang dibutuhkan untuk mendukung metode ini berupa alat suntik 1 ml, sonde oral mencit, stopwatch, timbangan mencit, dan wadah penyimpanan mencit. Sedangkan bahan bahannya yaitu asam asetat 0,7%, obat analgesik standar (asam asetil salisilat/aspirin), obat analgesik yang diuji (asam mefenamat), dan suspensi gom arab (PGA) 1-2 %. Ketiga mencit diberi perlakuan yang berbeda, yaitu mencit I sebagai kontrol negatif, mencit II untuk obat uji, dan mencit III sebagai kontrol positif. Sebelum diberikan perlakuan, terlebih dahulu mencit-mencit
ini
ditimbang pada timbangan mencit, dan kemudian data bobot tubuh mencit ini digunakan untuk perhitungan dosis obat yang akan diberikan. Setelah diperoleh dosis obat, barulah dilakukan pemberian obat pada semua mencit. Kepada mencit I yang digunakan sebagai kontrol negatif diberikan PGA 1-2% secara oral dengan sonde oral sejumlah dosis yang telah dihitung. Pada mencit II diberikan asam mefenamat secara oral sejumlah dosis yang dihitung, dan pada mencit III sebagai kontrol positif diberikan asetosal (asam asetil salisilat) juga secara oral sejumlah dosis yang dihitung. Setelah 30 menit, pada semua mencit disuntikan asam asetat 0,7% secara intraperitonial dengan dosis sesuai dengan bobot tubuh mencit. Kemudian semua mencit diletakkan di area pengamatan dan dibiarkan bebas untuk diamati gerakan geliatnya dan dihitung jumlahnya. Pengamatan dicatat setiap 5 menit selama 60 menit jangka waktu pengamatan. Data yang diperoleh dianalisis secara statistik berdasarkan analisis variasi dan kebermaknaan perbedaan jumlah geliat antara kelompok kontrol dan kelompok uji. Dari data yang didapat dihitung daya proteksi obat uji terhadap rasa nyeri dan efrektivitas analgesiknya dengan rumus:
% Efektivitas analgesik = % Proteksi = 100% –
Kemudian data disajikan dalam bentuk tabel dan grafik.
VI. DATA PENGAMATAN
Tabel Pengamatan
Perlakuan
K
yang
E
diberikan
L
Jumlah Geliat Setiap 5` Selama 60`
Ratarata
1
5`
10`
15`
20`
25`
30`
35`
40`
45`
50`
55`
60`
30
40
35
36
38
32
30
39
42
32
27
25
2
D I E
3
PGA
10
45
33
29
13
32
22
35
33
28
40
48
4
31
36
38
66
51
46
47
32
22
18
13
5
7
40
48
21
20
20
17
13
13
9
3
2
6
0
9
16
24
9
7
10
9
2
0
2
1
51
165
168
148
146
142
125
143
122
91
90
89
1
15
19
25
39
42
35
32
37
26
21
15
10
2
24
61
74
57
50
39
30
34
42
20
10
6
0
24
24
28
22
41
15
26
14
12
15
3
12
32
35
37
32
27
30
13
9
20
17
20
5
1
29
39
28
23
20
16
11
9
8
8
4
6
8
26
47
41
37
28
26
26
20
13
10
5
66
191
244
230
206
190
149
147
120
94
75
48
1
0
24
35
34
22
21
21
22
13
9
5
5
2
0
11
21
44
38
49
41
45
39
32
20
10
3
25
54
24
18
23
35
41
40
44
49
30
42
4
4
25
29
22
13
19
19
20
5
0
2
1
25
50
63
69
80
99
80
79
72
69
54
43
5
35
41
33
27
22
14
3
13
13
8
13
59
199
213
220
203
245
216
209
186
172
119
114
24,6
4
JUMLAH
Asam
3
Mefenamat
4
24,4
JUMLAH
Asetosal
29,9
5 6
JUMLAH Perlakuan
5`
10`
15`
20`
25`
30`
35`
40`
45`
50`
PGA
10,2
33
33,6
29,6
29,2
28,4
25
28,6
24,4
18,2
18
17,8
11
31,8
40,6
38,3
34,3
31,6
24,8
24,5
20
15,6
12,5
8
9,8
33,2
35,5
36,6
33,8
40,8
36
34,8
31
28,6
19,8
19
Asam Mefenamat Asetosal
1. 2. 3.
Perhitungan Dosis
() ( ) ( )
55`
60`
4. 5.
Perhitungan % Proteksi
1.
2.
Perhitungan % Efektifitas Analgesik
1.
Grafik Tabel Proteksi
% Proteksi 5.00% 0.00% As. Mefenamat
Aspirin
-5.00% -10.00% -15.00% -20.00% -25.00%
Tabel Rata-rata Jumlah Geliat Mencit
% proteksi
Perlakuan
5`
10`
15`
20`
25`
30`
35`
40`
45`
50`
PGA
10,2
33
33,6
29,6
29,2
28,4
25
28,6
24,4
18,2
18
17,8
11
31,8
40,6
38,3
34,3
31,6
24,8
24,5
20
15,6
12,5
8
9,8
33,2
35,5
36,6
33,8
40,8
36
34,8
31
28,6
19,8
19
Asam Mefenamat Asetosal
55`
60`
Grafik Jumlah Rata-rata Geliat Terhadap Waktu 45
R a t a r a t a g e l i a t
40 35 30 Kontrol
25
As. Mefenamat
20
Asetosal 15 10 5 0 5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
Waktu
Perhitungan Anava 1. Model Linear Kelompok
Kontrol PGA
Asam Mefenamat
Aspirin
I
406
316
211
II
-
447
350
II
368
224
425
IV
404
284
159
V
213
202
783
VI
89
287
227
Total
1480
1760
2155
2. Analisis
Yijk = µ + Ʈi + ƹij Yij
=
Daya tahan mencit ( jumlah geliat yang dihasilkan ) yang mendapat
obat ke-i ulangan ke-j terhadap asam asetat 0,7 % µ = rataan umum Ʈi = pengaruh obat ke-i ƹij = Pengaruh galat dari obat ke-i ulangan ke-j 3. Hipotesis
Ho
: Ʈi = 0, artinya pengaruh jenis obat berbeda terhadap efek
analgetik (jumlah geliat mencit) H1
: Ʈi ≠ 0, artinya paling sedikit ada satu i dimana Ʈi ≠ 0 ada
pengaruh jenis obat sama terhadap efek analgetik terhadap jumlah geliat 4. Analisis Ragam a. Faktor Koreksi
=
FK =
= 1.703.244,765 b. Sum of square total
+31+ ) SSTot =(
-1.703.244,765 = 2.107.981 - 1.703.244,765 = 404.737,765 c. Sum of Square Treatment
- 1.703.244,765 = - 1.703.244,765
SSTreat =
= 1.655.337,5 - 1.703.244,765 = - 47.907,265 d. Sum Square of Error
SSE = SS Tot – SSTreat = 404.737,765 – (- 47.907,265 ) = 452.645,03 e. Degree of Freedom
df Total = N-1 = 17-1 = 16 df Treat = t-1 = 3-1= 2 df Eror = 16 – 2 = 14 f. Mean of Square Treatment
=
MST =
= - 23.953,6325 g. Mean of Square Error
=
MSE =
= 32.231,78786 h. Fhitung
=
Fhit =
= - 0,74
Tabel Anava
Source of
Df
variance Treatment
2
Sum of
Mean of
squares
squares
- 47.907,265
23.953,6325
Error
14
452.645,03
32.231,78786
Fhitung
F 0,05 (2,15 )
- 0,74
3,68
Total
16
404.737,765
-
Kesimpulan
Ftabel :
()
Karena Fhitung < Ftabel maka H0 diterima artinya pengaruh jenis obat berbeda terhadap efek analgetik (jumlah geliat mencit)
VII. PEMBAHASAN
Pada praktikum kali ini yaitu Pengujian Efek Analgetika bertujuan untuk mengenal berbagai cara untuk mengevaluasi secara eksperimental efek analgetik suatu obat, memahami dasar-dasar perbedaan daya analgetik berbagai obat analgetika, dalam hal ini asam mefenamat dan asam asetil salisilat, dan mampu memberikan pandangan mengenai kesesuaian khasiat yang dianjurkan untuk sediaan sediaan farmasi analgetika, dimana akan dilihat dari persen efektivitas yang diperoleh dari perbandingan persen proteksi zat uji dengan persen proteksi obat analgetika. Dalam perlakuan kali ini digunakan induksi nyeri secara kimiawi yaitu menggunakan bahan larutan steril Asam Asetat 0,7% yang diberikan secara peroral. Pada praktikum, pemberian larutan Asam Asetat 0,7% diberikan 30 menit setelah pemberian obat analgetika. Obat analgetika yang digunakan adalah asam mefenamat dan asetosal atau asam asetil salisilat, hal ini diharapkan agar obat yang diberikan sudah mengalami absorbsi sehingga Asam Asetat langsung berefek dan juga untuk mempermudah pengamatan onset dari obat itu. Pada praktikum kali ini obat-obat analgetik yang diperbandingkan adalah obat-obat analgetik golongan non narkotik/perifer yaitu, Asetosal dan Asam Mefenamat. Dengan prinsip percobaan ini menggunakan metode Witkin (Writhing Tes / Metode Geliat ), dengan prinsip yaitu memberikan asam asetat 0,7% (indikator nyeri) kepada mencit yang akan menimbulkan geliat (Writhing), sehingga dapat diamati respon mencit ketika menahan nyeri pada perut dengan cara menarik abdomen, menarik kaki kebelakang, dan membengkokan kepala ke
belakang. Dengan pemberian obat analgetik (asam mefenamat dan asetosal) akan mengurangi respon tersebut. Kelompok kontrol yang digunakan pada percobaan ini adalah PGA, sehingga hewan percobaan hanya diberikan PGA pada awal percobaan dan penginduksi asam asetat pada 60 menit setelah pemberian PGA tanpa pemberian sedian analgesik. Asam asetat 0,7% merupakan asam lemah yang tidak terkonjugasi dalam tubuh, pemberian sediaan asam asetat 0,7% terhadap hewan percobaan akan merangsang prostaglandin untuk menimbulkan rasa nyeri akibat adanya kerusakan jaringan atau inflamasi. Prostaglandin menyebabkan sensitisasi reseptor nyeri terhadap stimulasi mekanik dan kimiawi sehingga prostaglandin dapat menimbulkan keadaan hiperalgesia, kemudian mediator kimiawi seperti bradikinin dan histamin merangsangnya dan menimbulkan nyeri yang nyata. Akibat dari adanya rasa nyeri inilah hewan percobaan akan menggeliatkan kaki belakangnya saat efek dari penginduksi ini bekerja. Pemberian sediaan asam asetat 0,7% pada peritonial atau selaput gastrointestinal hewan memungkinkan sediaan lebih mudah diabsorbsi oleh tubuh dan cepat memberikan efek. Selama 5 menit kemudian, setelah diberi larutan asam asetat 0,7% mencit akan menggeliat dengan ditandai perut kejang dan kaki ditarik ke belakang. Jumlah geliat mencit dihitung setiap 5 menit selama 60 menit. Kemudian pada kelompok mencit kedua dengan obat analgetik berupa asam mefenamat diberikan secara peroral dan kelompok mencit ketiga diberikan asetosal secara peroral. Kemudian asam asetat 0,7%, disuntikan secara peritonial supaya setelah 30 menit pemberian obat analgetik ters ebut telah mengalami proses absorbsi pada tubuh mencit untuk meredakan nyeri. Pemberian asam asetat 0,7% secara intraperitonial memungkinkan sediaan lebih mudah diabsorbsi oleh tubuh, cepat memberikan efek, mencegah penguraian asam asetat pada jaringan fisiologik organ tertentu, serta efek merusak jaringan tubuh jika pada organ tertentu. Misalnya apabila asam asetat 0,7% diberikan peroral, akan merusak saluran pencernaan, karena sifat kerongkongan cenderung bersifat tidak tahan terhadap asam. Kemudian dilakukan pengamatan yang sama seperti kelompok kontrol negatif yaitu diamati geliatnya dihitung tiap 5 menit selama 60 menit.
Kemudian dimasukan dalam tabel dan dihitung % proteksinya dari tiap sediaan analgetika untuk diperoleh % efektivitasnya. Pada hewan uji kontrol negatif, yakni dimana hewan uji hanya diberikan zat penstimulus nyeri dan pelarut dari obat analgesik yang hendak diamati cara kerjanya tanpa diberikan obat analgesik. Maksud dari kontrol negatif ini adalah untuk melihat seberapa besar respon nyeri yang dihasilkan pada hewan uji untuk kemudian sebagai bahan perbandingan dengan hewan uji yang diberi obat analgesik sehingga dapat dilihat perbedaan yang signifikan antara hewan uji yang diberi dengan yang tidak diberi obat analgesik dalam hal respon nyeri yang dihasilkan. Namun sayangnya terjadi kekeliruan dalam pemberian suspensi PGA secara peroral kepada mencit pertama ini, kekeliruan ini mengakibatkan hewan uji konrol negative mati sehingga pengamatan kontrol negatif tidak dapat dilakukan, akibatnya suatu keadaan pembanding antara hewan yang diberi analgesik dan yang tidak diberikan analgesik tidak dapat dilihat. Kesalahan ini diakibatkan kekeliruan dalam menentukan saluran yang dimasuki sonde saat pemberian suspensi PGA. Seharusnya saluran yang dimasuki sonde adalah saluran pencernaan dari hewan uji, namun kenyataannya saluran yang dimasuki sonde adalah saluran pernafasannya sehingga hewan percobaan mengalami kematian karena saluran pernafasan termasuk paru-paru terisi sejumlah cairan yang pada fungsi normalnya tak seharusnya dimasuki oleh cairan. Selanjutnya dilakukan uji untuk efek asam mefenamat pada mencit II. Pada hewan dan metode uji ini, hewan uji diberikan asam mefenamat sebagai obat analgesik (pereda nyeri) di samping pemberian zat penginduksi nyeri yaitu asam asetat. Uji ini dimaksudkan agar dapat dilihat seberapa besar kemampuan cara kerja dari asam mefenamat dalam menurunkan atau meredakan nyeri pada mencit berdasarkan hasil perbandingan dengan obat prototipe pada percobaan ini yaitu asetosal. Mulanya hewan uji ini diberikan asam mefenamat secara peroral, agar dapat diamati pengaruh atau cara kerja asam mefenamat dalam meredakan nyeri, maka pada menit ke-30 dilakukan pemberian zat penginduksi nyeri yaitu asam asetat secara intraperitonial. Asam asetat merupakan asam lemah yang tidak terkonjugasi dalam tubuh, pemberian sediaan asam asetat terhadap hewan
percobaan akan merangsang prostaglandin untuk menimbulkan rasa nyeri akibat adanya kerusakan jaringan atau inflamasi. Prostaglandin menyebabkan sensitisasi reseptor nyeri terhadap stimulasi mekanik dan kimiawi sehingga prostaglandin dapat menimbulkan keadaan hiperalgesia, kemudian mediator kimiawi seperti bradikinin dan histamin merangsangnya dan menimbulkan nyeri yang nyata. Akibat dari adanya rasa nyeri inilah hewan percobaan akan menggeliatkan kaki belakangnya saat efek dari penginduksi ini bekerja. Pemberian sediaan asam asetat pada peritonial atau selaput gastrointestinal hewan memungkinkan sediaan lebih mudah diabsorbsi oleh tubuh dan cepat memberikan efek. Setelah diamati, pada 5 sampai 15 menit pertama setelah pemberian asam asetat, hewan uji menunjukan aktivitas geliat yang meningkat yaitu 24, 61, dan 74. Akan tetapi setelah 20 menit sampai 60 menit pemberian asam asetat hewan uji memperlihatkan aktivitas geliat semakin menurun yaitu 57, 50, 39, 30, 34, 42, 20, 10, dan 6 geliat. Secara teoritis seharusnya pada menit-menit awal hewan uji menunjukkan aktivitas geliat paling tinggi kemudian terus menurun seiring bertambahnya waktu pengamatan, hal ini dikarenakan pada awal-awal pemberian asam asetat diberikan yaitu hanya berjarak 30 menit dari pemberian asam mefenamat, pada saat ini asam mefenamat belum bekerja atau memberikan efek maksimal sebagai analgesik untuk meredakan nyeri yang disebabkan asam asetat, sehingga dapat diamati respon nyeri hewan uji melalui aktivitas geliatnya. Dengan bertambahnya lama pengamatan, maka efek iritatif dari asam asetat akan semakin berkurang dan efek analgesik dari asam mefenamat akan mulai bekerja sehingga rasa nyeri dapat ditekan atau diredakan. Hal ini dapat diamati dengan adanya penurunan aktivitas geliat pada hewan uji. Hal ini berbanding terbalik dengan hasil pengamatan pada 15 menit pertama setelah pemberian asam asetat dimana aktivitas geliat terus mengalami peningkatan dari 5 sampai 15 menit pertama, akan tetapi hasil uji mulai normal setelah 20 menit pengamatan sampai 60 menit dimana aktivitas geliat hewan uji terus mengalami penurunan. Ketidaksesuaian hasil pengamatan pada 5-15 menit pertama dapat disebabkan karena hewan uji merasakan sakit sehingga hewan uji malas bergerak akibatnya aktivitas geliat tidak dapat diamati secara tepat, adapun setelahnya diberikan perlakuan pada
hewan uji dengan mendorongnya untuk bergerak sehingga aktivitas geliat dapat diamati. Adapun jika dibandingkan dengan hasil pengamatan rata-rata dari tiap kelompok menunjukkan data yang hampir sama dimana pada 20 menit pertama aktivitas geliat hewan uji mengalami peningkatan dan seteleh menit ke-25 sampai 60 aktivitas geliat menunjukkan penurunan yang menandakan mulai sesuai dengan yang seharusnya. Sehingga dapat dilihat bahwa rata-rata tiap kelompok mengalami kendala dan kesalahan yanng sama dalam mengamati aktivitas geliat hewan uji. Selanjutnya adalah melakukan pengamatan terhadap daya kerja analgesik dari obat prototipe yaitu asetosal, pada tahap ini dilakukan uji kontrol positif dimana hewan uji diberikan zat penginduksi nyeri dan obat pereda nyeri yang standar sehingga dapat dijadikan bahan perbandingan untuk obat analgesik yang ingin diketahui tingkat efektivitasnya berdasarkan perbandingannya dengan obat prototipe ini. Hewan uji ke III ini diberikan asetosal secara peroral kemudian ditunggu selama 30 menit lalu hewan uji diberikan asam asetat 0,7 % secara intraperitonial. Sebelum diberikan asam asetat secara intraperitonial, daerah peritonial hewan uji dibasahi dengan alkohol terlebih dahulu, pemberian ini dimaksudkan agar memberikan rasa sensasi dingin pada hewan uji, dan zat ini dapat mengecilkan pori-pori yang pada tujuan akhirnya adalah untuk mengurangi rasa nyeri pada hewan uji saat dilakukan penyuntikan agar mencit merasa nyaman dan tidak melakukan perlawanan yang berarti sehingga dosis tepat diberikan. Kemudian hewan uji diberikan asam asetat 0,7% secara intraperitonial dan kemudian diamati respon nyeri yang diperlihatkan hewan uji selama 60 menit. Sama halnya dengan respon yang ditunjukkan oleh hewan uji II, pada hewan uji III ini pun pada 20 menit pertama waktu pengamatan hewan uji menunjukkan peningkatan aktivitas geliat yaitu 0, 11, 21, dan 44 geliat. Pada tiap 5 menit selanjutnya mengalami naik turun yaitu 38, 49, 41, 45, 39 , dan pada 15 menit terakhir pengamatan hewan uji menunjukkana aktivitas geliat yang semakin menurun yaitu 31, 20, dan 10 geliat. Jika dibandingkan dengan hasil pengamatan dari rata-rata tiap kelompok dapat diamati bahwa aktivitas geliat pada hewan uji juga mengalami peningkatan di 20 menit pertama, setelahnya mengalami naik
turun, dan baru pada 20 menit pengamatan terakhir hewan uji menunjukkan penurunan aktivitas geliat. Secara teoritis berdasarkan waktu pemberian asam asetat, seharusnya menit-menit awal pengamatan akan menunjukkan aktivitas geliat paling tinggi kemudian terus mengalami penurunan seiring dengan telah habisnya reaksi asam asetat dengan tubuh hewan uji dan mulai bekerjanya asetosal sebagai analgesik dalam meredakan nyeri yang diakibatkan asam asetat. Akan tetapi, dari hasil pengamatan diperoleh ketidaksesuaian dimana pada menitmenit awal aktivitas geliat terus mengalami peningkatan, kemudian aktivitas geliat mengalami naik turun, dan baru pada menit 20 terakhir menunjukkan penurunan
aktivitas
geliat.
Kekeliruan
ini
dapat
diakibatkan
karena
ketidakcermatan dalam membedakan dan mengamati respon yang bisa disebut sebagai geliat karena minimnya pergerakan hewan uji karena rasa sakit yang dirasakannya, selain itu hewan uji yang tidak dengan jelas menunjukkan geliatnya membuat kekeliruan dalam menghitung tingkat aktivitas geliat hewan uji. Data-data pengamatan dari tiap kelompok kemudian dirata-ratakan kemudian rata-rata tersebut dijumlahkan untuk setiap kelompok hewan uji. Dari jumlah rata-rata tersebut, kemudian dapat diperoleh nilai % proteksi asam mefenamat dan asetosal yang dibandingkan jumlah geliat pada kelompok kontrol negatif dan % efektivitas asam mefenamat berdasarkan perbandingan dengan obat prototipe yaitu asetosal. Dari perhitungan, grafik, dan tabel di atas diperoleh nilai % proteksi dari asam mefenamat adalah 0,96% dimana nilai ini jauh lebih besar daripada nilai % proteksi asetosal yaitu -21,34%. Hal ini tentu saja memberikan gambaran mengenai kekuatan efek analgesik dari asam mefenamat jauh lebih besar daripada asetosal dimana jumlah geliat pada hewan uji yang diberi asam mefenamat lebih sedikit geliatnya dibandingkan dengan hewan uji yang diberikan asetosal. Hal ini sangat bertolak belakang dengan yang seharusnya, dimana sebagai obat prototipe seharusnya asetosal memiliki % proteksi lebih besar daripada zat yang diujikan pada percobaan ini yaitu asam mefenamat yang dapat dilihat dari jumlah geliat pada hewan uji yang diberi asetosal seharusnya lebih kecil daripada jumlah geliat pada hewan uji yang diberikan asam mefenamat. Kekeliruan ini dapat diakibatkan
karena ketidaktelitian dan ketidakcermatan praktikan saat memberikan asetosal dimana ada kemungkinan ketidaktepatan dosis yang diberikan, baik dari ketidakhomogenan suspensi asetosal yang diberikan dan teknik pemberiannya juga dapat disebabkan karena ketidakcermatan praktikan dalam mengamati jumlah geliat hewan uji. Sedangkan % efektivitas asam mefenamat yang diperoleh adalah -4,498%, hal ini menunjukkan bahwa pemberian asam mefenamat sebagai analgesik tidak memiliki pengaruh yang signifikan dalam meredakan nyeri pada hewan uji karena jumlah geliat dari hewan uji kontrol negatif (tidak diberi asam mefenamat) beberapa pada waktu pengamatan memiliki nilai yang lebih kecil daripada hewan uji yang diberi asam mefenamat. Padahal seharusnya dengan pemberian asam mefenamat, nyeri pada hewan uji dapat diredakan dengan indikator jumlah geliat dari hewan uji yang diberi asam mefenamat lebih sedikit jumlahnya dibandingkan dengan jumlah geliat dari hewan uji kontrol negatif. Kekeliruan ini dapat diakibatkan kurang cermatnya dalam mengamati jumlah geliat dari hewan uji yang disebabkan hewan uji cenderung tidak mau bergerak karena nyeri yang dirasakannya dimana di sisi lain praktikan kurang mendorong hewan uji untuk bergerak sehingga pengamatan uji geliat menjadi bias, di lain hal juga dapat disebabkan karena ketidaktepatan pemberian dosis asam mefenamat yang diakibatkan tidak homogennya suspensi asam mefenamat yang diberikan karena tidak dikocok terlebih dahulu suspensinya sehingga konsentrasi asam mefenamat yang diberikan tidak tepat, kesalahan lainnya adalah kurang tepatnya teknik pemberian asam mefenamat secara peroral.
VIII. KESIMPULAN
1. Berbagai cara untuk mengevaluasi secara eksperimental efek analgetik suatu obat dapat dilakukan dengan cara mengamati peningkatan waktu reaksi. 2. Dasar-dasar perbedaan daya analgetika dapat dipahami dengan nilai % proteksi dan % efektivitas. 3. Kesesuaian khasiat yang dianjurkan untuk sediaan-sediaan farmasi analgesika sudah tepat.
DAFTAR PUSTAKA
Anief, Moh. 2000. Prinsip Umum dan Dasar Farmakologi. Universitas Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Cerner
Multum.
2009.
Aspirin.
Available
online
at:
http://www.drugs.com/aspirin.html [diakses tanggal 5 April 2014] Goodman and Gilman. 2006. The Pharmacologic Basis of Therapeutics – 11th Ed.McGraw-Hill Companies. Inc. New York. Katzung,B.G. 1997. Farmakologi Dasar dan Klinik , ed IV. Penerbit Buku Kedokteran. Jakarta. Mutschler Ernest. 1991. Dinamika Obat, Buku Ajar Farmakologi & Toksikologi edisi V. Penerbit ITB. Bandung. Penunjang
Medis.
2010.
Asam
Mefenamat.
Available
online
at:
http://mediapenunjangmedis.dikirismanto.com/asam-mefenamat.html [diakses tanggal 5 April 2014]. Tjay, Hoan Tan. 2007. Obat-Obat Penting: Khasiat, Penggunaan, dan Efek-efek Sampingnya. Edisi ke-6. PT. Gramedia. Jakarta.
