Pemeriksaan Retraksi Bekuan I.
Tujuan 1.1. Mahasiswa dapat mengetahui tehnik pemeriksaan retraksi bekuan. 1.2. Mahasiswa dapat melakukan pemeriksaan dan menginterpretasikan
hasil
pemeriksaan retraksi bekuan. II.
Prinsip 5 mL darah yang diambil dari vena dimasukkan kedalam tabung centrifuge bersamaan dengan sebatang lidi. Kemudian didiamkan pada suhu kamar selama 2-3 jam, serum serta sel-sel yang darah yang terperas keluar dari bekuan diukur volumenya dan dan dinyatakan dalam persen dari volume darah seluruhnya.
III.
Dasar Teori A. Pengertian Hemostasis Hemostasis adalah mekanisme tubuh untuk menghentikan pendarahan dan mencegah
perdarahan spontan. Selain itu, dapat mengusahakan darah tetap mengalir di dalam pembuluh darah (menghentikan perdarahan dan mencegah terjadinya pembekuan darah atau thrombus) (Dhani, 2010) Faktor yang berperan pada hemostasis : 1. Pembuluh darah 2. Trombosit 3. Faktor-faktor pembekuan darah Trombosit (juga disebut Platelet atau keping darah) adalah sel-sel berbentuk oval kecil yang dibuat di sumsum tulang. Trombosit membantu dalam proses pembekuan. Ketika pembuluh darah pecah, trombosit berkumpul di daerah dan membantu menutup kebocoran. Trombosit bertahan hidup hanya sekitar 9 hari dalam aliran darah dan secara konstan akan digantikan oleh sel-sel baru (Sridianti, 2013). Protein penting yang disebut faktor pembekuan sangat penting untuk proses pembekuan. Kendati trombosit sendiri bisa menutup kebocoran pembuluh darah kecil dan untuk sementara
menghentikan atau memperlambat pendarahan, dengan adanya faktor pembekuan darah menghasilkan penggumpalan yang kuat dan stabil. Trombosit dan faktor pembekuan bekerja sama untuk membentuk benjolan padat (disebut bekuan darah) untuk menutup kebocoran, lukaluka, atau goresan dan untuk mencegah pendarahan di dalam dan pada permukaan tubuh kita.Ketika pembuluh darah besar yang terputus (atau dipotong), tubuh mungkin tidak dapat memperbaiki dirinya melalui pembekuan saja. Dalam kasus ini, perban atau jahitan digunakan untuk membantu mengontrol perdarahan. Jika jumlah trombosit terlalu rendah, perdarahan yang berlebihan dapat terjadi. Namun, jika jumlah trombosit terlalu tinggi, dapat terbentuk pembekuan darah (trombosis), yang dapat menghambat pembuluh darah dan mengakibatkan peristiwa seperti stroke, infark miokard, emboli paru atau penyumbatan pembuluh darah ke bagian lain dari tubuh , seperti ujung-ujung lengan atau kaki. Suatu kelainan atau penyakit dari trombosit disebut thrombocytopathy (Sridianti, 2013). Hemostasis terdiri dari enam komponen utama, yaitu: trombosit, endotel vaskuler, procoagulant plasma protein faktors, natural anticoagulant proteins, protein fibrinolitik dan protein antifibrinolitik. Semua komponen ini harus tersedia dalam jumlah cukup, dengan fungsi yang baik serta tempat yang tepat untuk dapat menjalankan faal hemostasis dengan baik. Interaksi komponen ini dapat memacu terjadinya thrombosis disebut sebagai sifat prothrombotik dan dapat juga menghambat proses thrombosis yang berlebihan, disebut sebagai sifat antithrombotik. Faal hemostasis dapat berjalan normal jika terdapat keseimbangan antara faktor prothrombotik dan faktor antithrombotik.(Rafsan,2012) Hemostasis normal dapat dibagi menjadi dua tahap: yaitu hemostasis primer dan hemostasis sekunder. Pada hemostasis primer yang berperan adalah komponen vaskuler dan komponen trombosit. Disini terbentuk sumbat trombosit (trombosit plug) yang berfungsi segera menutup kerusakan dinding pembuluh darah. Sedangkan pada hemostasis sekunder yang berperan adalah protein pembekuan darah, juga dibantu oleh trombosit. Disini terjadi deposisi fibrin pada sumbat trombosit sehingga sumbat ini menjadi lebih kuat yang disebut sebagai stable fibrin plug. Proses koagulasi pada hemostasis sekunder merupakan suatu rangkaian reaksi dimana terjadi pengaktifan suatu prekursor protein (zymogen) menjadi bentuk aktif. Bentuk aktif ini sebagian besar merupakan serine protease yang memecah protein pada asam amino tertentu sehingga protein pembeku tersebut menjadi aktif. Sebagai hasil akhir adalah pemecahan fibrinogen menjadi fibrin yang akhirnya membentuk cross linked fibrin. Proses ini jika dilihat
secara skematik tampak sebagai suatu air terjun (waterfall) atau sebagai suatu tangga(cascade). (Rafsan,2012) Jadi dalam proses hemosatasis terjadi 3 reaksi yaitu reaksi vascular berupa vasokontriksi pembuluh darah, reaksi selular yaitu pembentukan sumbat trombosit, dan reaksi biokimiawi yaitu pembentukan fibrin. Faktor-faktor yang memegang peranan dalam proses hemostasis adalah pembuluh darah, trombosit, dan faktor pembekuan darah. Selain itu faktor lain yang juga mempengaruhi hemostasis adalah faktor ekstravascular, yaitu jaringan ikat disekitar pembuluh darah dan keadaan otot.(Anonim,2012) Pendarahan mungkin diakibatkan oleh kelainan pembuluh darah, trombosit, ataupun sistem pembekuan darah. Bila gejala perdarahan merupakan kalainan bawaan, hampir selalu penyebabnya adalah salah satu dari ketiga faktor tersebut diatas kecuali penyakit Von Willebrand. Sedangkan pada kelainan perdarahan yang didapat, penyebabnya mungkin bersifat multipel. Oleh karena itu pemeriksaan penyaring hemostasis harus meliputi pemeriksaan vasculer, treombosit, dan koagulasi. (Anonim,2012) Proses koagulasi dapat dimulai melalui dua jalur, yaitu jalur ekstrinsik (extrinsic pathway) dan jalur intrinsik (intrinsic pathway). Jalur ekstrinsik dimulai jika terjadi kerusakan vaskuler sehingga faktor jaringan (tissue factor) mengalami pemaparan terhadap komponen darah dalam sirkulasi. Faktor jaringan dengan bantuan kalsium menyebabkan aktivasi faktor VII menjadi FVIIa. Kompleks FVIIa, tissue factor dan kalsium (disebut sebagai extrinsic tenase complex) mengaktifkan faktor X menjadi FXa dan faktor IX menjadi FIXa. Jalur ekstrinsik berlangsung pendek karena dihambat oleh tissue factor pathway inhibitor (TFPI). Jadi jalur ekstrinsik hanya memulai proses koagulasi, begitu terbentuk sedikit thrombin, maka thrombin akan mengaktifkan faktor IX menjadi FIXa lebih lanjut, sehingga proses koagulasi dilanjutkan oleh jalur intrinsik. Jalur intrinsik dimulai dengan adanya contact activation yang melibatkan faktor XII, prekalikrein dan high molecular weigth kinninogen (HMWK) yang kemudian mengaktifkan faktor IX menjadi FIXa. Akhir-akhir ini peran faktor XII, HMWK dan prekalikrein dalam proses koagulasi dipertanyakan. Proses selanjutnya adalah pembentukan intrinsic tenase complex yang melibatkan FIXa, FVIIIa, posfolipid dari PF3 (trombosit factor 3) dan kalsium. Intrinsic tenase complex akan mengaktifkan faktor X menjadi FXa. Langkah berikutnya adalah pembentukan kompleks yang terdiri dari FXa, FVa, posfolipid dari PF3 serta kalsium yang disebut sebagai
prothrombinase complex yang mengubah prothrombin menjadi thrombin yang selanjutnya memecah fibrinogen menjadi fibrin. (Rafsan,2012) Pemeriksaan faal hemosatasis adalah suatu pemeriksaan yang bertujuan untuk mengetahui faal hemostatis serta kelainan yang terjadi. Pemeriksaan ini bertujuan untuk mencari riwayat perdarahan abnormal, mencari kelainan yang mengganggu faal hemostatis, riwayat pemakaian obat, riwayat perdarahan dalam keluarga. Pemeriksaan faal hemostatis sangat penting dalam mendiagnosis diatesis hemoragik. Biasanya pemeriksaan hemostasis dilakukan sebelum operasi. Beberapa klinisi membutuhkan pemerikasaan hemostasis untuk semua penderita pre operasi, tetapi ada juga membatasi hanya pada penderita dengan gangguan hemostasis. Yang paling penting adalah anamnesis riwayat perdarahan. Walaupun hasil pemeriksaan penyaring normal, pemeriksaan hemostasis yang lengkap perlu dikerjakan jika ada riwayat perdarahan. (Anonim,2012) Pemeriksaan ini terdiri atas: A. Tes penyaring meliputi :
Percobaan pembendungan Masa perdarahan Hitung trombosit Masa protombin plasma (Prothrombin Time, PT) Masa tromboplastin partial teraktivasi (Activated partial thromboplastin time,
APTT) Masa trombin (Thrombin time, TT)
B. Tes khusus meliputi :
Tes faal trombosit Tes Ristocetin Pengukuran faktor spesifik (faktor pembekuan) Pengukuran alpha-2 antiplasmi
B. Pembekuan Darah Pembekuan atau penggumpalan darah atau disebut juga koagulasi terjadi apabila darah ditampung dan di biarkan begitu saja, akan terjadi suatu massa yang menyerupai gel yang kemudian menjadi massa yang memadat dengan meninggalkan cairan jernih yang disebut serum darah. Kumpulan ini terjadi dari filament-filamen fibria yang mengikat sel darah merah. Sel darah merah platelef (Hoffbrand, 1987).
Koagulasi darah atau pembekuan darah adalah transformasi darah dari cairan menjadi gel padat. Pembentukan bekuan di atas sumbat trombosit memperkuat dan menunjang sumbat, memperkuat tambalan yang menutupi lubang-lubang si pembuluh. Selain itu seirng dengan memadatnya darah disekitar defek pembuluh, darah tidak lagi dapat mengalir (Sherwood, 1986). Lebih dari 40 macam zat yang mempengaruhi pembekuan darah telah ditemukan dalam darah dan jaringan, beberapa diantaranya mempermudah tegadinya pembekuan, disebut prokoagulan, dan yang lain menghambat pembekuan, disebut antikoagulan. Apakah pembekuan akan terjadi atau tidak, tergantung pada keseimbangan antar kedua golongan zat. Dalam keadaan normal antikoagulan lebih dominan sehingga darah tidak membeku, tetapi bila pembuluh darah rusak aktivitas prokoagulan di daerah kerusakan menjadi jauh lebih tinggi dari pada aktivitas antikoagulan, dan bekuan pun terbentu (Zaesty, 2012) Mekanisme Secara Umum. Peneliti-peneliti dalam bidang pembekuan darah semuanya setuju bahwa pembekuan terjadi melalui tiga langkah utama : 1. Suatu zat atau kompleks zat-zat disebut aktivator protrombin timbul, sebagai reaksi terhadap pecahnya pembuluh atau kerusakan darah itu sendiri. 2. Activator protrombin mengkatalisa perubahan protrombin menjadi trombin. 3. Thrombin bekerja sebagai enzim untuk mengubah fibrinogen menjadi benang-benang fibrin yang menjaring trombosit, sel-sel darah, dan plasma sehingga terjadi bekuan darah. C. Retraksi Bekuan Retraksi bekuan merupakan pemeriksaan untuk menguji fungsi trombosit. Darah yang digunakan dalam pemeriksaan ini adalah darah vena. Dalam beberapa me nit setelah terbentuk, bekuan darah mulai menciut dan biasanya memeras keluar hampir seluruh cairan dari bekuan itu dalam,30 sampai 60 menit. Cairan yang terperas keluar disebut serum, sebab seluruh fibrinogen dan sebagian besar faktor-faktor pembekuan yang lain telah dikeluarkan; dan dengan demikian serum berbeda dari plasma. Jelas bahwa serum tidak dapat membeku karena tidak mengandung faktor-faktor pembekuan. Trombosit diperlukan untuk terjadinya retraksi bekuan. Oleh sebab itu kegagalan pada proses retraksi merupakan tanda bahwa jumlah trombosit yang beredar dalam darah adalah kurang. Mikrograf elektron dari trombosit dalam bekuan darah memperlihatkan bahwa trombosit-trombosit tersebut melekat pada benangbenang fibrin sebenarnya dengan cara mengikat benang-benang itu sehingga menjadi satu. Selain itu, trombosit yang terperangkap dalam bekuan terus melepaskan zat-zat prokoagulan,
salah satu di antaranya ialah faktor pemantap fibrin yang menyebabkan terjadinya ikatanikatan silang antara benang-benang fibrin yang berdekatan. Selain itu, trombosit memberikan dukungan langsung untuk terjadinya retraksi bekuan dengan cara mengaktifkan molekul . aktin dan miosin trombosit, yang merupakan protein-protein yang kontraktil dan dapat menimbulkan kontraksi kuat dari tonjolan-tonjolan runcing pada trombosit yang melekat pada fibrin. Jelas bahwa peristiwa ini juga akan menciutkan jaringan fibrin menjadi massa yang lebih kecil. Kontraksi molekul aktin dan miosin mungkin diaktifkan oleh trombin. dan juga oleh ion kalsium yang dilepaskan oleh gudang kalsium dalam retikulum endoplasma dan aparatus Golgi dari trombosit (Gandasoebrata, 2010). Dengan terjadinya retraksi bekuan, ujung-ujung robekan pembuluh darah ditarik saling mendekat, sehingga memungkinkan terjadinya hemostasis. Percobaan ini digunakan untuk menguji fungsi trombosit, selain trombosit dapat juga digunakan untuk menguji : -
Kadar fibrinogen Jenis permukaan yang bersentuh dengan darah beku Kwalitas dan kwantitas trombosit Hct Beberapa keadaan seperti : myeloma, pneumonia, dan ikterus.
Meningkatnya Hct akan diikuti dengan berkurangnya retraksi bekuan yang sebanding. Pengaruh pneumonia dan ikterus pada retraksi bekuan masih belum dapat diterangkan. Pada myeloma, protein yang abnormal mempengaruhi retraksi bekuan. Retraksi bekuan terjadi sejam setelah darah membeku dan menjadi sempurna lewat 24 jam. Cara yang diterangkan tadi memberi nilai yang kwantitatif pada percobaan ini. Jika darah yang diperiksa mempunyai nilai Hct rendah dengan sendirinya jumlah serum yang diperas keluar lebih banyak dari biasa. Pada keadaan ini dan juga pada erytositosis sebagai gantinya dapat diukur jumlah serum yang ketinggalan dalam bekuan, yaitu volume cairan bekuan (Gandasoebrata,2010). Dengan terjadinya retraksi bekuan, ujung-ujung robekan pembuluh darah ditarik saling mendekat, sehingga memungkinkan terjadinya hemostasis. (Hoffbrand & Moss, 2013) Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi retraksi bekuan: 1. Kadar fibrinogen 2. Faktor-faktor pembekuan dalam serum darah 3. Jenis permukaan yang bersentuhan dengan darah beku
IV.
Alat dan Bahan
1. Alat : 2.
Spuit 5 mL Tabung sentrifuge bergaris Stopwatch Bahan : Darah vena Lidi Alcohol swab Kapas kering
V. Cara Kerja 1. Alat dan bahan yang akan digunakan disiapkan 2. Diambil kira-kira 5 mL darah dari vena dan dimasukkan ke dalam tabung sentrifuge bergaris. Dimasukkan juga sebatang lidi ke dalam tabung tersebut dan dicatat volumenya. 3. Dibiarkan pada suhu kamar selama 2-3 jam . 4. Bekuan darah dilepaskan dengan hati-hati dari dinding tabung, kemudian tabung dimiringkan dan bekuan diangkat dari tabung dengan mengangkat lidi tersebut. 5. Volume serum dicatat ( bersama sel-sel yang masih tertinggal dalam tabung) yang ada dalam tabung dan dinyatakan dalam persen (%) dari volume darah sebelumnya dalam VI.
VII.
tabung. Interpretasi hasil Nilai normal : 40 - 60% Abnormal : < 40 % Daftar Pustaka
Anonym. 2011. Laporan praktikum pemeriksaan koagulasi. http:// dicerahkan.blogspot.com/ 2011/01/ laporan-praktikum-pemeriksaan-koagulasi.html Gandasoebrata. 2010. Penuntun Laboratorium Klinik Cetakan keenambelas. Dian Rakyat : Jakarta. Dhani. 2010. Hemostasis. http://aviramadhani.blogspot.com/2010/03/ hemostatis.html Sherwood, Laurancee. 1986. Fisiologi Manusia. Exakta Ganeca. Jakarta. Hoffbrand. 1987. Metode Praktikum Sistematik Hewan. Erlangga.Jakarta. Zaesty, Arif. 2012. Waktu Koagulasi Darah. http://arifzaesty-uns.blogspot.com/2012/11/laporanfiswan-waktu-koagulasi-darah.html Khairul Osman. 2007. Gangguan Pendarahan. Essential Hematology : Jakarta Sridianti. 2013. Trombosit. http://www.sridianti.com/trombosit-fungsi.html http://id.scribd.com/doc/172440755/retraksi-bekuan
http://id.scribd.com/doc/173977815/Paper-Hematologi-Retraksi-Bekuan
