PAPER H EM ATOLOGI ATOLOGI
PEMERIKSAAN HEMOGLOBIN
Oleh Kelompok I (Genap) :
LUH PUTU AYU BINTANG UTAMI
(P07134012002) (P07134012002)
PANDE KADEK WIDIANA PUTRA
(P07134012022) (P07134012022)
I GUSTI LANANG RAJENDRA WATUSILA
(P07134012032) (P07134012032)
NI LUH PUTU GINA OKTA VERIANA
(P07134012042) (P07134012042)
Disampaikan kepada : Dosen Pengampu Mata Kuliah Hematologi
KEMENTERIAN KESEHATAN RI POLITEKNIK KESEHATAN DENPASAR DIII JURUSAN ANALIS KESEHATAN 2013
PEMERIKSAAN HEMOGLOBIN METODE HEMATIN ASAM (SAHLI)
I. TUJUAN 1.1 Tujuan Instruksional Umum
- Untuk mengetahui kadar hemoglobin dalam darah yang diperiksa. - Untuk mengetahui metode pemeriksaan hemoglobin. 1.2 Tujuan Instruksional Khusus
- Untuk mengetahui dan memahami pemeriksaan hemoglobin dengan metode Sahli. - Untuk dapat melaksanakan pemeriksaan hemoglobin dengan metode Sahli. - Untuk dapat mengintepretasikan hasil pemeriksaan kadar hemoglobin yang didapatkan.
II. METODE
Metode yang digunakan dalam pemeriksaan hemoglobin ini adalah metode hematin asam (Sahli).
III. PRINSIP
Prinsip Metode Sahli adalah hemoglobin diubah menjadi hematin asam dengan penambahan larutan asam encer (HCl 0,1 N), kemudian warna yang terjadi dibandingkan secara visual dengan standar dalam alat.
IV. DASAR TEORI 4.1 Ti nj auan Umum Tentang Darah
Hematologi adalah ilmu tentang darah dan jaringan pembentuk darah yang merupakan salah satu sistem organ terbesar di dalam tubuh. Darah membentuk 6 sampai 8% dari berat tubuh total dan terdiri dari sel-sel darah yang tersuspensi di dalam suatu cairan yang disebut plasma (Sacher, Ronald A., 2004). Darah adalah kendaraan atau medium untuk transportasi jarak jauh berbagai bahan antara sel dan lingkungan eksternal atau antara sel itu sendiri. Warna merah darah keadaannya tidak tetap bergantung pada banyaknya oksigen dan karbondiosida di dalamnya. Darah yang banyak mengandung CO 2 warnanya merah tua. Adanya O 2 dalam darah diambil melalui pernapasan, dan zat ini sangat berguna pada peristiwa pembakaran
atau metabolisme dalam tubuh. Visikositas atau kekentalan darah lebih kental dari pada air yang mempunyai BJ 1,041 − 1,067, temperatur 38 ⁰C dan pH 7,37 – 7,45. Volume darah sel keseluruhan adalah seperduabelas atau kira-kira lima liter sekitar
55%
adalah
plasma
darah,
sedangkan
45%
sisanya
terdiri
dari
eritrosit.(Evelyn.CP, 1985) Darah berwarna merah terang apabila ada oksigen dan merah tua apabila tidak ada oksigen. Warnanya disebabkan oleh hemoglobin, protein pernafasan yang mempunyai besi dalam bentuk heme, tempat oksigen bergabung. Fungsi utama sel darah merah adalah mengangkut oksigen yang diperlukan untuk hidup di seluruh tubuh, yaitu mengangkut oksigen ke jaringan dan mengembalikan karbondioksida dari jaringan paru-paru. Untuk mencapai pertukaran gas ini, sel darah merah mengandung protein khusus yaitu, hemoglobin.(A.V.Hofbrand, 1987)
4.2 Tin jauan U mum Tentang H emoglobin
Hemoglobin adalah molekul protein pada sel darah merah yang berfungsi sebagai media transport oksigen dari paru-paru ke seluruh jaringan tubuh dan membawa karbondioksida dari jaringan tubuh ke paru-paru. Kandungan zat besi yang terdapat dalam hemoglobin membuat darah berwarna merah. Saat ini pengukuran kadar hemoglobin dalam darah sudah menggunakan mesin otomatis selain mengukur hemoglobin mesin pengukur akan memecah hemoglobin menjadi sebuah larutan. Hemoglobin dalam larutan ini kemudian dipisahkan zat lain dengan menggunakan zat kimia bernama nilai sinar yang berhasil diserap oleh hemoglobin. Hemoglobin adalah metaloprotein pengangkut oksigen yang mengandung besi dalam sel darah merah mamalia dan hewan lainnya. Molekul hemoglobin terdiri dari : globin, apoprotein, dan empat gugus heme, suatu molekul organik dengan satu atom besi. Fungsi hemoglobin dalam darah adalah : 1 Mengatur pertukaran oksigen dengan karbondioksida di dalam jari ngan tubuh. 2 Mengambil oksigen dari paru-paru kemudian dibawa keseluruh jaringan tubuh untuk dipakai sebagai bahan baku. 3 Membawa karbondioksida dari jaringan tubuh sebagai hasil metabolisme ke paru-paru untuk dibuang.
4 Untuk mengetahui apakah seseorang kekurangan darah atau tidak dapat diketahui dengan pengukuran kadar Hb. Penurunan kadar Hb dari normal berarti kekurangan darah. Kekurangan darah berarti anemia. Selain kekurangan Hb juga disertai dengan eritrosit yang berkurang serta nilai hematokrit dibawah normal. (Kresno, 1988) Pada manusia telah dikenal kurang dari 14 macam Hb yang dipelajari secara mendalam dengan bantuan elektroforesis. Hb diberi nama dengan simbol alfabeta misalnya ; Hb A, Hb C, Hb D, Hb E, Hb F, Hb G, Hb I, Hb M, Hb S, dan sebagainya. (Joice, 2008) Kadang-kadang Hb diberi nama menurut kota tempat ditemukan jenis Hb atau orang yang menemukannya, misalnya ; Hb New York, Hb Sydney, Hb Bart, Hb Gower, dan lain-lain. Hb A ( Adult=Dewasa) mulai diproduksi pada usia 5 - 6 bulan kehidupan intrauterine janin, pada usia 6 bulan postnatal kosentrasi Hb A 99%. Hb A terdiri dari 2 rantai α dan 2 rantai β. Hb F ( Foetus= janin) mulai ditemukan dalam darah pada minggu ke dua puluh usia kehamilan. Pada bayi Hb F dan sebelum usia 2 tahun jumlahnya tinggal sedikit, diganti oleh Hb A. Karena sifatnya yang resisten terhadap alkali, Hb F ini mudah dipisahkan dari Hb A. Hb F terdiri dari 2 rantai α dan 2 rantai T. Pada pusat molekul terdapat cincin heterosiklik yang dikenal dengan porifin yang menahan satu atom besi. Atom besi ini merupakan situs/lokal ikatan oksigen. Porifin yang mengandung besi disebut heme. Nama hemoglobin merupakan gabungan dari heme dan globin. Globin sebagai istilah generik untuk protein globural. Ada beberapa protein mengandung heme, dan hemoglobin adalah yang paling dikenal dan paling banyak dipelajari. Gambar struktur molekul hemoglobin
v
Sumber: Google images, 2013
Pada manusia dewasa, hemoglobin berupa tetramer (mengandung 4 subunit protein), yang terdiri dari masing-masing dua sub unit mirip secara struktural dan berukuran hampir sama. Tiap sub unit memiliki berat molekul ± 16,000 Dalton, sehingga berat molekul total tetramernya menjadi sekitar 64,000 Dalton. Tiap sub unit hemoglobin mengandung satu heme, sehingga secara keseluruhan hemoglobin memilki kapasitas empat molekul oksigen. (Hariono, 2006 )
4.3 M etode Penetapan K adar H emoglobin
Adapun metode pemeriksaan hemoglobin antara lain : 1. Metode Berat Jenis (metode Cupri-Sulfat) 2. Metode Gasometrik (O2 atau CO) 3. Metode Kimia (kadar Fe dalam Hb) 4. Metode Kolorimetrik Metode Kolorimetri sendiri dapat dibagi menjadi lima metode antara lain : 1. Direct Matching methods (Tallquist) 2. Metode Hematin-Asam (Sahli) 3. Metode Hematin-alkali 4. Metode Oksihemoglobin 5. Metode Sianmethemoglobin Berikut ini akan dibahas beberpa metode pemeriksaan hemoglobin metode kalorimetri di atas. 1. Direct Matching methods (Tallquist) Prinsipnya adalah membandingkan darah asli dengan suatu skala warna yang bertingkattingkat mulai dari warna merah muda sampai warna merah tua. Cara ini hanya mendapat kesan dari kadar hemoglobin saja, sebagai dasar diambil adalah 100%=15,8 gram hemoglobin per 100 ml darah. Tallquist mempergunakan skala warna dalam satu buku, mulai dari merah muda 10 %. Di tengah-tengah ada lowong dimana darah yang akan dibandingkan secara langsung sehingga kesalahan dalam melakukan pemeriksaan antara 25%-50%. (Depkes RI, 1989) Cara Kerja Metode Tallquist : -
Darah dari ujung jari diisap dengan kertas saring
-
Lalu diletakkan di bawah lubang skala
-
Bandingkan warna darah daripada skala
-
Konversi satuan dalam %
Risiko kesalahan mengukur dengan metode ini cukup besar, karena warna skala dapat berubah (Adam, Syamsunir, 1992) 2. Metode Hematin-Asam (Sahli) Prinsip : Hemoglobin diubah menjadi hematin asam, kemudian warna yang terjadi dibandingkan secara visual dengan standar dalam alat. Cara sahli ini banyak dipakai di Indonesia, walaupun cara ini tidak tepat 100%, akan tetapi masih dianggap cukup baik untuk mengetahui apakah seseorang
kurang darah. Kesalahan dalam melakukan
pemeriksaan ini kira-kira 10 %. Kelemahan cara sahli ini adalah hematin asam itu bukan merupakan larutan sejati dan juga alat hemoglobinometer sukar distandardisasi. Selain itu, tidak semua macam hemoglobin
dapat
diubah
menjadi
hematin,
misalnya
karboxy
hemoglobin,
methemoglobin dan sullfhemoglobin (Depkes RI, 1989). Sebelum melakukan pemeriksaan hemoglobin baik dengan menggunakan metode Sahli maupun metode-metode lainnya tentunya menggunakan darah yang akan menjadi bahan pemeriksaan. Seperti halnya metode Sahli ini juga, memerlukan sampel darah untuk pemeriksaan yang dapat diperoleh dari darah kapiler, EDTA, atau oksalat. 1. Darah kapiler Darah kapiler adalah Pembuluh darah kapiler merupakan ujung yang letaknya berada di bagian akhir dari pembuluh arteri. Darah kapiler biasanya didapatkan langsung melalui pengambilan ke pasien. Pada orang dewasa biasanya diambil pada ujung jari atau anak daun telinga, pada bayi dan anakanak bisa juga pada tumit atau ibu jari kaki. Tempat yang dipilih tidak boleh memperlihatkan gangguan peredaran darah seperti cyanosis atau pucat. Untuk pengambilan darah ini terlebih dahulu perlu disediakan semua alat yang diperlukan seperti jarum, botol penampung,pipet, dll. Tempat yang akan ditusuk harus bersih, jika perlu dicuci terlebih dahulu dengan air dan sabun. (Gandosoebrata, 1969) 2. Darah EDTA Untuk menjaga agar darah yang akan diperiksa tidak sampai membeku maka digunakanlah antikoagulan. Tidak semua macam antikoagulan dapat dipakai karena ada yang terlalu banyak berpengaruh terhadap bentuk eritrosit atau leukosit yang akan diperiksa morfologinya. EDTA atau Ethylene Diamine Tetra Acetate adalah salah satu antikoagulan yang paling sering digunakan dalam pemeriksaan
hematologi karena tidak berpengaruh terhadapbesar dan bentuk eritrosit dan leukosit. Serta mencegah menggumpalnya trombosit. EDTA yang sering dipakai adalah dalam bentuk larutan EDTA 10%. Darah EDTA dapat dibuat dengan mencampurkan 2 mg EDTA dengan 2 ml darah vena yang dicampur di dalam botol atau tabung khusus selama 1 menit atau lebih. Pemeriksaan denga memakai darah EDTA sebaiknya dilakukan segera, namun bisa juga disimpan dalam lemari es dengan suhu 4 0 C haya saja kalau disimpan terlalu lama nilai hematokrit darah akan lebih tinggi. Yang penting untuk diketahui adalah sebelum mengambil darah yang bercampur dengan antikoagulan dari botol, haruslah dipastikan darah dan antikoagulannya sudah bercampur dengan baik. (Gandosoebrata, 1969)
3. Darah Oksalat Darah oksalat adalah darah yang ditambahkan antikoagulan dari campuran ammonium oksalat dan kalium oksalat yang juga dikenal sebagai campuran oksalat seimbang. Cara pembuatannya adalah dengan mencampurkan campuran oksalat seimbag dengan 2 – 5 ml darah vena di dalam botol khusus dengan membolak-balikkan botol secara perlahan selama kurang lebih 30 detik. Pemeriksan dengan memakai darah oksalat sebaiknya janga ditunda-tunda karena adakalanya eritrosit-eritrosit cenderung menggumpal. Untuk pemeriksaan kadar hemoglobin waktu penundaan pemeriksaan maksimal yang disarankan adalah 24 jam. Cara Kerja Metode Sahli : -
Tabung Hb meter (Sachli) diisi dengan Cloin sampai garis 2.
-
Diisap darah dengan pipet sahli sampai garis 20 mm.
-
Lalu dimasukkan dalam tabung sahli kemudian dikocok sampai terjadi warna coklat tua.
-
Diencerkan dengan air sampai warna cairan dalam tabung sama dengan warna batang tabung gelas disamping satuannya gram %.
Metode ini juga memiliki kekurangan, ketidaktepatan metode ini disebabkan oleh batang gelas dapat berubah warnanya bila sudah lama (Adam, Syamsunir, 1992). Cara Sahli ini bukanlah cara yang teliti. Kelemahan metodik berdasarkan kenyataan bahwa kolorimetri visual yang tidak teliti, bahwa hematin asam itu bukan merupakan larutan sejati dan bahwa alat itu tidak distandarkan. Cara ini juga kurang baik karena tidak
semua
macam
hemoglobin
diubah
menjadi
hematin
asam,
umpamanya
karboxyhemoglobin, methemoglobin dan sulfehemoglobin. Ketelitian yang biasanya dicapai oleh ± 10% kadar hemoglobin yang ditentukan dengan cara sahli dan cara-cara kolorimetri visual lain hanya patut dilaporkan dengan meloncat-loncat ½ g/dl, sehingga laporan menjadi ump, 11, 11 ½, 12, 12 ½, 13 g/dl. Janganlah melaporkan hasil yang memakai angka decimal sepert i 8,8 , 14,0 , 15,5 g/dl dsb, ketelitian dan ketepatan cara sahli yang kurang memadai tidak membolehkan laporan seperti itu. Kesalahan-kesalahan pada penetapan kadar hemoglobin cara Sahli : 1. Tidak tepat mengambil 20 µl darah. 2. Darah dalam pipet tidak sempurna dikeluarkan ke dalam HCl karena ti dak dibilas. 3. Tidak baik mengaduk campuran darah dan asam pada waktu mengecerkan. 4. Tidak memperhatikan waktu yang seharusnya berlalu untuk mengadakan pembandingan warna. 5. Kehilangan cairan dari tabung karena untuk mencampur isinya, tabung itu dibolak-balikkan dengan menutupnya memakai ujung jari. 6. Ada gelembung udara di permukaan pada waktu membaca. 7. Membandingkan warna pada cahaya yang kurang terang. 8. Menggunakan tabung pengencer yang tidak diperuntukan alat yang dipakai. 5. Metode Foto Elektrik Kalorimetri (Sianmethemoglobin) Prinsipnya adalah hemoglobin diubah menjadi cyanmethemoglobin dalam larutan drabkin yang berisi kalium sianida dan kalium ferisianida. Absorbensi larutan diukur pada panjang gelombang 540 nm. Larutan drabkin yang dipakai untuk mengubah hemoglobin, oxyhemoglobin, methemoglobin, dan karboxymoglobin menjadi cyanmethemoglobin, sedang sulfhemoglobin tidak berubah karena tidak diukur. Cara ini sangat bagus untuk laboratorium rutin dan sangat dianjurkan untuk penetapan kadar hemoglobin dengan teliti karena standar cyanmethemoglobin yang ditanggungkan kadarnya stabil dan dapat dibeli. Larutan drabkin teridri atas natrium bikarbonat 1 gram, kalium sianida 50 mg, kalium ferisianida 200 mg, aqudest 100 ml. (Gandosoebrata, 2006) Cara ini sangat bagus untuk pemeriksaan di laboratorium rutin dan sangat dianjurkan untuk penetapan kadar hemoglobin degan teliti karena standar sianmethemoglobin yang ditanggung kadarnya bersifat stabil dan dapat dibeli. Ketelitian cara ini dapat mencapai ± 2%.
Laporan
hasil
pemeriksaan
kadar
hemoglobin
dengan
memakai
cara
sianmethemoglobin dan spektrofotometer hanya boleh menyebut satu angka (digit) di blakang tanda desimal, melaporkan dua digit sesudah angka decimal melampaui ketelitian dan ketepatan yang dapat dicapai dengan metode ini. Variasi-variasi fisiologis juga menyebabkan digit kedua dibelakang tanda decimal menjadi tanpa makna. Sumber kesalahan pada pemeriksaan hemoglobin dengan menggunakan metode sianmethemoglobin : a)
Statis vena pada pengambilan darah menyebabkan kadar hemoglobin lebih tinggi dari seharusnya, sebaliknya penggunaan darah kapiler menyebabka kontaminasi cairan jaringan yang menyebabkan kadar hemoglobin lebih rendah dari seharusnya.
b)
Terjadinya bekuan darah
c)
Tidak mengocok darah sewaktu mengambil darah untuk pemeriksaan
d)
Menggunakan larutan standart/reagen yang tidak baik
e)
Menggunakan pipet 20 ul atau 5,0ml yang tidak akurat untuk itu perlu dilakukan kalibrasi pipet.
f)
Cara pemipetan tang tidak tepat baik sewaktu mengambil darah
g)
Fotometer yang kurang baik, misalnya pengaturan panjang gelombang yang tidak tepat, untuk itu perlu dilakukan kalibrasi panjang gelombang. Perubahan pada spektrofotometer mengharuskan kita untuk membuat kurva standar baru.
h) Perubahan tegangan listrik akan mempengaruhi pembacaan serapan.Darah yang lipemik akan menyebabkan hasil yang lebih tinggi dari seharusnya.
4.4 F aktor yang M empengaru hi H asil Pemeri ksaan K adar H emoglobin
Hal-hal yang dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan hemoglobin, antara lain sebagai berikut : 1. Reagen Reagen adalah bahan pereaksi yang harus selalu baik kualitasnya mulai dari saat penerimaan, semua reagen yang dibeli harus harus diperhatikan nomor lisensi kadaluarsanya, keutuhan wadah atau botol atau cara transportasinya. 2. Metode Laboratorium yang baik adalah laboratorium yang mengikuti perkembangan metode pemeriksaan
dengan
pertimbangan
kemampuan
laboratorium
tersebut
dan
biaya
pemeriksaannya. Petugas laboratorium harus senantiasa bekerja dan mengacu pada metode
yang digunakan, jika metode yang digunakan salah atau tidak sesuai maka akan berpengaruh pada hasil pemeriksaan kadar hemoglobin. 3. Bahan pemeriksaan Bahan pemeriksaan meliputi; cara pengambilan spesimen, pengiriman spesimen, penyimpanan spesimen, dan persiapan sampel. 4. Lingkungan Dalam hal ini dapat berupa ; keadaan ruang kerja, cahaya, suhu kamar, kebisingan, luas dan tata ruang 5. Tenaga labratorium. Dalam hal ini yang diharapkan adalah petugas laboratorium harus mengusai alat dan teknik di bidang laboratorium. 6. Sampel Kekeruhan dalam suatu sampel darah dapat mengganggu dalam fotokolorimeter dan menghasilkan absorbensi dan kadar Hb yang lebih tinggi dari yang sebenarnya. Kekeruhan semacam ini dapat disbabkan antara lain oleh leukositosis, lipemia, dan adanya globulin abnormal seperti pada macro iobulinemia. (Gandosoebrata, 2006) Kesalahan-kesalahan yang dapat menyebabkan susunan darah yang digunakan dalam pemeriksaan dapat berubah antara lain : 1. Mengambil darah dari tempat yang menyatakan adanya gangguan peredaran seperti pucat 2. Tusukan kurang dalam sehingga darah harus diperas-peras keluar 3. Kulit yang diusuk masih basah alkohol 4. Tetesan darah pertama dipakai untuk pemeriksaan 5. Terjadi bekuan dalam tetesan darah karena terlalu lambat bekerja Sumber keselahan dalam memperoleh darah 1. Menggunakan semprit dan jarum yang basah 2. Mengenakan ikatan pembendung terlalu lama atau terlalu keras 3. Terjadi bekuan dalam semprit karena lambatnya bekerja 4. Terjadi bekuan dalam botol oxalate karena tidak dicampur semestinya dengan oxalate kering atau antikoagulan.
4.5 Kadar Hemoglobin Normal
Fungsi sel darah merah dalam darah arteri sistemik mengangkut oksigen dari paru paru ke jaringan dan kembali dalam darah vena dengan karbon dioksida (CO 2) ke paru-
paru ketika molekul hemoglobin memuat dan melepas oksigen (O 2) masing-masing rantai globin dalam molekul hemoglobin mendorong satu sama lain (A.V.Hofbrand. 1987) Pada bayi baru lahir, kadar hemoglobin lebih tinggi dari pada orang dewasa yaitu berkisar antara 13,6 - 19,6 g/dl. Kemudian kadar hemoglobin menurun dan pada umur 3 tahun dicapai kadar paling rendah yaitu 9,5 - 12,5 g/dl. Setelah itu secara bertahap kadar hemoglobin naik dan pada pubertas kadarnya mendekati kadar pada dewasa yaitu berkisar antara 11,5 - 14,8 g/dl. Pada pria dewasa kadar hemoglobin berkisar antara 13 16 g/dl sedangkan pada wanita dewasa antara 12 - 14 g/dl. Tabel 1. Batasan normal kadar hemoglobin
Sumber : R. Gandasoebrata, 1984
4.6 Peni ngkatan dan Penur un an Kadar H b
Peningkatan kadar Hb tergantung oleh lamanya anoreksia, juga tergantung dari respons individu yang berbeda-beda. Kerja fisik yang berat juga dapat menaikkan kadar hemoglobin, mungkin hal ini disebabkan masuknya sejumlah eritrosit yang tersimpan di dalam kapiler-kapiler ke peredaran darah atau karena hilangnya plasma. Kadar hemoglobin yang kurang dari rujukan merupakan salah satu tanda dari anemia.
Menurut morfologi eritrosit di dalam sediaan darah apus, anemia dapat
digolongkan atas tiga golongan yaitu anemia mikrositik hipokrom, anemia makristik dan anemia normostik normokrom. Untuk mencari penyebab suatu anemia diperlukan pemeriksaan-pemeriksaan lebih lanjut. Bila kadar hemoglobin lebih tinggi dari nilai rujukan, maka keadaan ini disebut polistemia. Polistemia ada tiga macam yaitu polistemia vera, suatu penyakit yang tidak diketahui penyebabnya, polistemia skunder, suatu keadaan yang terjadi sebagai akibat berkurangnya saturasi oksgen misalnya
kelainan jantung bawaan, penyakit paru-paru, karena peningkatan kadar eritroprotein berlebih, dan polistemia relatif, suatu keadaan yang terjadi sebagai akibat kehilangan plasma missal pada luka bakar. (R. Dharma, 2004)
V. ALAT DAN BAHAN 4.1 Alat
1.
Hb-meter Sahli Hb-meter Sahli terdiri dari : - Gelas standar berwarna coklat - Tabung Sahli berskala (g% dan %) - Pipet Sahli (volume 20 μL) - Gelas pengaduk - Pipet Pasteur
4.2 Bahan
1. Larutan HCl 0.1N 2. Aquadest
VI. CARA KERJA
Menurut R. Gandosoebrata dalam buku “Penuntun Laboratorium Klinik” prosedur kerja untuk pemeriksaan hemoglobin metode Sahli adalah sebagai berikut : 1. Dimasukkan kira-kira 5 tetes HCl 0,1 N kedalam tabung pengencer hemometer. 2. Dihisap darah (kapiler, EDTA, atau oxalate) dengan pipet hemoglobin sampai garis tanda 20 µl. 3. Dihapus darah yang melekat pada sebelah luar ujung pipet. 4. Catatlah waktu dan segera alirkan darah dari pipet kedalam dasar tabung pengencer yang berisi HCl itu. Hati-hati jangan sampai ada gelembung udara. 5. Diangkat pipet sedikit, lalu diisap asam HCl yang jernih itu ke dalam pipet 2 atau 3 kali untuk membersihkan darah yang masih tertinggal pada pipet. 6. Dicampur isi tabung itu supaya darah dan asam bersenyawa, warna campuran menjadi coklat tua. 7. Ditambahkan air setetes demi setetes, tiap kali diaduk dengan batang pengaduk yang tersedia. Persamaan warna campuran dan batang standar harus dicapai dalam waktu 3-5 menit setelah saat darah dan HCl dicampur. Pada usaha
mempersamakan warna hendaknya tabung diputar demikian sehingga garis bagi tidak terlihat. 8. Dibaca kadar hemoglobin dengan gram / 100 ml darah.
VII. INTERPRETASI HASIL
Interpretasi hasil yang dapat dilakukan untuk
pemeriksaan hemoglobin ini dapat
dilakukan dengan terlebih dahulu membandingkan hasil pemeriksaan yang diperoleh dengan nilai normal kadar hemoglobin yang digunakan sebagai acuan. Adapun nilai normal kadar hemoglobin menurut Gandosoebrata, 1984 adalah sebagai berikut :
1. Untuk Usia Dewasa -
Laki-laki
13,0 - 16,0 gr%
-
Perempuan
11,0 – 13,0 gr%
2. Untuk Usia Anak-anak -
Bayi baru lahir
13,6 – 19,6 gr%
-
Bayi umur 3 bulan
9,0 – 12,5 gr%
-
Bayi umur 1 tahun
11,0 – 13,0 gr%
-
Anak umur 10-12 tahun
11,5 – 14,8 gr%
Jika hasil pemeriksaan kadar hemoglobin yang dilakukan terhadap pasien masih ada pada rentang normal sesuai dengan kelompok usia yang telah disebutkan di atas maka dapat dinyatakan kondisi pasien dalam keadaan normal. Bila kadar hemoglobin yang diperiksa berada di bawah angka normal maka dapat dicurigai bahwa pasien yang diperiksa mengalami anemia, sehingga dapat dilakukan pemeriksaan lanjutan untuk mengetahui jenis dan penyebab anemia yang kemungkinan diderita oleh pasien. Akan tetapi jika kadar hemoglobin yang diperiksa berada di atas nilai kadar normal maka pasien diduga mengalami polistemia, yang dapat disebabkan oleh berkurangnya saturasi oksigen misalnya kelainan jantung bawaan, penyakit paru-paru, peningktan eritroprotein berlebih untuk polistemia skunder, sedangkan untuk polistemia relatif dapat disebabkan oleh kehilangan plasma misalnya pada pasien yang mengalami luka bakar.
VIII. DAFTAR PUSTAKA
Gandosoebrata, R. 1969. Penuntun Laboratorium Klinik . Jakarta : Dian Rakyat Depkes RI. 1989. Hematologi. Pusat Pendidikan Tenaga Kesehatan. Jakarta. Adam, Syamsunir. 1992. Dasar-dasar mikrobiologi dan Parasitologi untuk Perawat . Jakarta: EGC Sacher, Ronald A. dan Richard A. McPherson. 2004. Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium Edisi 11. Alih bahasa : Brahm U. Pendit dan Dewi Wulandari. Jakarta: EGC Kee, Joyce LeFever. 2008. Pedoman Pemeriksaan Laboratorium & Diagnostik Edisi 6 . Alih bahasa : Sari Kurnianingsih, Palupi Widyastuti, Rohana Cahyaningrum, Sri Rahayu. EGC : Jakarta.
