I.
PENDAHULUAN 1.1.
Latar Belakang
Berbagai macam senyawa kimia baik organik maupun anorganik bersifat racun racun terhada terhadap p jasad jasad renik renik banyak banyak kita kita jumpai jumpai dalam dalam kehidu kehidupan pan seharisehari-har hari. i. Seny Senyaw awaa kimi kimiaa yang yang mema memati tika kan n jasad jasad renik renik diseb disebut ut deng dengan an desin desinfek fekta tan. n. Desi Desinf nfek ektan tan adala adalah h zat zat kimi kimiaa yang yang memati mematika kan n sel sel vege vegetat tatif if belu belum m tentu tentu mematikan bentuk spora mikroorganisme penyebab suatu penyakit. Cara kerja zat-zat kimia dalam mematikan atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme berbeda-beda antara lain dengan merusak dinding sel mengubah permeabilitas sel mengubah molekul protein dan asam amino yang dimiliki mikroorganisme menghambat kerja enzim menghambat sintesis asam nukleat dan protein serta sebagai antimetabolit. !engujian jenis atau kemampuan desinfektan berdasarkan uraian di atas perlu dilakukan agar mengetahui bagaimana sebenarnya pengaruh desinfektan terse tersebu butt terh terhad adap ap mikr mikroo oorg rgani anism smee yang yang ada. ada. "paka pakah h desi desinf nfek ekta tan n terse tersebu butt memberi memberikan kan efek yang yang baik baik atau tidak. Selain itu hal ini berpen berpengar garuh uh juga juga terhadap sanitasi dari ruangan dimana jika ternyata desinfektan tersebut tidak efektif efektif maka maka masih masih terdap terdapat at mikroo mikroorga rganism nismee yang yang mungki mungkin n dapat dapat masuk masuk ke dalam bahan baku atau dalam proses pengolahan. #ika terdapat mikroorganisme maka akan berpengaruh bagi ketahanan produk tersebut dan bagi konsumen.
1.2. Tujuan $. %ntuk %ntuk menget mengetahu ahuii efektifita efektifitass suatu desinf desinfekt ektan. an. &. %ntuk mengetahui mengetahui keefektifan keefektifan suatu desinfektan. desinfektan. '. %ntuk menetapkan menetapkan koefisien koefisien fenol suatu desinfektan. desinfektan.
II.
TEORI DASAR II.1 I.1.
Des Desinfe infek ktan tan
Desinfektan
adalah
suatu
bahan
kimia
yang
dipakai
untuk
mencegah pertumbuhan mikroorganisme melalui suatu mekanisme kerja tertentu terutama pada benda pada benda mati. Desinfektan digunakan secara luas untuk sanitasi baik di rumah tangga laboratorium dan rumah sakit (Shaffer $)*+, arson &$'/. 0ekanisme 0ekanisme penghancuran penghancuran mikroorga mikroorganisme nisme oleh desinfektan desinfektan dilakukan dilakukan dengan dengan jalan merusak struktur dinding sel mengubah permeabilitas membran sel (#oklik et al . . $)12, Chatim dan Suhato $))2/ mengadakan perubahan molekulmoleku molekull protei protein n dan asam nukleat nukleat mengham menghambat bat kerja kerja enzim enzim atau dapat pula pula dengan cara menghambat sintesa asam nukleat dan protein. Desinfektan dapat mematikan mematikan bentuk-bent bentuk-bentuk uk pertumbuh pertumbuhan an (sel vegetatif/ vegetatif/ suatu mikroorga mikroorganisme nisme tetapi tidak mematikan terhadap bentuk spora karena bentuk spora bersifat lebih tahan. Beberapa faktor yang mempengaruhi mempengaruhi kerja desinfektan desinfektan antara lain ukuran ukuran dan komposisi populasi jasad renik konsentrasi zat antimikroba lama paparan temperatur temperatur lingkungan lingkungan sekitar konsentrasi konsentrasi desinfektan desinfektan dan jenis bahan (!elczar dan Chan $))1/. Proses Proses desinfeksi dapat menghilangkan 60% - 90%
jasad renik. Usaha desinfeksi dapat bersifat sterilisasi sempurna sempurna atau atau
meng mengha hamb mbat at
terg ergantung
pert pertum umbu buha han n
kepada
jenis
mikr mikroo oorrgani ganism sme. e.
desinfektan
dan
lama
Hal Hal
ini ini
kontak
desinfektan dengan mikroorganisme mikroorganisme yang diuji. Katu atung ng !"99 !"99#$ #$ meng mengat atak akan an bah baha a konse onsent ntra rasi si yang yang sangat sangat rendah endah dapat dapat mengha menghamb mbat at pertum pertumbuh buhan an bakter bakterii dan konse onsent ntra rasi si
lebi lebih h
terten tertentu. tu. Pemilih emilihan an
ting tinggi gi
dapa dapatt
memb membun unuh uh
mikr mikroo oorrgani ganism sme e
suatu su atu desinf desinfekt ektan& an& perlu perlu memper memperhat hatik ikan an
kriteria desinfektan yang baik. 'uatu desinfektan dikatakan baik apabila pada konsentrasi ke(il sudah memiliki daya antimikroba yang yang tinggi tinggi&& dis disamp amping ing itu desinf desinfekt ektan an terseb tersebut ut mudah mudah larut larut dala dalam m air& air& sert serta a stab stabil il di dala dalam m baha bahan n orga organi nik. k. 'ela 'elanj njut utny nya a Pel(ar dan )han !"99#$ menambahkan baha desinfektan yang ideal hendaknya tidak bersifat toksik bagi manusia dan hean& tidak menyebabkan bau& mempunyai akti*itas broad spektrum yang luas dan harganya relatif murah.
Kriteria suatu desinfektan yang ideal adalah bekerja dengan (epat untuk menginakti*asi mikroorganisme pada suhu kamar& berspektrum luas& akti*itasnya tidak dipengaruhi oleh bahan organik& pH& temperatur& dan kelembaban& tidak toksik pada hean
dan
manusia& tidak
bersifat korosif&
bersifat
biodegradable& memiliki kemampuan menghilangkan bau yang
kurang
sedap&
tidak
meninggalkan
noda&
stabil&
mudah
digunakan& dan ekonomis !'isandono& "99+, ut(her and Ulaeto& 0"0$. /enurut isman !000$& menyatakan baha tidak ada desinfektan yang ideal& oleh karena itu penggunaan desinfektan harus sesuai dengan prosedur penggunaannya. erdasarkan struktur kimia jenis bahan& desinfektan dapat terbagi kedalam beberapa golongan yaitu1 alkohol& aldehid& asam& halogen& dan persenyaaan logam
berat
yang
dan
mengandung
garam-garamnya&
halogen& serta
peroksidan& fenol
dan
persenyaaan yang berhubungan dengannya. !rander
et al.&
"9#, Katung& "99#$. II.2.
Pengglngan Desinfektan
0enurut Siswandono ($))+/ desinfektan dapat dibagi menjadi enam kelompok yaitu 1 1. Turunan Al!e"i!a
Senyawa turunan aldehid memiliki gugus aldehid (C34/ pada struktur kimianya misalnya formaldehid paraformaldehid dan glutaraldehid. 5urunan aldehid umumnya digunakan dalam campuran air dengan konsentrasi +6 - +6 dan bekerja dengan mendenaturasi protein sel bakteri (Siswandono $))+, Somani et al . &$$/. arutan formaldehid (formalin/ mengandung formaldehid (4C34/ '76 yang mempunyai aktivitas antibakteri dengan kerja yang lambat. arutan formaldehid digunakan untuk pengawetan mayat desinfektan ruangan alat-alat dan baju dengan kadar $8+. arutan formaldehid dalam air atau alkohol
digunakan untuk mendesinfeksi tangan dengan konsentrasi maksimum + mg9 (Somani et al . &$$/. !araformaldehid diperoleh dengan menguapkan larutan formaldehid. Senyawa ini serupa dengan formalin. !araformaldehid mempunyai bau kurang menyenangkan. !araformaldehid bekerja pada konsentrasi maksimum $ mg9 (:hanem et al . &$&/. :lutaraldehid digunakan untuk mensterilkan bahan cair dan peralatan bedah yang tidak dapat disterilkan dengan pemanasan. Senyawa ini mempunyai keuntungan karena tidak berbau dan efek iritasi terhadap kulit dan mata lebih rendah dibanding formalin. arutan glutaraldehid &6 efektif sebagai antibakteri dan spora pada p4 7+ ; 1+ (
eunggulan turunan aldehid adalah sifatnya stabil persisten dapat dibiodegradasi dan cocok dengan
beberapa
material
peralatan.
?amun
senyawa
tersebut
dapat
mengakibatkan resistensi jasad renik berpotensi sebagai karsinogen dan mengakibatkan iritasi pada sistem mukosa. (>ahrs $))+, arson &$'/. 2. Turunan Alk"l
2urunan alkohol merupakan bahan yang banyak digunakan selain turunan aldehid& misalnya etanol !)H+3H$& isopropanol !)4H53H$. lkohol bekerja dengan mendenaturasi protein dari sel bakteri
dan
umumnya
dibuat
dalam
(ampuran
air
pada
konsentrasi 50% - 90%. 7tanol bersifat bakterisid yang (epat& digunakan sebagai antiseptik kulit dan sebagai pengaet. kti*itas bakterisidnya optimal pada kadar 50%. 8sopropanol mempunyai akti*itas bakterisid lebih kuat dibandingkan etanol karena lebih efektif dalam menurunkan tegangan permukaan sel bakteri dan denaturasi bakteri !7lisabeth& 0"$.
#.
Sen$a%a Pengksi!asi
'enyaa pengoksidasi yang umum digunakan sebagai desinfektan
adalah
hidrogen
peroksida&
benoil
peroksida&
karbanid peroksida& kalium permanganat& dan natrium perborat !'isandono& "99+, boh& et
al.&
0"4$.
Hidrogen peroksida adalah senyaa pengoksidasi yang sering digunakan sebagai antimikroba. 'enyaa ini diurai oleh enim
katalase
menghasilkan
oksigen
yang
aktif
sebagai
antiseptik. Hidrogen peroksida digunakan untuk men(u(i luka dan penghilang bau badan dengan kadar "-4% !'isandono& "99+, hanem& et enoil
al.&
0"$.
peroksida
dalam
air
melepaskan
hidrogen
peroksida dan asam benoat. enoil peroksida pada konsentrasi +-"0%
digunakan
sebagai
antiseptik dan
pengobatan jeraat !'tampi& et Karbanid
peroksida
al.&
keratolitik untuk
00, boh&
disebut
juga
et al.&
urea
0"4$. peroksida&
mengandung hidrogen peroksida !4:%$ dan oksigen !"6%$. ;arutan karbamid peroksida dalam air se(ara perlahan-lahan melepaskan hidrogen peroksida& dan digunakan untuk antiseptik pada telinga dan pada luka !'isandono& "99+, 7lisabeth& 0"$. Kalium permanganat dan natrium perborat digunakan sebagaidesinfektan dan antiseptik karena bersifat oksidatif. Pada umumnya& keduasenyaa tersebut digunakan untuk pemakaian lokal dalam bentuk larutan dalam air !'isandono& "99+, ;arson& 0"4$. &. Turunan 'enl
struktur kimia tersebut bertujuan untuk mengurangi efek iritasi kulit dan meningkatkan akti*itas antibakteri !reer& 0"0$. 'enyaa fenolik seringkali digunakan dalam (ampuran sabun dan deterjen. kti*itas antimikroba senyaa fenolik disebabkan
kemampuannya
merusak
lipid
pada
membran
plasma mikroorganisme sehingga menyebabkan isi sel keluar. Peningkatan sifat
lipo=l turunan
fenol
akan meningkatkan
akti*itas desinfektannya. 'alah satu senyaa fenolik yang paling sering digunakan adalah kresol !'isandono& "99+, Kahrs& "99+$. ? sehingga efektif membunuh bakteri !'isandono& "99+,
meningkat
bila
jumlah
halogen
yang
dimasukkan
bertambah. Polihalogenisasi fenol akan membentuk senyaa yang mempunyai kelarutan dalam air sangat ke(il. 8katannya dengan reseptor inti fenol lemah& sehingga akti*itasnya rendah. Pemasukan
gugus
nitro
dapat
meningkatkan
akti*itas
antimikroba. 'edangkan pemasukan gugus asam karboksilat dan asam
sulfonat
menurunkan
akti*itas
antimikroba
karena
menurunkan kelarutan dalam lemak sehingga penembusan ke membran sel bakteri menurun !Pratii& 00#, hanem&
et al.&
0"$.
tetapi tidak
dapat
digunakan
se(ara
sistemik karena toksisitasnya tinggi. 'enyaa-senyaa tersebut hanya digunakan untuk antiseptik kulit& mulut& dan desinfektan.
)ontoh1 timol& kresol& klorokresol& klorosilenol& dan betanaftol !Pratii& 00#$. 4.1.
Defnisi Fenol
alam men(oba keasaman reaksi dalam at-at kimia seperti asam asetat& dan lain-lain banyak digunakan indikator& indikator seperti kertas lakmus.
sifat
yang
berbeda.
>alam
air
fenol
sedikit
terionisasi menghasilkan ion H@ dengan Ka A "0-"0. 4.2.
Karakteristik Fenol
dapat
melepaskan
ion
H@
dari
gugus
hidroksilnya.
Pengeluaran ion tersebut menjadikan anion fenoksida )6H+3C yang dapat dilarutkan dalam air. >ibandingkan dengan alkohol alifatik lainnya& fenol bersifat lebih asam. Hal ini dibuktikan dengan mereaksikan fenol dengan ?a3H& di mana fenol dapat melepaskan H@. Pada keadaan yang sama& alkohol alifatik lainnya tidak dapat bereaksi seperti itu. Pelepasan ini diakibatkan pelengkapan orbital antara satusatunya
pasangan
oksigen
dan
sistem
aromatik
yang
mendelokalisasi beban negatif melalui (in(in tersebut dan menstabilkan anionnya. 4.3.
Siat Fenol
". /empunyai
gugus
hidroksi tetapi bukan termasuk
golongan alkohol dan bukan pula termasuk basa . 2ermasuk asam karbolat yang bersifat asam lemah 4. 2idak berarna dengan ujud padat tetapi mudah men(air dengan titik lebur :D) :. Eika terkena fenol& kulit akan melepuh dan rusak +. >alam kehidupan sehari-hari fenol dikenal dengan karbol
!lisol$
yang
digunakan
sebagai
disinfektan
dengan pengaet kayu karena bakteri akan mati disebabkan mengalami kerusakan pada protein 6.
semprotan
kloraseptik.
berfungsi
dalam
pembuatan obat-obatan !bagian dari produksi aspirin& pembasmi rumput liar& dan lainnya. 'elain itu fenol juga berfungsi dalam sintesis senyaa aromatis yang terdapat dalam batu bara. 2urunan senyaa fenol !fenolat$ banyak terjadi se(ara alami sebagai Fa*onoid alkaloid dan senyaa fenolat yang lain. )ontoh dari senyaa fenol adalah eugenol yang merupakan minyak pada (engkeh.
Pada
tahun
"#65
fenol
untuk pertama
kali
digunakan sebagai antiseptik pada pelaksanaan operasi oleh ;ister sebagai germi(ide untuk men(egah timbulnya infeksi pas(a bedah !rander
et al.&
"9#, )hatim dan 'uhato& "99:,
Katung& "99#$.olongan fenol merupakan desinfektan yang baik digunakan sebagai desinfektan !rander et
al.&"9#$.
Hal itu
disebabkan karena fenol lebih bersifat stabil terhadap bahan organik jika dibandingkan dengan bahan lainnya namun fenol juga memiliki beberapa kerugian yaitu sifatnya yangsangat bera(un terhadap manusia maupun hean& mengiritasi dan merusak jaringan tubuh& serta harganya yang relatif mahal !Pel(ar dan )han& "99#, oostita& 00$. erdasarkan alasan-alasan tersebut diatas& maka fenol jarang
digunakan
sebagai
antiseptika
maupun
sebagai
desinfektan. 'ebagai gantinya digunakan turunan fenol yaitu kresol !Eoklik
et al.&
"9#:, Katung& "99#$. Kresol sering dipakai
sebagai desinfektan karena dianggap lebih efektif !rander et
al.&
"9#$. Katung !"99#$ mengatakan baha kresol merupakan salah satu fenol yang mempunyai daya antimikroba beberapa kali lebih kuat daripada fenol& mempunyai sifat ra(un dan iritasi jaringan yang lebih ke(il& serta harganya yang relatif lebih murah. /enurut pendapat Pel(ar dan )han !"99#$ dan Katung !"99#$& kresol beberapa kali germisidal dibandingkan fenol& akan tetapi tidak berpengaruh terhadap spora !rander et
al.&"9#$.
ahan kimia ini berbentuk (air& hampir tidak berarna sampai kuning ke(oklatan pu(at atau dapat menjadi lebih tua akibat pengaruh aktu dan udara. aunya seperti fenol& kelarutannya dalam air relatif ke(il namun dapat ditingkatkan dengan (ara men(ampur
kresol
dengan
air
sabun
!Har*ey&
"990$.
entuk (ampuran ini sudah dibakukan dan disebut larutan kresol tersabun& atau dikenal dengan nama lisol !alins& "9#0$. ;isol merupakan (ampuran larutan kresol dalam pelarut minyak yang berasal dari lemak nabati dengan kalium hidroksida atau natrium hidroksida dengan air. ;arutan lisol berarna kuning sampai (oklat kekuningan& berbau kresol dan larutan sempurna di dalam air dengan segala perbandingan !/artindale& "994$.
;isol memiliki spektrum yang luas sebagai bakterisid dan konsentrasi yang biasa digunakan adalah -+ %& sehingga pemakaian lisol jauh lebih ekonomis bila dibandingkan dengan fenol mengingat lisol lebih mudah didapat dan konsentrasi yang dibutuhkan
lebih
ke(il
daripada
fenol
!osilaati&
"99:$.
/ekanisme kerja lisol dalam membunuh mikroorganisme adalah dengan merusak dinding dan membran sitoplasma sel serta menyebabkandenaturasi protein sel !Eoklik et
al.&"9#:,
Golk and
heeler& "99$. &.(.
Definisi )resl
>resol adalah salah satu contoh benzena tersubtitusi. Benzena yang disubtitusi adalah benzena yang dua atom hidroksilnya diganti dengan gugus fungsional yang lain. ?ama lain kresol adalah metil fenol. :ugus fenol dan hidroksil dapat berkedudukan orto- meta- atau para-. &.*.
)egunaan )resl
>resol efektif sebagai bakterisida dan kerjanya tidak banyak dirusak oleh adanya bahan organic.?amun agen ini menimbulkan iritasi (gangguan/ pada jaringan hidup dan oleh karena itu digunakan terutama sebagai disinfektan untuk benda mati.Satu persen lisol (kresol dicampur dengan sabun/ telah digunakan pada kulit tetapi konsentrasi yang lebih tinggi tidak dapat ditolerir.
+. Turunan A,,niu, )uartener
2urunan amonium kuartener seperti benalkonium klorida& benetonium klorida& setrimid& deIualinium klorida& dan domifen bromida.
2urunan
ini
mempunyai
efek
bakterisid
dan
bakteriostatik terhadap bakteri ram positif dan ram negatif& jamur& dan protooa. 2etapi& turunan ini tidak aktif terhadap bakteri pembentuk spora& seperti Mycobacterim tuberculosis dan *irus !;oughlin&
et
al.&
00, hanem&
et
al.&
0"$. Keuntungan
penggunaan turunan amonium kuartener sebagai desinfektan antara lain adalah toksisitasnya rendah& kelarutan dalam air besar& stabil dalam larutan air& tidak berarna& dan tidak
menimbulkan korosi pada alat logam. Kerugiannya adalah senyaa ini tidak efektif dengan adanya sabun dan surfaktan anionik dan non ionik& ion )a dan /g& serum darah& makanan& dan senyaa kompleks organik !
2urunan halogen yang umum digunakan adalah berbasis iodium seperti larutan iodium& iodofor& dan po*idon iodium. Kompleks klorin dengan senyaa organik disebut klorofor& sedangkan kompleks iodin dengan senyaa organik disebut iodofor. Halogen dan halogenofor digunakan sebagai antiseptik dan desinfektan. Klorin dan klorofor terutama digunakan untuk mendesinfeksi air& seperti air minum dan air kolam renang. )ontohnya& klorin dioksida& natrium hipoklorit& kalsium hipoklorit& dan
triklosan. 'edang
iodin
dan iodofor digunakan untuk
antiseptik kulit sebelum pembedahan dan
antiseptik luka.
2urunan ini umumnya digunakan dalam larutan air dengan konsentrasi " - +% dan mampu mengoksidasi dalam rentang aktu "0-40 menit. )ontohnya& po*idon iodium !reer& 0"0$.
II.#.
)efisien 'enl
>aya kekuatan desinfektan dapat diuji antara lain dengan koe=sien fenol. Koe=sien fenol merupakan kemampuan suatu desinfektan dalam membunuh bakteri dibandingkan dengan fenol. Uji ini dilakukan untuk membandingkan akti*itas suatu produk !desinfektan$ dengan fenol baku dalam kondisi uji yang sama. ijoseputro& "9#, 'omani& et al.&
0""$. ?ilai koe=sien fenol kurang dari satu menunjukkan
baha desinfektan yang diuji kurang efektif atau kurang dayanya bila dibandingkan dengan fenol. 'ebaliknya bila nilai koe=sien fenol lebih dari satu& maka desinfektan tersebut lebih kuat dayanya atau lebih efektif dalam membunuh mikroorganisme dibandingkan dengan senyaa fenol. Koe=sien fenol ditentukan dengan (ara membagi pengen(eran tertinggi dari fenol yang mematikan jasad
renik dalam sepuluh menit
tetapi tidak
membunuh dalam lima menit terhadap pengen(eran tertinggi bahan antimikroba yang membunuh jasad renik dalam sepuluh menit tetapi tidak dalam lima menit !Purohit& et Pada prinsipnya
uji
koe=sien
al.&
fenol
00:$. merupakan
perbandingan akti*itas fenol dengan pengen(eran baku terhadap akti*itas sampel dengan pengen(eran tertentu /8) ( Minimum Inhibitor Consentration/ !konsentrasi terendah dimana pertumbuhan
bakteri terhambat $ suatu antiseptik terhadap bakteri tertentu. /etode pegen(eran bertingkat dengan mengurangi konsentrasi at sebanyak setengah dari konsentrasi aal dengan *olume yang sama. /etode turbidimetri& menentukan takaran dengan melihat kekeruhan yang terjadi setelah per(obaan dilakukan. Hasil kali konsentrasi dengan *olume senyaa yang semula digunakan adalah sama dengan hasil kali konsentrasi senyaa tersebut dalam *olume setelah pengen(eran.
II.&.
e!ia
!ertumbuhan adalah pertambahan teratur semua komponen suatu organisme. Dengan demikian pertambahan ukuran yang diakibatkan oleh bertambahnya air atau karena deposit lipid bukan merupakan pertumbuhan sejati.
faktor pertumbuhan organik. Bahan nutrisi yang digunakan untuk pertumbuhan mikroorganisme di laboraturium disebut media kultur (Sylvia &1/. >elangsungan hidup dan pertumbuhan mikroorganisme tergantung pada nutrisi yang tersedia dan lingkungan pertumbuhan yang menguntungkan. Di dalam laboratorium persiapan gizi yang mikroorganisme disebut
digunakan untuk menumbuhkan
media (tunggal sedang/. 5iga bentuk fisik yang
digunakan8 cair atau kaldu media, media setengah padat, dan
media padat.
!erbedaan utama antara media-media ini adalah media padat dan setengah padat berisi bahan pemadat (biasanya agar-agar/ sedangkan media cair tidak (!rescott &&/. 0edia untuk budidaya mikroorganisme mengandung zat-zat yang diperlukan untuk mendukung pertumbuhan keragaman mikroorganisme
dari mikroorganisme. >arena
dan jalur metabolik mereka yang beragam ada
berbagai media. Bahkan sedikit perbedaan komposisi medium bisa menghasilkan perbedaan secara dramatis pertumbuhan karakteristik mikroorganisme. >etika metode untuk kultur mikroorganisme pertama kali dikembangkan pada abad ke$) sebagian besar oleh @obert >och dan rekannya jaringan hewan dan tumbuhan yang terutama digunakan sebagai sumber nutrisi yang digunakan untuk mendukung pertumbuhan mikroba. Salah satu penemuan utama och adalah bahwa agar-agar dapat digunakan untuk membentuk kultur media dimana mikroorganisme dapat tumbuh. =kstrak
tumbuhan dan
jaringan hewan disusun sebagai kaldu atau dicampur dengan agar-agar untuk membentuk berbagai kultur media. 4ampir semua tanaman hewan atau organ hewani dipertimbangkan untuk digunakan dalam mempersiapkan media (@onald &+/. Berdasarkan konsistensinya media dikelompokkan menjadi dua macam yaitu media cair (liquid media/ dan media padat ( solid media/. "pabila media cair merupakan ekstrak kompleks maerial biologis maka media tersebud dinamakan rich medaia atau broth. 0edia padat menggunakan bahan pembeku ( solidifying agent / misalnya agar suatu kompleks polisakarida yang diperoleh dari alga merah (red algae/. "gar memiliki komposisi kimia berupa D-galaktosa '*anhidro--galaktosa D-glucuronic acid. "gar sebagai bahan pembeku akan
mencair saat didihkan kemudian didnginkan pada suhu 2-2& °C sebelum dibekukan. 0edai agar ini tidak akan mencair lagi kecuali pada suhu 1-) °C. "gar merupakan agen pengeras yang bagus sekali karena tidak dapat didegradasi oleh mikroorganisme (Sylvia &1/.
II.&.1. Nutrien Broth /NB0
Nutrient broth merupakan media untuk mikroorganisme yang berbentuk cair. Nutrien broth adalah medium umum untuk uji air dan produk dairy. ?B juga digunakan untuk pertumbuhan mayoritas dari mikroorganisme yang tidak selektif dalam artian mikroorganisme heterotrof. 0edia ini merupakan media sederhana yang dibuat dari ekstrak beef pepton dan agar. ?B merupakan salah satu media yang umum digunakan dalam prosedur bakteriologi seperti uji biasa dari air sewage produk pangan untuk membawa stok kultur untuk pertumbuhan sampel pada uji bakteri dan untuk mengisolasi organisme dalam kultur murni.
III.
ALAT DAN BAHAN
III.1. $ & ' 2 + * 7 1 )
Alat Bulb !ipet Bunsen =rlenmeyer !ipet %kur !ipet Aolume @ak 5abung @eaksi Stopwatch Swab 5abung @eaksi Steril
III.2. $ & '
Ba"an "uades arutan resol $6
2 +
I.
0edia ?B ( Nutrient Broth/ ?aCl fisiologis
PROSEDUR
I.1. Pe,uatan Sus3ensi Bakteri $ antai dioles dengan menggunakan swab. & Swab dimasukkan ke dalam tabung reaksi berisi ?aCl fisiologis ) ml. ' Diambil sebanyak $ ml dari tabung reaksi tersebut. 2 Dimasukkan ke dalam tabung reaksi lain yang berisikan ) ml media ?B
( Nutrient Broth/.
I.2. Pengujian Desinfektan $ 5abung reaksi * buah disusun pada rak tabung. & Dibuat seri pengenceran larutan kresol dalam tabung-tabung reaksi sebagai
berikut8 )resl 145 /,l0 & & & & & &
Akua!es /,l0
' 2 + * 7 1
lu,e Ttal /,l0 + * 7 1 ) $
Dikurang /,l0
lu,e Ak"ir /,l0
$ & ' 2 +
+ + + + + +
Pengen6eran
$ 8 &+ $ 8 ' $ 8 '+ $ 8 2 $ 8 2+ $ 8 +
'
Dipipet & ml larutan kresol $6 dan dimasukkan ke dalam * tabung
2
reaksi. Ditambahkan akuades steril dengan volume seperti tabel di atas kocok
+
hingga homogen. Dikurangi volume tiap-tiap tabung sehingga tertinggal + ml larutan dengan
berbagai tingkat pengenceran. * Dibuat seri pengenceran larutan fenol seperti pada larutan kresol. 7 !ada saat t masukkan + ml suspensi biakan murni ke masing-masing tabung yang berisi larutan fenol dan kresol mulai dari pengenceran 1
terendah sampai yang tertinggi lalu inkubasikan pada suhu kamar. Setelah waktu kontak + menit ambil $ ose dari tiap-tiap tabung pengenceran dan masing-masing diinokulasikan ke dalam tabung reaksi lainnya yang berisi $ ml medium ?B. akukan hal tersebut sampai waktu
kontak &+ menit. ) Diinkubasikan selama & hari pada suhu 5'oC. $ Diamati adanya pertumbuhan dari kekeruhan medium. #ika ada pertumbuhan ditandakan positif (/ jika sebaliknya maka diberi tanda (-/.
.
HASIL PEN7AATAN
Tael 1. Hasil Penga,atan Pertu,u"an ikrrganis,e 3a!a )resl (5 !an 'enl Pertu,u"an ikrrganis,e Setela" Sa,3el Pengen6eran 8aktu )ntak /,enit0 ( 14 1( 24 2( $8&+ $8' $8'+ resol +6 $82 $82+ $8+ Sumber 8 Dokumentasi !ribadi (&$2/ Tael 2. Uji )resl 145 !engan %aktu Pengujian 14 enit Pertu,u"an ikrrganis,e Sa,3e Pengen6era Setela" 8aktu )ekeru"an l n )ntak /14 ,enit0 >resol $8&+ >eruh +6 $8' >eruh &
En!a3an
5erdpat endapan 5erdapat endapan
$8'+
>eruh '
$82
>eruh
$82+
>eruh +
$8+
>eruh 2
& 5erdapat endapan ' 5erdapat endapan 5erdaat endapan 2 5erdapat endapan '
Sumber 8 Dokumentasi !ribadi (&$2/
I.
PEBAHASAN
!engawasan terhadap mikroorganisme penyebab penyakit telah menjadi pemikiran para ahli semenjak penyakit-penyakit mulai dikenal. Berbagai macam substansi telah dicoba untuk memilih yang paling tepat guna menghilangkan pencemaran oleh jasad renik terhadap benda-benda baik hidup ataupun mati. Bahan antimikroba yang ditemukan memiliki keefektifan yang bermacammacam dan pengunaannya pun ditujukan terhadap hal-hal yang berbeda-beda pula. Salah satu jenis anti mikroba dikenal sebagai disinfektan merupakan suatu zat (biasanya kimia/ yang dipakai untuk maksud disinfeksi pada bahan-bahan tidak bernyawa. Desinfektan didefinisikan sebagai bahan kimia yang digunakan untuk mencegah terjadinya infeksi atau pencemaran jasad renik seperti bakteri dan virus juga untuk membunuh atau menurunkan jumlah mikroorganisme atau kuman penyakit lainnya. Desinfektan memiliki sifat mikrosidal yaitu membunuh mikroorganisme
dan
mikrostatik
yaitu
menghambat
pertumbuhan
mikroorganisme (
peroksidan logam berat dan garam-garamnya serta fenol dan persenyawaan yang berhubungan dengannya. (Brander et al . $)1&, >atzung $))1/. Eat-zat antimikroba yang dipergunakan untuk disinfeksi harus diuji keefektifannya. Cara menentukan daya sterilisasi zat-zat tersebut adalah dengan melakukan tes koefisien fenol. %ji ini dilakukan untuk membandingkan aktivitas suatu produk (desinfektan/ dengan daya bunuh fenol dalam kondisi tes yang sama. Berbagai pengenceran fenol dan produk yang dicoba dicampur dengan suatu volume tertentu biakan Salmonella thyphosa atau Staphylococcus aureus. Salah satu cara pengujian desinfektan yang umumnya dipakai di laboratorium dalah metode pengeceran dimana kekuatan desinfektan dinyatakan dengan koefisien fenol. 0etode koefisien fenol merupakan uji yang telah dibukukan dengan baik. Dalam metode ini mikroorganisme uji dimasukkan dalam larutan fenol murni dan larutan zat kimia yang akan di evaluasi pada berbagai taraf pengenceran (Schlegel dan Schmidt$))2/. !raktikum kali ini akan melakukan uji sifat-sifat desinfektan. Sampel yang digunakan yaitu fenol +6 dan kresol $ 6. %ji sanitasi yang dilakukan ini untuk mengetahui apakah desinfektan efektif dalam membunuh suatu jenis biakan bakteri serta untuk mengetahui koefisien fenol.
I.1. Pengujian Sifat Desinfektan
!engujian sifat desinfektan dilakukan dengan cara melihat daya kerja fenol atau kresol dalam membunuh bakteri pada konsentrasi dan waktu kontak tertentu. !ertama dibuat terlebih dahulu suspensi bakteri dengan cara menswab lantai lalu hasil swab tersebut dicelupkan ke dalam tabung rekasi yang berisi ) ml ?aCl fisiologis kemudian sebanyak $ ml dari tabung tersebut diambil dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi lainnya yang berisi ) ml media ?B ( Nutrient Broth/. >ocok tabung reaksi hingga homogen kemudian didapatkan suspensi bakteri. !engujian desifektan dilakukan dengan cara menyusun sebanyak * tabung reaksi steril pada rak tabung reaksi kemudian diisikan kresol $6 atau fenol +6 masing-masing sebanyak & ml dan diberi nomor dari $-*. 5abung reaksi kemudian ditambahkan akuades sebanyak ' ml 2 ml + ml * ml 7 ml dan 1 ml sesuai urutan tabung. 4al ini dilakukan untuk membuat seri pengenceran. Setelah fenol
atau kresol tercampur dengan akuades larutan tersebut kemudian diambil hingga tersisa + ml pada setiap tabung. !engenceran yang didapatkan yaitu $8&+ $8' $8'+ $82 $82+ $8+. arutan yang tersisa tersebut kemudian ditambahkan + ml suspensi biakan murni. Setelah + menit tabung pengenceran tersebut diinokulasikan dengan ose steril ke dalam tabung reaksi yang telah berisi medium ?B. 0edium ?B ( Nutrient Broth/ adalah medium cair yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri. >omposisi kimia medium ?B sama dengan medium ?" tetapi pada pembuatan ?B tidak ditambahkan agar sebagai pemadat. 4al yang sama dilakukan pada waktu kontak setelah $ menit $+ menit & menit dan &+ menit. 5abung reaksi yang telah diinokulasi diinkubasikan pada suhu ' C selama & hari. !engamatan lalu dilakukan dengan mengamati kekeruhan larutan jika dalam tabung terdapat kekeruhan berarti menunjukan adanya aktifitas mikroorganisme yang tumbuh dan ditandai dengan positif untuk yang keruh dan negatif yang tidak keruh. Berdasarkan hasil pengamatan dapat dilihat bahwa semua tabung pada semua konsentrasi dan waktu kontak terdapat pertumbuhan mikroorganisme (/. !ertumbuhan mikroorganisme dapat diidentifikasi dari adanya kekeruhan atau endapan pada tabung reaksi. Dari hasil pengamatan tersebut tidak dapat diketahui jenis desinfektan mana yang lebih efektif. hasil pengamatan menunjukkan bahwa bakteri atau spora tidak ada yang mati baik menggunakan fenol maupun kresol. 4asil praktikum menunjukkan perbedaan dengan literatur seharusnya dengan desinfektan
yang
diberikan
bakteri
dapat
mati
pada
suhu
tertentu
karena menurut Dwidjoseputro ($))2/ desinfektan adalah bahan kimia yang digunakan untuk memusnahkan mikroorganisme. >enaikan suhu yang semakin tinggi juga seharusnya memengaruhi tingkat kematian bakteri atau spora. 4al ini mungkin disebabkan karena pada saat melakukan percobaan terjadi kontaminasi dari lingkungan sekitar. 0ungkin juga disebabkan oleh alat-alat yang digunakan sudah terkena kontaminasi silang. Bahan yang digunakan yaitu fenol dan kresol sudah tidak aseptis lagi (lama penyimpanan memengaruhi daya kerjanya sebagai desinfektan/.
:ambar $. 5abung %ji !etumbuhan 0ikroorganisme Sumber 8 Dokumentasi !ribadi (&$2/ Desinfektan
jenis
senyawa
fenol
(fenol
cresol
heFachorophene
recorcinol dan thymol/ dapat membunuh mikroba dengan cara mendenaturasi protein dan memiliki konsentrasi kerja &-+ 6. Berdasarkan literatur terse but fenol dan kresol seharusnya sudah dapat mematikan mikroba dalam konsentrasi &-+6. Sedangkan hasil praktikum yang menggunakan fenol dan kresol + 6 tidak dapat mematikan ataupun menghambat pertumbuhan mikroorganisme. 4al ini dapat disebabkan karena beberapa faktor 8 •
5abung yang berisi larutan kresol atau fenol telah terkontaminasi mikroorganisme lain saat inokulasi
•
5abung dan peralatan lainnya tidak tersterilisasi dengan baik fenol dan kresol yang digunakan sudah rusak sehingga daya efektivitasnya sudah menurun
•
#enis
mikroorganisme
yang
diinokulasikan
tidak
dapat
dihambat
pertumbuhannya oleh desinfektan jenis fenol maupun kresol •
>onsentrasi desinfektan yang rendah !ada pengujian ini juga dilakukan pengenceran dan dilakukan inokulasi
pada menit yang berbeda-beda. 4al tersebut dilakukan untuk melihat pengaruh konsentrasi dan waktu kontak terhadap daya efektivitas desinfektan. !ada pengenceran semakin tinggi pengenceran maka semakin rendah konsentrasi desinfektan
tersebut
sehingga
kemampuannya
untuk
menghambat
atau
mematikan mikroorganisme juga semakin berkurang. Sedangkan menit inokulasi berpengaruh terhadap waktu kontak antara mikroorganisme dengan desinfektan.
Semakin lama waktu kontak maka semakin efektif daya kerja desinfektan tersebut. !ertumbuhan dapat didefinisikan sebagai pertambahan secara teratur semua komponen dalam sel hidup. !ertumbuhan pada organisme uniseluler termasuk bakteri dapat didefinisikan sebagai pertambahan jumlah sel yang diikuti pertumbuhan jumlah sel mikroorganisme (oefisien fenol dilakukan pada kresol. >oefisen fenol merupakan kemampuan suatu desinfektan dalam membunuh bakteri jika dibandingkan dengan fenol. Cara pengujiannya dengan mengencerkan suatu kultur cair bakteri sebanyak $8$ dengan larutan desinfektan yang diuji pada konsentrasi berbeda. 5itik akhir adalah konsentrasi terendah yang menghasilkan kultur steril setelah diinkubasi. #ika suatu desinfektan mempunyai koefisien fenol 2 maka daya membunuhnya berarti 2 kali dibandungkan fenol (
mikroorganisme/. !ertumbuhan bakteri yang terjadi tidak sesuai dengan pendugaan awal karena komponen yang ada pada fenol maupun kresol seharusnya mampu membunuh bakteri. omponen kimia yang bersifat membunuh jasad renik disebut mempunyai sifat bakterisidal maupun fungisidal. Beberapa komponen kimia efektif membunuh mikroorganisme jenis tertentu contohnya virus yang dibunuh dengan halogen oksadin formalin serta 0ycobacteria yang dibunuh dengan fenol maupun alkohol. &. Sifat mikrostatik (menghambat pertumbuhan jasad renik/ >omponen ini ada yang bersifat bakteristatik maupun fungistatik. Biasanya komponen ini terdapat dalam jumlah yang kecil misalnya pada rempah-rempah. >omponen kimia yang bersifa t membunuh lebih baik dibandingka dengan yang bersifat menghambat. '. >ecepatan penghambatan >omponen kimia memiliki kecepatan pembunuh yang berbeda ada yang cepat maupun lambat. Sel yang sedang tumbuh atau berkembang biak lebih sensitif dan mudah dibunuh dibandingkan sel yang dalam keadaan istirahat9statis. Bakteri menjadi lebih tahan pada fase statis akibat sudah masuk fase pertumbuhan lambat dan sudah lewat fase adpatasi. 2. Sifat lain Sifat ini sebagai sifat pendukung seperti harganya yang tidak mahal aktivitasnya dalam waktu lama larut dalam air stabil dalam larutan sifat racun sifat iritasi kulit dan warna yang tidak dapat dihilangkan.
dalam tahapan pembelahan dimana lapisan fospolipid di sekeliling sel sedang dalam kondisi yang sangat tpis sehingga fenol dapat berpenetrasi dengan mudah dan merusak isi sel (>usdarwati dkk &$/. >resol adalah salah satu senyawa fenolik yang digunakan sebagai desinfektan dan antiseptik. Senyawa fenolik adalah senyawa fenol yang telah mengalami modifikasi secara kimiawi. Cara kerja kresol dalam membunuh bakteri adalah dengan koagulasi protein dan menyebabkan kebocoran membran sel konsentrasi yang biasa digunakan adalah &6. >euntungan dari penggunaan senyawa grup fenol ini adalah aktivitasnya tidak hilang dengan adanya zat organik sabun atau air sadah dan tidak meninggalkan efek residu jika mengering. >elemahannya adalah kresol harus digunakan pada air lunak (
ada9resisten bisa melakukan pertumbuhan saat sudah dipindahkan ke media ?B. '. 5erdapatnya spora bakteri yang resisten terhadap komponen fenol. Spora bakteri dalam fase vegetatif lebih susah dibunuh dan hanya beberapa komponen kimia yang efektif terhadap spora seperti halogen merkuriklorida formalin dan etilen oksida (ontaminasi dapat terjadi saat inokulasi ke medium tumbuh akibat proses yang tidak steril (alat lingkungan dan praktikan/ sehingga menyebabkan adanya koloni yang tumbuh pada medium yang berasal dari luar dan bukan bagian bakteri hasil pemberian kreol9fenol. +. !roses sterilisasi yang tidak maksimal dan kontaminasi dari luar pada alat yang digunakan dan medium ?B. *. >eefektifan dari kresol dan fenol yang digunakan sudah menurun sehingga kurang efektif membunuh bakteri. >onsentrasi
dan
waktu
kontak
merupakan
faktor
yang
dapat
mempengaruhi efektivitas desinfektan. Selain konsentrasi dan waktu kontak efektivitas desinfektan juga dipengaruhi oleh faktor-faktor lain. =fisiensi dan efektivitas disinfektan dipengaruhi oleh beberapa faktor yaitu 8 -
>onsentrasi >onsentrasi desinfektan tergantung pada bahan yang akan didesinfektan dan pada organisme yang akan dihancurkan. >onsentrasi yang tinggi dapat membunuh mikroorganisme tetapi jika kosentras i rendah maka hanya sebatas menghambat pertumbuhannya saja tidak mampu
-
mematikan. Gaktu kontak Gaktu yang diperlukan mungkin dipengaruhi oleh banyak variabel tetapi waktu yang cukup bagi desinfeksi untuk bekerja sangat membantu
-
dalam menghambat atau membunuh mikroba. Suhu desinfektan
Semakin tinggi suhunya maka kerja desinfektan semakin cepat dan meningkat. Desinfektan terbuat dari bahan-bahan kimia sehingga suhu -
yang tinggi akan mempercepat reaksi kimia pada komponen desinfektan. #enis mikroba Setiap jenis mikroba memiliki sifat resistensi yang berbeda-beda. >ondisi lingkungan (p4 dan tempat mikroba hidup/
II.
)ESIPULAN
$
Semua tabung pada semua konsentrasi dan waktu kontak menunjukan
&
hasil yang positif (/ artinya terdapat pertumbuhan mikroorganisme. Dari hasil pengamatan tersebut tidak dapat menentukan keofisien
'
fenol. !ada semua tabung terjadi pertumbuhan mikroorganisme yang ditandai dengan adanya kekeruhan. !ada beberapa tabung selain
2
terjadi kekeruhan juga terdapat endapan. >etidakakuratan data hasil pengamatan disebabkan karena bakteri yang diinokulasikan pada pembersih berada pada fase pertumbuhan statis sehingga susah dibunuh jumlah bakteri yang dinokulasikan sangat banyak terdapatnya spora bakteri yang resisten terhadap komponen fenol terjadinya kontaminasi saat menginokulasikan bakteri yang sudah diberi fenol9kresol ke media ?B proses sterilisasi yang tidak maksimal dan kontaminasi dari luar pada alat yang
+
digunakan dan medium ?B. >eefektifan dari kresol dan fenol yang digunakan sudah menurun
*
sehingga kurang efektif membunuh bakteri. =fisiensi dan efektivitas desinfektan dipengaruhi oleh konsentrasi waktu kontak suhu jenis mikroba dan kondisi lingkungan.
DA'TAR PUSTA)A
boh& /.& 3ladosu& P.& dan 8brahim& K. !0"4$. ntimi(robial (ti*ities of 'ome rands of Households >isinfe(tants /arketed in buja /uni(ipal rea )oun(il&
reer& ). !0"0$. Gariations in Phenol )oeJ(ient >eterminations of )ertain >isinfe(tants. American Journal of !ublic "ealth# 44!"$1 6". ut(her&
and
%rthopo&$iruses by "ousehold
Ulaeto&
>.
!0"0$.
Contact
Inacti$ation
Philadelphia1 >epartment iomedi(al '(ien(es& >stl Porton >on. Hal. 59-#4. 'isinfectants#
Mi)robiologi. >idjoseputro. !"99:$. 'asar('asar >jambatan. Eakarta. Hal. "0& ""#-"4:.
of
of
Penerbit
7lisabeth& .& priliana& 7.& dan ukmono& P. !0"$. Uji 7fekti*itas Pada ntiseptik di Unit Perinatologi umah 'akit Umum bdul /oeloek andar ;ampung# Medical Journal of *ampung +ni$ersity. ":!"$1 "+-"6.
isinfe(tant 7e(ts of enalkonium )hloride on 'ome 8mportant egradation by Aspergillus niger Using Pla(ketturman >esign and esponse 'urfa(e /ethodology. African Journal of Biotechnology# ""!#:$1 "::-"+6.
Kahrs& .<. !"99+$. >isinfe(tants& ntisepti(s& 'anitiers& and 'teriliing gents. e$ue Scientifique et .echnique de */ %ffice International 'es ,pi0ooties. ":!"$1 "0+-". >atzung B. :. $))1. linik. =disi AH. =:C !enerbit Buku >edokteran. #akarta. *'-*''. >usdarwati dkk. &$. Daya "ntibakteri =kstrak Buah "das terhadap Bakteri Micrococcus luteus secara Hn Aitro. #urnal Hlmiah !erikanan dan >elautan Aol & ?o. $ 4al8 '$-'+ 0artindale. $))'. 5he =Ftra !harmacopeia. ' th =d. 5he !harmaceutical !ress. ondon. +7-+7&.
;arson& 7. !0"4$. /onitoring Hand Hygiene. American Journal of Infection Control . :"!$1 :4-:+. !elczar 0. #. dan =. C. S. Chan. $))1. Dasar-Dasar 0ikrobiology. %H !ress. #akarta. 2**-+7.
Pratii& '. !00#$. Mi)robiologi 1armasi. Penerbit 7rlangga. Eakarta. Hal. "5-"#. @isman =. &. Sanitasi dan Desinfektan angkah "wal yang =fektif 0encegah !enyakit. Hnfomedia. ?o8 5l971. =disi no. $*) "pril &8 $-2. Schlegel 4.:. dan >. Schmidt. $))2. 0ikrobiologi %mum. :ajah 0ada %niversity !ress. Iogyakarta
'haer& E.. "96+. .he ole of *aboratory in Infection Control in the "ospital . rbor1 Uni*ersity of /i(higan& '(hool of Pulbi( health. Hal. 4+:& 4+5. 'isandono. "99+. >imia 0edisinal. irlangga Uni*ersity Press. 'urabaya. Hal. :9-+0. 'omani& '..& 8ngole& .?.& and Kulkarni& '.?. !0""$. 'isinfection of 2ater by +sing Sodiun Chloride 3NaCl4 and Sodium "ypochlorite 3Na%Cl4#
'hegaon1 'hri 'ant 7ngineering. Hal. :0-:4.
ajanan
/aharaj
Surya Iohannes. &). 3ptika. !enerbit >andel 5angerang.
)ollege
of
