LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI “Uji Kualitas Air Kran Dengan Metode MPN“ Kelompo!
Siti Ramadhan Ningrum(2014340022), Galih Alfridha (2014340030), Anisa Purnasari (2014340016), Adinda Rizkia (201434003)
"aultas Tenologi Industri Pertanian Ta#un !$%& !$%&
TANGGAL PRAKTIKUM
Praktikum ini dilaksanakan !ada "ari Sa#tu, $angga l %&s&m#&r 201, Pukul 16'30 sam!ai d&ngan s&l&sai di a#ratrium *ikr#ilgi +ni&rsitas Sahid -akarta'
'UDUL PRAKTIKUM
+.i /ualitas Air /ran %&ngan *&td& *PN
TU'UAN PRAKTIKUM
Agar mahasisa da!at m&lakukan !&rsia!an nth, m&dia dan larutan !&ng&n&r s&rta m&nga!likasikan m&td& *st Pr#a#l& Num#&r (*PN) atau Angka Paling *ungkin (AP*) untuk nth !angan'
P(NDA)ULUAN
Air m&ru!akan suatu sarana utama untuk m&ningkatkan d&ra.at k&s&hatan masarakat kar&na air m&ru!akan salah satu m&dia dari #&r#agai maam !&nularan !&nakit' Air #&rsih adalah air ang .&rnih, tidak #&rarna, taar dan tidak #&r#au' Sum#&r daa alam aitu air, da!at di!&rl&h dari air !&rmukaan m&li!uti air sungai, danau, aduk, raa dan g&nangan air laina' Air m&ru!akan k&#utuhan ang !aling di#utuhkan di dalam k&hidu!an manusia' Air ang ada di alam #ukanlah dida!at s&#agai air murni, m&lainkan s&#agai air ang m&ngandung #&rmaammaam zat, #aik ang t&rlarut atau!un t&rsus!&nsi' -&nis dan .umlah zat t&rs&#ut t&rgantung dari kndisi lingkungan s&kitar sum#&rna' Air m&ru!akan mat&ri &s&nsial #agi k&hidu!an makhluk hidu!, kar&na makhluk hidu! m&m&rlukan air untuk m&m!&rtahankan k&langsungan hidu!na' S&ara umum fungsi air dalam tu#uh s&tia! mikrrganism& adalah untuk m&larutkan s&naa rganik, m&nsta#ilkan suhu tu#uh dan m&langsungkan #&r#agai r&aksi kimia tingkat s&lul&r' P&ntingna air di dalam tu#uh manusia, #&rkisar antara 050 dari s&luruh ttal #&rat #adan' $ulang manusia m&ngandung air s&#anak 22 #&rat tulang, dalam darah dan gin.al s&#anak 73' P&ntingna air #agi k&s&hatan da!at
1
dilihat dari .umlah air ang ada di dalam rgan, 70 dari darah t&rdiri atas air, dalam tulang m&ngandung 2, s&dangkan dalam urat saraf t&rda!at air, dalam gin.al m&ngandung 70 air, dalam hati 0 air, dan tt air' /&kurangan air m&n&#a#kan !&nakit #atu gin.al dan kandung k&mih, kar&na t&r.adi kristalisasi unsurunsur ang ada di dalam airan tu#uh' /&hilangan air s&#anak 1 dari #&rat #adan da!at m&ngaki#atkan k&matian' /&#utuhan minum rang d&asa adalah minimum 1,52 lit&r air s&hari (Slam&t, 2004)' S&lain !&ntingna air #agi tu#uh manusia, air di#utuhkan #agi k&hidu!an lainna, #aik untuk k&#utuhan hidu! s&harihari aitu k&!&rluan untuk k&#utuhan dm&stik rumah tangga mau!un k&#utuhan dalam !&rtanian, industri, !&rikanan, !&m#angkit listrik t&naga air, dan naigasi, s&rta r&kr&asi (S&r.ani, 188)' P&m&riksaan air s&ara mikr#ilgi sangat !&nting dilakukan kar&na air m&ru!akan su#stansi ang
sangat !&nting dalam
m&nun.ang k&hidu!an
mikrrganism& ang m&li!uti !&m&riksaan s&ara mikr#ilgi #aik s&ara kualitatif
mau!un kuantitatif da!at
di!akai
s&#agai
!&ngukuran d&ra.at
!&n&maran' +.i kualitatif Coliform s&ara l&ngka! t&rdiri dari tiga taha! aitu u.i dugaan ( presumptive test ) , u.i !&n&ta!an (confirmed test ) , dan u.i !&l&ngka! (completed test )' *&td& !&ngu.ian ang digunakan adalah m&td& Most Probable Number (*PN) atau -umlah P&rkiraan $&r#atas (-P$)' P&m&riksaan d&ra.at !&n&maran air s&ara mikr#ilgi umumna ditun.ukkan d&ngan k&hadiran #akt&ri indikatr s&!&rti Coliform dan Fecal coli' 9akt&ri Coliform s&#agai suatu k&lm!k diirikan s&#agai #akt&ri #&r#&ntuk #atang gram n&gatif, tidak m&m#&ntuk s!ra, a&r#ik, dan ana&r#ik fakultatif ang m&mf&rm&ntasi laktsa d&ngan m&nghasilkan asam dan gas dalam aktu 47 .am !ada suhu 3: ;' 9&rdasarkan hal inilah ang m&latar #&lakangi dilaksanakanna !raktikum ini untuk m&ng&tahui t&knik !&ngu.ian kualitas air d&ngan m&nggunakan m&td& *PN s&hingga da!at m&ng&tahui air ang #aik untuk diknsumsi'
DATA )A*IL P(NGAMATAN a+ Ta,el
;m#inatin f
*PN
;nfid&nd&n& imits
2
Psiti&
1 1
46
"igh
14
120
,+ Per#itungan
*PN Sam!&l > Nilai *PN dari $a#l& ?
1 @! ang dit&ngah
> 46 ? 1= 101 > 4'6 ? 10 2 ;fu =ml
P(MBA)A*AN A- Metode MPN
*&td& *PN m&ru!akan u.i d&r&tan ta#ung ang m&nu#urkan !&rtum#uhan Coliform s&hingga di!&rl&h nilai untuk m&nduga .umlah Coliform dalam sam!&l ang diu.i' +.i !sitif akan m&nghasilkan angka ind&ks' Angka ini dis&suaikan d&ngan ta#&l *PN untuk m&n&ntukan .umlah Coliform dalam sam!&l (Pakadang, 2010)' *&td& *PN #iasana dilakukan untuk m&nghitung .umlah mikr#a di dalam nth ang #&r#&ntuk air, m&ski!un da!at !ula digunakan untuk nth #&r#&ntuk !adat d&ngan t&rl&#ih dahulu m&m#uat sus!&nsi 110 dari nth t&rs&#ut' *&td& *PN digunakan m&dium air di dalam ta#ung r&aksi, dimana !&rhitunganna dilakukan #&rdasarkan .umlah ta#ung ang !sitif aitu ang ditum#uhi l&h .asad r&nik s&t&lah inku#asi !ada suhu dan aktu t&rt&ntu' P&ngamatan ta#ung ang !sitif da!at dilihat d&ngan m&ngamati tim#ulna k&k&ruhan atau t&r#&ntukna gas di dalam ta#ung k&il (ta#ung durham) ang dil&takkan !ada !sisi t&r#alik, aitu untuk .asad r&nik !&m#&ntuk gas' +ntuk s&tia! !&ng&n&ran !ada umumna digunakan tiga atau lima s&ri ta#ung' &#ih #anak ta#ung ang digunakan m&nun.ukkan
3
k&t&litian ang l&#ih tinggi, t&ta!i alat g&las ang digunakan .uga l&#ih #anak (@ardiaz, 1886)' +ntuk m&td& *PN (most probable number ) digunakan m&dium air dalam adah #&ru!a ta#ung r&aksi, !&rhitungan di lakukan #&rdasarkan .umlah ta#ung ang !sitif aitu ta#ung ang m&ngalami !&ru#ahan !ada m&diumna #aik itu #&ru!a !&ru#ahan arna atau t&r#&ntukna g&l&m#ung gas !ada dasar ta#ung durham' Pada m&td& !&rhitungan *PN ini digunakan #&ntuk tiga s&ri !&ng&n&ran, ang !&rtama 101, 10 2 dan 103' /&mudian dari hasil !&ru#ahan t&rs&#ut diari nilai *PNna !ada ta#&l nilai *PN, dan untuk .umlah #akt&rina maka digunakan rumus (G#&l, 2007)'
Ada!un sam!&l air ang diu.ikan untuk m&ng&tahui kualitas air aitu air
kran'
S&#&lum
s&mua
!rs&dur
dahulu tangan harus dist&rilkan m&nggunakan
k&r.a
dilakukan
alkhl
0
t&rl&#ih ang
dis&m!rtkan k& s&luruh !&rmukaan tangan ang #&rtu.uan untuk m&n&gah t&r.adina kntaminan #akt&ri' angkah s&lan.utna dilakukan !&ng&n&ran !ada sam!&l air kran' P&ng&n&ran dilakukan d&ngan m&nggunakan aBuad&s st&ril ang #&rtu.uan untuk m&nimalisir .umlah #akt&ri ang t&rda!at !ada m&dium ang digunakan, kar&na aBuad&s adalah air dari hasil f&rm&ntasi ang tidak t&rda!at #akt&ri didalamna s&hingga !ada !&nam!uran m&dium d&ngan #ahan ang diu.ikan akan m&nangka! mikrrganism& ang t&rkandung di dalamna s&hingga mudah untuk diamati' P&ng&n&ran dilakukan d&ngan m&nggunakan tiga s&ri ta#ung !&ng&n&ran 10 1, 102 dan 10 3
' Pada u.i !&ndugaan dilakukan d&ngan m&nginku#asi sam!&l air ang
t&lah dimasukkan k&dalam ta#ung r&aksi ang #&risi m&dium Lactose Broth dan ta#ung durham' S&#&lum sam!&l air dari !&ng&n&ran dimasukkan k&dalam ta#ung r&aksi ang #&risi m&dium Lactose Broth #agian !inggir dari ta#ung r&aksi difiksasi !ada a!i #uns&n, tu.uan dari !&rlakuan fiksasi ini adalah untuk m&n.aga k&st&rilan dari m&dia s&hingga tidak t&rkntaminasi d&ngan udara' Lactose broth digunakan s&#agai m&dia untuk m&nd&t&ksi k&hadiran Coliform dalam air, makanan, !rduk susu, dan m&m!&la.ari
4
f&rm&ntasi
laktsa
l&h
#akt&ri
!ada
umumna'
*&dium Lactose
broth m&miliki km!sisi 0'3 &kstrak #&&f, 0' !&!tn, dan 0' laktsa' P&!tn dan &kstrak #&&f m&n&diakan nutri&nt &s&nsial untuk m&ta#lism #akt&ri' aktsa m&n&diakan sum#&r kar#hidrat ang da!at dif&rm&ntasi untuk rganism& Coliform' Pada ta#ung r&aksi dil&takkan ta#ung durham s&ara t&r#alik, fungsi dari ta#ung durham adalah untuk m&ng&tahui t&r#&ntukna gas g&l&m#ung atau untuk m&nangka! gas ang ditim#ulkan aki#at adana f&rm&ntasi laktsa m&n.adi asam dan gas' S&t&lah m&lakukan u.i !&ndugaan dilan.utkan d&ngan u.i !&n&gasan' +.i !&n&gasan #&rfungsi untuk m&akinkan hasil !sitif ang ada !ada u.i !&ndugaan' *&dium ang digunakan dalam u.i !&n&gasan ini aitu m&dium Brilliant Green Lactase Bilebroth (9G9) ang m&ru!akan m&dia ang akan #&rarna hi.au m&talik .ika t&rda!at r&aksi f&rm&ntasi d&ngan m&dia' Carna ini #&rasal dari adana klni Coliform ang #&r&aksi d&ngan 9G9' E. Coli m&ru!akan #akt&ri f&rm&ntasi, s&ringkali m&nghasilkan arna hi.au m&talik m&ngkila!' Brilliant Green Lactose Bile Broth, di#uat dari !&!tn&, lats&, ?gall, #rilliant gr&&n, dan aBuad&s' @ungsi dari m&dium 9G9 adalah untuk m&nd&t&ksi #akt&ri Coliform ang ada !ada air' *&dium k&dua ang digunakan !ada u.i !&n&gasan ini adalah *&dium Escherichia coli (D;) ang #&rfungsi untuk m&nd&t&ksi adana #akt&ri Eschericia coli !ada air ang diu.ikan.
B- Alat dan Ba#an Ada!un alat dan #ahan ang digunakan dalam !raktikum
u.i kualitas air kran d&ngan m&nggunakan m&td& *PN adalah a+ Alat Rak ta#ung, $a#ung r&aksi,
1'
*&nia!kan ta#ung r&aksi dan m&m#&rikan la#&l !ada
2'
masingmasing ta#ung d&ngan tanda 10 1, 102 dan 103' *&ngisi ta#ung r&aksi masingmasing 8 ml aBuad&st st&ril
3'
ang t&lah di ukur d&ngan m&nggunakan g&lasukur' *&nam#ahkan sam!&l air kran masingmasing 1 ml d&ngan m&nggunakan !i!&t ukur 1 ml k&dalam ta#ung ang t&lah #&risi aBuad&st st&ril !ada ta#ung !&ng&n&ran 101,
4'
k&mudian m&ngk agar t&ram!ur s&arahmg&n' *&nam#ahkan 1 ml sam!&l dari !&ng&n&ran 101 k&dalam ta#ung !&ng&n&ran 102, k&mudian m&ngk s&hingga
'
t&ram!ur s&ara hmg&n' *&nam#ahkan 1 ml sam!&ldari!&ng&n&ran 102 k&dalam ta#ung !&ng&n&ran 103, k&mudian m&ngk s&hingga
6' '
t&ram!ur s&ara hmg&n' P&rlakuan !ada !in 3 dilakukan s&#anak 3 kali Pada ta#ung r&aksi ang lain'
K(*IMPULAN
9&rdasarkan hasil !&ngamatan dan !&m#ahasan dari u.i kualitas air d&ngan m&nggunakan m&td& *PN da!at diam#il k&sim!ulan #aha 1' *&td& ang digunakan dalam !&m&riksaan kualitas air adalah m&td& *PN
(*st
Pr#a#l&
Num#&r)
kar&na m&td&
ini
da!at
m&nd&t&ksi Coliform dalam .umlah ang sangat r&ndah' *&td& *PN t&rdiri dari tiga taha!, aitu u.i !&ndugaan ( presumptive test ) , u.i knfirmasi (confirmed test ), dan u.i k&l&ngka!an (completed test )' *&td& *PN (most probable number ) m&nggunakan m&dium air dalam adah #&ru!a ta#ung r&aksi, !&rhitungan di lakukan #&rdasarkan .umlah ta#ung ang !sitif aitu ta#ung ang m&ngalami !&ru#ahan !ada m&diumna #aik itu #&ru!a !&ru#ahan arna atau t&r#&ntukna g&l&m#ung gas !ada dasar ta#ung durham' 2' Sam!&l air ang t&lah di da!atkan dan diu.i m&nun.ukkan, #aha s&mua sam!&l air ang di da!atkan m&ru!akan sam!&l air ang tidak laak
6
minum kar&na s&mua .umlah D'li ang dida!atkan #&rdasarkan hasil u.i aitu s&#&sar diatas 46=100 ml s&dangkan standar air #&rsih kandungan klifrm adalah 0=100 ml' Param&t&r ang s&ring digunakan untuk m&ngid&ntifikasi kualitas air adalah #anak tidakna mikrrganism& #akt&ri lifrm ang t&rkandung dalam sam!&l air' 3' /ualitas
air
!ada
sam!&l air
kran ang
diu.i tidak laak untuk
diknsumsi s&#agai air minum s&#a# .umlah #akt&ri Coliform sangat #anak !ada .&nis air sam!&l s&hingga akan #&r#ahaa #ila diknsumsi'
*ARAN
Ada!un saran ang da!at ingin disam!aikan adalah s&#aikna di dalam !&laksanaan !raktikum kali ini aktu ang t&lah dit&ta!kan digunakan s&#aik #aikna s&hingga !raktikum da!at #&r.alan s&suai d&ngan a!a ang diinginkan dan m&nda!atkan hasil !&ngamatan d&ngan tingkat k&akuratan tinggi,
DA"TAR PU*TAKA
%id.s&!utr' 1884' DasarDasarMikrobiolo!i' %.am#atan' -akarta'
Gaus&' 1846' Media PertumbuhanMikroor!anisme' Ra.aali Pr&ss' -akarta' G#&l' 2007' Mikrobiolo!i"mumDalamPraktek ' +ni&rsitas"asanuddin, *akassar' im' 1887' Microbiolo!#$ %nd Edition' *Gra"ill 9k' N& Erk' Pakadang' 2010' BukuPenuntunPraktikumMikrobiolo!iFarmasi' -urusan @armasi Plit&knik /&s&hatan %&!k&s' *akassar' Slam&t, -uliS&mirat' 2004' &esehatanLin!kun!an' Gad.ah*ada +ni&rsit Pr&ss' Egakarta' Flk' 1883' Mikrobiolo!iDasar'ilid ($ Edisi&elima. Drlangga' -akarta'
GLO*ARIUM
1' *PN suatu m&td& &num&rasi mikrrganism& ang m&nggunakan data dari hasil !&rtum#uhan mikrrganism& !ada m&dium air s!&sifik dalam s&ri ta#ung ang ditanam dari sam!&l !adat atau air ang ditanam #&rdasarkan .umlah sam!&l atau di&n&rkan m&nurut tingkat s&ri ta#ungna s&hingga dihasilkan kisaran .umlah mikrrganism& ang diu.i dalam nilai *PN=satuan lum& atau massa sam!&l' 2' 9akt&ri Coliform glngan mikrrganism& ang lazim digunakan s&#agai indiatr, dimana #akt&ri ini da!at m&n.adi sinal untuk m&n&ntukan suatu sum#&r air t&lah t&rkntaminasi l&h !athg&n atau tidak' 3' S!ra satu atau #&#&ra!a s&l (#isa ha!lid atau!un di!lid) ang t&r#ungkus l&h la!isan !&lindung' S&l ini drman dan hana tum#uh !ada lingkungan ang m&m&nuhi !&rsaratan t&rt&ntu, ang khas #agi s&tia! s!&si&s' 4' 9akt&ri a&r#i #akt&ri ang m&m#utuhkan ksig&n untuk hidu!na' 9ila tidak ada ksig&n, maka #akt&ri akan mati' 9akt&ri a&r# m&nggunakan gluksa atau zat rganik lainna (misalna &tanl) untuk diksidasi m&n.adi ;2 (kar#n diksida), " 2 (air), dan s&.umlah &n&rgi' ' 9akt&ri Ana&r#ik fakultatif 0 #akt&ri ang da!at hidu! d&ngan #aik #ila ada ksig&n mau!un tidak ada ksig&n'
7
6' @&rm&ntasi !rs&s !rduksi &n&rgi dalam s&l dalam k&adaan ana&r#ik (tan!a ksig&n)' ' -asad r&nik mahluk hidu! ang t&rdiri dari satu atau #&#&ra!a kum!ulan s&l d&ngan ukuran #&#&ra!a mikrn (1 mikrn > 0,001 mm)' 7'
dalam
tingkat
ang
da!at
m&n&#a#kan
m&m#ahaakan
(m&rugikan) k&s&hatan' 10' Sus!&ns& suatu am!uran fluida ang m&ngandung !artik&l !adat' Atau d&ngan kata lain am!uran h&t&rg&n dari zat air dan zat !adat ang dilarutkan dalam zat air t&rs&#ut'
8
