VITRO MULTIPLIKASI MULTIPLIKASI TUNAS DARI TUNAS IN VITRO
Selasa, 12 April 2016 A. Tujuan juan 1 Melatih ketrampilan mahasiswa dalam melakukan multiplikasi tunas anggrek dan krisan 2. Mengetahui persiapan sebelum penanaman eksplan B. Dasa Dasarr T Teeori ori Kultur jaringan tumbuhan bertujuan untuk pemuliaan tanamanan dengan cara
perbanyakan tanaman secara egetati!. Kultur jaringan yang sukses dilakukan pada biji anggrek dengan tujuan untuk mengecambahkannya dalam media yang kaya nutrisi karena biji dari anggrek tidak mempunyai cadangan makanan. "#uniati, "#uniati, 200$%. &ertumbuhan tanaman anggrek baik egetati! maupun generati! tidak hanya ditentukan 'leh !akt'r genetik, tetapi juga dipengaruhi 'leh !akt'r lingkungan seperti cahaya, suhu, kelembaban, kadar (2 dan media tumbuh. Media tumbuh merupakan salah satu syarat penting yang perlu diperhatikan dalam budidaya anggrek, k arena media ber!ungsi sebagai tempat berpijaknya berpijaknya tanaman, tanaman, mempertahank mempertahankan an kelembaban kelembaban dan tempat tempat penyimpanan penyimpanan hara serta air yang diperlukan ")riningsih,201*%. +alam +alam usaha usaha pengemb pengembang angan an budiday budidaya, a, salah salah satu satu syarat syarat penting penting yang yang perlu perlu dipe diperh rhat atik ikan an adal adalah ah peng penggun gunaa aan n medi mediaa tumb tumbuh uh.. Medi Mediaa tumb tumbuh uh yang yang baik baik haru haruss memenuhi beberapa persyaratan, yaitu tidak cepat melapuk, tidak menjadi sumber penyakit, mampu mengikat air dan -at-at hara secara baik, mudah didapat dalam jumlah yang diinginkan dan murah, ramah lingkungan. +ala +alam m perb perban anya yaka kan n tana tanama man n angg anggre rek k yang yang suda sudah h ada ada "pla "plate tele let% t% maka maka perbanyakan ini disebut dengan subkultur plantlet anggrek. &erbanyakan dalam istilah kultu kulturr jari jaring ngan an menga mengacu cu pada pada isti istila lah h mult multip ipli likas kasi. i. Mult Multip ipli lika kasi si adal adalah ah kegi kegiat atan an memperb memperbany anyak ak cal'n cal'n tanama tanaman n dengan dengan menanam menanam ekspla eksplan n pada pada media. media. Kegiat Kegiatan an ini dilakukan di laminar !l'w untuk menghindari adanya k'ntaminasi yang menyebabkan gagalnya pertumbuhan eksplan. )abung reaksi yang telah ditanami ekplan diletakkan pada rakrak dan ditempatkan di tempat yang steril dengan suhu kamar "/estari, 2011%. C. Rumu Rumusaa saan n Masala Masalah h 1. agaimana agaimana tahap tahap untuk melakuka melakukan n multiplik multiplikasi asi tunas tunas anggrek anggrek dan krisan krisan
2. Apa saja yang perlu dipersiapkan ketika akan dilakukan multiplikasi tunas aggrek dan krisan D. Metode Penanaman multipliasi An!!re dan Krisan 1. Mensterilkan ntkas dengan cara menyempr'tkan alc'h'l abs'lut kedalam entkas 2. Menyiapkan media tanam dalam b't'l, bahan sterilan "alc'h'l dan bunsen% dan alat
tanam steril "pinset dan skalpel % ke dalam ntkas *. Menyiapkan tunas Anggrek dan tunas krisan yang telah ditumbuhankan dalam medium in itr' $. Alat tanam seperti skalpel dan piset secara berulang disterilisasi selama pr'ses penanaman tunas dengan cara memasukan ke dalam alc'h'l apabila tidak digunakan dan membakar dengan api bunsen ketika akan digunakan. 3. &ada b't'l tunas yang telah ditumbuhakan dalam medium in itr' saat membuka dan menutup dilakukan tidak jauh dari nyala api bunsen. 6. Mengambil 1 tunas anggrek kemudian akar pada tunas anggrek dibersihkan selanjutnya menanamkan tunas ke media tanam dalam b't'l A. Setiap 1 b't'l tanam terdapat 1 tunas yang disubkultur. Melakukan hal yang sama pada tunas krisan yang akan disubkultur. 4. Memberi label pada b't'l 5. Memindahan ke dalam ruang inkubasi dengan meletakan ke rak inkubasi yang diberi cahaya lampu .
". #asil
enis 7&)
)unas yang digunakan
K'ndisi
Keterangan
8't'
A& 4,3 )unas ppm9:AA Krisan 0,3 ppm
A& 4,3 ppm 9 :AA 4,3 ppm
)unas Anggrek
1. )unas tidak tumbuh 2. )idak mengalami petambahan tinggi *. )idak mengalami pertambahan jumlah daun;tunas $.
Subkultur mengalami k'ntam
Subkultur tidak mengalami k'ntam
$. Pem%ahasan Multiplikasi tunas dari tunas in itr' merupakan cara yang sederhana dengan
met'de kultur untuk memperbanyak suatu tanaman. +alam praktikum ini, subkultur dilakukan pada tanaman anggrek yang sudah tersedia di lab kultur "planlet% untuk diperbanyak dalam medium baru. Sebelum melakukan subkultur, hal yang dilakukan yakni mensterilisasi alat dan bahan penanaman di dalam /A8 selama 1 jam.
? selama 1 jam.
k'ntaminan. Alat dan bahan yang perlu di paparkan sinar >? dalam /A8 diantaranya lampu busen untuk media sterilisasi supaya dalam pengerjaan subkultur tetap dalam keadaan steril, k'rek untuk menyalakan bunsen, scalpel unruk mem't'ng eksplan yang akan ditanam, pinset untuk memindahkan eksplan ke dalam medium MS yang baru, petridish unutk tempat mem't'ng planlet. Sedangkan bahan yang perlu disterilisasi dengan sinar >? adalah medium MS dalam b't'l kultur yang telah dibuat sebelumnya. Sedangkan plantlet yang akan digunakan yaitu anggrek dan krisan yantelah ditumbuhkan di dalam b't'l kultur tidak distreilisasi >? karena jika dipaparkan dengan sinar >? maka plantlet tersebut akan terjadi mutasi. &lantlet anggrek dan krisan yang akan ditanam diseleksi untuk diambil bagian yang bagus, setelah itu ditanam di media MS dengan cara membenamkan sedikit pada bagian pangkal eksplan hingga eksplan berdiri tegak. >ntuk satu b't'l media MS untuk multiplikasi anggrek dilakukan satu b't'l berisi *3 p't'ngan eksplan sedangkan untuk untuk penanaman krisan dilakukan satu b't'l satu eksplan. K'ndisi steril sangat berpengaruh untuk kelangsungan hidup eksplan, sehingga selama pengerjaannya diupayakan untuk menjaga kesterilan k'ndisi penanaman. >ntuk medium MS krisan ditambahan 7&) A& 4,3 ppm9:AA 0,3 ppm sedangkan pada medium MS anggrek A& 4,3 ppm 9 :AA 4,3 ppm. Keberhasilan penanaman atau perbanyakan dilihat dari kesterilan media dan eksplan serta tumbuhnya akar pada eksplan setelah beberapa hari penanaman. ika tidk tumbuh akar, eksplan tidak akan tumbuh menjadi planlet. erdasarkan tujuan praktikum yang telah dilakukan yaitu melakukan multiplikasi tunas anggrek dan krisan serta untuk mengetahui persiapan yang dilakukan sebelum penanaman eksplan.
pertumbuhan dan
perkembangan suatu kultur dipengaruhi 'leh perimbangan antara h'rm'n yang
ditambahkan kedalam media "h'rm'n eks'gen% danh'rm'n yang dihasilkan 'leh tanaman itu sendiri "h'rm'n end'gen%. &. Simpulan '. Met'de multiplikasi tunas dari tunas in itri dilakukan dengan c ara memilin plantlet
yang berkualitas baik kemudian melakukan multiplikasi dengan memindahkan eksplan yang diambil dari planlet tersebut ke dalam medium MS baru. 2. &ersiapan sebelum melakukan multiplikasi tunas dari tunas in itr' yaitu dengan memaparkan alat dan bahan subkultur "Medium MS% dengan menggunakan sinar >? ke didalam /A8 selama 1 jam untuk menghindari k'ntaminasi #. Da(tar pustaa /estari, . @. 2011. &eranan 7at &engatur )umbuh dalam &erbanyakan )anaman melalui Kultur aringan. AgroBiogen, 4"1% 6*65. )riningsih, /. A. M. Siregar, /. A. &. &utri. 201*. &ertumbuhan ksplan &uar )enangau " Elettariopsis sp.% Agroekoteknologi, 1"2% 246253. #uniati, ., 200$. &enapisan @alur Kedelai @lycine maB "/.% Merrill )'leran )erhadap :aCl >ntuk &enanaman di /ahan Salin. +epartemen i'l'gi, 8MD&A, >niersitas Dnd'nesia, +ep'k 16$2$, Dnd'nesia.
LAMPIRAN
A. Cara pem%uatan medium '. Mem%uat lauran sto) *PT inetin dan NAA a. Menimbang sebnayk 0,1 gram :AA dalam 0,1 gram A& atau kinetin b. Melarutkan dalam 100 ml aEuades pada masingmasing st'ck 7&) ke dalam tabung erlemeyer c. >ntuk 7&) kinetin ditambahan ntuk 7&) :AA ditambahkan :a(< 10= +. Mem%uat medium A ,medium MS dan inetin -/ ppm0 NAA 1/ ppm2 a. Mengambil sebanyak 4,3 ml larutan st'ck 7&) kinetin dan 3 ml larutan st'ck :AA b. Kemudian mencampurkan kedua larutan st'ck 7&) tersebut kedalam media MS 3. Mem%uat medium B ,medium MS dan inetin -/ ppm0 NAA -/ ppm2 a. Mengambil sebanyak 4,3 ml larutan st'ck 7&) kinetin dan 4,3 ml larutan st'ck :AA b. Kemudian mencampurkan kedua larutan st'ck 7&) tersebut kedalam media MS B. Doumentasi a. Proses su%ultur an!!re dan risan
%. Persiapan alat dan %ahan 4an! aan disterilisasi men!!unaan sinar U5 dalam LA$
C. 6a7a%an Pertan4aan
1. Karena eksplan yang akan dikultur sudah dikultur sebelumnya, dan sudah pasti dalam keadaan steril. Apabila eksplan yang akan dikultur disterilisasi menggunakan >? maka eksplan akan terjadi mutasi. 2. 7&) A merupakan h'rm'ne sit'kinin yang ber!ungsi sebagai perangsang pembelahan sel dan pertumbuhan pucuk pada tumbuhan. Sedangkan 7&) :AA adalah h'rm'ne auksin merangsang perpanjangan sel diujung batang dan ujung akar. *. a. 4,3 ppm A 9 3,0 ppm :AA b. 4,3 ppm A 9 4,3 ppm :AA /ebih baik yang "b% , karena pada k'mp'sisi "b% 7&) :AA dan 7&) A memiliki k'mp'sisi seimbang sehingga pertumbuhan akan lebih 'ptimal $. Karena subkultur bertujuan untuk menggandakan eksplan yang sudah dikultur sebelumnya sehingga pr'ses pertumbuhannya lebih cepat 3. )idak ada
LAP8RAN KULTUR 6ARIN&AN TUMBU#AN
MULTIPLIKASI TUNAS DARI TUNAS IN VITRO ANGGREK DAN KRISAN
8leh 9 RA#MAD:AN T"$ARANI ;;'';'313< R8MB"L ' BI8L8&I +1'3
6URUSAN BI8L8&I $AKULTAS MAT"MATIKA = ILMU P"N&"TA#UAN ALAM UNI5"RSITAS N"&"RI S"MARAN&
+1'<
