BAB I PENDAHULUAN A Latar Belakang 1. Cairan Tubuh
Makanan yang masuk ke dalam mulut biasanya masih berbentuk potongan atau keratan yang mempunyai ukuran relatif besar dan tidak dapat diserap langsung oleh dinding usus. Oleh karena itu sebelum siap disera p oleh dinding usus makanan tersebut harus melewati sistem pencernaan makanan yang terdiri atas beberapa organ tubuh, yaitu mulut, lambung, dan usus dengan bantuan pankreas dan empedu. Dalam mulut makanan dihancurkan secara mekanis oleh gigi dengan jalan dikunyah. Selama penghancuran secara mekanis ini berlangsung, kelenjar yang ada di sekitar mulut mengeluarkan cairan yang disebut saliva atau ludah. Tiga kelenjar saliva yaitu kelenjar sublingual, kelenjar submaksilar, dan kelenjar parotid. elenjar sublingual adalah kelenjar saliva yang paling kecil, terletak di bawah lidah bagian depan. elenjar submaksilar terletak di belakang kelenjar sublingual dan lebih dalam. elenjar parotid ialah kelenjar saliva paling besar dan terletak di bagian atau mulut di depan telinga . Setiap hari sekitar !"!.# liter saliva dikeluarkan oleh kelenjar saliva. Saliva terdiri atas $$.%&' air dan (.#)' terdiri atas ion"ion *a %+, Mg %+, a +, +, -O &", *l ", /*O ", SO&%", dan 0at"0at organik seperti musin dan en0im amilase 1ptialin2. Musin suatu glikoprotein dikeluarkan oleh kelenjar sublingual dan kelenjar submaksilar, sedangkan ptialin dikeluarkan oleh kelenjar parotid. Musin dalam saliva adalah suatu 0at yang kental dan licin yang berfungsi membasahi makanan dan sebagai pelumas yang memudahkan atau memperlacar proses menelan makanan. *airan air liur mengandung 3"amilase yang menghidrolisa ikatan 31!4&2 pada cabang sebelah luar glikogen dan amilopektin menjadi glukosa , sejumlah kecil maltosa, dan suatu inti tahan hidrolisa yang disebut dekstrin. /anya sebagian kecil amilum yang dapat dicema di dalam mulut, oleh karena itu sebaiknya makanan dikunyah lebih lama untuk memberi kesempatan lebih banyak pemecahan amilum di rongga mulut.
1 | Makalah Biokimia
2. Cairan E mpedu
andungan empedu merupakan kantong otot kecil yang berfungsi untuk menyimpan empedu 1cairan pencernaan berwarna kuning kehijauan yang dihasilkan oleh hati2. 5mpedu mengalir dari hati melalui duktus hepatikus kiri dan kanan, lalu keduanya bergabung membentuk duktus hepatikus utama bergabung dengan saluran yang berassal dari kantung empedu 1duktus sistikus2 membentu k saluran empedu utama. Saluran empedu utama masuk ke usus bagian atas pada sfingter Oddi, yang terletak beberapa centimeter di bawah lambung 16nonim, %(!(2. *airan empedu terdiri dari asam emped, protein, garam empedu, kalsium dan lemak. 7ungsi dari cairan empedu adalah untuk membentuk penyerapan lemak, dan vitamin 6,D,5 dan 16nonim, %(!(2. *airan empedu merupakan cairan jernih, berwarna kuning, agak kental dan mempunyai rasa pahit. *aoran empedu mengandung 0at"0at anorgani k, yaitu /*O , *l", a+ dan
+
serta 0at"0at organic, yaitu asam"asam empedu, bilirubin dan
kolesterol. 6sam"asam empedu yang penting ialah asam kolat dan asam deoksikolat. 8eberapa fungsi asam empedu antara lain9 sebagai emulgator dalam proses pencernaan lemak dalam usus: dapat mengaktifkan lipase dalam cairan pancreas: membantu mengadsorbsi asam"asam lemak, kolesterol, vitamin D dan serta karoten: sebagai perangsang aliran cairan empedu dari hati: dan menjaga agar kolesterol tetap larut dalam cairan empedu sebab bila perbandingan asam empedu dengan kolesterol rendah, akan menyebabkan terjadinya beberapa endapan kolesterol 16nna -oedjiadi, !$$&: %&&2. ;aram empedu bersifat digestif dan memperlancar kerja en0imdan memperlancar kerja en0im lipase dalam memecah lemak. ;aram empedu juga membantu pengabsorpsian lemak yang telah dicernakan 1gliserin dan asam lemak2 dengan cara menurunkan tegangan permukaan dan memperbesar daya tembus endothelium yang menutupi vili usus. ;aram empedu dibentuk di hati dari kolesterol melalui reaksi yang menyebabkan hidroksilasi inti steroid dan memutus rantai sisi. Dalam reaksi pertama, terjadi penambahan sebuah gugus ɒ"hidroksil kekarbon < 1di sisi
ɒ
pada cincin =2. 6ktivasi <
"hidroksilase yang mengkatalisis reaksi penentu ini ditekan oleh adanyagaram"garam
ɒ
empedu. -ada reaksi berikutnya, terjadi reduksi ikatan rangkap dan mungkin terjadi
2 | Makalah Biokimia
hidroksilasi tambahan. Dihasilkan dua kelompok senyawa yang berbeda. Satu kelompok memiliki gugus ɒ"hidroksi diposisi ,< dan !% dan menghasilkan seri asam kenakalat. Melalui reaksi oksidasi karbon dikeluarkan dari rantai sisi. 7ragmen"#" karbon sisanya yang melekat ke struktur cincin memiliki sebuah gugus karboksi 1Dawn marks, %(((2. 8ilirubin adalah produk utama dari penguraian sel darah merah yang tua. 8ilirubin disaring dari darah oleh hati, dan dikeluarkan pada cairan empedu. Sebagaimana hati menjadi semakin rusak, bilirubin total akan mengikat sebagian dari bilirubin total termetabolisme dan bagian ini disebut sebagai bilirubin langsung. 8ilirubin mengandung bahan pewarna, yang member warna pada kotoran 16nonim, %(!(2. 8ilirubin yang terbentuk di jaringan perifer akan diangkut ke hati oleh albumin plasma. Metabolism bilirubin lebih lanjut terjadi dihati. -eristiwa metabolism ini dapat dibagi menjadi tahap, yaitu9 !. 6mbilan bilirubin oleh sel parenkim hati %. onyugasi bilirubin dalam reticulum endoplasma halus . Sekresi bilirubin terkonyugasi ke dalam empedu 1/apper >obert . murray, !$$): #!2
3 | Makalah Biokimia
BAB II TIAUAN PU!TA"A A.LANDA!AN TE#$I 1.CAI$AN TUBUH a.Penetapan PH Liur Saliva adalah cairan yang lebih kental daripada air biasa. Tiap hari sekitar !"!,# liter saliva dikeluarkan oleh kelenjar saliva. elenjar saliva yang utamaadalah kelenjar parotis, submandibularis, dan sublingualis. Selain itu juga ada beberapa kelenjar bukalis yang kecil 1;anong, !$$#2.Saliva terdiri atas $$,%&' air dan (,#)' merupakan ion"ion *a++, Mg++, a+, +, -O&", *l, /*O", SO&%"serta 0at"0at organik seperti musin dan en0imamilase 1-oedjiad i, !$$&2. Saliva mempunyai p/ antara ?,("<,&. Suatu kisaran yang menguntungkan untuk kerja pencernaan dari "amilase. 5n0im ini bekerjasecara optimal pada p/ ?,? 1;uyton dkk, !$$<2. 6milase saliva mulai tidak aktif pada p/ &,(. Oleh karena itu, sete lah makanan ditelan dan masuk ke dalamlambung, proses hidrolisis oleh en0im amilase saliva tidak berjalan lebih lama lagi. Secara umum en0im "amilase bekerja optimal pada p/ ?,? 1;uyton, !$$<2
b.U%i !ul&at @ji sulfat dalam pengujian kadar sulfat dalam saliva ini kami mencampurkan ! mA air liur yang sudah diencerkan dengan /*A tujuannya untuk mengasamkan air liur tersebut lalu ditambahkan 8a*l%. 8elerang organic merupakan bagian terbesar dari belerang teroksidasi 1)#"$( '2 dan berasalterutama dari metabolisme protein. Maka akan terbentuk endapan putih yang menunjukkan adanya belerang anorganik, reaksi yang terjadi adalah 9 8a*l% + SO&% ⁻ 4 8aSO& + %*l ⁻.-ada uji presipitasi, pada saat air liur ditambahkan dengan asam asetat encer membentuk endapan putih, air liur disini mengandung en0im amilase, amylase yang direaksikan dengan asam asetat encer akan membentuk endapan putih, asamasetat encer mempunyai kemampuan mengikat air dari gugus pengikatair,sehingga kelarutan amilum akan berkurang dan akan mengendap
'.U%i &()&at Saliva berfungsi sebagai buffer. ompenen yang berperan serta sebagai buffer pada saliva adalah fosfat, urea, protein, dan bikarbonat. 8ikarbonat merupakan komponen
4 | Makalah Biokimia
yang paling besar fungsinya sebagai buffer dalam saliva karena sifatnya yang mudah untuk berikatan dengan hidrogen 1Tenovuo dan AagerlB,!$$&2. 7osfat yang berperan untuk beberapa tingkatan dalam buffer saliva pada keadaan volume saliva yang rendah saja. Sedangkan protein merupakan komponen yang paling sedikit peran sertanya sebagai buffer. 7osfat sulit mengikat asam sedangkan bikarbonat merupakan komponen yang paling mudah mengikat asam.
d.U%i "l(rida 6ir liur ditambahkan /O !(' dalam uji klorida. /O !(' berfungsi untuk mengikat klorida yang terkandung dalam air liur. Setelah itu p/ air liur diukur dan menghasilkan p/ asam. Aarutan air liur kembali ditambahkan 6gO yang berfungsi " membentuk endapan garam 6g*l. /asil yang ditunjukkan oleh air liur setelah penambahan /O !(' dan 6gO adalah terbentuknya larutan keruh dengan endapan di dalamnya. /al ini menunjukkan air liur mengandung mineral klorida dan dapat membentuk endapan garam pada p/ asam.
2.CAI$AN E*PEDU a. Te) +m elin -igmen C pigmen empedu sebagian besar merupakan hasil katabolisme hemoglobin yang berasal dari penghancuran sel C sel darah merah oleh sistem retikuloendotelial dari hati, limpa, dan sumsum tulang. -igmen empedu yang utama adalah biliverdin, yang berwaran hijau dan bilirubin yang berwarna jinggakuning coklat. Oksidasi pigmen empedu oleh berbagai pereaksi akan menghasilkan suatu turunan yang berwarna, misalnya mesobiliverdin 1hijjau hingga biru2, mesobilirubin 1kuning2 dan mesobilisianin 1hijau hingga ungu2. 6sam nitrat adalah sejenis cairan korosif yang tak berwarna, dan merupakan asam beracun yang dapat menyebabkan luka bakar. Aarutan asam nitrat dengan kandungan asam nitra t lebih dari )? ' disebut juga sebagai nitrat berasap. Sebagai sebuah oksidator yang kuat, asma nitrat bereaksi dengan hebat dengan sebagian besar bahan C bahan organic dan reaksinya dapat bersifat eksplosif. -roduk akhirnya bervariasi tergantung pada konsentrasi asam, suhu, serta reduktor. >eaksi dapat terjadi dengan semua logam kecuali deret logam mulia da aloi tertentu. arakteristik ini membuat asam nitrat menjadi agen yang umum nya digunakan dalam uji asam.
5 | Makalah Biokimia
b. Te) Pettenk(&er 6sam"asam empedu membantu emulsifikasi lipid yang dimakan, suatu proses yangmemudahkan pencernaan en0imatik dan absorbsi lemak diet. 6sam"asam deoksikolat dan litokolat adalah asam"asam empedu sekunder yang disintesis dalam usus lewat kerjanyaen0im"en0im bakteri pada asam"asam empedu primer. /anya sebagian asam"asam empedu primer yang terdapat dalam usus diubah menjadi asam empedu sekunder.
B. TUUAN 1. Cairan Tubuh
a. @ntuk mengetahui -/ liur b. @ntuk mengetahui adanya sulfat dalam liur pada uji sulfat c. @ntuk mengetahui adanya fosfat dalam liur pada uji fosfat d. @nuk mengetahui ada tidaknya klorida dalam liur pada uji klorida 2. Cairan Empedu
a. @ntuk mengetahui adanya pigmen empedu pada tes ;melin b. @ntuk mengetahui adanya asam empedu pada tes pettenkofer
6 | Makalah Biokimia
BAB III *ET#DEL#+I PE$C#BAAN A.Cairan Tubuh 1. Penetapan PH Liur Tu%uan , @ntuk mengetahui p/ Aiur Da)ar ,
-ada kisaran p/ tertentu suatu indicator akan memberikan perubahan warna sesuai dengan / ᶧ dalam larutan yang diperiksa. Bahan ,
!. 6ir Aiur %. -h Endikator Cara "er%a ,
!. Sediakan air liur sebanyak ml dan di tampung ke tabung %. *elupkan p/ indicator ke air liur dan sesuai kan dengan warna di p/ indic ator untuk menentukan p/.
2. U%i ! ul&at Tu%uan , @ntuk mengetahui adanya sulfat dalam liur Da)ar ,
Eon Sulfat dalam suasana asam daapt diendapakan oleh barium 8a % +ᶧ SO&%
⁻
4 8aSO& 1endapan putih2 4 1₊ /⁺2
Bahan ,
!. 6ir liur %. /*A encer/*A !(' . 8a*l%
7 | Makalah Biokimia
Cara "er%a ,
8ahan
.
Tabung
Aiur
!mA
/*A
"# tetes
8a*l%
#"!(tetes
/asil -engamatan
Terdapat endapan putih
U%i -()&at Tu%uan
9 Mengetahui adanya fosfat dalam saliva
Da)ar
9
7osfat bereaksi dengan asam moliblat membentuk asam fosfomoliblat , yang dapat direduksi memberikan warna biru tua 1ortofosfat2 Alat ,
a. Tabung reaksi -yreF b. >ak tabung reaksi c. -ipet tetes Bahan ,
a. Saliva b. Aarutan @rea !(' c. Aarutan ammonium molibdat special d. Aarutan 7eSO #' special
8 | Makalah Biokimia
Cara ker%a ,
!. Esi saliva ! ml dalam tabung reaksi yang bersih dan kering menggunakan pipet tetes %. Tambahkan ! (,# ml 1!( tetes2 urea !( ' dan # mA 1!(( tetes2 larutan amonium molibdat special . *ampur baik"baik dan tambahkan menggunakan 7eSO& special sebanyak (,# ml 1!( tetes2 &. perhatikan dan catat adanya warna biru yang menunjukkan adanya fosfat. #. Entensitas warna akan bertambah bila dibiarkan beberapa waktu.
. U%i "l(rida Tu%uan 9 mengetahui ada tidaknya klorida dalam liur Da)ar ,
Eon klorida dalam suasana asam dapat diendapkan oleh 6g 1perak2. 5mpedu 6g*l 1endapan putih2 menunjukan adanya klorida Bahan ,
!. Aiur %. asalm nitrat !(' . perak nitrat !' Cara ker%a ,
8ahan Aiur 6samnitrat -eraknitrat
Tabung mA! "#tetes #"!(tetes
B.Cairan Empedu 1. Te) +melin Tu%uan , untuk mengetahui adanya pigmen empedu Da)ar ,
-enambahan asam nitrat pada pigmen empedu akan menghasilkan senyawa hasil oksidasi yang berwarna
9 | Makalah Biokimia
Bahan ,
!. cairan empedu encer 1!9#2 %. larutan asam nitrat pekat Cara ker%a , •
sediakan dua buah tabung reaksi , masukkan !.#ml asam nitrat pekat pada masing"masing tabung reaksi.
•
pada taung reaksi 6 masukkan !.#ml cairan empedu !9#( dan pada tabung reaksi 8 masukkan !.#ml empedu pekat.
•
catat warna yang terbentuk
8ahan *airanempeduencer 6Guades 6samnitratpekat
TabungE mA " mA
TabungEE " mA mA
2. Te) Pe ttenk(&er Tu%uan 9 untuk mengetahui asam empedu Da)ar ,
6sam" asam empedu yang terdapat dalam empedu terutama sebagai garam empedu, yang merupakan senyawa aromatik kompleks. 6sam empedu bereaksi dengan furfural 1yang terbentuk pada penambahan asam pekat dan karbohidrat2 membentuk turunan berwarna. 8ahan9 1. Aarutan asam empedu encer 1!9#2 dan akuades. 2. Aarutan sukrosa #' 3. 6sam sulfat pekat.
Cara ker%a,
Siapkan % tabung, tabung E diisi dengan cairan empedu encer sebanyak # ml, lalu tabung EE diisi dengan aGuades sebanyak #ml. Aalu kedua tabung tersebut ditetesi sebanyak # tetes larutan sukrosa # '. Setelah itu kedua tabung juga diberi / %SO& pekat 1 melalui dinding tabung2 sebanyak ml pada masing"masing tabung. Tabung *airan empedu
TabungE # ml
TabungEE "
encer 6Guades Aarutansukrosa#'
" #tetes
ml# #tetes
10 | Makalah Biokimia
/%SO& pekat
ml
ml
1 melalui dinding tabung2
BAB I/ HA!IL PE$C#BAAN DAN PE*BAHA!AN A.CAI$AN TUBUH 1.Penetapan PH liur Ha)il 9 didapatkan -/ liur < Pembaha)aan ,
/asil percobaan menunjukan ph liur <,dalam hal ini masih normal,sebab Saliva mempunyai p/ antara ?,("<, &. Suatu kisaran yang menguntungkan un tu k ke rj a pe nc er na an da ri "am il as e. 5n 0im in i be ke rja sec ar a op ti ma l pa da p/ ? , ? 1;u yto n dk k, ! $$< 2. 6 mil ase s aliv a 44set el ah ma ka na n di te la n d a n m a s u k k e d a l a m l a mb u n g , p r o s e s hidrolisis oleh en0im amilase saliva tidak berjalan lebih lama lagi
2.U%i !ul&at Ha)il , terdapat endapan putih Pembaha)an ,
Didapatkan hasil endapan putih pada percobaan yang menunukkan adanya belerang anorganik, reaksi yang terjadi adalah 9 8a*l% + SO&% ⁻ 4 8aSO& + %*l ⁻.-ada uji presipitasi, pada saat air liur ditambahkan dengan asam asetat encer membentuk endapan putih, air liur disini mengandung en0im amilase, amylase yang direaksikan dengan asam asetat encer akan membentuk endapan putih, asam asetat encer mempunyai kemampuan mengikat air dari gugus pengikatair,sehingga kelarutan amilum akan berkurang dan akan mengendap.
0.U%i -()&at Ha)il , pada saliva membentuk senyawa berwarna biru Pembaha)an ,
8erdasarkan hasil data di atas, menunjukkan bahwa saliva positif terdapat kandungan fosfat. /al ini terlihat larutan berwarna biru yang menjadi tolak ukur
11 | Makalah Biokimia
positifnya suatu 0at yang terdapat di saliva. eberadaan ion fosfat dalan saliva dilepaskan oleh larutan urea kemudian larutan tersebut ditambahkan dengan 7eSO ₄ agar suasananya menjadi asam sehingga dapat bereaksi dengan larutan ammonium molibdat.6sam tersebut digunakan untuk membuktikan adanya ion"ion fosfat yang terdapat pada saliva dengan membentuk senyawa yang berwarna biru
.U%i "l(rida Ha)il , terdapat endapan berwarna putih Pembaha)an ,
@ji *lorida, dimana filtrate ditambahkan dengan larutan 6gO dan menghasilkan endapan putih yang menandakan pada saliva positif1+2 mengandung ion *l ". /al ini sesuai dengan teori yang menyatakan bahwa suatu sampel yang ditambahkan dengan 6gO akan diperoleh endapan putih yang menandakan adanya ion *l ". lorida merupakan 0at"0at anorganik yang berfungsi untuk menjaga keseimbangan asam basa dalam tubuh. >eaksinya adalah9 *l" +H6gO4 I 6g*l1putih2 + O"
B. CAI$AN E*PEDU 1.Te) +melin Ha)il ,
-ada tabung E yang terisi cairan empedu terlihat adanya gradasi warna yang berubah" ubah 1hijau C unggu C agak coklat C bening2 Sedangkan tabung EE yang berisi aGuades tidak terdapat perubahan warna Pembaha)an ,
Jat warna empedu berasal dari pemecahan hemoglobin pada butir sel darah merah. 8eberapa 0at warna itu adalah bilirubin1orange,kuning,coklat2 dan biliverdin1hijau2. -ada percobaan ini larutan /
pekat ditambahkan kedalam tabung yang berisi
cairan empedu. Tujuan dari penambahan /O agar terjadi oksidasi 0at warna empedu. 8anyaknya /O pekat yang dimasukkan kedalam tabung reaksi diusahakan sama banyak dengan jumlah empedu sehingga cairan empedu berada pada bagian atas 1hijau2 dan bagian bawah larutan /O1p2, setelah digoyangkan menghasilkan larutan yang brwarna orange. Test gmelin empedu berdasarkan atas reaksi asam nitrat dengan 0at warna menghasilkan serangkaian hasil oksida. 7ungsi
12 | Makalah Biokimia
dari 0at warna ini adalah menurungkan kadar gula darah,mencegah kelelahan otot,dan memperbaiki kerusakan hati akibat alcohol.
2.Te) Pettenk(&&er Ha)il ,
-ada tabung E yang terisi cairan empedu terlihat adanya turunan berwarna dan biasanya terdapat cincin ungu di tengahnya. Sedangkan tabung EE yang berisi aGuades tidak ada perubahan warna. Pembaha)an ,
@ji pettenkofer mempunyai prinsip yang sama dengan uji gmelin yaitu penambahan 0at pengoksidasi kuat 1/%SO& 2 pada cairan empedu, perubahan warna tersebut disebabkan karena oksidasi pigmen tersebut. /al ini sesuai dengan teori bahwa pigmen empedu yang dioksidasi oleh berbagai pereaksi akan menghasilkan suatu turunan berwarna.
13 | Makalah Biokimia
BAB / "E!I*PULAN A. CAI$AN T UBUH
-ada praktikum didapatkan -/ saliva <, terdiri atas ion"ion sulfat, fosfat dan klorida yang didapatkan hasil positif pada setiap percobaan. B. CAI$AN E *PEDU
!. empedu adalah cairan bers ifat asam yan g berwarna hijau yang diek skresikan oleh hepatosit hati pada sebagian besar vertebrata %. pigmen"pigmen
empedu
berasal
dari
bilirubin
dan
biliferdin
dari
penghancuran eritrosit . pada tes gmelin untuk pigmen empedu, cairan terli hat adanya gradasi warna yang berubah"ubah 1hijau C unggu C agak coklat C bening2. &. -ada tes pettenkofer untuk asam empedu, cairan terlihat adanya turunan berwarna dan biasanya terdapat cincin ungu di tengahnya
14 | Makalah Biokimia
$E-$EN!I !. http9ml.scribd.comdoc?&)$#<#$Aaporan"Tetap"-raktikum"8iokimia"EE %. http9www.scribd.comdoc)%$<?biokimia"%%%%%%%%%%%%%%% . http9ml.scribd.comdoc$!)$#($$A6-O>6"5JEM &. http9berburudggema.blogspot.com%(!%(!percobaan"empedu.html #. http9themac0manchemistry.blogspot.com%(!%(#empedu"laporan.html ?. http9themac0manchemistry.blogspot.com%(!%(#laporan"biokimia.html 7. http9tjouliends.blogspot.com%(!!()laporan"praktikum"biokimia"uji"gmelin.html
15 | Makalah Biokimia