I. Judul : Protein II. Tujuan : II.1Uji Susunan Elementer Protein Mengidentifikasi adanya unsur – unsur penyusun protein. II.2Uji Kelarutan Protein Mengetaui daya kelarutan protein teradap pelarut tertentu. II.!Uji Pengendapan Protein dengan "aram Mengetaui pengaru larutan garam alkali dan garam di#alen konsentrasi tinggi teradap sifat kelarutan protein. II.$Uji %iuret Mem&uktikan adanya molekul – molekul peptida dari protein. II.'Uji (inidrin Mem&uktikan adanya asam amino &e&as dalam protein. II.)Uji *antoprotein Mem&uktikan adanya asam amino tirosin+ triptofan+ atau fenilalanin yang terdapat dalam protein. III.
Landasan Teori 1. Protein Protein memegang peranan penting atau komponen utama sel e,an atau
manusia. manusia. -le karena sel itu merupakan pem&entuk pem&entuk tu&u kita+ maka protein yang ang
terd terdap apat at dala dalam m
makan akanan an &erf &erfu ungsi ngsi se&a se&ag gai at at
utam tama
dala dalam m
pem&entukan dan pertum&uan tu&u. /alam keidupan kita+ protein memegan memegang g perana peranan n yang yang pentin penting g pula. pula. Suatu Suatu protein protein &erfun &erfungsi gsi se&aga se&agaii &iokatalis+ pengganti sel0sel yang rusak atau tua+ se&agai at pem&angun dan lain0lain. Kita memperole protein dari makanan yang &erasal dari e,an ataupun tum&u tum&uan. an. Protein Protein yang yang &erasal &erasal dari dari e,an e,an &iasa &iasa dise&u dise&utt dengan dengan protei protein n e,a e,ani ni sedan sedangk gkan an yang yang &eras &erasal al dari dari tum& tum&u uan an dise& dise&ut ut prot protein ein na&a na&ati ti.. %e&erap %e&erapaa makana makanan n yang yang &erfun &erfungsi gsi se&agai se&agai sum&er sum&er protein protein adala adala daging daging++ telur+ telur+ susu+ ikan+ &eras+ kaang+ kedelai+ gandum+ gandum+ jagung+ &ua0&uaan &ua0&uaan++ dan lain0lain. Sala satu sum&er protein yang di akan diuji dalam la&oratorium adala al&umin atau puti telur. elur merupakan &aan makanan yang umum
1 | P r o t e i n
dikonsumsi dikonsumsi ole masyarakat masyarakat yang memiliki memiliki kadar protein yang ukup tinggi. tinggi. Selain Selain itu puti puti telur telur memilik memilikii fungsi fungsi yang yang ukup ukup pentin penting g diketa diketaui ui ole ole masy masyara araka katt yaitu yaitu se&ag se&agai ai anti antido dotu tum m atau atau pena pena,ar ,ar rau raun n apa& apa&ila ila oran orang g keraunan logam &erat. 2. Prin Prinsi sip p Per Pero o&a &aan an a. Susu Susuna nan n Elem Elemen ente terr Pro Protei tein n Semua jenis protein tersusun atas unsur – unsur kar&on 345+ idrogen 365+ oksigen 3-5+ dan nitrogen 3(5. erdapat pula protein yang mengandung sedi sediki kitt &eler &eleran ang g 3S5 3S5 dan dan fosfa fosfatt 3P5. 3P5. /eng /engan an meto metode de pem&a pem&aka karan ran atau atau penga&uan+ akan diperole unsur – unsur penyusun protein yaitu 4+ 6+ -+ dan (. 3Estien+ 277)5 &. Uji Kelarutan Protein Protei Protein n &ersifa &ersifatt amfoter amfoter++ yaitu yaitu dapat dapat &ereak &ereaksi si dengan dengan larutan larutan asam maupun &asa. /aya larut protein &er&eda di dalam air+ asam+ dan &asa. Se&agian ada yang muda larut dan ada pula yang sukar larut. (amun+ semua protein tidak larut dalam pelarut lemak seperti eter atau kloroform. 8pa&ila protein dipanaskan atau ditam&a etanol a&solut+ maka protein akan menggu menggump mpal al 3terkoa 3terkoagul gulasi asi5. 5. 6al ini dise&a dise&a&ka &kan n karena karena etanol etanol menarik menarik mantel air yang melingkupi molekul0molekul protein. 3Esti en+ 277)5 . Uji Pengen Pengendap dapan an Prot Protein ein dengan dengan "aram "aram Pengaru penam&aan garam teradap kelarutan protein &er&eda0&eda. ergan ergantun tung g pada pada konsen konsentras trasii dan jumla jumla muatan muatan ionny ionnyaa dalam dalam laruta larutan. n. Semaki Semakin n tinggi tinggi konsen konsentras trasii dan jumla jumla muatan muatan ionny ionnya+ a+ semaki semakin n efektif efektif garam aram
dala dalam m
menge engen ndap dapkan kan
pro protein tein..
peris eristi ti,a ,a
pem pemisa isaan an
atau atau
pengendapan protein ole garam &erkonsentrasi tinggi dise&ut salting out . 3Estien+ 277)5 d. Uji Pengen Pengendapan dapan Protein Protein dengan dengan 9ogam 9ogam 8sam 8sam -rganik -rganik Protein terdiri dari asam0asam amino yang diu&ungkan melalui ikatan peptida pada ujung0ujungnya. Selain ikatan peptida terdapat ikatan kimia lain dalam protein yaitu ikatan idrogen+ ikatan idrofo&+ ikatan ionikatan elektrostatik elektrostatik++ dan ikatan #an der ;aals. aals. Protein Protein dapat tidak sta&il teradap &e&erapa faktor yaitu p6+ radiasi+ suu+ medium pelarut organik+ dan detergen. Protein tersusun dari atom 4+ 6+ -+ dan (+ serta kadang0kadang P
2 | P r o t e i n
dikonsumsi dikonsumsi ole masyarakat masyarakat yang memiliki memiliki kadar protein yang ukup tinggi. tinggi. Selain Selain itu puti puti telur telur memilik memilikii fungsi fungsi yang yang ukup ukup pentin penting g diketa diketaui ui ole ole masy masyara araka katt yaitu yaitu se&ag se&agai ai anti antido dotu tum m atau atau pena pena,ar ,ar rau raun n apa& apa&ila ila oran orang g keraunan logam &erat. 2. Prin Prinsi sip p Per Pero o&a &aan an a. Susu Susuna nan n Elem Elemen ente terr Pro Protei tein n Semua jenis protein tersusun atas unsur – unsur kar&on 345+ idrogen 365+ oksigen 3-5+ dan nitrogen 3(5. erdapat pula protein yang mengandung sedi sediki kitt &eler &eleran ang g 3S5 3S5 dan dan fosfa fosfatt 3P5. 3P5. /eng /engan an meto metode de pem&a pem&aka karan ran atau atau penga&uan+ akan diperole unsur – unsur penyusun protein yaitu 4+ 6+ -+ dan (. 3Estien+ 277)5 &. Uji Kelarutan Protein Protei Protein n &ersifa &ersifatt amfoter amfoter++ yaitu yaitu dapat dapat &ereak &ereaksi si dengan dengan larutan larutan asam maupun &asa. /aya larut protein &er&eda di dalam air+ asam+ dan &asa. Se&agian ada yang muda larut dan ada pula yang sukar larut. (amun+ semua protein tidak larut dalam pelarut lemak seperti eter atau kloroform. 8pa&ila protein dipanaskan atau ditam&a etanol a&solut+ maka protein akan menggu menggump mpal al 3terkoa 3terkoagul gulasi asi5. 5. 6al ini dise&a dise&a&ka &kan n karena karena etanol etanol menarik menarik mantel air yang melingkupi molekul0molekul protein. 3Esti en+ 277)5 . Uji Pengen Pengendap dapan an Prot Protein ein dengan dengan "aram "aram Pengaru penam&aan garam teradap kelarutan protein &er&eda0&eda. ergan ergantun tung g pada pada konsen konsentras trasii dan jumla jumla muatan muatan ionny ionnyaa dalam dalam laruta larutan. n. Semaki Semakin n tinggi tinggi konsen konsentras trasii dan jumla jumla muatan muatan ionny ionnya+ a+ semaki semakin n efektif efektif garam aram
dala dalam m
menge engen ndap dapkan kan
pro protein tein..
peris eristi ti,a ,a
pem pemisa isaan an
atau atau
pengendapan protein ole garam &erkonsentrasi tinggi dise&ut salting out . 3Estien+ 277)5 d. Uji Pengen Pengendapan dapan Protein Protein dengan dengan 9ogam 9ogam 8sam 8sam -rganik -rganik Protein terdiri dari asam0asam amino yang diu&ungkan melalui ikatan peptida pada ujung0ujungnya. Selain ikatan peptida terdapat ikatan kimia lain dalam protein yaitu ikatan idrogen+ ikatan idrofo&+ ikatan ionikatan elektrostatik elektrostatik++ dan ikatan #an der ;aals. aals. Protein Protein dapat tidak sta&il teradap &e&erapa faktor yaitu p6+ radiasi+ suu+ medium pelarut organik+ dan detergen. Protein tersusun dari atom 4+ 6+ -+ dan (+ serta kadang0kadang P
2 | P r o t e i n
dan S. /ari keseluruan asam amino yang terdapat di alam anya 27 asam amino yang yang &iasa dijumpai pada protein. Pada &er&agai uji kualitatif yang dilakukan teradap &e&erapa maam protein+ semuanya mengau pada reaksi yang terjadi antara pereaksi dan komponen protein+ yaitu asam amino 38nonim5. 8pa&il 8pa&ilaa protein protein yang yang &erada &erada dalam dalam keadaa keadaan n isoelek isoelektrik trik &ermua &ermuatan tan negatif &ertemu dengan logam yang &ermuatan positif akan menye&a&kan terjadinya terjadinya proses proses netralisasi netralisasi dan mengasilka mengasilkan n endapan endapan garam proteinat yang mengendap dan &ersifat re#ersi&le. e. Uji %iuret Ion 4u2<3dari pereaksi &iuret5 dalam suasana &asa akan &ereaksi dengan polipeptida atau ikatan 0 ikatan peptida yang menyusun protein dan mem&entuk senya,a kompleks &er,arna ungu 3#iolet5. =eaksi &iuret positif terad teradap ap dua &ua ikatan ikatan peptid peptidaa atau atau le&i+ le&i+ tetapi tetapi negatif negatif untuk untuk asam amino &e&as atau dipeptida. =eaksi ini juga positif teradap senya,a 0 senya,a yang mengandung dua gugus : 046 2 (6 (62+ 04S(62+ 043(65(62+ dan –4-(6 2. %iuret merupakan senya,a dengan dua ikatan peptida yang f.
ter&entuk pada pemanasan dua molekul urea. 3Estien+ 277)5 Uji (inidrin Uji ninid ninidrin rin merupa merupakan kan uji yang yang &ersifa &ersifatt umum umum untuk untuk protein protein dan asam asam amin amino. o. (in (inid idrin rin dapa dapatt meng mengu& u&a a asam asam amin amino o menj menjad adii suat suatu u aldeida. (inidrin dilakukan dengan menam&akan &e&erapa tetes larutan ninidrin ninidrin yang terliat terliat tidak ,arna kedalam kedalam sampel+ sampel+ kemudian kemudian dipanaskan &e&erapa menit. 8danya 8danya protein ditandai dengan adanya peru&aan ,arna ungu 3(o#ita+ 277>5. (inidrin &eraksi dengan asam amino &e&as dan protein mengasilkan ,arna &iru. =eaksi ini termasuk yang paling umum dilakukan untuk analisis kualitatif protein dan produk asil idrolisisnya. =eaksi ninidrin dapat pula dilakukan teradap urin untuk mengetaui adanya asam amino atau untuk mengetaui mengetaui adanya pelepasan protein protein ole airan tu&u 3Santoso+ 277?5. Pada reaksi ninidrin dilepaskan 4- 2 dan (6$ seingga asam amino dapat ditentukan seara kuantitatif dengan mengukur jumla 4- 2 dan (6! yang dilepaskan. Prolin mengasilkan ,arna kompleks yang &er&eda ,arnanya
3 | P r o t e i n
dengan asam amino lainnya. 6asil uji yang positif pada uji ninidrin di&erikan pada asam amino yang mengandung asam @0amino dan peptida yang memiliki gugus @0amino yang &e&as. g. Uji *antoprotein Uji Aantoprotein merupakan uji kualitatif pada protein yang digunakan untuk menunjukkan ke&eradaan gugus &enene . Metode analisis protein ini menggunakan larutan asam nitrat pekat+ yang merupakan sala satu asam pekat. 9arutan asam nitrat ini ditam&akan dengan ke dalam larutan protein. Setela kedua larutan terse&ut terampur maka akan terjadi reaksi ini seingga ter&entuk endapan &er,arna puti. 9angka selanjutnya dilakukan pemanaskan teradap larutan terse&ut+ pada taapan ini endapan &er,arna puti akan &eru&a ,arna menjadi kuning. =eaksi peru&aan yang terjadi terse&ut dise&ut nitrasi pada inti dari &enena yang terdapat pada molekul dari
protein.
6asil
positif
pada
uji
Aantoprotein
adala
munulnya gumpalan atau inin ,arna kuning. Pada uji ini+ digunakan larutan asam nitrat yang &erfungsi untuk memea protein menjadi gugus &enena. 8sam amino yang menunjukkan reaksi positif untuk uji ini+ yaitu tyrosin+ penilalanin dan tryptopan. Protein yang mengandung residu asam amino dengan
radikal fenil dalam
struktur
kimianya
3protein
yang
mengandung asam amino fenilalanin atau tirosin5 jika ditam&akan dengan asam nitrat pekat akan ter&entuk gunpalan ,arna puti. Pada pemanasan+ ,arna gumpalan puti terse&ut akan &eru&a menjadi kuning yang akirnya &eru&a menjadi jingga jika ditam&a dengan larutan &asa.
IV.
Alat dan Bahan IB.1 Uji Susunan Elementer Protein
4 | P r o t e i n
0 0 0 0 0 0 0
IB.2
8lat 8lat pemanas 4a,an porselen "elas o&yek Kertas lakmus Penjepit ta&ung a&ung reaksi =ak ta&ung reaksi
%aan : 0 8l&umin telur 0 "elatin 0 9arutan (a- 17C 0 9arutan P&0asetat 'C 0 9arutan 64l pekat
Uji Kelarutan Protein
8lat 0 Pipet tetes 0 a&ung reaksi 0 =ak ta&ung reaksi
IB.!
%aan : 8l&umin telur 8ir suling 3aDuades5 8lkool >)C "elatin Kloroform 9arutan 64l 17C 9arutan (a-6 $7C
0 0 0 0 0 0 0
Uji Pengendapan Protein dengan "aram
8lat 0 Pipet tetes 0 a&ung reaksi 0 =ak ta&ung reaksi
0 0 0 0 0 0
%aan 8l&umin telur 9arutan 3(6$52S-$ jenu 9arutan (a4l 'C 9arutan %a4l 'C 9arutan 4a4l2 'C 9arutan MgS-$ 'C
$.' Uji %iuret 8lat 0 Pipet tetes 0 a&ung reaksi 0 =ak ta&ung reaksi
5 | P r o t e i n
0 0 0 0 0 0
%aan : 9arutan al&umin 2C "elatin 2C Kasein 7+'C "lisin 2C 9arutan (a-6 17C 9arutan 4uS-$ 'C
$.) Uji (inidrin 8lat 0 8lat pemanas 0 Pengatur ,aktu 0 Pipet tetes
0 0 0 0 0
%aan : 9arutan al&umin 2C "elatin 2C Kasein 7+'C Pepton 7+'C Pereaksi ninidrin
0 0 0 0 0 0 0
%aan : 9arutan al&umin 2C "elatin 2C Kasein 7+'C Kuning elur 9arutan 6(-! 9arutan (a-6 17C 9arutan 4uS-$ 'C
$. Uji *antoprotein 8lat 0 8lat pemanas 0 Pipet ukur
V. Prosedur Kerja V.1Uji Susunan Elementer Protein 8. Uji 8danya unsur 4+6+ dan 1. Memasukkan 1 ml 8l&umin telur ke dalam ta&ung reaksi. 2. Menaru kaa o&yek di atas ta&ung + kemudian memanaskan 8l&umin
telur diatas lampu &unsenspiritus. !. Memperatikan adanya pengem&unan
pada
gelas
o&yek+
yang
menunjukkan adanya 6idrogen 365 dan -ksigen 3-5. $. Mengam&il gelas o&yek+ lalu mengamati &au yang terjadi. %ila terium &au ram&ut ter&akar+ &erarti protein mengandung unsur (itrogen 3(5. '. %ila terjadi pengarangan+ &erarti ada atom Kar&on 345. ). Mengulangi pero&aan menggunakkan ser&uk gelatin. %. Uji adanya atom ( 1. Memasukkan 1 ml larutan al&umin telur ke dalam ta&ung reaksi 2. Menam&akan 1 ml (a-6 17C kemudian panaskan !. Memperatikan &au ammonia yang terjadi dan menguji uapnya dengan kertas lakmus mera yang tela di&asai aDuades $. Mengulangi pero&aan dengan menggunakan ser&uk gelatin 4. Uji adanya atom S
6 | P r o t e i n
1. Memasukkan 1 ml al&umin telur ke dalam ta&ung reaksi. 2. Menam&akan 1 ml larutan (a-6 17C ke dalam ta&ung reaksi yang tela &erisi al&umin + kemudian memanaskannya. !. Menam&akan $ tetes larutan P&0asetat ' C+ kemudian terjadi peru&aan ,arna yaitu larutan menjadi &er,arna itam yang menandakan ter&entuknya P&S. $. Menam&akan $ tetes 64l pekat dengan ati0ati melalui dinding ta&ung+ kemudian memperatikan &au kas &elerang dari &elerang yang teroksidasi. '. Mengulangi pero&aan diatas dengan mengganti al&umin menggunakan ser&uk gelatin. V.2Uji Kelarutan Protein 8. 8l&umin telur 1. Menyiapkan alat dan &aan yang digunakan dalam praktikum. 2. Menyediakan ' ta&ung reaksi dan mengisi masing0masing ta&ung reaksi. terse&ut dengan aquades+ larutan 64l 17C+ larutan (8-6 $7C+ alkool >)C+ dan kloroform se&anyak 1 ml. 3. Menam&akan 2 ml larutan al&umin telur pada setiap ta&ung. . Mengook larutan terse&ut dengan kuat. !. Mengamati sifat kelarutannya. %. "elatin 1. Menyiapkan alat dan &aan yang digunakan dalam praktikum. 2. Menyediakan ' ta&ung reaksi dan mengisi masing0masing ta&ung reaksi. terse&ut dengan aquades+ larutan 64l 17C+ larutan (8-6 $7C+ alkool >)C+ dan kloroform se&anyak 1 ml. 3. Menam&akan 2 ml larutan gelatin pada setiap ta&ung. . Mengook larutan terse&ut dengan kuat. '. Mengamati sifat kelarutannya. V.3Uji Pen"enda#an Protein den"an $aram 1. Menyiapkan alat dan &aan yang digunakan dalam praktikum. 2. Mem&uat 9arutan 3(6 $52S-$ jenu+ 9arutan (a4l 'C+ 9arutan 4a4l 2 'C+ 9arutan MgS-$ 'C. !. Mem&erikan la&el pada $ &ua ta&ung reaksi. $. Masing0masing ta&ung reaksi di isi dengan 2 ml al&umin telur. '. Pada ta&ung yang tela di&eri la&el &erturut0turut di tam&akan 9arutan 3(6$52S-$ jenu+ 9arutan (a4l 'C+ 9arutan 4a4l 2 'C+ 9arutan MgS- $ 'C setetes demi setetes ingga tim&ul endapan. ). Selanjutnya tam&akan kem&ali larutan0larutan garam seara &erle&ian. . Kookla ta&ung reaksi. ?. 8mati peru&aan yang terjadi.
7 | P r o t e i n
>. 4atat asilnya. V.Uji Biuret 1. Sediakan $ ta&ung reaksi yang tela &ersi+ kemudian tam&akan ke dalam masing – masing ta&ung reaksi dengan larutan al&umin+ kasein+ dan glisin se&anyak 2 ml. 2. am&akan pada setiap ta&ung dengan 1 ml (a-6 17C dan ! tetes 4uS- $ 'C. !. Kemudian ampurla dengan &aik. $. 8matila peru&aan ,arna yang terjadi. V.!Uji %inhidrin 1. Sediakan $ ta&ung reaksi yang &ersi dan kering+ lalu masing0masing diisi dengan larutan 8l&umin+ "elatin+ Kasein dan Pepton se&anyak 2 m9. 2. am&akan pada setiap ta&ung ' tetes pereaksi ninidrin pada setiap ta&ung. !. 4ampur dengan &aik+ dan panaskan di penangas air ingga mendidi selama ' menit. $. 8mati dan atat peru&aan ,arna yang terjadi.
V.&Uji 'anto#rotein 1. Sediakanla $ ta&ung reaksi yang tela &ersi dan masing – masing isila
dengan larutan al&umin+ gelatin+ kasein+ dan kuning telur se&anyak 2 ml. 2. Pada setiap ta&ung+ tam&akanla 1 ml 6(- ! pekat. Peratikan adanya endapan puti yang ter&entuk. !. Kemudian panaskan selama 1 menit dan amati ter&entuknya ,arna kuning. $. Selanjutnya+ dinginkan di &a,a air kran+ lalu tam&akan (a-6 17C setetes demi setetes melalui dinding ta&ung ingga ter&entuk lapisan. '. Peratikan peru&aan ,arna yang terjadi.
VI.
(asil dan Pem)ahasan VI.1 (asil BI.1.1 Uji Susunan Elementer Protein a&el ).1 Uji adanya unsur 4+6+ dan -
8 | P r o t e i n
%o
Pen"aran"an +/ , ,
0at uji
.
1. 2.
8l&umin "elatin
(asil #en"amatan +,-/ Bau ram)ut Pen"em)unan +( / ter)a*ar +%/ , ,
, ,
"" Foto 1 : al&umin yang sedang di&akar untuk
mengetaui
Foto 2 : ser&uk grlatin yang sedang
ke&eradaan
di&akar
unsur 4+6+-.
untuk
mengetaui
ke&eradaan unsur 4+6+-.
a&el ).2 Uji adanya atom ( %o
Perla*uan
.
1
8l&umin < 1ml (a-6 17C <
2
dipanaskan "elatin < 1ml (a-6 17C < dipanaskan
Foto
!
:
al&umin
<
3p6G175 %asa 3p6G>5
yang
ditam&akan
tela
Foto $ : ser&uk gelatin yang tela
(a-6
ditam&akan (a-6 17C
17C dan tela di&akar.
9 | P r o t e i n
(asil Pen"amatan +,-/ Bau Amonia* Kertas la*mus +%/ +%/ < %asa
dan tela di&akar.
3foto '. Kertas lakmus yang tela &erisi uap dari larutan al&umin dan (a-6 dan menunjukkan p6 G 175
a&el ).! Uji adanya atom S %o.
Perla*uan
1
8l&umin < 1 m9 (a-6 17C < dipanaskan <
2
$ tetes P&8 < $ tetes 64l pekat "elatin < 1 m9 (a-6 17C < dipanaskan <
(asil Pen"amatan P)S Beleran" +S/ , ,
,
$ tetes P&8 < $ tetes 64l pekat
Foto
!
10 | P r o t e i n
:
al&umin
yang
tela
Foto $ : ser&uk gelatin yang tela
ditam&akan (a-6 17C
ditam&akan
(a-6
17C
dan tela di&akar serta
dan tela di&akar serta tela
tela
ditam&akan
asetat dan 64l.
BI.1.2 Uji Kelarutan Protein a&el 6asil pengamatan
11 | P r o t e i n
P&0
ditam&akan P&0asetat dan 64l.
%aan 8l&umin
a&ung 1 2 ml
a&ung 2 2 ml
a&ung ! 2ml
a&ung $ 2ml
a&ung ' 2ml
telur 8ir suling 64l 17C (a-6
1 ml 0 0
0 1ml 0
0 0 1 ml
0 0 0
0 0 0
$7C 8lkool
0
0
0
1 ml
0
0
0
1 ml
>)C Klorofoin 0 0 Kook ta&ung dengan kuat 6asil : 9arut+ Emulsi+ 9arut tanpa terdenaturas tidak larut denaturas i
idak larut+
Emulsi+
idak larut+
terdenaturas
terdenaturasi
terdenaturas
i
i
%aan "elatin 8ir suling 64l 17C (a-6
i a&ung 1 2 ml 1 ml 0 0
a&ung 2 2 ml 0 1 ml 0
a&ung ! 2 ml 0 0 1 ml
a&ung $ 2 ml 0 0 0
a&ung ' 2 ml 0 0 0
$7C 8lkool
0
0
0
1 ml
0
0
0
1 ml
>)C Kloroform 0 0 Kook ta&ung dengan kuat 6asil : 9arut 9arutyida k larut
12 | P r o t e i n
9arut
9arut
9arut
idak larut+ terkoagulasi
Foto asil uji kelarutan protein %o.
1.
(asil Pra*ti*um
Ta)un"
Al)umin telur
$elatin
9arut+ tanpa denaturasi
9arut
Emulsi+ terdenaturasi
9arut
a&ung I 8ir suling 3aquades)
2.
a&ung II 9arutan
64l
17C
!.
a&ung III 9arutan (a-6 $7C
13 | P r o t e i n
$.
idak larut+ terdenaturasi
9arut
Emulsi+ terdenaturasi
9arut
idak larut+ terdenaturasi
idak larut+ terkoagulasi
a&ung IB 8lkool >)C
'.
a&ung B Kloroform
BI.1.! Uji Pengendapan Protein dengan "aram a&el 1 : 6asil Pengamatan Bahan
Ta)un" 1
Ta)un" 2
Ta)un" 3
Ta)un"
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
%erle&i
%erle&i
%erle&i
%erle&i
8l&umin telur (a4l C' 4a4l2 'C MgS-$ 'C %a4l2 'C Ko4o*lah ta)un" (asil5
Endapan &anyak atau sedikit
14 | P r o t e i n
Tida* terjadi enda#an )er6arna Kunin"
Tida* terjadi enda#an )er6arna *eruh
Tida* terjadi enda#an )er6arna )enin"
Terjadi enda#an )er6arna *eruh
a&el 2 : 6asil Uji
15 | P r o t e i n
8l&umin elur Se&elum diisi larutan uji
8l&umin elur Sesuda diisi larutan uji (a4l
%a4l 2
4a4l 2
MgS-$
16 | P r o t e i n
BI.1.$ Uji %iuret a&el 1 : 6asil pengamatan %o . 1. 2. !.
0at Uji
(asil Uji Biuret
Poli#e#tida +,-/
Ungu Ungu Ungu
< < <
8l&umin 2C "elatin 2C Kasein 7+'C
Tabel 2 : Dokumentasi Hasil Praktikum %o . 1.
$am)ar
Keteran"an
9arutan al&umin+ gelatin+ dan kasein se&elum ditetesi reagen.
2.
9arutan al&umin+ geletin+ dan kasein setela ditetesi (a-6
17 | P r o t e i n
17C dan 4uS- $ 'C.
BI.1.' Uji (inidrin a&el 1 : 6asil pengamatan (o.
Hat Uji
6asil Uji (inidrin
8sam 8mino &e&as 3<05
8l&umin 2 C
%er,arna Ungu
<
"elatin 2C
%er,arna Ungu Pekat
1
2
<< Kasein 7.'C
%er,arna Ungu Muda
!
< Pepton 7+'C
%er,arna Ungu Pekat
$
<<<
a&el 2 : /okumentasi asil praktikum
Zat Uji sebelum ditetesi larutan
18 | P r o t e i n
Zat Uji setelah ditetesi larutan dan dipanaskan
BI.1.) Uji *antoprotein Tabel 1 : Hasil praktikum (o. 1. 2.
19 | P r o t e i n
Hat Uji
6asil Uji *antoprotein
8l&umin 2C "elatin 2C
Kuning Kuning &ening
irosintriptofanf enilalanin 3<05 0 0
!. $.
Kasein 2C Kuning telur
%ening+ Kuning er&entuk ! lapisan &er,arna otange
0 <
diatas+ di tenga kuning telur dan di &a,a &er,arna kuning Tabel 2 : Dokumentasi hasil praktikum %o . 1.
$am)ar
Keteran"an
9arutan kasein+
al&umin+ dan
gelatin+
kuning
telur
se&elum ditam&akan reagen.
20 | P r o t e i n
2.
9arutan al&umin yang tela ditam&akan
1
ml
6(- !
pekat dan tela dilakukan pemanasan
serta
tela
ditam&akan (a-6.
!.
"elatin ditam&akan
yang 1
tela ml
6(- !
pekat dan tela dilakukan pemanasan
serta
ditam&akan (a-6.
21 | P r o t e i n
tela
$.
Kasein
yang
ditam&akan
1
tela ml
6(- !
pekat dan tela dilakukan pemanasan
serta
tela
ditam&akan (a-6.
'.
Kuning
telur
ditam&akan
1
yang
tela
ml
6(- !
pekat dan tela dilakukan pemanasan
serta
ditam&akan (a-6.
VI.2 Pem)ahasan BI.2.1 Uji Susunan Elementer Protein
Protein merupakan makromolekul yang menyusun le&i dari separu &agian dari sel. Protein juga menentukan ukuran dan struktur sel+ komponen utama dari sistem komunikasi antar sel serta se&agai katalis &er&agai reaksi &iokimia di dalam sistem sel maluk idup. Protein memiliki rantai yang panjang dan juga dapat mengalami ross0linking dan lain0lain. Protein merupakan su&stansi organik seingga mirip dengan &aan organik lain mengandung unsur kar&on+ idrogen dan oksigen. Semua protein merupakan polipeptida. Protein merupakan kelompok &iomakromolekul yang sangat eterogen. Ketika &erada di luar
22 | P r o t e i n
tela
makluk idup atau sel+ protein sangat tidak sta&il. Protein yang terli&at dalam reaksi &iokimia se&agian &esar &erupa enim &anyak terdapat di dalam sitoplasma dan se&agian terdapat pada kompartemen dari organel sel 3Sudarmaji+ 2775. Protein adala suatu polipeptida yang mempunyai &o&ot molekul yang sangat &er#ariasi+ dari '777 ingga le&i dari satu juta. /isamping &erat molekul yang &er&eda0&eda+ protein mempunyai sifat yang &er&eda0&eda pula. 8da protein yang muda larut dalam air+ tetapi ada juga yang tidak larut dalam air. =am&ut dan kuku adala suatu jenis protein yan tidak larut dalam air dan tidak muda &ereaksi+ sedangkan protein yang dalam &agian puti telur muda larut dalam air dan muda &ereaksi 3Pudjiadi+ 1>>$5. Semua jenis protein tersusun atas unsur0unsur kar&on 345+ ydrogen 365+ oksigen 3-5+ dan nitrogen 3(5 dan ada pula protein yang mengandung unsure &elerang 3S5 dan posfor 3P5. /engan metode pem&akaran ataupun pengem&unan kita dapat mengetaui unsur0unsur protein+ yaitu+ 4+6+-+dan (. 8. Uji adanya unsur 4+6+ dan Pada pero&aan ini+ mengidentifikasi elemen0elemen atau unsur0 unsur yang menyusun protein. 8dapun asil yang diperole dari pero&aan ini adala pada uji adanya unsur 4+ 6+ dan -+ &aik dengan at uji al&umin telur maupun gelatin+ sama0sama menunjukkan asil yang positif. 6al ini ditunjukkan dengan terjadinya pengarangan yang menandakan adanya unsur kar&on 345+ terium &au ter&akar yang
menandakan adanya
unsur
nitrogen 3(5+ dan
terjadi
pengem&unan yang menandakan adanya unsur idrogen 365 dan oksigen 3-5. %. Uji adanya atom ( Pada pero&aan kedua yaitu uji atom (+ &aik larutan al&umin dan gelatin menunjukkan asil yang sama+ dimana kedua larutan terse&ut positif mengandung atom ( yang ditunjukkan dengan adanya &au
23 | P r o t e i n
amoniak dan sama0sama &ersifat &asa. Untuk al&umin dengan p6 17 dan gelatin dengan p6 >. 4. Uji adanya atom S Pada uji susunan elementer untuk mengetaui adanya atom S 3sulfur5 pada &aan uji yakni al&umin dan gelatin+ terjadi asil &er&eda untuk setiap &aan uji. Untuk al&umin+ 1 ml al&umin dipanaskan &ersama 1 ml (a-6 17C tidak terjadi peru&aan ,arna. Ketika larutan ditam&akan dengan $ tetes P&0asetat 'C terjadi peru&aan ,arna itam yang mengindikasikan ter&entuk P&S. 8danya sulfur pada al&umin semakin diperkuat saat direaksikan dengan $ tetes 64l pekat karena adanya asap dengan &au kas &elerang dari &elerang yang teroksidasi yang artinya mengandung atom S. %er&eda dengan gelatin+ saat dipanaskan &ersama 1 ml (a-6 17C kemudian ditam&akan dengan $ tetes P&0asetat 'C tidak ada
peru&aan ,arna
itam yang
menandakan tidak
ter&entuknya P&S. (amun saat direaksikan dengan $ tetes 64l pekat+ postif mengandung atom S yaitu ditandai dengan &au &elerang. karena adanya asap dengan &au kas &elerang 3S5 dari &elerang yang teroksidasi. Uji ini dilakukan untuk mengetaui adanya protein yang mengandung asam amino dengan atom S. Pada uji ini+ dalam suasana &asa+ P&0asetat akan &ereaksi dengan S dari asam amino mem&entuk garam P&S &er,arna itam 3reaksi positif ditandai dengan ter&entuknya endapan &er,arna itam5. Pada pero&aan ini+ dapat terliat &a,a pada gelatin tidak terjadi peru&aan apapun. Sedangkan pada al&umin merupakan asam amino yang mengandung atom S pada molekulnya. =eaksi P&0asetat dengan asam0asam amino terse&ut akan mem&entuk endapan &er,arna oklat keitaman+ yaitu garam P&S
3mem&uktikan &a,a sampel protein terse&ut
mengandung atom S5 Penam&aan (a-6 dalam al ini adala untuk mendenaturasikan protein seingga ikatan yang mengu&ungkan
24 | P r o t e i n
atom S dapat terputus ole P&0asetat mem&entuk P&S. Sedangkan metionin dan triptofan tidak mengalami peru&aan ,arna 3ter&ukti &a,a sampel protein terse&ut tidak mengandung atom S5.
BI.2.2 Uji Kelarutan Protein /enaturasi protein dapat diartikan suatu peru&aan atau modifikasi teradap struktur sekunder+ tertier dan kuartener molekul protein tanpa terjadinya pemeaan ikatan0ikatan ko#alen. Karena itu+ denaturasi dapat diartikan suatu proses terpeanya ikatan idrogen+ interaksi idrofo&ik+ ikatan garam dan ter&ukanya lipatan atau ,iru molekul protein 3;inarno 1>>25. Panas dapat digunakan untuk mengaaukan ikatan idrogen dan interaksi idrofo&ik non polar. 6al ini terjadi karena suu tinggi dapat meningkatkan energi kinetik dan menye&a&kan molekul penyusun protein &ergerak atau &ergetar sangat epat seingga mengaaukan ikatan molekul terse&ut. Protein telur mengalami denaturasi dan terkoagulasi selama pemasakan. %e&erapa makanan dimasak untuk mendenaturasi protein yang dikandung supaya memudakan enim penernaan dalam menerna protein terse&ut 3Poedjiadi+ 1>>$5. Pemanasan akan mem&uat protein &aan terdenaturasi seingga kemampuan mengikat airnya menurun. 6al ini terjadi karena energi panas akan mengaki&atkan terputusnya interaksi non0ko#alen yang ada pada struktur alami protein tapi tidak memutuskan ikatan ko#alennya yang &erupa ikatan peptida. Proses ini &iasanya &erlangsung pada kisaran suu yang sempit 3Poedjiadi+ 1>>$5. Koagulasi adala proses penggumpalan partikel koloid karena penam&aan &aan kimia seingga partikel0partikel terse&ut &ersifat netral dan mem&entuk endapan karena adanya gaya grafitasi.Mekanisme koagulasi ter&agi menjadi 2+ yaitu seara fisik dan seara kimia. Koagulasi dapat terjadi seara fisik seperti: 315 Pemanasan+ kenaikan suu sistem koloid menye&a&kan tum&ukan antar partikel0partikel sol dengan molekul0molekul air &ertam&a &anyak. 6al ini melepaskan
25 | P r o t e i n
elektrolit yang teradsorpsi pada permukaan koloid. 8ki&atnya partikel tidak &ermuatan. onto: dara 325 Pengadukan+ onto: tepung kanji 3!5 Pendinginan+ onto: agar0agar. Sedangkan
seara
kimia
seperti
penam&aan elektrolit+ penampuran koloid yang &er&eda muatan dan penam&aan at kimia koagulan. Pada uji kelarutan ini+ &ertujuan untuk mengetaui daya kelarutan protein teradap pelarut tertentu. /aya larut protein &er&eda di dalam air+ asam+ maupun &asa. Se&agian ada yang muda larut dan ada pula yang sukar larut. (amun+ semua protein tidak larut dalam pelarut lemak seperti eter dan kloroform. 8pa&ila protein dipanaskan atau ditam&a dengan etanol a&solute+ maka protein akan menggumpal 3terkoagulasi5. 6al ini dise&a&kan etanol menarik mantel air yang melingkupi molekul0molekul protein. /ari asil pero&aan yang menggunakan al&umin telur dimana pada ta&ung pertama yang &erisi air suling+ ta&ung kedua yang &erisi 649 17C+ ta&ung ketiga yang &erisi (a-6 $7C+ ta&ung keempat &erisi 8lkool >)C+ dan ta&ung kelima &erisi kloroform setela ditam&akan al&umin telur 2 ml+ kemudian dikook dengan kuat. 6asil pada ta&ung pertama yang &erisi air suling adala larut+ tanpa denaturasi. a&ung kedua 64l 17C asil yang didapatkan yakni emulsi+ terdenaturasi. Pada ta&ung (a-6 $7C asilnya tidak larut+ terdenaturasi. Untuk ta&ung keempat yang &erisi 8lkool >)C asil yang didapatkan emulsi+ terdenaturasi. a&ung yang kelima yaitu &erisi kloroform asilnya tidak larut+ terdenaturasi. 8da &e&erapa ta&ung yang mengalami denaturasi ada yang tidak. Karena lamanya pemanasan yang menye&a&kan peanya ikatan idrogen+ interaksi idrofo&ik+ ikatan garam dan ter&ukanya lipatan atau ,iru molekul protein 3;inarno 1>>25. Protein &ersifat amfoter+ yaitu dapat &ereaksi dengan larutan asam maupun &asa. /aya larut protein &er&eda di dalam air+ asam+ dan &asa. Se&agian ada yang muda larut dan ada pula yang sukar larut. (amun+ semua protein tidak larut dalam pelarut lemak seperti eter atau kloroform.
26 | P r o t e i n
Untuk pero&aan yang menggunakan gelatin+ ta&ung pertama yang &erisi air suling+ ta&ung kedua yang &erisi 649 17C+ ta&ung ketiga yang &erisi (a-6 $7C+ ta&ung keempat &erisi 8lkool >)C+ dan ta&ung kelima &erisi kloroform setela ditam&akan al&umin telur 2 ml+ kemudian dikook dengan kuat. 6asil pada ta&ung pertama yang &erisi air suling adala larut. a&ung kedua 64l 17C asil yang didapatkan yakni tidak larut+ terkoagulasi. Pada ta&ung (a-6 $7C asilnya tidak larut+ terkoagulasi. Untuk ta&ung keempat yang &erisi 8lkool >)C asil yang didapatkan adala tidak larut+ dan ada endapan. a&ung yang kelima yaitu &erisi kloroform asilnya yaitu tidak larut+ terkoagulasi. Protein tidak larut dalam pelarut lemak seperti eter atau kloroform. BI.2.! Uji Pengendapan Protein dengan "aram Pada praktikum ini+ penam&aan ' maam larutan yaitu 4a4l2 ' C+ MgS-$ ' C+ %a4l 2 'C dan (a4l ' C kedalam al&umin telur masing – masing menim&ulkan reaksi yang &er&eda. /ari keempat larutan terse&ut+ semuanya tidak terjaadi endapan al ini dikarenakan kesalaan pada saat melakukan praktikum. Se&enarnya yang positif dapat mengendapkan al&umin telur adala larutan 4a4l2 ' C+ dan (a4l' C. /imana larutan terse&ut merupakan garam &erkonsentrasi tinggi dan mengaki&atkan kelarutan protein menjadi &erkurang+ seingga dapat menim&ulkan endapan pada dasar ta&ung reaksi. Penye&a& mengapa penam&aan garam &erkonsentrasi tinggi dan kelarutan protein menjadi &erkurang seingga tim&ul endapan dikarenakan adanya peristi,a denaturasi+ yaitu suatu peru&aan atau modifikasi teradap struktur sekunder+ tertier dan kuartener molekul protein tanpat terjadinya pemeaan ikatan0ikatan ko#elen. Protein yang terdenaturasi akan &erkurang kelarutannya. 9apisan molekul &agian dalam yang &ersifat idrofo&ik akan keluar sedangkan &agian idrofilik akan terlipat kedalam. Pelipatan atau pem&akikkan akan terjadi &ila protein mendekati p6 isoelektrislalu protein akan menggumpal dan mengendap. Biskositas akan &ertam&a karena molekul mengem&ang menjadi asimetrik+ sudut putaran optis
27 | P r o t e i n
larutan protein juga akan meningkat. Kemudian ,arna keru pada endapan terse&ut dise&a&kan karena terjadi ikatan antara ion salisilat dengan al&umin+ ion0ion negatif dapat menjenukan larutan ingga p6 larutan&erada di &a,a p6 isolistrik seingga gumpalan larut kem&ali. BI.2.$ Uji %iuret Pada pero&aan ini+ kita akan mem&uktikan adanya molekul0molekul peptida dari protein. Pada al&umin+ gelatin dan kasein menunjukkan ,arna ungu yang &erarti positif mengandung polipeptida. Ketiga &aan terse&ut memiliki rumus &angun yang kompleks dan mengikat dua atau le&i asam amino esensial+ seingga ter&entuk ikatan peptida. BI.2.' Uji (inidrin 8sam amino &e&as adala asam amino dimana gugus aminonya tidak terikat. Semua asam amino+ atau peptida yang mengandung asam0@ amino &e&as akan &ereaksi dengan ninidrin mem&entuk senya,a kompleks &er,arna &iru0ungu. (amun+ prolin dan idroksiprolin mengasilkan senya,a &er,arna kuning. Protein mengandung asam amino &erinti &enen+ jika ditam&akan asam nitrat pekat akan mengendap dengan endapan &er,arna puti yang dapat &eru&a menjadi kuning se,aktu dipanaskan. Senya,a nitro yang ter&entuk dalam suasana &asa akan terionisasi dan ,arnanya akan &eru&a menjadi le&i tua atau jingga. =eaksi ini didasarkan pada uji nitrasi inti &enena yang terdapat pada mulekul protein menjadi senya,a intro yang &er,arna kuning. Pada praktikum di atas al&umin+ kasein+ gelatin+ dan pepton mem&erikan asil positif 3<5 karena mem&entuk ,arna ungu yang menandakan larutanat terse&ut dapat &ereaksi dengan (inidrin. 6al ini mem&uktikan kalau ketiga at uji terse&ut mempunyai gugus asam amino &e&as. 8sam amino dapat ditentukan seara kuntitatif dengan
jalan
menggunakan intensitas ,arna yang ter&entuk se&anding dengan konsentrasi asam amino terse&ut. Pada reaksi ini dilepaskan 4- 2 dan (6$ seingga asam amino dapat ditentukan seara kuantitatif dengan mengukur jumla 4- 2 dan (6! yang dilepaskan.
28 | P r o t e i n
Struktur Prolin
Struktur 6idroksiprolin
BI.2.) Uji *antoprotein Pada praktikum uji Aantoprotein kali ini &ertujuan untuk mem&uktikan adanya asam amino tirosin+ triptofan+ atau fenilalanin yang terdapat dalam protein. Se&elum praktikum dimulai semua maasis,a tela menyiapkan keperluan untuk praktikum 3penggunaan jas la& dan sterilisasi alat – alat praktikum5 dengan di&antu ole asisten dosen. Pada uji Aantoprotein kali ini+ terdapat $ at uji yang digunakan yaitu al&umin 2C+ gelatin 2C+ kasein 7+'C+ dan kuning telur. Sedangkan untuk reagennya digunakan larutan 6(- ! pekat dan larutan (a-6+ masing – masing digunakan se&anyak 17 tetes. Uji Aantoprotein merupakan uji kualitatif pada protein yang digunakan untuk menunjukkan adanya gugus &enena 3inin fenil5. 8sam amino yang menunjukkan reaksi positif untuk uji ini adala tyrosin+
penilalanin+
dan
tryptopan.
=eaksi
positif
pada
uji
Aantoprotein adala munulnya gumpalan atau inin ,arna kuning. Pada uji ini+ digunakan larutan 6(- ! yang &erfungsi untuk memea protein menjadi gugus &enene 38nonim+ 27175. Uji Aantoprotein akan mengasilkan ,arna orange pada reaksi yang mengasilkan turunan &enena dengan penam&aan &asa. Uji Aantoprotein digunakan untuk asam amino yang mengandung inti &enene. =eaksi yang digunakan
29 | P r o t e i n
adala reaksi nitrasi pada inti &enena yang terdapat dalam protein ole asam nitrat pekat. =eaksi ini positif untuk triptofan+ fenilalanin+ dan tirosin. ;arna asil reaksi dengan asam nitrat pekat adala kuning tua+ sedangkan ,arna orange munul ketika reaksi ditam&akan dengan (a-6 se&agai &asa. -range pekat pada fenol menunjukkan adanya inti &enene pada gugus fenol. 6al itu memang sangatla tepat karena fenol memang memiliki gugus &enene 36arper+ 1>?75. =eaksi Aantoprotein terjadi pada saat larutan asam nitrat pekat ditam&akan dengan ati0ati ke dalam larutan protein. Setela diampur terjadi endapan puti yang dapat &eru&a menjadi kuning apa&ila dipanaskan. =eaksi yang terjadi adala nitrasi pada inti &enena yang terdapat pada molekul protein. 8dapun asil yang didapat dalam pero&aan kali ini adala dari keempat at uji 3al&umin+ gelatin+ kasein+ dan kuning telur5 yang digunakan+ anya kuning telur yang mem&entuk lapisan dan terdapat inin &enena dan ketiga at uji tidak memperliatkan adanya inin &enena anya terjadi peru&aan ,arna ketika tela ditam&akan larutan 6(-! pekat dan tela dipanaskan. 6asil praktikum tela sesuai dengan teori yang ada+ dimana dikatakan &a,a tirosin memang mempunyai inin &enena.
BII.
Simpulan 3Seara umum5 Simpulan pada praktikum protein kali ini adala seara umum praktikum tela &erjalan dengan &aik dan lanar. Semua maasis,a tela mampu melakukan uji protein seara kualitatif. Seingga melalui praktikum ini &anyak pengetauan mengenai protein yang didapat ole maasis,a. Selama melakukan proses praktikum+ tidak terdapat kendala yang &erarti.
BIII.
/aftar Pustaka 8nonim. 271!. ProteinJ 3makala5. /alam ttp:eprints.uny.a.id??$22&a&2C2707>)7$227>?.pdf . /iundu pada tanggal 1! -kto&er 271$.
30 | P r o t e i n
8nonim.JPem&aasan Uji ProteinJ. /alam ttps:,,,.sri&d.omdo ?7$'21$7PEM%868S8(0Uji0Protein. /iundu pada tanggal 11 -kto&er 271$. 8nonim.2711. 9aporan Praktikum. /alam ttps: ,,,.sri&d.omdo!>!$'!2 98P-=8(0 P=8KIKUM. /iakses pada tanggal 12 -kto&er 271$. 8nonim. Protein. /alam ttp:repository.usu.a.id &itstream 12!$')?> !!?'1 $4apterC27II.pdf . /iundu pada tanggal 1! -kto&er 271$. %intang+ Maria. 2717. Biokimia Teknik Penelitian. akarta: Erlangga /ianto+ 6aris. 2717. Uji Kualitatif Proetin 3makala5. /alam ttp:arisdianto.files.,ordpress.om271771protein0om2.pdf . /iundu pada tanggal -kto&er 271$. 9eninger+ 8l&ert 9+ 1>?2. “Dasar-Dasar Biokimia Jilid !" Pener&it Erlangga : akarta Laid+ Estien dan (ursanti+ 9isda.277). Penuntun Praktikum Biokimia untuk #ahasis$a %nalis. Logyakarta: 4B 8ndi -ffset. (o#ita.277>. 9aporan Praktikum %iokimia Protein. /alam ttp:jatera0 a,esome.&logspot.om271!12laporan0praktikum0&iokimia0 protein.tml . /iundu pada tanggal 1! -kto&er 271$. Pudjiadi+ 8nna. 1>>$& Dasar-dasar Biokimia. akarta:Uni#ersitas Indonesia Santoso+ 6. 277?. Protein dan Enim. /alam ttp:,,,. erus,n. teanology .om ./iakses pada tanggal 12 -kto&er 271$. Laid+ Estien dan (ursanti+ 9isda. 277). Penuntun Praktikum Biokimia untuk #ahasis$a %nalis. Logyakarta: 4B 8ndi -ffset ;inarno+ F. ". 1>>2. 'imia Pangan dan (ii. "ramedia: akarta
I*.
a,a&an Pertanyaan 3ika ada5 I*.1 Uji Susunan Elementer Protein 1. Pada pero&aan+ unsur apa yang mem&edakan al&umin dan gelatin
31 | P r o t e i n
a,a&: Pada pero&aan+ molekul al&umin mampu mengikat unsur lain seperti &elerang 3S5. Struktur molekul gelatin anya mampu mengikat Kar&on 345+ (itrogen 3(5+ 6idrogen 365 dan -ksigen 3-5. 2. Se&utkan jenis asam amino yang mengandung unsur terse&ut serta tuliskan struktur kimianyaN a,a&: enis asam amino yang mengandung atom sulfur 3asam amino polar5+yaitu: 4ysteine dan Metionine.
ysteine
metionine
!. uliskan reaksi ter&entuknya &au kas &elerang pada uji adanya atom SN a,a&: Penam&aan P&0asetat pada larutan al&umin dengan (a-6 17C meme&entuk endapan itam dan &au yang kas. 6al ini menunjukkan adanya unsur &elerang S yang terkandung di dalam al&umin. =eaksi seperti &erikut: S20 < P&2<
P&S 3itam5
Penam&aan 64l pekal pada larutan al&umin < (a-6 17C < P&0asetat meru&a endapan ,arna itam menjadi endapan ,arna puti. etapi endapan puti ini epat larut kem&ali dengan adanya 64l pekat yang &erle&i. Endapan puti dalam larutan asam klorida pekat atau kalium klorida akan mem&entuk larutan ion tetrakloroplum&at 3II5. %au yang terium adala &au kas dari 62S yang ter&e&askan+ dengan reaksi : P&S < 64l
3p5
P&4l 2< 62S
3puti5
P&4l2 < 24l0 3ion tetrakloroplum&at3II55
32 | P r o t e i n
OP&4l$20
I*.2 Uji Kelarutan Protein 1. Meskipun protein termasuk senya,a organik+ tetapi tidak larut dalam pelarut lemak seperti eter atau kloroform. Mengapa a,a&: Protein termasuk senya,a organik+ tetapi tidak larut dalam pelarut lemak seperti eter atau kloroform karena gugus kar&oksilat pada asam amino tidak melepas ion 6 <.
I*.! Uji Pengendapan Protein dengan "aram 1. elaskan mengapa dengan penam&aan garam &erkonsentrasi tinggi kelarutan protein menjadi &erkurang+ seingga dapat mengendapN a,a& : karena garam menye&a&kan konsentrasi yang tinggi pada kelarutan protein seingga dapat mengendap. Semakin tinggi konsentrasi garam yang di&erikan+ maka kelarutan protein akan semakin renda dan menim&ulkan endapan yang &anyak. 2. Pada pero&aan+ manaka garam yang le&i efektif untuk mengendapkan protein Mengapa a,a& : "aram yang le&i efektif untuk mengendapkan protein yaitu %a4l2 'C+ karena %a4l2 'C jenu merupakan garam dengan konsentrasi yang tinggi. Semakin tinggi konsentrasi garam yang di&erikan+ maka kelarutan protein akan semakin renda dan menim&ulkan endapan yang &anyak. !. 8pa nama protein serum yang dapat diendapkan dengan penam&aan amonium sulfat jenu a,a& : Protein serum yang dapat diendapkan dengan penam&aan ammonium sulfat jenu yaitu Serum 8l&umin $. 8pa fungsi protein terse&ut dalam dara dan dimana disintesis a,a& : Fungsi serum al&umin dalam dara yaitu+ untuk memeliara tekanan osmosis dan pengusung plasma dengan seara tidak langsung mengikat &e&erapa ormone steroid ydropo&i dan protein pengusung &agi emin dan asam lemak dalam sirkulasinya+ serta merangsang ormon – ormon lainnya seperti tiroid dan &iliru&in. Serum ini disintesis di dalam ati ole retikulum endoplasma.
33 | P r o t e i n
I*.$ Uji Pengendapan Protein dengan 9ogam 8sam -rganik 1. 8pa yang dimaksud denaturasi irre#ersi&le protein elaskan N a,a& : /enaturasi irre#ersi&el adala peristi,a rusaknya struktur protein dimana protein menggumpal yang tidak dapat lagi kem&ali ke struktur semula. 6ilangnya sifat0sifat struktur le&i tinggi dise&a&kan karena terkaaunya ikatan idrogen dan gaya0gaya sekunder lain yang memutuskan molekul
protein.
/enaturasi menye&a&kan
akti#itas
menurun atau mengilang. 2. elaskan mengapa susu atau puti telur dapat digunakan se&agai antidotum pada keraunan logam0logam &erat seperti P& 2< atau 6g2< a,a& : Susu atau puti telur dapat digunakan se&agai antidotum pada keraunan logam0logam &erat seperti P& 2< atau 6g2< karena reaksi antara garam logam &erat dan protein &iasanya mengasilkan gara m dari protein dan logam &erat yang tidak larut. -rang yang keraunan mungkin tela menelan logam &erat dengan jumla ukup &anyak. 8ntidot dapat digunakan protein seperti susu dan puti telur+ seingga terjadi pengendapan garam yang &eraun itu. Kemudian+ d&erikan emetik untuk menginduksi
munta
agar endapan
logam0protein
terse&ut
dikeluarkan dari tu&u atau dapat dikeluarkan melalui feses.
!. uliskan struktur kimia asam Sulfosalisilat dan 48 a,a& : 8. Struktur Kimia 8sam rikloroasetat
34 | P r o t e i n
dapat
%. Struktur kimia asam Sulfosalisilat
I*.' Uji %iuret 1. Se&utkan per&edaan antara polipeptida dan proteinN a,a& : per&edaan polipeptida dan protein adala terletak pada residu asam amino dan &o&ot molekul yang dimiliki ole masing – masing polipeptida dan protein. Polipeptida mempunyai residu asam amino Q 177 dan &o&ot molekul Q ).777. Sedangkan+ pada protein residu asam aminonya R 177 dan &o&ot molekulnya R ).777. 2. Pada pero&aan manaka yang mem&erikan asil negatif pada uji &iuret Mengapa a,a& : pada pero&aan yang tela kami lakukan+ semua larutan uji mem&erikan reaksi positif pada uji &iuret. 6anya saja terdapat per&edaan ,arna ungu yang ter&entuk. /ari ketiga larutan uji 3al&umin+ gelatin+ dan kasein5+ uji al&uminla yang mem&entuk ,arna ungu yang nyata+ sedangkan pada gelatin dan kasein ter&entuk ,arna ungu yang kurang nyata. 6al terse&ut menunjukkan &a,a pada uji al&umin ter&entuk ikatan peptida yang &anyak sedangkan pada uji gelatin dan kasein ter&entuk ikatan peptida yang sedikit.
I*.) 1.
Uji (inidrin elaskan apa yang dimaksud asam amino &e&as a,a& :
35 | P r o t e i n
Lang dimaksud dengan asam amino &e&as adala+ asam amino dimana gugus aminonya tidak terikat. 2. Pada pero&aan+ manaka yang mem&erikan asil positif pada uji ninidrin Mengapa a,a& : Lang mem&erikan asil positif pada uji ninidrin adala al&umin+ gelatin+ kasein dan pepton 6al ini dise&a&kan karena al&umin+ gelatin+ kasein dan pepton mem&entuk ,arna ungu muda sampai ungu pekat + al ini menandakan larutan terse&ut dapat &ereaksi dengan ninidrin dengan kata lain keempat at uji terse&ut mempunyai gugus asam amino &e&as. !. 8paka reaksi ninidrin dapat digunakan untuk menentukan asam amino seara kuantitatif elaskanN a,a& : =eaksi ninidrin dapat digunakan untuk menentukan asam amino seara kuantitatif al ini karena + asam amino dapat ditentukan seara kuntitatif dengan jalan menggunakan intensitas ,arna yang ter&entuk se&anding dengan konsentrasi asam amino terse&ut. Pada reaksi ini dilepaskan 4-2 dan (6$ seingga asam amino dapat ditentukan seara kuantitatif dengan mengukur jumla 4- 2 dan (6! yang dilepaskan. $.
uliskan struktur kimia asam amino pprolin dan idroksiprolin a,a& : Struktur kimia asama amino prolin dan idroksiprolin :
*truktur Prolin
I*.
Uji *antoprotein
36 | P r o t e i n
*truktur Hidroksiprolin
