RESPIRACIÓN AEROBIA Y ANAEROBIA LABORATORIO # 5 INTEGRANTES: STEINER MEJÍA EISON MEDINA ISAAC FERNÁNDEZ SAYURIS PERTUS CRISTOBAL PACHECO DOCENTE: GUSTAVO ROHENES GALE UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR BIOLOGIA CELULAR LIC. EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACION AMBIENTAL VALLEDUPAR 2013 INTRODUCCIÓN En esta práctica de laboratorio estudiaremos de manera física los procesos respiratorios en los que se necesita o no presencia de oxígeno, utilizando diferentes materiales y montajes que nos permitan de una u otra forma cumplir con los objetivos planteados en el cual utilizaremos levadura, jugo de naranja , y una suspensión de levadura al 5%así como diferentes reactivos que nos ayudaran en este proceso para a la adquisición de más conocimientos. Entendemos por respiración a la serie de procesos celulares utilizados por los organismos para obtener energía mediante la oxidación de diferentes moléculas. Esta energía es almacenada en enlaces de alta energía (ATP y GTP) y en moléculas reductoras (NADH y FADH2), para ser utilizada posteriormente de forma controlada. En función de quién sea el agente oxidante (el (e l aceptor último de electrones), podemos clasificar dos tipos de respiración: -Respiración aeróbica: aeróbica: si utilizan el O2 (del aire, de ahí el nombre) como aceptor de electrones. Propia de todos los eucariotas y de muchos procariotas.
-Respiración anaeróbica: si utilizan otro aceptor final que no sea el oxígeno, como por ejemplo el S, el Fe+3, el nitrato (NO3-) o el fumarato. Es exclusiva de algunos tipos de procariotas. Las moléculas más comúnmente utilizadas de 'combustible' son la glucosa, algunos aminoácidos y ácidos grasos. OBJETIVOS:
Diferenciar la respiración aerobia y anaerobia
Determinar la presencia de alcohol en la fermentación
Desarrollar destrezas y habilidades en el manejo del material y equipos de laboratorio
OBJETIVOS ESPECÍFICOS: Demostrar que en la respiración anaerobia hay desprendimiento de iones hidrógeno, sin la intervención del oxígeno.
Demostrar que en la fermentación alcohólica ocurre la degradación de la glucosa hasta la obtención del alcohol.
El alumno relacionará el proceso de respiración celular con el intercambio gaseoso que realizamos al respirar.
Conocerá los efectos del ejercicio sobre la respiración
MARCO TEORICO La respiración es el proceso mediante el cual se lleva a cabo la ruptura de glucosa para la obtención de energía (ATP).En la Tierra existen dos tipos de respiración celular: la respiración aerobia y la anaerobia. La respiración aerobia se lleva a cabo en presencia de oxígeno y la anaerobia en ausencia de oxígeno. La respiración anaerobia consta de un proceso de dos etapas, la glucólisis y la fermentación. La glucólisis es la degradación de la glucosa en dos moléculas de ácido pirúvico . Se lleva a cabo en tres pasos. Primero la activación de la glucosa, seguido de la ruptura de l a glucosa y finalmente la obtención de productos (2 ácidos pirúvicos + 2NADH + 4 ATP). La segunda etapa de la respiración anaerobia es la fermentación. La fermentación es la vía metabólica que comprende una serie de reacciones químicas en las que cada tipo de célula fermentadora utiliza el ácido pirúvico para la síntesis de otros productos. Existen dos tipos de fermentación: la etanólica, que se realiza sin oxígeno y en la que se obtienen dos moléculas de etanol; y la láctica, que se realiza sin presencia de oxígeno y se forma el ácido láctico. En esta etapa no se gana ni sepierde ATP. Los organismos que realizan este tipo de respiración son algunasbacterias.La reacción general de la respiración aerobia es: GLUCOSA + 6 O2 6 CO2+ 6 H2O +38 ATP.
En este tipo de respiración la ganancia es de 38 ATP. Todos los organismos a excepción de algunas bacterias que realizan respiración anaerobia, realizan este tipo de respiración, por ejemplo los humanos, los pájaros, peces y mamíferos. El ATP es un compuesto formado por moléculas portadoras de energía y que son muy importantes en la respiración, tanto aerobia como anaerobia, porque gracias a esta molécula la célula obtiene la energía que necesita. RESPIRACION CELULAR AEROBICA La respiración celular aeróbica es el conjunto de reacciones en las cuales el ácido pirúvico producido por la glucólisis se transforma en CO2 y H2O. En este proceso, se producen 36 moléculas de ATP. En las células eucariotas este proceso ocurre en el mitocondria en dos etapas llamadas el Ciclo de Krebs (o ciclo de ácido cítrico) y la cadena de transporte de electrones. En la cadena de transporte de electrones, los electrones producidos en glucólisis y en el ciclo de Krebs pasan a niv eles más bajos de energía y se libera energía para formar ATP; durante este transporte de electrones las moléculas transportadoras se oxidan y se reducen. El último aceptador de electrones de la cadena es el oxígeno. En la cadena se producen 34 moléculas de ATP a partir de una molécula inicial de glucosa RESPIRACION CELULAR ANAEROBICA La respiración celular anaeróbica es un proceso biológico de oxido reducción de monosacáridos y otros compuestos en el que el aceptor terminal de electrones es una molécula inorgánica distinta del oxígeno, y más raramente una molécula orgánica. La realizan exclusivamente algunos grupos de bacterias y para ello utilizan una cadena transportadora de electrones análoga a la de las mitocondria en la respiración aeróbica. No debe confundirse con la fermentación, que es un proceso también anaeróbico, pero en el que no participa nada parecido a una cadena transportadora de electrones y el aceptor final de electrones es siempre una molécula orgánica. En el proceso anaeróbico no se usa oxígeno, sino que para la misma función se emplea otra sustancia oxidante distinta, como el sulfato o el nitrato. En las bacterias con respiración anaerobia interviene también una cadena transportadora de electrones en la que se reoxidan los coenzimas reducidos durante la oxidación de los substratos nutrientes; es análoga a la de la respiración aerobia, ya que se compone de los mismos elementos (citocromos, quinonas, proteínas ferrosulfúricas, etc.). La única diferencia, por tanto radica, en que el aceptor último de electrones no es el oxígeno. Todos los posibles aceptores en la respiración anaerobia tienen un potencial de reducción menor que el O2, por lo que, partiendo de los mismos sustratos (glucosa, aminoácidos, triglicéridos), se genera menos energía en este metabolismo que en la respiración aerobia convencional. No hay que confundir la respiración anaeróbica con la fermentación, en la que no existe en absoluto cadena de transporte de electrones, y el aceptor final de electrones es una molécula orgánica; estos dos tipos de metabolismo tienen solo en común el no ser dependientes del oxígeno.
DIFERENCIAS ENTRE RESPIRACION CELULAR AEROBICA Y ANAEROBICA La diferencia básica entre la respiración celular aeróbica y la anaeróbica (a parte de suceder en presencia o ausencia de oxígeno) es la cantidad de moléculas de A TP que se producen. En la respiración celular anaeróbica, los hidrógenos (electrones) pasan al piruvato para formar el ácido láctico o el etanol, mientras que en la respiración celular aeróbica los hidrógenos pasan a la cadena de transporte de electrones para formar ATP. En la respiración celular aeróbica, el piruvato que pasa por el ciclo de Krebs produce hidrógenos adicionales que también pasan a la cadena de transporte de electrones para formar ATP. Por esta razón, en la respiración celular aeróbica se producen 36 moléculas de ATP a partir de una molécula de glucosa, mientras que en la ruta anaeróbica sólo se extraen 2 moléculas de ATP a partir de una molécula de glucosa. Las enzimas responsables de la respiración aeróbica se localizan en las mitocondrias en cambio las responsables de la anaeróbica se ubican en la matriz citoplasmática. FERMENTACIÓN: El proceso de fermentación es anaeróbico ya que se produce en ausencia de oxígeno; ello significa que el aceptor final de los electrones del NADH producido en la glucólisis no es el oxígeno, sino un compuesto orgánico que se reducirá para poder re oxidar el NADH a NAD+. El compuesto orgánico que se reduce (acetaldehído, piruvato) es un derivado del sustrato que se ha oxidado anteriormente. En los seres vivos, la fermentación es un proceso anaeróbico y en él no interviene la mitocondria ni la cadena respiratoria. Son propias de los microorganismos, como algunas bacterias y levaduras. También se produce la fermentación en la mayoría de las células de los animales (incluido el hombre), excepto en las neuronas que mueren rápidamente si no pueden realizar la respiración celular; algunas células, como los eritrocitos, carecen de mitocondrias y se ven obligadas a fermentar; el tejido muscular de los animales realiza la fermentación láctica cuando el aporte de oxígeno a las células musculares no es suficiente para el metabolismo aerobio y la contracción muscular. FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA: La fermentación alcohólica (denominada también como fermentación del etanol o incluso fermentación etílica) es un proceso biológico de fermentación en plena ausencia de aire (oxígeno - O2), originado por la actividad de algunos microorganismos que procesan los hidratos de carbono (por regla general azúcares: como pueden ser por ejemplo la glucosa, la fructosa, la sacarosa, el almidón, etc.) para obtener como productos finales: un alcohol en forma de etanol (cuya fórmula química es: CH3-CH2-OH), dióxido de carbono (CO2) en forma de gas y unas moléculas de ATP que consumen los propios microorganismos en su metabolismo celular energético anaeróbico. El etanol resultante se emplea en la elaboración de algunas bebidas alcohólicas, tales como el vino, la cerveza, la sidra, el cava, etc. Aunque en la actualidad se empieza a sintetizar también etanol mediante la fermentación a nivel industrial a gran escala para ser empleado como biocombustible.
La fermentación alcohólica tiene como finalidad biológica proporcionar energía anaeróbica a los microorganismos unicelulares (levaduras) en ausencia de oxígeno para ello disocian las moléculas de glucosa y obtienen la energía n ecesaria para sobrevivir, produciendo el alcohol y CO2 En la fermentación alcohólica suceden dos reacciones consecutivas: Acido piruvico acetaldehído + CO2 Acetaldehído + NADH + H+ etanol + NAD+ Este tipo de fermentación ocurre en levaduras, ciertos hongos y algunas bacterias, produciéndoseCO2 y alcohol etílico (etanol) LEVADURA Se denomina levadura a cualquiera de los diversos hongos microscópicos unicelulares que son importantes por su capacidad para realizar la descomposición mediante fermentación de diversos cuerpos orgánicos, principalmente los azúcares o hidratos de carbono, produciendo distintas sustancias. Aunque en algunos textos de botánica se considera que las levaduras "verdaderas" pertenecen sólo a la clase Ascomiceta, desde una perspectiva microbiológica se ha denominado levadura a todos los hongos con predominio de una fase unicelular en su ciclo de vida, incluyendo a los hongos basidiomicetes. A veces suelen estar unidos entre sí formando cadenas. Producen enzimas capaces de descomponer diversos sustratos, principalmente los azúcares. Una de las levaduras más conocidas es la especie Sacharomyces. Esta levadura tiene la facultad de crecer en forma anaerobia1 realizando fermentación alcohólica. Por esta razón se emplea en muchos procesos de fermentación industrial, de forma similar a la levadura química, por ejemplo en la producción de cerveza, vino, hidromiel, , pan, antibióticos, etc. AZUL DE BROMOTIMOL: Es un indicador de pH que en solución ácida queda amarillo, en solución básica queda azul y en solución neutra queda verde. Se utilizan para valorar soluciones en las que hay una sustancia ácida o básica en cantidad desconocida. La propiedad de estas sustancias es que al cambiar de color con el pH, cuando añadimos una disolución ácida de concentración conocida sobre una básica de concentración desconocida (o viceversa) el pH va cambiando. Si hemos elegido el indicador adecuado, el cambio de color se producirá exactamente cuando las concentraciones de ácido y base sean iguales, si sabemos la concentración de uno de ellos sabremos inmediatamente la concentración del otro. Azul de Bromotimol que cambia de Amarillo a Azul entre pH de 6,2 y 7,6.
REACTIVO BENEDICT: En química, la reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH libre del C anomérico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. El reactivo de Benedict consta de: Sulfato cúprico;
Citrato de sodio;
Carbonato Anhidro de Sodio.
Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.
El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O). El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en solución. En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetohexosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario enólico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cúprico). 2)O) y la trehalosa (enlace α(1 1)O), no dan positivo puesto que sus OH del C anoméricos están siendo utilizados en el enlace glucosídico. Los disacáridos como la sacarosa (enlace α (1
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En resumen, se habla de azúcares reductores cuando tienen su OH del C anomérico libre, y éstos son los que dan positivo en la prueba de Benedict. AZUL DE METILENO: La tinción es un método utilizado para estudiar microorganismos ya que se observa morfología, estructura y agrupamientos de los mismos. Existen diferentes tipos de tinción, en este caso , la tinción simple utiliza un solo colorante como puede ser el azul de metileno el cual se usa para observar bacterias y levaduras las cuales difieren desde el punto de vista químico de su medio exterior y por eso se tiñen contrastando con su alrededor. FORMOL 10%:
El formaldehido o metanal es un compuesto químico, más específicamente un aldehído (el más simple de ellos) es altamente volátil y muy inflamable, de fórmula H2C=O. Fue descubierto en 1867 por el químico sirio Jhon Alchaer. Se obtiene por oxidación catalítica del alcohol metílico. A temperatura normal es un gas (en C.N.P.T.) incoloro de un olor penetrante, muy soluble en agua y en esteres. Las disoluciones acuosas al ≈
40 % se conocen con el nombre de formol, que es un líquido incoloro de olor penetrante y sofocante; estas disoluciones pueden contener alcohol metílico como estabilizante. Puede ser comprimido hasta el estado líquido; su punto de ebullición es 21 °C DESARROLLO METODOLOGICO RECURSOS MATERIALES DE LABORATORIO: • Tubo de ensayo16x20 • Tubo de fermentación • Pipeta Pasteur • Gradillas • Mechero • Pinzas para tubo de ensayo • Vaso de precipitado • Pitillos • Cronometro
MATERIAL BIOLÓGICO: • Levadura de pan • Suspensión de levadura en sacarosa al 5% • Jugo de naranja
REACTIVOS: • Solución acuosa de azul de bromotimol • Reactivo de benedict • Solución acuosa de azul de metileno
• Formol 10%
PROCEDIMIENTO A. RESPIRACION ANAEROBIA B. RESPIRACION AEROBIA RESULTADOS I. RESPIRACION ANAEROBIA. Luego de llenar hasta la mitad un tubo de ensayo con suspensión de levadura (figura 1), agregarle 3 gotas de azul de metileno hasta quedar totalmente teñido (figura 2), más formol al 10%, obtuvimos los siguientes resultados: El formol agregado a la suspensión de levadura se ubico en el fondo, generando la aparición de glóbulos de grasas, los cuales presentaron una coloración violeta (figura 3). Figura 1 figura 2 figura 3 Después en otro tubo de ensayo agregamos 3 ml de jugo de naranja (figura 4) y un ml de reactivo de benedict (figura 5) presentando este una coloración distribuida en dos capas arriba un color amarillo verdoso y abajo un verde viche. Figura4 figura 5 Después llevamos a baño de maría (figura 6) y observamos los siguientes resultados: El tubo que contenía estas sustancias después de ser introducido en baño de maría reacciono de forma positiva, es decir, cambio su coloración inicial a un naranja claro, indicando la presencia de un azúcar reductor (figura 7). Figura 6 figura 7 En otro tubo de ensayo agregamos 3ml de jugo de naranja y 3ml de suspensión de levadura (figura 8), dejamos reposar por 5 minutos y agregamos reactivo de benedict (figura 9) en esta primera acción no hubo reacción. Figura 8 figura 9 Llevamos a baño de maría por 10 min y observamos que no hubo reacción, pues no cambio su coloración (figura 10).Comparamos los dos tubos y encontramos que el primero presento una reacción positiva y el otro negativa (figura 11). Figura 10 figura 11 Actividad y vaso Respiración por minuto Cambios en el vaso Imágenes
1. en reposo 17 Tomo un color azul verdoso 2. caminando 30 Tomo un color azul mas oscuro 3. ejercicio intenso 47 Tomo un color azul fuerte 1 ANÁLISIS DE RESULTADOS. RESPIRACION ANAEROBIA a. El formol mata a las levaduras e impide que la fermentación se lleve a cabo, por ello las levaduras se depositan en el fondo del tubo de ensayo, este al matar la levadura libera los portones de H+ que se encuentran en la solución de azul de metileno ya que este toma un color verdeazulado, reemplazando los oxígenos. b. Al adicionarle el reactivo de Benedict al jugo de naranja nos permite detectar un cambio inmediato de color los cual nos permitió analizar que contenía azúcares reductores la solución ya que el jugo de naranja contiene cantidades de azúcar por lo que la prueba da como resultado positiva como se menciono anteriormente. El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en solución. Es posible observar que la fructosa(una cetopentosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza(pasando por un intermediario enólico) a glucosa(que es capaz de reducir al ion cúprico) c. Al agregarle la levadura al jugo de naranja detectamos que la levadura Al momento de agregarle la levadura al jugo de naranja esta comienza a degradar o comerse el azúcar que contiene el jugo de naranja debido a lo cual al agregarle el benedict no se presentó ninguna reacción o ningún cambio de color ya que como dijimos anteriormente el benedict es un reactivo que reconoce los azucares y en ese momento ya no había presencia de azúcar debido a que la levadura ya habría acabado con ella. RESPIRACION AEROBIA Al analizar este procedimiento nos damos cuenta que el oxigeno que inhalamos es llevado hacia las cavidades pulmonares donde este pasara por diferentes reacciones metabólicas en el cual será convertido en bióxido de carbono CO2 para luego expulsarlo al medio El C02 es detectado por el azul de bromotimol. Ya que una de las propiedades del azul de bromotimol es medir el PH. Entre más claro se vea, es mayor la concentración de
CO2. Después del ejercicio estaba claro porque había CO2, sin embargo 2 minutos después estaba aún más claro, lo que significa que había una mayor concentración y esto nos indica que la persona que realizó el experimento tiene mala condición física. Cuando es azul el ambiente es alcalino, pero se torna amarillo en un ambiente ácido, cuando hay CO2 en el agua forma ácido carbónico lo cual sucedió en este experimento. Cuando se realiza ejercicio, la frecuencia respiratoria se incrementa para poder captar mayor oxígeno. Cuando el ejercicio se realiza en exceso, el oxígeno no resulta suficiente para poder llevar a cabo la ruptura de la glucosa, por lo cual los músculos llevan a cabo el proceso de fermentación láctica. Esto produce ácido láctico y es responsable del dolor que se siente después de haber realizado mucho ejercicio. CONCLUSIÓN Durante esta práctica se observó y comprobó que todos los seres vivos realizan el proceso de la respiración, ya sea aerobia o anaerobia. En la respiración aerobia se obtiene energía (ATP) a partir de la ruptura de la glucosa en presencia de oxigeno y en la anaerobia sin presencia de oxígeno.Con los tubos se pudo comprobar que en la respiración anaerobia hay desprendimiento de iones de hidrogeno sin la intervención del oxigeno. Cuando se dejó jugo de naranja con levaduras, estas fermentaron la glucosa del jugo. Al final de la práctica con el reactivo de Benedict se observó y comprobó que la cantidad de glucosa era mucho menor que en el tubo 2 que contenía jugo de naranja únicamente. Esto también demostró que en esta fermentación alcohólica se degrada la glucosa hasta obtener alcohol. Se demostró que en la respiración hay desprendimientos de iones de hidrogeno, con la intervención del oxígeno. Esto se puede hacer notar cuando un integrante del equipo tomó sus respiraciones por minuto en reposo, caminando y después de subir escaleras. Al respirar, se expulsa vapor de agua ya que el hidrogeno se une al oxígeno. Cuando se hace actividad física como caminar o subir escaleras las respiraciones aumenta para poder captar más oxígeno y poder obtener más energía. Se observó y relacionó el proceso de la respiración celular con el intercambio de gases al respirar. En el proceso de respiración, exhalamos CO2, esto se pudo observar al soplar aire a una solución de azul de bromo timol. Al entrar en contacto con CO2 se tornaba de un color más claro. Finalmente, como hemos mencionado anteriormente, los efectos que tiene el ejercicio sobre la respiración es: incremento de las respiraciones por minuto, mayor cantidad deCO2 exhalado, y la respiración anaerobia en forma de fermentación láctica en los músculos. BIBLIOGRAFÍA Blanco Prieto F. Manual del Laboratorio de Química. Gráficas Cervantes. Salamanca, 1983. García JL. Experiencias básicas en la enseñanza de las ciencias de la naturaleza II. Instituto de la educación. Universidad de Santander. Santander, 1980.
Gutiérrez R. et al. Enseñanza de las ciencias en la educación intermedia. Ed. Rialp. Madrid, 1990. http://blafar.blogia.com/2007/040901-los- pigmentos-vegetales.php http://www.botanica.cnba.uba.ar/Trabprac/Tp6/Pigmentos.htm J. Azcón-Bieto, M. Talón (eds.). Fundamentos de Fisiología Vegetal. Madrid: McGrawHill/Interamericana, Edición Universitat de Barcelona, 2000. B.B. Buchanan, W. Gruissem, R. Jones.Biochemistry and Molecular Biology of plants.Rockville (USA): American Society of Plant Physiologists, 2000. ANEXOS CUESTIONARIO 1- ¿qué sucede durante el fenómeno de la fermentación? La fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, que no requiere oxígeno, siendo el producto final un compuesto orgánico. Estos productos finales son los que caracterizan los diversos tipos de fermentaciones. La fermentación en este caso generada por la levadura un micro organismo vivo que fermenta principalmente azucares, se alimenta de la sacarosa que se utilizó para preparar esta solución convirtiéndola así en alcohol más dióxido de carbono. 2- ¿cuál es la utilidad de la fermentación alcohólica en la industria? La fermentación alcohólica en la industria es de gran utilidad para ellos porque permite convertir ciertas sustancias orgánicas como la glucosa, la sacarosa, el almidón y otros carbohidratos Con respecto a las bebidas alcohólicas en la elaboración de vinos. El proceso mediante el cual es producido vino es el siguiente: La elaboración del vino puede tener como materia prima cualquier fruta o vegetal con alto contenido de azúcares pero se asocia a los vinos de calidad con uvas. •La fermentación de estas uvas es llevada a cabo por levaduras silvestres (presentes de
forma natural en las uvas) o por lo general Saccharomyces cerevisiae.
•Luego de fermentado estas levaduras son separadas del vino por sedimentación. •El vino se añeja.
Este proceso se realiza en las levaduras, las levaduras son microorganismos unicelulares que consiguen su energía por medio de la fermentación alcohólica, en la que rompen las moléculas de glucosa para obtener energía para así poder sobrevivir y producen alcohol como consecuencia de la fermentación. De la fermentación
alcohólica se obtiene muchos productos como por ejemplo: vino, cerveza, alcohol, cigarrillos, chocolate, pan y otros. 3- ¿qué diferencias logra encontrar en el ensayo de la respiración aerobia, en las tres situaciones experimentales? Las diferencias más visibles que se logran encontrar en el desarrollo de estas tres experiencias son: El contenido de una respiración en las tres actividades es diferente. La coloración de los líquidos presentes en los vasos fue cambiando proporcionalmente a medida que aumenta el contenido de respiración. 4- ¿qué sustancias detecta el azul de bromotimol? ¿en el caso del experimento donde se uso el reactivo, cual fue la sustancia que detecta? El azul de bromotimol es un indicador de pH que en la solución de ácido se vuelve amarillo, en solución básica se convierte en una solución de azul y neutro se vuelve verde. Es ligeramente soluble en agua, soluble en alcohol y soluciones acuosas de álcalis. También es soluble en éter etílico . Menos soluble en benceno , tolueno y xileno . Prácticamente insoluble en éter de petróleo . El azul de bromotimol como se mencionó anteriormente es un reactivo que reconoce o indica el pH de ciertas sustancias tornándolas en colores específicos, en este ensayo identifico el pH de un medio básico es decir el hidróxido de sodio el cual se utilizó para pacificar la solución