Universidad Andrés Bello Facultad de Ciencias de la salud Departamento de ciencias biológicas Laboratorio de biología celular BIO0!
"raba#o "raba#o $ractico %& ' ()itosis* )eiosis + Fecundación,
%ombres- .aviera Acevedo /alentina /alentina Almendra $roesores- )aría .osé Día1 )auricio )aurici o /aldivia 2ección- 3 Fec4a- 0560'67089
Introducción De acuerdo a la teoría celular establecida por el biólogo alem:n ;udol /irc4o en el siglo istentes se dividen a través de una serie ordenada de pasos denominados ciclo celular? en el la célula aumenta su tama@o* el nmero de componentes intracelulares proteínas + organelos* duplica su material genético + inalmente se divide= l ciclo celular se divide en dos ases8 Interase* Eue consta dea= Fase de síntesis 2- n esta etapa la célula duplica su material genético para pasarle una copia completa del genoma a cada una de sus células 4i#as= b= Fase 8 + 7 intervalo- ntre la ase 2 + ) de cada ciclo 4a+ dos ases denominadas intervalo en las cuales la célula est: mu+ activa metabólicamente* lo cual le permite incrementar su tama@o aumentando el nmero de proteínas + organelos* de lo contrario las células se 4arían m:s peEue@as con cada división= 8 7 Fase ) )itosis- n esta ase se reparte a las células 4i#as el material genético duplicado* a través de la segregación de los cromosomas= La ase )* para su estudio se divide ena= $roase- n esta etapa los cromosomas constituidos de dos crom:tidas 4ermanas se condensan en el ncleo* mientras en el citoplasma se comien1a a ensamblar el 4uso mitótico entre los centrosomas= b= )etaase- Comien1a con el rompimiento de la membrana nuclear* de esta manera los cromosomas se pueden unir al 4uso mitótico mediante los cinetocoros= Una ve1 unidos* los cromosomas se alinean en el ecuador de la célula centro= c= Anaase- 2e produce la separación de las crom:tidas 4ermanas* las cuales migran 4acia los polos opuestos de la célula= d= "eloase- $osterior a la migración* comien1a a ormarse la envoltura nuclear= e= Citocinesis- Finalmente se divide la célula mediante el anillo contr:ctil de actina + miosina* produciendo dos células 4i#as* cada una con el numero completo de cromosomas= 8
Cuando +a no se reEuieren m:s células* estas entran en un estado denominado 0* en el cual abandonan el ciclo celular + entran en un periodo de latencia* lo cual no signiica Eue entren en reposo +a Eue éstas células presentan un metabolismo activo* pues si estas células reciben el estimulo adecuado abandonan el estado 0 + entran al 8= 8
Ob#etivos
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;eali1ar preparaciones rescas de gametos masculinos + emeninos de molusco= Observar una ecundación in vitro= Identiicar estructura de los gametos de molusco= Identiicar las etapas de la mitosis + sus características principales= Observar + comparar espermato1oides de toro con los espermato1oides de molusco + los espermato1oides de 4umanos= Identiicar los componentes del ovario de rata= Identiicar los componentes del testículo de rata=
)ateriales + )étodos
Actividad 8- (>tracción de gametos masculinos + emeninos de c4oro maltón, 2e prepararon las primeras muestras para la e>tracción de gametos de c4oros vivos los cuales se mantuvieron en un acuario con agua de mar iltrada con o>igenación + Eue previo a la actividad se colocaron en una bande#a con 4ielo para la no descomposición + me#or preservación de estos adem:s de acilitar de esta orma la manipulación de ellos= $ara tener acceso a las gónadas se reali1ó un corte a través de la unión de las conc4as Eue cubren a los c4oritos + donde luego para la identiicación de cada una de ellas ue necesario observar el manto de los c4oritos los cuales presentan un color característico dependiendo de su se>o* donde los mac4os presentaran gónadas en color amarillo + las 4embras en color caé oscuro? luego de determinar esto se procedió a la e>tracción de los gametos donde se ue presionando suavemente en la 1ona de la gónada + aspirando con una pipeta $asteur la solución acuosa Eue en el caso de los mac4os se encontraba en color blanEuecino solución enriEuecida en espermato1oides maduros + en las 4embras en color negro solución enriEuecida en óvulos maduros= 2e depositaron ambas muestras en dos distintas placas de vidrio rotuladas + se les agregaron c4orritos de agua de mar iltrada con el ob#eto de re suspender los gametos en la solución + así evitar la des4idratación= Utili1ando pipetas $asteur se prepararon muestras= a )uestra 82e tomaron algunos ml de gametos emeninos con una pipeta $asteur + se depositó una gota de ellos en el portaob#etos + se cubrió con un cubreob#etos* se colocó la muestra en el microscopio donde ue enocada en un aumento total de 900>* se tomaron las anotaciones correspondientes + se dibu#ó lo observado= b )uestra 7- 2e tomaron algunos ml de gametos masculinos con una pipeta $asteur + se depositó una gota de ellos en el portaob#etos + se cubrió con un cubreob#etos* se colocó la muestra en el microscopio donde ue enocada en un aumento total de 900>* se tomaron las anotaciones correspondientes + se dibu#ó lo observado= c )uestra - 2e tomaron algunos ml de gametos emeninos + masculinos con una pipeta $asteur + se depositó una gota de cada uno de ellos en el portaob#etos de tal manera de reali1ar una ecundación in vitro + se cubrió con un cubreob#etos* se colocó la muestra en el microscopio donde ue enocada en un aumento total de 900>* se tomaron las anotaciones correspondientes + se dibu#ó lo observado=
Actividad 7- ()uestras i#as de gametogénesis, 2e usaron muestras i#as de ovario de rata + testículo de rata* los cuales ueron observados con el ob#etivo de inmersión* para esto se puso sobre la muestra una gota de aceite de inmersión + se enocó con el ob#etivo de 800>* las muestras ueron observadas en un aumento total de 8000>* a in de identiicar las estructuras presentes= Actividad - (ametos masculinos,
2e utili1ó una muestra i#a de espermato1oides de toro* la cual ue observada con el ob#etivo de inmersión* en un aumento total de 8000>* a in de identiicar su estructura= Actividad 9- (tapas de la mitosis, 2e tomó una muestra i#a de raí1 de cebolla la cual est: en constante división mitótica* esta muestra se observó con el ob#etivo de inmersión* en un aumento total de 8000>* a in de identiicar las etapas de la mitosis=
;esultados
Actividad 8- (>tracción de gametos masculinos + emeninos de c4oro maltón, (Gvulos de c4oro maltón,
Ovulo
Hona pelucida
Imagen 1.a “óvulos de choro maltón”, circunferencias color café y café claro son la zona pelucida y el ovulo.
Muestra observada en un aumento total de 400x se aprecian dos gametos femeninos de chorito maltón en un color café claro se observa un ovulo y rodeando a este se encuentra lo zona pelucida lo cual se observa en un color café más oscuro, al redor del ovulo se encuentra el medio acuoso que está conformado por agua de mar ltrada de un color rosado claro!
(spermato1oides de c4oro maltón,
Burbu#as de aire
spermato1oides
Imagen 1.b: “espermatozoides de choro maltón”, formas circulares de color transparente.
n la muestra observada en un aumento total de 900> se pueden observar gametos masculinos de c4orito maltón distinguiéndose solo cabe1as de espermato1oides de color caé claro Eue est:n esparcidos en toda la muestra* luego se observa dos óvalos de un color oscuro los cuales se tratan de una gota de agua + est:n ubicados uno al costado superior de la muestra + otro en el centro de ella=
(Fecundación de c4oro maltón,
Hona pelucida
spermato1oides
Imagen 1.c: “fecundación choro maltón”, se observa en forma circular la zona pelucida y el ovulo, y peue!os c"rculos transparentes, los espermatozoides.
n la muestra observada en un aumento total de 900> se pueden identiicar gametos emeninos de c4orito maltón de color caé + de orma circular* un ovulo* rodeando a este se encuentra la 1ona pelucida Eue se observa caé oscuro* alrededor del ovulo se encuentran los gametos masculinos de c4orito maltón Eue se ven en un color mu+ claro casi transparente por lo cual no se pudieron identiicar sus partes= "ambién se observa una solución acuosa alrededor del ovulo la cual se trata de agua de mar iltrada=
Actividad 7- ()uestras i#as de gametogénesis,
(Ovario de rata,
Imagen #.a: “ovario de rata”
("estículo de rata,
Imagen #.b: “test"culo de rata
Actividad - (ametos masculinos,
(spermato1oides de toro,
Flagelo
Acrosoma
Imagen $: se observan filamentos delgados, los flagelos y una cabeza de forma triangular, el acrosoma.
Actividad 9- (tapas de la mitosis, ()itosis- $roase,
$ared celular
Cromatina en condensación
Imagen %.a: muestra de ra"z de cebolla en la etapa de la mitosis: profase, observada en un aumento total de 1&&&'.
2e observan las células de la raí1 de cebolla* su orma es rectangular* esta orma est: dada por las paredes celulares* la orma circular observada dentro de las células son los ncleos* en el cual se puede apreciar ilamentos inos de color caé oscuro de apariencia (enredada,* esto es la condensación de la cromatina* la cual al inali1ar ormara los cromosomas=
()itosis- )etaase,
"ared
Cromosomas en el ecuador
uso mitótico
Imagen %.b: muestra de ra"z de cebolla en la etapa de la mitosis: metafase, observada en un aumento total de 1&&&'.
2e observan las células de la raí1 de cebolla* su orma es rectangular* esta orma est: dada por las paredes celulares* la orma circular observada dentro de las células son los ncleos* en color negro se observan los cromosomas ubicados en el centro o ecuador de la célula línea vertical* en color caé claro a los lados de los cromosomas dispuestos en el ecuador se encuentra el comple#o de microtbulos conocido como 4uso mitótico* orientados de polo a polo de la célula=
()itosis- Anaase, $ared celular
uso mitótico
Cromosoma en polo opuesto
Imagen %.c: muestra de ra"z de cebolla en la etapa de la mitosis: anafase, observada en un aumento total de 1&&&'.
2e observan las células de la raí1 de cebolla* su orma es rectangular* esta orma est: dada por las paredes celulares* la orma circular observada dentro de las células son los ncleos* en color negro se observa dos estructuras con orma de mitad de circulo* estos son los cromosomas Eue +a 4an migrado a los polos opuestos de la célula* los ilamentos de color caé claro son el 4uso mitótico* gracias a su movimiento los cromosomas pueden migrar a los polos desde el ecuador=
()itosis- "eloase,
%cleos nuevos en proceso de separación
$ared celular
Imagen %.d: muestra de ra"z de cebolla en la etapa de la mitosis: telofase, observada en un aumento total de 1&&&'.
2e observan las células de la raí1 de cebolla* su orma es rectangular* esta orma est: dada por las paredes celulares* la orma circular observada dentro de las células son los ncleos* dentro de este se observan dos círculos m:s peEue@os* los ncleos de las dos nuevas células* los cuales est:n separ:ndose mediante la ormación de la membrana nuclear de cada ncleo=
Discusión Actividad 8 (>tracción de gametos de c4orito maltón,
Gvulo- en la muestra se pueden observar gametos emeninos de c4orito maltón los cuales se obtuvieron al in+ectar agua de mar iltrada para e>traer una muestra de óvulos vivos* sino se 4ubiera aplicado una solución apropiada para la muestra* est: 4ubiera muerto= Una ve1 sacada la muestra + llevaba al microscopio se pudo observar óvulos maduros el cual se reconoce por su orma + tama@o por esto se cree Eue el c4orito maltón estaba en una etapa de vida de adultoJ#oven= n la imagen también se observó un lugar se la muestra un poco m:s oscuro el cual se cree Eue se trata principalmente por un eecto de la lu1 del microscopio= spermios- en la imagen c4orito maltón se pudo observar nada m:s Eue cabe1as de espermato1oides* lo cual se debe principalmente al ba#o aumento en el Eue observo la muestra +a Eue al ser una muestra viva no se pudo observar a m:s de 900> en el microscopio = Al momento de observar la muestra en el microscopio se observó a los espermato1oides con un leve movimiento* esto se debe a Eue los c4oritos maltón estaban sometidos a ba#as temperaturas lo Eue provocó Eue los espermato1oides estuvieran débiles* a medida Eue transcurrió el tiempo estos empe1aron a producir m:s movimiento lo Eue se debe al calor Eue transmitió el microscopio Fecundación- en esta actividad se me1claron los gametos emeninos óvulos + masculinos espermato1oides de c4orito maltón para producir un enómeno llamado ecundación el cual se logra me1clando una muestra de gametos emeninos óvulos + una muestra de gametos masculinos espermato1oides= 2in embargo* a pesar de reali1ar estos pasos no se produ#o la ecundación* por lo Eue se cree Eue principalmente se debe a Eue el c4orito maltón estaba sometido a ba#as temperaturas provocando Eue sus gametos principalmente los espermato1oides estuvieran inmóviles o dormidos* por lo cual no podían transportarse de la orma m:s óptima + tampoco tenían la uer1a suiciente como para atravesar + ecundar el ovulo del c4orito maltón= "al ve1 si se 4ubieran sometido m:s tiempo a la lu1 la muestra* generando un aumento de la temperatura la ecundación se 4ubiera producido e>itosamente=
Actividad 7- ()uestras i#as de gametogénesis,
Actividad - (ametos masculinos- espermato1oides de toro, Los espermato1oides vistos en el microscopio permanecían Euietos debido a Eue la muestra era de tipo permanente= stos son células 4aploides Eue constitu+en el gameto masculino en animales orm:ndose en el interior de los testículos= Las paredes de estos
tbulos se encuentran tapi1adas de espermatogonias* las cuales* por meiosis* se transorman en espermato1oides= stos est:n compuestos por cuatro partes undamentales Eue son? la cabe1a* Eue contiene el proncleo* el cuello Eue contiene una placa basal Eue los separa de la cabe1a + los centriolos modiicados* la parte intermedia* Eue posee una gran cantidad de mitocondrias + la cola o lagelo Eue le proporciona movilidad= Las principales dierencias Eue encontramos entre estos espermato1oides son principalmente en cuanto a lo Eue es tama@o + cantidad= Los espermato1oides poseen una cabe1a* compuesta por el acrosoma* el ncleo + 7 centriolos* un cuello + un lagelo= n la cabe1a encontramos 7 partesJl acrosoma- s un peEue@o deposito ubicado en la parte apical de la cabe1a del espermato1oide* este contiene en1imas 4idrolíticas* principalmente la 4ialuronidasa* estas a+udan al espermato1oide a penetrar en el ovulo= Jl ncleo- Ubicado en la 1ona basal de la cabe1a este* contiene el material genético Eue aportara este gameto al embrión* si es Eue llega a ecundar el ovulo= La cabe1a termina cuando empie1a el cuello* este punto est: dado por 7 centriolos= Luego viene el cuello* aEuí encontramos un gran nmero de mitocondrias* estas le proporcionan al espermato1oide la energía* en orma de A"$* necesaria para poder despla1arse + penetrar en el ncleo= Luego lo sigue la cola* este es un lagelo* el cual se encarga de darle el movimiento al espermato1oide= n los espermios de c4oro maltón se visuali1aron cientos de espermato1oides vivos* los cuales presentaban gran movilidad en la muestra* los Eue ueron sacados de la gónada m:s blanEuecina del molusco + en esta muestra también no 4a+ muc4as dierencias en cuanto a los espermios de toro +a E se logran ver miles de espermios con sus respectivas estructuras pero estas en un tama@o muc4o m:s reducido a los espermios de toro en la muestra de espermios de c4oro maltón es casi imposible visuali1ar las colas de los espermios solo se visuali1an las cabe1as Eue so+ mu+ seme#ante a una gota de agua pero en movimiento= = La producción + maduración de las células se>uales masculinas se relaciona directamente con el tama@o de los testículos Eue en este caso sería ma+or en el toro
Actividad 9- (tapas de la mitosis, La mitosis es el proceso de distribución del material 4ereditario entre las células 4i#as* lo cual ocurre durante la división celular en organismos eucariontes=
La mitosis no es sino parte de un ciclo total Eue inclu+e el periodo en el cual no 4a+ división celular= ste periodo se denomina interase= Durante la interase se duplica AD%= Lo importante de este proceso es Eue* al duplicarse el material nuclear ocurre una copia e>acta de la inormación genética* para luego ser distribuido por igual en los dos ncleos Eue ormaran las dos células 4i#as* las cuales por consiguiente tendr:n una composición genética idéntica= sta etapa no se logró apreciar a través del microscopio +a Eue el AD% no est: lo suicientemente compactado para poder ser distinguido en el ncleo= l resto del proceso de la división celular se divide en cuatro partes$roase- Al inicio de la proase dentro del ncleo se 4acen visibles las ibras de cromatina* las cuales se acortan + engruesa se condensan= stas ibras son dobles* ormadas por dos 4ilos de cromatina llamado crom:tidas* estas continan condens:ndose 4asta ormar cromosomas= l nucléolo desaparece* en las células vegetales* como en nuestra muestra se orma el casEuete polar 4omologo a los centriolos en células animales* de estas sale + se orma el 4uso mitótico= n nuestra muestra nos ue posible distinguir las ibras de cromatina= l casEuete polar no se logró identiicar + suponemos Eue debido a una alta de tinción en la muestra Eue permitiera reconocerlo= )etaase- Durante esta ase los cromosomas se locali1an en el ecuador de la célula* distribuidos en un solo plano* gracias al 4uso mitótico el cual se (enganc4a,, a los cromosomas a través de su centrómero= n nuestra muestra pudimos apreciar todo lo anteriormente descrito= Anaase- Cuando los cromosomas comien1an a separarse se inicia la anaase* es decir los cromosomas migran a los polos opuestos de la célula* movimiento permitido por las ibras del 4uso mitótico= n nuestra muestra se observó claramente los cromosomas en cada polo opuesto de la célula= "eloase- Los cromosomas se encuentran en los polos e inician un proceso inverso de dierenciación* conclu+éndolo con la ormación de los ncleos 4i#os* reaparecen el nucléolo + una nueva membrana nuclear= l 4uso desaparece= n nuestra muestra observamos los dos ncleos de las células 4i#as en una misma célula* el proceso Eue le sigue es la citocinesis* en el cual se produce un estrangulamiento del citoplasma dividiéndolo en las dos células 4i#as= 9
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