KROMATOGRAFI
KROMATOGRAFI FLUIDA SUPERKRITIK
Vivayanti Nurhidayah 3 Analis 3
SEKOLAH MENENGAH KEJURUAN NEGERI 7 BANDUNG 2011
KROMATOGRAFI FLUIDA SUPERKRITIK
Ketika kromatografi cairan superkritis pertama kali dikembangkan pada tahun 1960, itu dianggap sebagai kromatografi fiksi ilmiah dan teknik pemisahan revolusioner. Tapi reputasinya telah surut perlahan-lahan selama bertahun-tahun dan sekarang bergerak maju dengan pesat sebagai metode analisis yang stabil dengan banyak keuntungan dibandingkan metode kromatografi yang ada. kromatografi cairan Superkritic lebih fleksibel daripada kromatografi cair kinerja tinggi, lebih biaya-efisien, user friendly, dengan throughput yang lebih tinggi, resolusi yang lebih baik dan waktu analisa lebih cepat dari umum metode kromatografi cair. Instrumentasi yang diperlukan untuk kromatografi cairan superkritis ini serbaguna karena kompatibilitas multi-detektor nya. Karena ini, kromatografi cairan superkritis telah membentuk ceruk di industri farmasi. Pasal ini review dasar-dasar, instrumentasi dan aplikasi bervariasi dari kromatografi cairan superkritis di arena analitis. Fenomena dan perilaku cairan superkritis (SCF) telah menjadi subyek hak penelitian dari 1800an. Hanny dan Hogarth pada tahun 1879 menunjukkan kelarutan pertama di (SCF) tetapi saran pertama dari kromatografi cairan superkritis (SFC) ini diajukan pada tahun 1958 oleh Lovelock. Pada tahun 1962 Klesper Corvin dan Turner digunakan SFC untuk pemisahan porfirin. Giddings pada tahun 1966 dan rijender sie pada tahun 1967 bertanggung jawab untuk pengembangan lebih lanjut dari SFC. jentoft dan Gouw pada tahun 1972 berhasil dilakukan analisis campuran minyak bumi yang diperoleh SFC. Novotny and Lee et al. mendemonstrasikan percobaan pertama di SFC kapiler pada tahun 1982. Kolom ini dikemas komersial pertama SFC dibuat tersedia pada tahun 1981 dan komersial pertama instrumen kolom kapiler SFC diperkenalkan pada tahun 1985 1. Super Kritis cairan: Dana Amentals dan Properties Fluida superkritik dapat didefinisikan dari diagram fase untuk zat murni (Gambar 1), di mana daerah yang sesuai untuk negara padat, cair dan gas jelas. Suatu zat seperti CO 2 dapat eksis dalam, cair dan gas fase padat di bawah berbagai kombinasi suhu dan tekanan. Untuk substansi setiap ada suhu di atas yang tidak bisa lagi eksis sebagai cairan, tidak peduli berapa banyak tekanan diterapkan. Demikian juga, ada tekanan atas yang substansi tidak bisa lagi eksis sebagai gas tidak peduli seberapa tinggi suhu dinaikkan. Titik-titik kritis disebut suhu dan tekanan kritis masing-masing 2 dan menentukan batas-batas pada diagram fase untuk zat murni. Pada titik ini, cairan dan uap memiliki kerapatan yang sama dan cairan tidak dapat dicairkan dengan meningkatkan tekanan tersebut. Di atas titik ini, di mana tidak ada perubahan fasa terjadi, substansi bertindak sebagai fluida superkritis. Jadi SCF dapat digambarkan sebagai cairan yang diperoleh dengan pemanasan di atas suhu kritis dan menekan di atas tekanan kritis 3. Ada
transisi terus menerus dari cair ke SCF dengan meningkatnya suhu pada tekanan konstan atau dari gas ke SCF oleh meningkatnya tekanan pada suhu konstan. Istilah ini, cairan dikompresi sering digunakan untuk menggambarkan cairan superkritis, cairan kritis dekat, suatu cairan diperluas atau gas terkompresi yang sangat .
Gambar. 1: Tahap Diagram untuk Zat Murni Penting Sifat cairan KRITIS Super
4
5
SCFs memiliki kerapatan yang tinggi (0.2-0.5gm/cm 3) karena yang mereka memiliki kemampuan luar biasa untuk membubarkan besar, molekul non-volatile, misalnya, SC - CO 2 mudah larut n-alkana yang mengandung 30 atom karbon sampai 5, di -ftalat n-alkil dengan kelompok dialkyl mengandung 4-16 atom karbon dan senyawa aromatik polisiklik dan beberapa dengan cincin banyak. Solvation strength of SCF is directly related to the fluid density. Solvasi SCF kekuatan secara langsung berkaitan dengan jenis fluida. Jadi kelarutan padat dapat dimanipulasi dengan membuat perubahan-perubahan kecil dalam suhu dan tekanan. Proses penting tertentu didasarkan pada kelarutan tinggi spesies organik di SC-CO 2, misalnya, telah digunakan untuk mengekstraksi kafein dari biji kopi untuk mendapatkan kopi tanpa kafein dan untuk mengekstraksi nikotin dari rokok tembakau. Suatu sifat penting kedua adalah bahwa analit SCFs terlarut dapat dengan mudah ditemukan dengan hanya membiarkan solusi untuk menyeimbangkan dengan suasana pada temperatur rendah, untuk contoh analit larut dalam SC-CO 2 dapat dipulihkan hanya dengan mengurangi tekanan dan memungkinkan untuk menguap dalam kondisi laboratorium ambien. Properti ini berguna dengan analit termal tidak stabil. Keuntungan lain dari SCFs banyak adalah bahwa mereka murah, berbahaya, ecofriendly dan tidak beracun. Dengan SCFs di tangan, tidak ada kebutuhan dari setiap pelarut organik. Akhirnya SCFs memiliki keunggulan konstanta difusi yang lebih tinggi, dan viskositasnya lebih rendah dibandingkan dengan pelarut cair. Viskositas rendah berarti bahwa tekanan drop di
kolom untuk laju alir yang diberikan sangat berkurang. The diffusibility besar berarti lagi panjang kolom dapat digunakan. Tinggi koefisien difusi berarti kecepatan analisis yang lebih tinggi yang meningkat dalam urutan HPLC, SFC dan GC. Kelebihan tersebut yaitu penting dalam keduanya, kromatografi dan ekstraksi dengan SCFs. SCFs yang menemukan aplikasi dalam fraksinasi minyak tekanan uap rendah, dalam beberapa reaksi dalam berbagai bidang biokimia, kimia polimer, ilmu lingkungan serta makanan, polimer dan industri bahan 5. Tabel I: SCFs memiliki kerapatan, viskositas dan properti lainnya yang antara antara mereka suatu zat dalam bentuk gas dan cair 6 Properti Densitas (g / cm
3)
Gas (STP) Gas (STP) SCF -3 (0.6-2) x 10 (0,6-2) x 10 0.2-0.5 0.2-0.5
Cair 0.6-2 0.6-2
-3
Koefisien difusi
(1-4) x 10 -1 (1-4) x 10 -1
10 -3 x 10 - 4 10 -3 x 4
10-
(0.2-2) x 10 -5 (0,2-2) x 10 -5
(cm 2 /s) (Cm 2 / s) Viskositas (Cm G -1 s - (1-4) x 10 - 4 (1-4) x 10-4
(1-3) x 10 - 4 (1-3) x 10- (0.2-3) x 10 -2 (0,2-3) x 10
1)
4
-2
Tabel II: Kritis dari beberapa sifat umum digunakan SCFs 7, 8 Cairan Temperatur kritis (K) Kritis Tekanan (bar) Karbon dioksida 304.1 304.1 73.8 73.8 Etana 305.4 305.4 48.8 48.8 Etilena 282.4 282.4 50.4 50.4 Propana 369.8 369.8 42.5 42.5 Propylene 364.9 364.9 46.0 46.0 Trimethoflurane 299.3 299.3 48.6 48.6 Chlorotrifluoromethane 302.0 302.0 38.7 38.7 Trichloromethane 471.2 471.2 44.1 44.1 Amonia 405.5 405.5 113.5 113.5 Air 647.3 647.3 221.2 221.2 Sikloheksana 553.5 553.5 40.7 40.7 n-Pentana 469.7 469.7 33.7 33.7 Toluena 591.8 591.8 41.0 41.0 Kedua cairan superkritis kepentingan tertentu, karbon dioksida dan air.
Karbon dioksida 9 Ini adalah tidak mudah terbakar, tidak beracun dan ecofriendly pelarut dengan suhu kritis rendah 304K dan tekanan kritis moderat 73bar.It adalah larut dengan berbagai pelarut organik, dan siap pulih setelah pengolahan. Sebagai itu molekul kecil dan linier, itu berdifusi lebih cepat daripada pelarut cair konvensional. Hal ini sering digunakan untuk menggantikan freon dan pelarut organik tertentu. Air 9 Ini memiliki temperatur kritis 647K dan tekanan kritis 220bar karena polaritas tinggi. Karakter air pada perubahan kondisi superkritis dari satu yang mendukung hanya spesies ion pada kondisi kamar untuk satu yang melarutkan parafin, aromatik, gas dan garam. Karena properti ini unik, penelitian telah dilakukan pada air superkritis untuk proses reaksi dan pemisahan untuk mengolah air limbah beracun. Pengendalian reaksi yang bergantung pada konstanta dielektrik dari sebuah medium juga mungkin dalam air superkritis sebagai perubahan dielektrik yang konstan dari sekitar 78 pada suhu kamar dan tekanan atmosfer sekitar 6 pada kondisi kritis. Pilihan akhir SCF tergantung pada aplikasi tertentu serta faktor-faktor lain seperti keselamatan, mudah terbakar, perilaku fasa, kelarutan pada kondisi usaha dan harga cairan. Fluida superkritis Kromatografi Kromatografi adalah teknik analisis yang digunakan untuk pemisahan campuran kimia yang kompleks menjadi komponen-komponen individu. Dalam SFC, sampel dilakukan melalui kolom memisahkan dengan cairan superkritis dimana campuran dibagi menjadi band yang unik berdasarkan jumlah dari interaksi antara analit individu dan fasa diam dalam kolom. Sebagai band ini meninggalkan kolom, identitas mereka dan jumlah ditentukan oleh detektor 10. SFC adalah hibrida dari kromatografi gas dan cairan karena ketika fase bergerak di bawah temperatur kritis dan di atas tekanan kritis, ia bertindak sebagai cairan, sehingga teknik ini kromatografi cairan (LC) dan saat fase gerak di atas temperatur kritisnya dan di bawah tekanan kritis, ia bertindak sebagai gas sehingga teknik ini adalah gas kromatografi (GC) 11. Jadi SFC menggabungkan beberapa fitur terbaik dari masing-masing, LC serta GC. SFC adalah penting, karena memungkinkan pemisahan dan penentuan kelompok senyawa yang tidak mudah diatasi oleh salah GC atau LC. Sebagai contoh, GC tidak dapat diterapkan untuk senyawa nonvolatile atau termal tidak stabil. Demikian pula, LC tidak dapat digunakan untuk senyawa dengan kelompok-kelompok fungsional itu tidak dapat dideteksi oleh salah satu detektor spektroskopi atau elektrokimia yang digunakan dalam LC.SFC adalah teknik kromatografi relatif baru dan ada sejumlah besar penelitian saat ini sedang berlangsung, baik dalam metode pengembangan SFC dan hardware pembangunan.
SFC instrumentasi 10, 12, 13 Instrumentasi dari SFC mirip di sebagian besar hal instrumentasi untuk HPLC karena tekanan dan suhu yang diperlukan untuk membuat cairan superkritis dari beberapa atau cairan gas terletak baik dalam batas-batas operasi peralatan HPLC Namun, ada dua perbedaan utama antara keduanya.. Pertama, oven thermostated mirip dengan GC, diperlukan untuk memberikan kontrol suhu yang tepat dari fase gerak dan kedua, pembatas atau perangkat tekanan balik untuk mempertahankan tekanan dalam kolom pada tingkat yang diinginkan dan untuk mengkonversi eluen dari SCF ke gas untuk transfer ke detektor 7.
Fig. Gambar. II Diagram Arus Konstruksi Instrumen SFC 10 Dalam SFC, fase mobile awalnya dipompa sebagai cair dan dibawa ke wilayah superkritis oleh pemanasan di atas suhu superkritis sebelum memasuki kolom analitis. Jalur ini melewati katup injeksi mana sampel diperkenalkan ke dalam aliran superkritis dan kemudian ke dalam kolom analisis. Hal ini dipertahankan superkritis saat melewati kolom ke detektor oleh pembatas tekanan ditempatkan baik setelah detektor atau di akhir kolom. Pompa Dalam kontrak untuk sistem HPLC pompa, tekanan daripada kontrol aliran diperlukan dan operasi pulseless lebih kritis. Secara umum, jenis pompa tekanan tinggi digunakan dalam SFC ditentukan oleh jenis kolom. Untuk kolom dikemas, pompa reciprocating biasanya digunakan sedangkan untuk SFC kapiler, pompa jarum suntik yang paling umum digunakan. Pompa Reciprocating memungkinkan lebih mudah pencampuran dari fase bergerak atau pengenalan cairan modifier. pompa Syringe memberikan tekanan yang konsisten untuk fase gerak rapi.
Penyuntik Injeksi di SFC biasanya dicapai dengan beralih dari isi dari sebuah loop sampel ke dalam cairan pembawa di pintu masuk kolom melalui katup yang cocok. Untuk kolom dikemas SFC, sistem HPLC injeksi konvensional cukup, tapi untuk kolom kapiler SFC, volume sampel tergantung pada diameter kolom dan volume sampel yang kecil harus segera disuntikkan ke dalam kolom, sehingga pneumatis katup digerakkan digunakan.
Oven Sebuah oven kolom thermostated diperlukan untuk kontrol suhu yang tepat dari fase gerak. GC Konvensional atau oven LC umumnya digunakan. Kolom Kemampuan solvating kuat fase mobile di SFC membuat pemilihan hati-hati imperatif fasa diam. Pada dasarnya dua jenis kolom analisis yang digunakan dalam SFC, dikemas dan kapiler. Sebelumnya bekerja pernyerap bekerja seperti alumni, silika atau polystyrene atau fasa diam larut dalam SC-CO 2. dikemas kolom karya terbaru lebih telah melibatkan berikat sari non-fase stasioner seperti octadecylsilyl (C 18) atau silika terikat aminopropil. Pembatas atau Device Back-Tekanan Ini adalah perangkat, yang digunakan untuk menjaga tekanan yang diinginkan dalam kolom oleh diafragma tekanan-adjustable atau nosel dikendalikan sehingga tekanan kolom-outlet yang sama dijaga terlepas dari laju pompa aliran fase mobile. Itu membuat fase bergerak superkritis seluruh pemisahan dan sering harus dipanaskan untuk mencegah penyumbatan. The pembatas tekanan ditempatkan baik setelah detektor atau di akhir kolom. Sebuah pembatas khas untuk 50 atau 100 pM kolom tubular terbuka terdiri dari panjang 2-10 cm 5-19 pipa kapiler yang melekat pada kolom. Bergantian pembatasan dapat menjadi bagian integral dari kolom yang dibentuk dengan menggambar di akhir kolom dalam api. Mikroprosesor Instrumen komersial untuk SFC yang biasanya dilengkapi dengan satu atau lebih mikroprosesor untuk mengontrol variabel seperti tekanan memompa, suhu oven dan kinerja detektor. Detektor SFC menggunakan fase gerak, yang dapat menjadi cair seperti atau gas seperti. Oleh karena itu kompatibel dengan HPLC dan GC detektor. Konvensional fasa-gas detektor seperti detektor
ionisasi nyala api dan detektor fotometri, detektor cair-fase seperti Detektor indeks bias, detektor spektrofotometer ultraviolet-tampak dan detektor cahaya hamburan yang telah digunakan untuk SFC. spektrometri massa dan spektrometri inframerah transformasi Fourier juga dapat digunakan secara efektif dengan pilihan SFC.The detektor akan tergantung pada komposisi fase gerak, tipe kolom, laju alir dan kemampuan untuk menahan tekanan tinggi SFC. Pengaruh Tekanan Bagian dari teori pemisahan di SFC didasarkan pada kerapatan fluida superkritis yang sesuai dengan daya solvating. Seperti tekanan dalam sistem meningkat, kepadatan meningkat cairan superkritis dan Sejalan perusahaan solvating meningkat daya. Hal ini pada gilirannya lebih pendek waktu elusi untuk eluen sebagai tekanan perubahan SFC memiliki efek diucapkan pada retensi analit. Efek ini bersifat umum dan mirip dengan suhu diprogram pada GC atau elusi gradien dalam HPLC. Tahap Mobile Ada sejumlah cairan mungkin, yang dapat digunakan dalam SFC sebagai fase gerak. Namun, berdasarkan biaya rendah, low interference dengan detektor kromatografi dan sifat fisik yang baik (tidak beracun, nonflammable, nilai-nilai kritis rendah) CO 2 adalah ponsel fase yang paling banyak digunakan untuk SFC. Ini adalah pelarut yang sangat baik untuk berbagai molekul organik nonpolar. In addition, it transmits in the UV. Selain itu, mengirimkan di UV tersebut. It permits a wide selection of temperatures and pressures without exceeding the operating limits of modern HPLC equipments. Ini memungkinkan berbagai pilihan suhu dan tekanan tanpa melebihi batas operasi peralatan KCKT modern. Modifiers 6, 9, 14 Pengubah 6, 9, 14 CO 2 is not a very good solvent for high molecular weight, ionic and polar analytes. CO 2 tidak baik pelarut untuk tinggi, berat molekul ionik dan kutub analit sangat. Ini dapat diatasi dengan menambahkan sebagian kecil dari cairan cairan pengubah kedua disebut. Hal ini umumnya merupakan pelarut organik, yang benar-benar larut dengan karbon dioksida (alkohol, eter siklik) tetapi hampir dapat berupa air termasuk cair. Oleh karena itu dalam beberapa metanol aplikasi diperkenalkan dalam konsentrasi kecil (1-20% mol) untuk memodifikasi daya solvasi CO 2. Termasuk tambahan kimia seperti asam dan basa dalam pengubah selanjutnya dapat meningkatkan kelarutan. Pengubah juga dapat meningkatkan selektivitas pemisahan dan meningkatkan efisiensi pemisahan dengan memblokir beberapa situs yang sangat aktif pada fase diam. Jumlah kecil (3,5%) metanol untuk CO 2 meningkatkan kelarutan kolesterol. Jika suatu analit hanya larut dalam larutan air, itu mungkin kandidat miskin untuk SFC. Selain dari pelarut metanol lainnya juga digunakan sebagai pengubah seperti asetonitril, etanol and1propanol. Untuk solut nonpolar sangat dipertahankan, pengubah meningkatkan efisiensi kolom. Untuk zat terlarut polar, mereka meningkatkan retensi dan efisiensi, keduanya.
Perbandingan SFC dengan Jenis Lain Kromatografi SFC menggabungkan beberapa karakteristik gas dan kromatografi cair, sebagai beberapa sifat fisik SCF adalah intermediet antara gas dan cairan. Seperti GC, SFC secara inheren lebih cepat dari LC karena kekentalan yang lebih rendah memanfaatkan debit aliran yang lebih tinggi. Difusi tarif di SCFs adalah intermediet antara gas dan cairan. Sebagai akibatnya, band perluasan lebih besar dalam SCFs tetapi kurang, daripada dalam gas. Dengan demikian, diffusivities intermediate dan viskositas hasil SCFs dalam pemisahan lebih cepat daripada yang dicapai dalam LC, disertai dengan zona bawah memperluas daripada yang ditemui di GC 10. Fase gerak yang memainkan peran yang berbeda dalam GC, LC dan SCF. Dalam GC, fase bergerak menyebabkan gerakan zona. Di LC, fase mobile transport molekul terlarut dan juga berinteraksi dengan mereka sehingga mempengaruhi selektivitas. Ketika molekul yang larut dalam medium superkritis, proses menyerupai volatilisasi tetapi pada suhu jauh lebih rendah dibandingkan dengan GC. Jadi, pada suhu tertentu tekanan uap untuk molekul besar di SCF mungkin 10 10 lebih besar dari pada tidak ada cairan itu. Sebagai akibatnya, senyawa dengan berat molekul tinggi, spieces termal tidak stabil, polimer dan molekul biologis besar dapat dielusi dari kolom pada suhu yang cukup rendah. Keuntungan terbesar yang memegang lebih dari GC SFC adalah kemampuan untuk memisahkan senyawa termal labil. Hal ini dihargai di bidang farmasi karena sekitar 20% dari semua obat kandidat masuk dalam kategori ini. Tidak seperti GC, dengan mengubah fase gerak selektivitas dapat bervariasi dalam SFC 15. Senyawa yang mengandung Karena sifat termal tidak stabil atau tidak-volatile nitrogen banyak dan / atau belerang, mereka tidak dapat dianalisis dengan GC. Bahkan jika HPLC dapat diterapkan untuk menganalisis senyawa-senyawa, itu menghasilkan sejumlah besar pelarut organik, yang perlu akhirnya dibuang. Biaya pelepasan pelarut organik berkisar dari $ 5 sampai $ 10 per galon dan terus meningkat karena peraturan lingkungan yang ketat. Dengan keinginan untuk teknologi sadar lingkungan, penggunaan bahan kimia organik yang digunakan dalam HPLC dapat dikurangi dengan penggunaan SFC. Karena SFC umum menggunakan karbon dioksida, dikumpulkan sebagai produk sampingan reaksi kimia lain atau dikumpulkan langsung dari atmosfer, tidak memberikan kontribusi bahan kimia baru untuk lingkungan 16. Like GC, SFC is inherently faster than HPLC, because of its lower viscosity and higher diffusion rates. Seperti GC, SFC secara inheren lebih cepat dari HPLC, karena viskositas yang lebih rendah dan tingkat difusi yang lebih tinggi. It is well documented that SFC provides a combination of 35 times increase in the speed of analysis and a decrease in the analysis cost through saving in organic solvent 17 . Hal ini juga mencatat bahwa SFC menyediakan kombinasi peningkatan 3-5 kali dalam kecepatan analisa dan penurunan biaya analisis melalui tabungan di 17 pelarut organik. Tidak seperti GC atau HPLC dimana fase gerak mendominasi jenis detektor yang akan digunakan, SFC menggunakan fase gerak, yang dapat berupa cairan seperti atau gas seperti. Oleh karena itu kedua detektor GC dan HPLC berlaku untuk SFC. THal ini kompatibilitas
multidetektor membuat SFC teknik keberhasilan tidak paralel dalam analisis spesies termal bertanggung jawab dan / atau relatif tinggi berat molekul senyawa. kromatografi cairan Supercritical ini memiliki keunggulan utama selama beberapa teknik kromatografi konvensional (GC dan HPLC). Keuntungan terbesar yang memiliki lebih dari HPLC SFC terletak dalam perbedaan dalam fase gerak. cairan Supercritical kurang kental, memiliki difusivitas lebih tinggi daripada cairan dalam kondisi HPLC dan memungkinkan penurunan tekanan yang lebih rendah sepanjang kolom analitis. Ini tidak hanya menyediakan kemampuan untuk meningkatkan panjang kolom, tapi juga memungkinkan untuk laju aliran yang lebih cepat. Faktor-faktor ini pada gilirannya mempengaruhi rasio kapasitas, selektivitas, dan ketinggian pelat teoritis. Telah dilaporkan bahwa 200.000 pelat teoritis telah dicapai dengan menggunakan sebelas analitis (4.6mm id) kolom dalam seri. Selain itu, SFC bisa diatur untuk ambien temperatur sub, yang merupakan faktor kunci dalam banyak pemisahan kiral 17. Aplikasi Sekarang SFC telah diterapkan pada berbagai bahan 18 termasuk produk-produk alami,, obat makanan, pestisida, herbisida,, surfaktan polimer dan aditif polimer, bahan bakar fosil, minyak bumi, bahan peledak dan propelan. Beberapa aplikasi penting adalah sebagai berikut. Produk Alam Lipofilik - senyawa amphiphilic dengan sifat antara volatil dan senyawa hidrofilik yang sering membuat masalah sehubungan dengan isolasi dan penentuan hasil analisis di daerah abu-abu analitis, Tapi SFC telah ditemukan untuk memberi prosedur relatif cepat dan sederhana untuk penentuan konstituen minyak seperti klorofil dan turunannya 19, karotenoid, tocopherol 20, 21 vitamin 22,23 dan 24 fenolat yang mungkin penting bagi kualitas minyak. Dengan demikian memberikan suatu alat untuk menentukan keaslian minyak dan kemungkinan meningkatkan penentuan hubungan antara konstituen minyak dan sifat biokimia fisik maupun minyak. Pemisahan garam empedu 25 dan umum asam empedu gratis seperti asam ursodeoxycholic dan asam chenodeoxycholic dalam persiapan farmasi telah dilaporkan menggunakan kolom silika phenylbonded dan SFC-CO 2 diubah dengan methanol 26. SFC telah berhasil digunakan untuk pemisahan triterpen 27 underivatized, asam estimasi kafein dari teh 28 dan asam empedu terkonjugasi 29. Kapiler-SFC sudah digunakan untuk analisis panaxadiol / panaxatriol dalam ginseng dan persiapan yang 30 Juni karotenoid sayur 31 dan alkaliods pyrrolizidine 32. Pestisida ekstraksi dan kromatografi cairan Supercritical telah digunakan untuk analisis residu pestisida pada makanan kaleng buah, dan sayuran dimana piretroid, herbisida, fungisida dan karbamat telah diuji 33.
Surfaktan Pemisahan oligomer pada sampel Triton X100 surfaktan nonionik telah dilaporkan di mana deteksi adalah dengan mengukur arus total ion yang dihasilkan oleh spektrometer massa ionisasi kimia 34. Lipid Sebagai SFC beroperasi pada suhu rendah sampai sedang, hal ini sangat cocok untuk analisis tinggi lemak seperti trigliserida dengan berat molekul. Meskipun metode HPLC memberikan resolusi yang sangat baik, waktu elusi relatif panjang dan deteksi kuantitatif menjadi masalah. Pemisahan lilin parafin, asam lemak bebas, mono-di-dan tri asil gliserol deterjen seperti Triton X-100 telah dicapai dengan menggunakan kolom kapiler dilapisi dengan fasa diam nonpolar pada suhu antara 60 ° -120 ° di mana tidak ada kerusakan termal untuk lipid diamati 3. SFC juga telah diterapkan untuk menganalisis fosfolipid setelah konversi menjadi turunan diasilgliserol 35. Pemisahan ester metil asam lemak 36, biosintesis asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) 37, lipid nonsaponifiable 38, kolesterol dan esternya dalam serum manusia 39,40 dan 41 sampel makanan, mono-, di-dan trigliserida dalam farmasi eksipien 42 telah dilakukan oleh SFC sukses. SFC has also been applied to analysis of archaebacterial lipids and glycosphingolipids 43 . SFC juga telah diterapkan untuk analisis lipid archaebacterial dan glycosphingolipids 43. Sejumlah artikel review telah muncul dalam beberapa tahun terakhir ini 44, topik 45, 46 dan harus berkonsultasi untuk informasi lebih rinci. Polimer SFC menyediakan elusi senyawa tinggi berat molekul, polimer dan molekul biologis yang besar dari sebuah kolom pada suhu yang cukup rendah. Pemisahan rangkaian oligomer polisiloksan dimetil 47 dan polycyclics hidrokarbon aromatik diekstraksi dari karbon fluoresensi deteksi menggunakan hitam 48 telah dilaporkan. SFC juga telah diterapkan untuk analisis 49 polyethoxylated, alkylphenols antioksidan polyolefinic / stabilisator cahaya 50 dan hidrokarbon aromatik polynuclear dalam knalpot mobil 51. Obat Zat obat modern yang umumnya nonvolatile dan termal atau kimia labil karena itu analisis dengan HPLC adalah umum di GC. Dalam SFC kondisi yang ringan dan penguapan tidak diperlukan sehingga memungkinkan untuk menangani zat obat tersebut oleh SFC. Pemisahan berbagai kategori obat seperti antidepresan 52, antipscychotics fenotiazin 53, beta blocker 54, felodipine 55, obat dihydropyridine baru-clevidipine 56, betacyclodextrins alkohol 57, 58 vasodialators seperti isosorbide mononitrate, mononitrate dinitrate, cyclandelate, nimodipine, amlodipine, pentifylline, pentoxifylline, lovastatin 59, pyrethrins 60, mononitrate -5 - dan yang terkait dalam zat senyawa isosorbide curah dan tablet 61, atropin 62, 3-il metil oligomer-indol dan ascorbigens 63, tolnaftate dan kotoran terkait 64 telah dilakukan oleh SFC. Pemisahan dan
melacak estimasi benzidine serta makromolekul adduct 65, mikotoksin fusarium 66, estrogen 67, kombinasi berbagai obat antiperadangan nonsteroid seperti asam flufenamic 68, asam mefenamat, fenbufen, campuran indometasin, asam flufenamic, asam mefenamat, asam salisilat asetil, ketoprofen dan fenbufen campuran dan campuran ibuprofen, fenoprofen, ketoprofen naproxen, dan fenbufen oleh SFC telah dilaporkan. SFC juga telah diterapkan untuk estimasi prostaglandin 69, penentuan mefloquine dalam darah 70, antikanker obat seperti siklofosfamid, diaziquone, mitomycin C, thiotepa 71, trioleate sorbitan dalam dosis inhaler 72 meteran,-steroid 73, [14C] propranolol 74, underivatized Dichlorophenoxy 2,4-asam asetat 75, penentuan metabolit urin dari stirena 76, skrining tinggi kecepatan 77 kombinatorial, perpustakaan penentuan fenilbutazon dan oxyphenbutazone utama metabolit dalam serum, fenilbutazon dalam bentuk dosis 78 dan sulphadoxin dalam plasma darah 79, mesoprostol dari tablet 80, SFC simultan ibuprofen dan methocarbomal dalam bentuk sediaan padat. 81 Senyawa kiral Pemisahan kiral oleh SFC pertama kali didokumentasikan pada tahun 1985 82. Karena efisiensi tinggi, pemisahan cepat, analisis temperatur rendah dan penerapan untuk berbagai macam detektor, SFC kini telah menjadi alternatif yang menarik untuk pemisahan obat kiral 83. Keberhasilan SFC di bidang kimia bioanalytical didokumentasikan dengan baik. Sebuah istirahat nyata melalui untuk SFC di bidang bioanalytical telah kontribusinya terhadap perpisahan kiral, dan dalam waktu dekat mungkin melampaui KCKT dalam kemampuan untuk menyediakan selektivitas yang cukup dari stereoisomer molekul 4. SFC telah diterapkan untuk pemisahan sejumlah besar enantiomer, diasterioisomers dan isomer geometri seperti dan kiral analisis akiral dari camazepam dan metabolitnya 84, diasterioisomers Du sebuah P105 novel antibakteri oksazolidinon-85, pemisahan kiral dari 1,3 derivatif dioxolane 86 , 87, diasterioisomers 2-bromomethyl2-[(2,4-Dikhlorofenil) -1,3-dioxolan-4-il] metil benzoat, 88 enansiomer ibuprofen 89, agen antijamur kiral 90, pemisahan enantiomeric dari aminoalcohols 91, triadimefon, dan triadimenol enantiomer 92 anddiasterioisomers, enantiomer sulfoxide Albendazole 93, 94, pemisahan kiral berdasarkan obat antibiotik 95 makrosiklik, pemisahan cis dan trans enantiomer beta karoten 96 dan resolusi L D-alpha dan turunan asam amino 97, pemisahan enetiomeric dari enam triazole pestisida: cyproconazole, propiconazole, diniconazole, hexaconazole, tebuconazole, dan tetraconazole 98, pemisahan enetiomeric campuran rasemat lima obat asam yaitu dichlorprop, ketoprofen, warfarin, coumachlor dan thalidomide menggunakan fasa diam makrosiklik kiral antibiotik (CSP) 99. Organometallics Pemisahan chelates logam dan organometals dari termal kategori labil, chelates logam transisi, logam berat, lanthenides dan aktinida serta senyawa organologam, air raksa dan timah telah dilakukan oleh SFC. Penentuan kelarutan senyawa organologam oleh SFC juga dilaporkan. 100.
SFC-MS dalam Farmasi Dalam industri farmasi, konsentrasi analit dalam kisaran picogram-per-mililiter atau lebih rendah yang biasa seorang. Dalam rangka untuk mendeteksi tingkat konsentrasi realistis, detektor dengan sensitivitas tertinggi, selektivitas luas dan resolusi terbaik harus digunakan. Saat ini, detektor yang cocok untuk semua kriteria ini adalah spektrometer massa. MS vs Detektor Tersedia lainnya untuk
101
SFC
Persyaratan Tekanan untuk kromatografi kolom dikemas cairan superkritis (pSFC) secara signifikan membatasi jenis detektor yang dapat digunakan dengan sukses. C detektor perlu memiliki toleransi tekanan upto 400 bar. Ini batas atas ini dimungkinkan dengan absorbansi sel khusus tahan tekanan-detektor, tetapi tidak dengan sel jendela ortogonal desain yang ditemukan di fluorimeters. GC detektor yang telah digunakan dengan baik kromatografi cairan kapiler superkritis (cSFC) dan pSFC termasuk, spektrometer massa, ionisasi nyala (FID), menangkap elektron, nitrogen-fosfor dan detektor fosfor sensitif, hanya untuk beberapa nama. Secara keseluruhan, detektor ini memberikan berbagai selektivitas sensitif, tetapi masingmasing dengan sendirinya dapat dibatasi dalam aplikasiDetektor hanya benar-benar universal yang tersedia untuk SFC adalah FID dan MS. FID akan menghasilkan kebisingan latar belakang yang tinggi di hadapan SFC pengubah polar, menyimpulkan bahwa detektor universal praktis pilihan harus MS. Beberapa aplikasi dari SFC-MS termasuk Pemisahan avermectines, sekelompok agen kuat spektrum luas antiparasit oleh kimia ionisasi SFC-MS, penentuan profil ketidakmurnian antibiotik macrolid menggunakan SFC-EIMS dan eritromisin-A dari kaldu fermentasi menggunakan SFC-CIMS, pemisahan distereoisomers sefalosporin menggunakan SFC - EIMS, Pemisahan campuran 6 pestisida yaitu atrazin, simazine, dimethirimol, terbacil, manazon, dan dikemas kolom ethirimol oleh SFC-EIMS 102, Pemisahan campuran 7 trigliserida yaitu trilaurin, trimyristin, tripalmitin, tristearin, triolein, trilinolien dan trilinolenin, menggunakan cSFC-EIMS 103, identifikasi lemak glycerols triacyl susu 104, Pemisahan gamma dan alpha - mengandung asam triacyl di glycerols berry, minyak analisis 105 106 beta agonis, karakterisasi trigliserida dalam minyak sayur 107, analisis lenolenic panjang rantai polyprenols 108, analisis artemisinin 109, penentuan allicin dalam ekstrak bawang putih 110, perkiraan trichothecenes 111, karakterisasi-link glycans N 112, karakterisasi glycosphingolipids oleh SFC-113, MS analisis mengandung besi logam organik, silikon, timah, kromium , arsenik, timbal, merkuri dan antimon menggunakan spektrometri deteksi plasma dan induktif digabungkan spektrometer massa plasma (ICPMS) interfacing SFC 114, pemisahan campuran sulphonamides 115. Sebuah fitur unik dengan menggunakan SFC-MS untuk memantau sintesis kiral adalah gangguan diabaikan dari akiral kotoran. Selain itu, dengan SFC-MS, kelebihan enantiomeric dapat ditentukan dengan batas deteksi jauh lebih rendah daripada di UV dan analisis kali jauh lebih pendek dibandingkan dengan fasa normal / cair kromatografi fase terbalik 116.
