PEMERIKSAAN WIDAL I.
TUJUAN I.1 Tu Tujuan juan Instruksi Instruksional onal Umum Umum 1. Untuk Untuk menget mengetahui ahui pemeriks pemeriksaan aan Imunoser Imunoserolo ologi gi yang yang tepat tepat untuk untuk penegaka penegakan n diagnos diagnosis is
demam typhoid. 2. Untuk Untuk mengeta mengetahui hui dan memah memahami ami prinsi prinsip p kerja kerja dari pemer pemeriks iksaan aan tes tes Widal Widal untuk untuk penegakan diagnosis demam typhoid. I.2 Tu Tujuan juan Instruksi Instruksional onal Kusus Kusus 1. Untuk dapat dapat melakukan melakukan pemeriks pemeriksaan aan Widal Widal untuk untuk penegakan penegakan diagnosis diagnosis demam typhoid. typhoid. 2. Untuk dapat mengetahu mengetahuii adanya adanya antibodi antibodi spesif spesifik ik terhadap terhadap bakteri bakteriSalmonella. Salmonella. 3. Untuk dapat dapat menginter menginterpretas pretasikan ikan hasil hasil yang didapatkan didapatkan melalui melalui tes tes Widal Widal.. II.
MET!DE Metode yang digunakan digunakan dalam praktikum praktikum ini adalah Rapid adalah Rapid Slide Test Test dan dan tes aglutinasi
tabung reaksi. III.
PRINSIP Pada uji agluti aglutinas nasii standar standar,, serum serum pasien pasien antib antibodi odi!! yang yang sudah sudah dien"er dien"erkan kan di"amp di"ampur ur
dengan suspensi bakteri antigen!. antigen!. #ika antibodi antibodi homolog yang tersedia "ukup maka akan menyebabkan aglutinasi. I".
ALAT DAN #A$AN I$. I$.1 %lat %lat 1. &a"a &a"a objek objek berbent berbentuk uk "in"in "in"in sli slide de "ard "ard putih! putih! 2. Mikropipet 3. 'ello( lo( tip ). *tik *tik peng pengad aduk uk +. abung bung rea reaks ksii -. ak ak tab tabun ung g rea reaks ksii /. Peng Pengad aduk uk meka mekani nik k
/.2 0aha 0ahan n 1. aru aruta tan n a all 4,56 4,56 2. %ntig ntigen en fi fibril bril 3. *erum /.3 eag eagen en 1. Bruc Brucel ella la abor abortu tuss 2. Bruce Brucell lla a mili milite tens nsis is 3. Anti Antigen gen Salm Salmon onel ella la Gru Grup pA 4. Anti Antigen gen Salm Salmon onel ella la Gru Grup pB 5. Anti Antigen gen Salm Salmon onel ella la Gru Grup p C 6. arat!p"oid arat!p"oid A # Antigen Antigen Salmonell Salmonella a $lagellar $lagellar A % &. arat! arat!p"oi p"oid d B # Antigen Antigen Salmo Salmonel nella la $lagel $lagellar lar B %
'. arat!p"oid C # Antigen Salmonella $lagellar C % (. roteus )*2 1+. roteus )*1( 11. roteus )*, 12. T!p"oid ) # Salmonella Grup - Somati/ % ".
%ARA KERJA a. Ra&i' Sli'( T(st 1. 7isiapkan sebuah slide "ard ber(arna putih 2. 7engan menggunakan pipet yang sesuai, ditambahkan sejumlah serum yang akan
diperiksa ke dalam kotak dari kiri ke kanan dengan berurutan 8 4,49 ml, 4,4) ml, 4,42 ml, 4,41 ml, 4,+ ml. serum harus bersih dan tidak panas. Prosedur ini diulangi dengan kontrol serum positif dan negatif. 3. %ntigen diko"ok dengan hati:hati untuk memastikan suspensi ter"ampur merata. ). *e"ara ;ertikal, ditambahkan satu tetes antigen setiap sejumlah sampel. 1 #enis reagen yang sama dari kiri ke kanan. +. *erum dan antigen di"ampur dengan menggunakan stik pengaduk . 7igunakan stik pengaduk yang berbeda untuk masing:masing jumlah serum atau digunakan stik yang sama dan dikerjakan dari kanan ke kiri, masing:masing "ampuran harus berbentuk area berukuran 4,+ in"hi:1 in"hi. -. *lide digoyangkan dengan tangan atau pengaduk mekanik pada ke"epatan 1+4 rpm selama 2:3 menit /. %glutinasi diamati dengan pen"ahayaan tidak langsung berlatar belakang gelap. 9. *erum positif oleh titer yang dikenali dan serum negati;e harus termasuk ke dalam kontrol. ). T(s A*lutinasi Ta)un* R(aksi 1. 7isiapkan 14 tabung reaksi dan diberi label. 2. 1,5 ml larutan atrium &lorida ditambahkan ke tabung pertama. 3. 1,4 ml larutan atrium &lorida ditambahkan ke tabung ke 2: 5. ). 4,1 ml serum yang akan diuji ditambahkan ke tabung pertama. 1,4 m serum yang
telah dien"erkan pada tabung 1! diaduk rata dan dipindahkan dari tabung pertama ke tabung kedua. Prosedur ini diulangi sampai kesepuluh tabung mengandung seri pengen"eran serum dua kali lipat dari 1824 sampai1 8 142)4. 1,4 m pengen"er serum diambil dari tabung 14 dan dibuang. abung nomor 1 dianggap sebagai pengen"eran 1824. Prosedur ini diulangi dengan serum kon trol positif dan negatif.
+. *atu tabung ditempatkan diakhir seri tabung pengen"eran dan 1,4 m larutan atrium &lorida 4,56 ditambahkan untuk mengen"erkan serum. abung tersebut dilabeli dengan nama <"ontrol *aline=. -. *uspensi antigen dihomogenkan dengan mengo"ok botol se"ara hati:hati. *atu tetes antigen ditambahkan untuk setiap tabung. /. ak diko"ok untuk men"ampur antigen dengan serum dan ditempatkan di (aterbath. Waktu dan suhu inkubasi yang dianjurkan adalah sebagai berikut8
%ntigen Salmonella 0) Grup A Salmonella 0) Grup B Salmonella 0) Grup C Salmonella 0) Grup #T!p"oid )% Salmonella 0 a Salmonella 0 b Salmonella 0 c Salmonella 0 d #T!p"oid % Brucella aborius dan Brucella eltonois roteus )* 2 )* 1( dan
emperatur )+4:+44 )+4:+44 )+4:+44
Waktu Inkubasi 19 jam 19 jam 19 jam
)+4:+44
19 jam
)+4:+44 )+4:+44 )+4:+44
2 jam 2 jam 2 jam
)+4:+44
2 jam
3/4
)9 jam
)+4:+44
19 jam )*, atatan 8T"!poid dan antigen Salmonella lagellar harus diinkubasi selama 2 jam pada suhu )+4:+44 . 7ilanjutkan dengan inkubasi 14 jam pada suhu 24 : 94 sebelum pemba"aan terakhir. 9. *etelah diinkubasi, rak yang berisi tabung reaksi dipindahkan dengan hati:hati dan diamati aglutinasinya. Menggunakan sumber "ahaya tidak langsung dan latar belakang hitam akan memberikan kondisi optimal untuk pemba"aan tabung. 5. >asil test di"atat dan diitepretasikan hasil ke nilai rujukan. 14. iter dari serum reaktif di"atat sebagai pengen"eran terakhir yang memberikan reaksi 2?. "I. INTERPRETASI $ASIL )?8 *emua organisme berkumpul di dasar tabung dan "airan supernatant bersih 3?8 *ekitar /+6 organisme berkumpul dan supernatant sedikit keruh 2?8 *ekitar +46 organisme berkumpul dan supernatant dengan kekeruhan sedang 1?8 *ekitar 2+6 organisme berkumpul dan supernatant keruh : 8 idak ada aglutinasi yang teramati dan mun"ul kekeruhan pada suspensi
