UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA I
PRÁCTICA 10: 10: “MULTIPLICACIÓN BACTERIANA (REQUERIMIENTOS FISICOQUÍMICOS)” PROFESORA: Q.F.B. BEATRIZ ELENA ARELLANO PIMENTEL
INTEGRANTES: CAST CASTIL ILLO LO HERN HERN NDEZ NDEZ ERICK HERNANDEZ GONZALEZ OCTAVIO MEDI MEDINA NA MO MORE RENO NO JO JOS S ANTONIO JUSTICK VÁZQUEZ LEZAMA LESLIE YARAVÍ EQUIPO: 4 SEMESTRE: 6° GRUPO: 1652 FECHA DE ENTREGA: 19 DE SEPTIEMBRE DE 2016
Objetivo
Identificar las necesidades fisicoquímicas de los microorganismos observando cómo influyen estos en la multiplicación bacteriana.
Diagrama de flujo Multiplicación bacteriana (requerimientos fisicoquímicos)
Efecto de la temperatura. Dividir las dos cajas de agar sangre en 2 partes
Sembrar B. subtilus, E. coli, S. typhi y S. pyogenes por estría sim le. Incubar una caja a 37°C y otra a temperatura ambiente.
Efecto del pH. Dividir por la mitad las cajas de agar nutritivo pH 6 y pH 9
Requerimientos de oxígeno. Dividir dos cajas de agar tioglicolato en tres divisiones.
Sembrar E. coli, S. aureus, P. aeroginasa y M, lysodeikticus por estría sim le.
Sembrar E. coli, P. aeroginosa y Clostriium spp por estría sim le.
Incubar las cajas a 37°C.
Incubar una caja en una jarra de anaerobiosis y otra a aerobiosis, ambas a 37°C.
Efecto de la presión osmótica. Dividir en 2 partes la caja de agar nutritivo y otra con 7.5% de sal y una caja de Sal y Manitol en
Sembrar E. coli y S. aureus en agar Sal y Manitol, y también en las demás cajas aparte de M. luodeikticus y C. e ui. Incubar las cajas a 37°C.
Leer la incubación a las 24 y 48 horas
Efecto de la humedad. Etiquetar 4 tubos, dos con 3% de agar como baja humedad y otros dos con
Sembrar S. aureus y E. coli en cada tubo por punción de pico de flauta. Incubar las cajas a 37°C.
Resultados Requerimientos fisicoquímicos
Sembrado
Observación Condiciones: Medio a pH= 9, se sembró E. coli (imagen de arriba) y S. aureus (imagen de abajo). Como se puede observar, el medio alcalino no permitió el libre crecimiento de E. coli , ya que su pH óptimo está entre 6-7, sin embargo S. aureus se desarrolló pese a que su pH óptimo está entre 4-9.
pH
pH
Temperatura
Condiciones: Medio con Ph= 6, sembrado de E. coli y S. aureus. En éstas imágenes podemos percibir un crecimiento más voluminoso de E. coli , por otro lado, S. aureus proliferó de una manera menos significativa, pero creció.
Condiciones: S. pyogenes y S. aureus en medio AN a 37°C. En la imagen nos podemos dar cuenta que dichas condiciones favorecieron a ambas cepas, aunque S. pyogenes no se ve con gran claridad, se encuentra como una película muy delgada sobre el medio.
Oxígeno
Condiciones: S. pyogenes y S. aureus en medio AN a temperatura ambiente. Estas condiciones favorecieron el crecimiento, sin embargo, en menor cantidad, al comparar ambas fotos podemos observar un crecimiento menor en comparación con la temperatura de 37°C. Tales resultados nos hablan de microorganismos mesófilos. Condiciones: Medio de agar tioglicolato, incubación en anaerobiosis (imagen de arriba), incubación de aerobiosis (imagen de abajo), se sembró E. coli , y P. aeuruginosa Clostridium sp . Podemos observar claramente que se Clostridium sp desarrolló en ambos medios (aerobia facultativa), mientras que E. coli y P. aeuriginosa pareciera que también pero con una muy marcada diferencia en cuanto a cantidad, lo que nos indica que ambas son anaerobias facultativas.
Condiciones: Medio de AN con 7.5% de sal (imagen de arriba), AN normal, se sembró E.coli y S. aureus . Se observa crecimiento de S. aureus en ambos medios, en menor cantidad en medio con sal en comparación al medio E. coli normal, y definitivamente, sólo se desarrolló en un medio normal.
Presión osmótica
Humedad
Condiciones: AN con 3% de humedad, se sembró E. coli (imagen de abajo) y S. aureus (imagen de arriba). Ambas cepas se desarrollaron perfectamente en un medio muy húmedo, en comparación a la humedad normal.
Condiciones: AN con humedad normal, se sembró E. coli (imagen de abajo) y S. aureus (imagen de arriba). Ambas cepas pueden desarrollarse en un medio con humedad normal, sin embargo, la cantidad de microorganismos es menor en comparación con un medio dotado de una mayor humedad.
Análisis de resultados Se realizaron una gran variedad de cultivos en los que se le modificaron algunas condiciones como lo fueron temperatura, pH, presión osmótica, la humedad y requerimiento de oxígeno para poder observar como estas interfieren en el desarrollo de algún microorganismo. En el caso de requerimiento de oxigeno se realizó una doble prueba en donde se cultivaron los mismos microorganismos C lostridium s p, E.coli y P. aeurog inos a y se colocó una en condiciones aerobias (con oxígeno) donde se esperaba que solo crecieran y E.coli y P. aeuroginosa ya que una es aerobia facultativa ( E.coli ) aerobia estricta (P. aeuroginosa) sin embargo también se observa una colonia desarrollada en C lostridium s p esto no se esperaba ya que esta es una anaerobia estricta y por ende no crecería en presencia de oxígeno, por lo que se cree que hubo una contaminación o una confusión al momento de sembrar los microorganismos, la otra prueba en condiciones anaerobias (sin oxígeno), donde se observó una contaminación al parecer por el escurrimiento de la muestra de C lostridium s p hacia la parte de P. aeurog inos a donde se ve un ligero crecimiento de una colonia. Para la prueba de humedad si hubo un crecimiento en todas las pruebas sin embargo se observó una diferencia en el crecimiento colonial, en las pruebas de pH se observa cómo afecto totalmente el desarrollo de la E.coli en medio alcalino, en las pruebas de temperatura se observó crecimiento en ambas pero con menor cantidad a temperatura ambiente, y en las pruebas de presión osmótica la salinidad afecto significativamente el crecimiento de las colonias.
Conclusión
Después de un proceso rápido para la realización de la práctica, algunos microorganismos fueron sometidos a diversas condiciones (temperatura, pH, requerimientos de oxígeno, presión osmótica y humedad) para poder analizarlos posteriormente y conocer los medios, especificaciones o requerimientos que necesitan ciertos microorganismos para poderse reproducir, ya sea en situaciones demasiado adversas o en ambientes neutros, ideales para su crecimiento. Cada requerimiento fue importante para poder clasificar a los microorganismos según su forma de crecimiento, la manera en que lo hacen, el tiempo en el que se reproducen, el medio de cultivo que necesitan y a partir de ahí darles ciertos nombres, como por ejemplo: los microrganismos halófilos (altas concentraciones de sal) termosensibles (no soportan temperaturas extremas) termoestables( soportan temperaturas extremas) aerobios (necesitan Oxigeno), anaerobios (pueden sobrevivir en ausencia de Oxigeno) entre otros.
Bibliografía
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