UNIVERSIDAD UNIVERSID AD NACIONAL MAYOR MAYOR DE SAN MARCOS FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA E.A.P E.A. P. INGENIERÍA AGROINDUS AGROINDUSTRIAL TRIAL
CURSO: Laboratorio de i!robio"o#$a #e%era" & a'"i!ada TEMA: COMPORTAMIENTO CULTURAL DEL CRECIMIENTO MICRO(IANO RESPONSA(LE: M#. S!. ("#a. Miria E)te"a Mee%*a +. INTEGRA NTES: Carri, INTEGRANTES: Carri,% % T-'a&a!i/ 0o)1 Car"o) 23454667 E)'e8o Aria)/ 0-a% 0o)1 23454266 C9rde%a) (er%ardo/ A"e
COMPORTAMIENTO CULTURAL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO INTRODUCCION Entendemos por crecimiento microbiano el aumento del número de microorganismos a lo largo del tiempo. Por tanto, no nos referimos al crecimiento de un único microorganismo que denominaremos ciclo celular , sino al demográco de una población. En este tema nos centraremos en el crecimiento de bacterias, el estudio que se hace puede servir también para entender el crecimiento de bacterias y de otros hongos. enominamos ciclo celular al proceso de desarrollo de una bacteria aislada. ! lo largo del ciclo celular tiene lugar la replicación del material genético, la s"ntesis de componentes celulares, la elongación de la bacteria para alcan#ar un tama$o doble del inicial y su división por bipartición para dar lugar a dos células hi%as. &a duración del ciclo celular coincide con el tiempo de generación y depende, en general, de los mismos factores de los que depende este. El crecimiento de una población resulta de la suma de los ciclos celulares de todos los individuos de dicha población. &os cultivos de microorganismos de los que hemos hablado son asincrónicos puesto que en ellos cada microorganismo se encuentra en un punto diferente del ciclo celular. Por consiguiente, en un momento determinado en un cultivo se encuentran células que acaban de dividirse, otras que están replicando su !', otras que están creciendo, otras que están iniciando la división celular, etc. En un cultivo sincrónico todas las células se encuentran simultáneamente en la misma fase del crecimiento celular. &os cultivos sincrónicos son muy dif"ciles de mantener por lo que su importancia está principalmente ligada a los estudios básicos de biolog"a microbiana. (in embargo, en la naturale#a, las bacterias del suelo se encuentran en condiciones de crecimiento pró)imas a la fase estacionaria *en la que se produce una cierta sincroni#ación del cultivo+ y, por consiguiente, durante cierto tiempo las poblaciones naturales probablemente se comporten como relativamente sincrónicas. &as poblaciones de bacterias crecen de forma e)plosiva acumulando grandes números en un periodo de tiempo muy reducido. Puesto que el efecto de los microorganismos es en la mayor"a de los casos depende de su número, entender cómo se produce el crecimiento microbiano es importante para poder evitar o reducir sus efectos nocivos y potenciar los beneciosos o aplicados.
CULTIVO DE MICROORGANISMOS
El cultivo de microorganismos consiste en proporcionarles las condiciones f"sicas, qu"micas y nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de forma controlada. En general, podemos distinguir cultivos l"quidos y sólidos en función de las caracter"sticas del medio y cultivos discontinuos y continuos en función de la disponibilidad de nutrientes en el medio.
OBJETIVO Estudiar el comportamiento de los microorganismos aislados previamente en diferentes medios de cultivo y comprobar la pure#a de los mismos.
MATERIALES .- epas puras de Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus, Pseudomonas, Saccharomyces, Aspergillus y Penicillium codicadas de /0 a 01 horas de incubación. /.- 2ubos de ensayo con caldo nutritivo. 3.- 2ubos con agar nutritivo y agar sabouraud en plano inclinado. 0.- 2ubos con agar papa de)tros en plano inclinado 4.- 2ubos con agar nutritivo semisólido en columna. 5.- !sa de siembra, gradilla, plumón. 6.- 7ater"a 8ram9 cristal violeta, lugol, alcohol-acetona, fucsina fenicada de :iehl. &áminas portaob%etos, cubreob%etos limpias, papel lente. 1.- ;icroscopio, aceite de inmersión y alcohol 6<=.
PROCEDIMIENTO: 1. Replicación de l!"id# a l!"id# •
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2omar el cultivo con la mano i#quierda y destapar con el dedo me$ique de la mano derecha a la altura del mechero *alrededor de un radie de ohle previamente ?ameada al fuego e)traer una al"cuota del inóculo. 2apar el tubo con el algodón y colocarlo en la gradilla. epositar el inóculo en el nuevo tubo y agitarlo, ?amear la boca del tubo al mechero y taponar. Esterili#ar el asa al mechero. @otular e incubar a /1 A 3<=.
1. COMPORTAMIENTO EN MEDIO L$%UIDO: ;ediante el siguiente cuadro se sinteti#arán los comportamiento macroscópico en un medio l"quido.
caracteres de
CUADRO I CANTIDAD DE DESARROLLO
TURBIEDAD
DESARROLLO SUPER&ICIE
!bundante
Bomogénea
- Cormación de pel"cula, e naturale#a9 8omosa, lisa, orrugada, escamosa ;embranosa, ostrosa
;oderado
En grumos nos
- (in pel"cula9 desarrollo en anillo
Escaso
En grumos gruesos !lgodonoso
'ulo
OLOR ninguno
Cecaloide,
!romático Parecido a.
C#'p#()a'ien)# C"l)"(al de Bac)e(ia* en Medi# L!"id# E)!eri!i Sta'&"o!o P)e-doo Sa"o%e" (a!i""-) *p M.O. a !o"i !!-) %a) *p "a *p Ca(ac)e(*)ica a-re-) * Can)idad de !bundante Bomogénea !bundante ;oderado !bundante de*a((#ll# Bomogéne Bomogénea Bomogénea Bomogéne Bomgénea T"(+ide,
De*a((#ll# *"pe(-cie Ol#( Sedi'en)# Na)"(ale,a *edi'en)#
a (in pel"cula
(in pel"cula
!nillo verde
Cecaloide
(ui generis
;oderado ;ucoide
;oderado ;ucoide
Cruta podrida !bundante 8rumoso
a (in pel"cula Cecaloide Escaso 8ranular
(in pel"cula escompue sto !usente !usente
3. Dcuál es el fundamento de la cromogénesis &a cromogénesis o pigmentación de colonias bacterianas es una de las caracter"sticas más notables de los cultivos. En algunas especies el pigmento producido es retenido dentro de las células y su masa celular se coloreaF en otras especies, por el contrario, el pigmento es e)pulsado al medio de cultivo. Estos pigmentos pueden ser solubles o insolubles en agua, y no son producidos en todos los medios de cultivo ni ba%o todas las condiciones ambientales. &os factores que in?uyen en la pigmentación son variados y no se encuentran bien estudiados. Principalmente se ha encontrado que su s"ntesis e intensidad están afectadas por las condiciones de crecimiento, a tal punto que ciertos pigmentos se observan me%or en cultivos sólidos. e la misma forma, la producción de pigmentos bacterianos se encuentra estrechamente relacionada con la composición del medio de cultivoF factores como la presenciaGausencia de fuentes de carbono o nitrógeno orgánicasGinorgánicas, as" como la presencia de otros componentes9 sales, aminoácidos, entre otros, pueden inhibir o estimular su s"ntesis. &as funciones espec"cas de la mayor"a de los pigmentos en los cultivos bacterianos no están determinadas. En general, son metabolitos secundarios sin función biológica denida en el crecimiento celular, a los cuales se les han atribuido diversas funciones, como ser amortiguadores redo) o generarGneutrali#ar radicales libres tó)icos de o)"geno, ra#ones que podr"an e)plicar la actividad antibiótica encontrada en algunos de estos compuestos, relacionando la habilidad de producirlos con la supervivencia del organismo y con el incremento in vivo de la virulencia de algunos microorganismos. 0. Duál es el fundamento de la ?uorescencia en los microorganismos &a ?uorescencia es un tipo de luminiscencia que caracteri#a a las sustancias que son capaces de absorber energ"a en forma de radiación electromagnética y luego emitir parte de esa energ"a con una longitud de onda diferente.
H'&I(JH'E(9 En esta práctica reali#ada se demostró que a través de las caracter"sticas morfológicas de los cultivos se puede saber de qué microorganismos estamos tratando.
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