qer!"uio#asd$%&'(l)*cvbn +qer!"uio#asd$%&'(l)*cv DESARROLLO DEL INÓCULO Y CULTIVO CELULAR POR LOTE DE bn+qer!"uio#asd$%&'(l)* PICHIA STIPITIS NRRL Y-7124 cvbn+qer!"uio#asd$%&'(l “Año del buen servicio al ciudadano” )*cvbn+qer!"uio#asd$%&' UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE INGENIERÍA (l)*cvbn+qer!"uio#asd$% E. A. P. DE AGROINDUSTRIA AGROINDUS TRIA &'(l)*cvbn+qer!"uio#asd -re,In$or+e n613 $%&'(l)*cvbn+qer!"uio#a sd$%&'(l)*cvbn+qer!"uio Docen!e3 #asd$%&'(l)*cvbn+qer!"u Ing. Augus! C"s#$$! C"$%&'(n C"$%&'(n In!e%ran!es3 io#asd$%&'(l)*cvbn+qer! C)CERES PEREDA *ERYSHELL ENCINAS ESTRADA GREISSY "uio#asd$%&'(l)*cvbn+qe LORE+O ,I*ENES ESTRELLA ESTRELL A PALACIOS HILARIO HIL ARIO ANTONY r!"uio#asd$%&'(l)*cvbn+q VALERIO *OLINA *ARIÍ Curso3 er!"uio#asd$%&'(l)*cvbn LAORATORIO DE IOPROCESOS +qer!"uio#asd$%&'(l)*cv Ciclo3 VII Nuevo C&i+bo!e, -er. bn+qer!"uio#asd$%&'(l)* 4ru#o de #r5c!ica3 /012 / /
ÍNDICE OBJETIVOS:...................................................................................................0
I.
I.1.
OBJETIVOS GENERALES:........................................................................0
I.2.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:.......................................................................0
METODOLOGÍA EXPERIMENTAL:....................................................................4
II.
A. REACTIVOS Y SOLUCIONES......................................................................27 B. PROCEDIMIENTO.....................................................................................27 Análii C!"#$%"&!á'i(".....................................................................................27 CONDICIONES CROMATOGRAFÍAS ..................................................................2 III.
MATERIALES INSTRUMENTOS Y)O REACTIVOS: ........................................0
III.1. M*+i" +* M$n%*n(i,n: .................................................................................0 III.1.1. M$%*!i$l* * in%!-#*n%": .....................................................................0 III.1.2. E-i/":.............................................................................................0 III.1.0. R*$(%i": ...........................................................................................0 III.2. M*+i" +* A(%i$(i,n:..................................................................................01 III.2.1. M$%*!i$l* * in%!-#*n%": .....................................................................01 III.2.2. E-i/":.............................................................................................01 III.2.0. R*$(%i": ...........................................................................................01 III.0. M*+i" +* '*!#*n%$(i,n: ...............................................................................01 III.0.1. M$%*!i$l* * in%!-#*n%": .....................................................................01 III.0.2. E-i/":.............................................................................................02 III.0.0. R*$(%i": ...........................................................................................02 IV.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:..............................................................03
VI. ANEXOS:.......................................................................................................03
RESUMEN En *l /!**n%* %!$3$4" * 5$ +*$!!"ll$+" *l (-l%i" (*l-l$! +* l$ (*/$ Pichia stipitis NRRL Y-7124 !*$li6$n+" - #$ni/-l$(i,n +*+* - *%$+" in$(%i$ *n
$&$!. El (-$l 5$ *&-i+" -n$ *!i* +* /!"(*+i#i*n%" *(-*n(i$l* %$l* ("#" $(%i$(i,n7 in"(-l$(i,n *n $&$!7 +án+"l* %"+$ l$ ("n+i(i"n* /$!$ -* /-*+$ (!*(*!7 $i#i#" * in"(-l, *n -n #*+i" !i(" 819 #l7 *l (-$l %i*n* %"+" l" n-%!i*n%* -* *%$ l*$+-!$ !*-i*!* /$!$ - ,/%i#" +*$!!"ll". L-*&" +* -n *i+*n%* (!*(i#i*n%" *n *l #*+i" !i("7 l$ %"%$li+$+ +* *%* #*+i" * +il-i+" +*n%!" +* "%!" #*+i" 8in"(-l$(i,n l;-i+$ < l;-i+" $l -* * +*n"#in$ #;ni#" 82== #l /"! - li#i%$(i"n* *n (-$n%" $ n-%!i*n%*7 >$ -* *%* ("n%i*n* "l" l" ("#/"n*n%* n*(*$!i" /$!$ -* *l #i(!""!&$ni#" /-*+$ -3i%i!7 %$l* ("#" '-*n%* +* ($!3"n" -* *n n-*%!" ($" '-* ?il"$. S* %!$%$ *n%"n(* +* "3*!$! > ("#/$!$! ("#" * $ /!"+-(i*n+" *l (!*(i#i*n%" +* l$ 3i"#$$ (*l-l$! ("n l" n-%!i*n%* n*(*$!i" /$!$ %$l $((i,n > $l #i#" %i*#/" ("#" $ +i#in->*n+" *l -%!$%" *n *%* ($" /!in(i/$l#*n%* l$ ?il"$7 l" (-$l '-* /"i3l* +*%*!#in$! /"! *l #@%"+" DNS 8$6($!* !*+-(%"!* ("n l$ #-*%!$ %"#$+$ ($+$ 5"!$ +-!$n%* -n %i*#/" +* 12 5"!$. > l$ &*n*!$(i,n +* /!"+-(%" ("#" *l *%$n"l *l (-$l '-* #*+i+" #*+i$n%* CG 8(!"#$%"&!$';$ +* &$*. S* "3%-" -n !*n+i#i*n%" /!"#*+i" +*: 3i"#$$ +* =720 &)& &l-("$. A /$!%i! +* l$ 3i"#$$ "3%*ni+$ * /-+i*!"n "3%*n*! l" /$!á#*%!" (in@%i(" l" (-$l* '-*!"n -n
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=7229 5! 17 YP)S 170 ? 1= 0 & +* E%$n"l)& +* F!-(%"$7 X)S
=7=9 & +* Bi"#$$)5"!$.
I. INTRODUCCIÓN En l$ $(%-$li+$+ #-(5" +* l" $li#*n%" "n "3%*ni+" &!$(i$ $l #$n*4" > ("n"(i#i*n%" +*l (!*(i#i*n%" +* #i(!""!&$ni#". R*-l%$ *n%"n(* i#/"!%$n%* *l ("n"(i#i*n%" +* l$ ("n+i(i"n* *n -* *%" #i(!""!&$ni#" /-*+$n "/%i#i6$! - /!"+-(%". P$!$ *ll" l$ /!*/$!$(i,n +* #*+i" +* (-l%i" /$!$ *%" #i(!""!&$ni#" * -n 3-*n /-n%" +* /$!%i+$ /$!$ ("n"(*! "3!* ("#/"!%$#i*n%"7 $; ("#" %$#3i@n *l *&-i#i*n%" +* l$ (in@%i($ n" /!"/"!(i"n$ +$%" #-(5" #á /!á(%i(" > *?$(%" "3!* l$ *l"(i+$+ > ($!$(%*!;%i($ +*l (!*(i#i*n%" +*l #i(!""!&$ni#" %!$%$+". L$ /!*/$!$(i,n +* #*+i" /$!$ *l +*$!!"ll" +* /!"(*" +* '*!#*n%$(i,n * -n$ *%$/$ '-n+$#*n%$l /$!$ $*&-!$! l$ /!"+-(%ii+$+ +* l" #i#". L" ("#/"n*n%* +* l" #*+i" ("n%i%->*n l" *'*(%"!* *?%*!n" +* n$%-!$l*6$ -;#i($ -* +**#/*$n -n !"l **n(i$l *n l" /!"(*" >$ -* +*3*n (-#/li! ("n l" !*-*!i#i*n%" +*l (!*(i#i*n%" > +* '"!#$(i,n +* /!"+-(%" > $+*#á -#ini%!$! *n*!&;$ /$!$ l$ ;n%*i +* #*%$3"li%" > /$!$ *l #$n%*ni#i*n%" (*l-l$!. N" "3%$n%* -* l" #i(!""!&$ni#" $!;$n ("ni+*!$3l*#*n%* !*/*(%" +* l" n-%!i*n%* -* /-*+*n n*(*i%$!.
E $; -* /$!$ *%$ /!á(%i($ 5*#" (*n%!$+" n-*%!$ $%*n(i,n *n *l #i(!""!&$ni#" 8 pichia stipitis NRRL Y 7124 7 ini(i$n+" l$ !*i*#3!$ ("#" *%$+" +* (*/$ ("n&*l$+$7 /$!$ l-*&" !**#3!$!l" *n #*+i" !i("7 *#/l*$n+" ("#" '-*n%* +* ($!3"n" l$ ?il"$7 /!"(-!$n+" - !á/i+$ $(%i$(i,n7 /$!$ /"+*! *#3!$! l$ l*$+-!$ *n -n %i*#/" +*%*!#in$+" > *n -n #*+i" #;ni#".
II. OBJETIVOS
2.1OBJETIVOS GENERALES:
Di*$! > !*$li6$! -n$ *?/*!i*n(i$ +* (-l%i" (*l-l$! /"! l"%* *n #$%!$(*7 *#/l*$n+" -n$ (*/$ Pichia stipis NRRL Y12H7 *$l-án+"* *l *'*(%" +* l$ '-*n%* +* ($!3"n" > l$ *l"(i+$+ +* $&i%$(i,n *n l$ (in@%i($ +* (!*(i#i*n%" > l$ /!"+-((i,n +* *%$n"l.
2.2OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
Di*$! > /!*/$!$! *l #*+i" li-i+" +* (-l%i". L"&!$! l$ $(%i$(i,n (*l-l$! > +*$!!"ll" +*l in,(-l". D*%*!#in$! l$ (in@%i($ +* (!*(i#i*n%" +* pichia stipitis NRRL Y
12H. D*%*!#in$! l$ (in@%i($ +* ("n-#" +* l$ '-*n%* +* ($!3"n". D*%*!#in$! l$ (in@%i($ +* &*n*!$(i,n +* *%$n"l.
D*%*!#in$! *l
μ M
7
qs
> l" !*n+i#i*n%" +*l n-%!i*n%*
li#i%$n%* *n (@l-l$ > *n *%$n"l7 $+*#á +* l$ !*/*(%i$
/!"+-(%ii+$+* *n (@l-l$ > *n *%$n"l. E$l-$! *l $l"! +*l / +-!$n%* l$ (in@%i($.
III. MATERIALES Y METODOS
7a!erial 8iol9%ico3 Ce#a de Pichia stipis NRRL Y12H -RE-ARACI:N DE S:LIDO DE 7ANTENCI:N3 7a!eriales " Equi#os3 •
"$"n" "n"$5#6"
•
*"'" E'$&n&8&' %& 23 $.
•
*&69&'! uns&n
•
G'"%#$$"
•
: Tu;!s %& &ns"8! 6!n "<"s.
•
P#<&" %& 1 $.
•
V"s! %& <'&6#<#"%!.
•
C!6#n" " g"s
•
O$$" " <'&s#(n.
•
V"'#$$" %& =#%'#!
•
Gu"n&s.
•
Es<>u$"
Reac!ivos " nu!rien!es3 • • • • •
Agu" %&s#$"%". E?'"6! %& $&="%u'". P&<!n". E?'"6! %& "$" Ag"'.
-RE-ARACI:N DE 7EDIO DE ACTIVACI:N3 7a!eriales " Equi#os3 •
Balanza analítica
•
2 Matraz de 125 ml.
•
Una probeta de 100ml
•
Micropipeta
•
Estufa
•
Algodón
•
asa
•
!arilla de "idrio
•
Esp#tula
Reac!ivos " nu!rien!es3 •
lucosa
•
E$tracto de le"adura
•
%olución de sales
•
Agua destilada
•
Alco&ol
-RE-ARACI:N DE 7EDIO DE ;ER7ENTACI:N3 7a!eriales " Equi#os3 •
Matraz de 1 '
•
2 Matraces de 125 ml.
•
!arilla de "idrio
•
Balanza analítica
•
asa ( algodón
•
)lla a presión
Reac!ivos " nu!rien!es3
lucosa
*+,-2%)-
%olución de sales
/,2)-
Mg%)-.,2)
E$tracto de 'e"adura
Agua destilada Alco&ol
INOCULACI:N AL 7EDIO DE ACTIVACI:N3 *"&'#"$&s 8 &@u#
Matraz de 125 ml.
•
Algodón
•
asa
•
Agua destilada
•
Aza bacteriológica
•
%&aer
•
*&69&'! uns&n '5
Balanza Analítica
Espectrofotómetro
Horno Esterilización
Agitador
Centrífuga
Autoclave
Incubadora
IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES
Shaker
V. CONCLUSIONES
VI.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
VII. ANEOS
