UNIVERSIDAD NORBERT WIENER
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA CONTROL MICROBIOLÓGICO DE LOS MEDICAMENTOS MEDIC AMENTOS”
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PRACTICA N°2 - PREPARACIÓN
DE MEDIOS DE CULTIVO Y SU FORMA DE ESTERILIZACIÓN.TÉCNICAS DE SIEMBRA Y ESTUDIO DEL DESARROLLO BACTERIANO.
INTEGRANTES:
ANDRADE HUALLPA, MERCEDES
ESTRADA LAPAS, GUILLERMINA
QUISPE CUSCO, JENNY
VENTO AQUINO, MIDORI
VENTURA VALDERA, FLOR
VIDAL OLORTEGUI, CLAUDIA
Q.F. GALLARDO JUGO, TERESA
DOCENTE: SECCIÓN: FB6N1 LIMA – 2017
PRACTICA N°2 - PREPARACIÓN
DE MEDIOS DE CULTIVO Y SU FORMA DE
ESTERILIZACIÓN.TÉCNICAS DE SIEMBRA Y ESTUDIO DEL DESARROLLO BACTERIANO
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO Y SU FORMA DE ESTERILIZACIÓN Nos entregaron para esta práctica medios de cultivo ya pesados, fueron los siguientes medios:
Sólido:
Agar Tripticase de Soya (TSA), Agar MacConkey para placas petri Agar SIM (Azufre – Indol – Motilidad) Agar TSI (triple sugar iron ) para tubos Agar Manitol Salado (AMS)
Líquido:
Caldo: Tripticase de Soya (TSB) y/o Caldo peptonado.
Y se añadió agua destilada con la cantidad que nos indicó la profesora. En el caso del caldo se homogenizo rápido porque es un medio líquido, pero en los agares se homogenizo y tuvimos que calentar en baño maría hasta que se disolvieran por completo. A cada frasco con medio de cultivo lo forramos la tapa con papel kraff, pegamos una cinta indicadora para autoclave luego rotulamos con su nombre de cada medio de cultivo, indicando la fecha de preparación y a quienes pertenece. En el caso del agar TSI y SIM lo dispensamos en tubo, lo mismo se realizó para el caldo TSB. Para los tubos armamos su torunda de algodón (que nos sirve como tapitas).
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Una vez que los frascos y tubos identificados se llevan a esterilizar por autoclave a 15 lb de presión es decir a 121 ° C por 15 minutos.
Terminado el proceso de esterilización sacar los medios con mucho cuidado (utilizar guantes especiales para calor húmedo), y enfriarlos a chorro de agua fría para trasvasarlo a placas Petri de vidrio estériles.
Los tubos estériles dejarlo en la gradilla solo el caso del SIM y TSB, los tubos que contiene agar TSI se deben inclinar un poco para que tengan la forma de pico de flauta.
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Una vez realizado su dispensación de cada agar y tubos rotular a cada uno de ellos identificando que medios son y la fecha de preparación.
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PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
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TÉCNICAS DE SIEMBRA Y ESTUDIO DEL DESARROLLO EN MEDIOS DE CULTIVO: A.SÓLIDOS 1. Medios de cultivo:
Agar Nutritivo Agar Salado Agar de Sangre
2. Cultivos de Gram (+):
Staphylococcus aereus Staphylococcus epodermidis Staphylococcus pyogenes Streptococcus agalactiae Streptococcus pneumoniae
3. Procedimiento: Con el asa en aro previamente esterilizada, tomar una asada del cultivo de microorganismos, y sembrar por el método de dispersión y agotamiento en las placas
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4. Resultados:
B.- SEMISÓLIDOS Y LÍQUIDOS 1.- Medios de cultivo:
Agar caldo tioglicolato Agar de gelatina
2.- Cultivos de Gram (+):
Staphylococcus aereus Bacillus subtilis
3.- Procedimiento: Con el asa en aro previamente esterilizada, tomar una asada del cultivo de microorganismos, y sembrar en los tubos de ensayo.
4.-Resultados:
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CUESTIONARIO 1.- Qué importancia tiene el uso de los medios sólidos? Eduardo y teddy 1980 , sostiene que el uso del principal medio solido es para el aislamiento de hongos y bacterias, y para su mantenimiento. El agar es una sustancia inerte polisacárida (hidrato de carbono) que se extrae de las algas. Como esta sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo. Este conjunto convenientemente esterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos de ensayo y presentan la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias, "procesos que antes no eran posibles en medio líquido"1.
2.-¿Cómo controlaría si el medio de cultivo preparado está listo para realizar una siembra? Los medios preparados listos para usar tienen un tiempo limitado de conservación, que es de varios meses si las condiciones de almacenamiento y transporte son las adecuadas. - Se recomienda su almacenamiento por regla general por debajo de los 20ºC y protegidos de la luz. - Algunos medios deben conservarse entre 2-8ºC, siendo este requisito especificado en la etiqueta del producto. - Los medios de cultivo con Agar no deben guardarse por debajo de 0ºC, ya que se alteraría la estructura del gel. - La pérdida de agua puede provocar precipitados o hacer que cristalicen ciertas sustancias del medio de cultivo, así como originar grietas en las placas preparadas. En los medios de cultivo que deben refundirse y que deben contener aditivos lábiles, se suministra el medio basal preparado y según la necesidad se deben añadir los aditivos de forma estéril 2.
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1.-Duran Villanueva. José Luis . Microbiología. Universidad Nacional Hermilio valdizan. Facultad de Ciencias Agrarias. Perú. 2013 https://es.slideshare.net/WARAUYA20/medios-de-cultivos-metodologa-y-usos
2.-Panreac Química S.A. Manual Básico de Microbiología. 2012.
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