IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KOEFISIEN EKSTINGSI VITAMIN B 12 DENGAN SPEKTROFOTOMETER UV.docx

IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KOEFISIEN EKSTINGSI VITAMIN B 12 DENGAN SPEKTROFOTOMETER UV-VIS

Hari/Tanggal Hari/Tanggal : Jum’at/19 Maret 2015

I. PENDAHULUAN

Vitamin Vitamin B12 disebut disebut juga sianokobalamin siano kobalamin adal adala! a! sebua sebua! ! "itamin larut air #ang ber$eran $enting dalam ber%ungsi normaln#a otak dan dan sistem sara%  serta dalam $embentukan dara!&& Vitami dara! itamin n ini meru$aka meru$akan n sala! sala! satu dari dela$an dela$an "itamin B& B& 'mumn#a "itamin ini terlibat dalam metabolisme metabolisme setia$ sel dalam tubu! terutama terutama $engaru!n# $engaru!n#aa $ada sintesis dan regulasi ()* ()* serta serta $ada sintesis asam lemak dan dan $roduksi energi& Vitamin Vitamin B12 meru$akan meru$akan kum$ulan kum$ulan sen#a+a,sen# sen#a+a,sen#a+a a+a #ang ter!ubung se-ara kimia kimia #ang semuan#a memiliki akti"itas sebagai "itamin& "itamin& .e-ara struktur struktur "itamin "itamin B12 adala! "itamin "itamin #ang $aling $aling kom$leks kom$leks dan mengandung mengandung elemen kobal #ang jarang tersedia se-ara biokimia& Biosintesis Biosintesis dari dari struktur dasar "itamin ini !an#a da$at dilakukan ole! bakteri namun kon"ersi antara bentuk,bentukn#a #ang berbeda da$at terjadi dalam tubu!& .uatu bentuk sintesis #ang umum dari "itamin ini sianokobalamin sianokobalamin tidak terjadi di alam namun digunakan dalam ban#ak sediaan %armasi dan su$lemen dan juga sebagai ba!an tamba!an makanan karena kestabilann#a dan !argan#a #ang lebi! mura!& (alam tubu! "itamin ini diub diuba! a! menja menjadi di bent bentuk uk %isio %isiolo logi gisn# sn#a a metilkobalamin metilkobalamin da dan adenosilkobalamin adenosilkobalamin deng dengan an membu embuan ang g gugu guguss sianida n#a n#a +alau +alau$u $un n dalam dalam konse konsent ntras rasii mini minima mal& l& Baru Baru,b ,bar aru u ini ini !idroksokobalamin suatu bentuk kobalamin #ang di!asilkan di!asilkan dari bakteri metilkobalamin metilkobalamin dan adeno adenosilk silkoba obalam lamin in juga juga da$at da$at ditemu ditemukan kan $ada $ada $roduk $roduk %armako %armakolog logii dan su$lem su$lemen en makanan #ang ma!al& egunaaan dari at,at ini masi! di$erdebatkan& .$ektro%otometer 'V,Visible sering digunakan untuk ke$erluan $eneta$an kadar dan identi%ikasi suatu sen#a+a& 3anjang gelombang #ang se-ara maksimum diabsorbsi ditentukan dengan mengukur absorbansi sam$el $ada rentang $anjang gelombang #ang tela! ditentukan& .etela! -a!a#a -a!a#a mele+ati larutan uji energi -a!a#a -a!a#a #ang mele+ati $!ototube $!ototube din#atakan din#atakan sebagai rasio transmitansi -a!a#a 4 -a!a#a #ang mele+ati sam$le ter!ada$ -a!a#a in-ident 40 intensitas -a!a#a dari sumber sebelum mele+ati sam$le& a!a#a #ang diterima $!ototube

Trusted by over 1 million members

Try Scribd FREE for 30 days to access over 125 million titles without ads or interruptions! Start Free Trial Cancel Anytime.





adala! diukur diukur sebagai $ersen transmitans transmitansii 6T atau sebagai sebagai log kebalikann#a kebalikann#a absorbansi *& Jika 4 lebi! ke-il dari 4 o artin#a sam$el men#era$ sejumla! sinar& (alam !al ini terda$a terda$att !ubung !ubungan an #ang #ang seder! seder!ana ana antara antara absorb absorbans ansii * dengan dengan intens intensitas itas -a!a#a -a!a#a #ang #ang mele+ati sam$el dan intensitas -a!a#a sebelum mele+ati sam$el #akni : Bagi Bagian an sinar sinar #ang #ang dise disera$ ra$ akan akan terg tergan antu tung ng $ada $ada bera$ bera$aa ban# ban#ak ak molek molekul ul #ang #ang beinteraksi dengan sinar& (engan kata lain nilai absorbansi sangat bergantung $ada konsent konsentrasi rasi suatu suatu sen#a+a& sen#a+a& Hubung Hubungan an antara antara ban#ak ban#akn# n#aa -a!a#a -a!a#a #ang #ang disera$ disera$ dengan dengan kons konsen entr trasi asi suat suatu u sen# sen#a+a a+a din# din#ata ataka kan n se-a se-ara ra kuan kuanti titat tati% i% melal melalui ui $ersa $ersama maan an

Hukum

: Lambert-Beer :

7og 40 / 4 8 & 7&  &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&  eterangan : 40 8

4ntensitas -a!a#a sebelum mele+ati sam$le

4

4ntensitas -a!a#a setela! mele+ati sam$le

8



8 oe%isien oe%isien ekstingsi ekstingsi #aitu konstanta konstanta #ang tergantun tergantung g $ada $ada si%at alami dari sen#a+a sen#a+a substansi dan $anjang gelombang #ang digunakan untuk analisis

7

8

 8

3anjang atau jarak -a!a#a #ang mele+ati sam$le onsentrasi dari larutan #ang dianalisa

oe%isien ekstingsi sering $ula din#atakan dalam koe%isien absor$ti"itas molar& )ilai absor$ti"itas molar da$at ber"ariasi& (alam $engukuran kemurnian suatu sen#a+a da$at dilakukan dengan menentukan !arga sera$an relati%n#a& .era$an relati% adala! $erbandingan !arga !arga sera$an $ada 2 ujung ujung $anjang $anjang gelombang gelombang tertentu dimana untuk at tertentu tertentu besarn#a tertentu $ula se!ingga da$at digunakan untuk mengidenti%ikasi kemurnian at tersebut&

II. TUJUAN

1& Mema!ami Mema!ami $rinsi$ identi%ik identi%ikasi asi "itamin B12 B12 melalui metode metode s$ektro%otom s$ektro%otometer eter 'V,V 'V,V4. 4. 2& Menent Menentuka ukan n koe%isien koe%isien ekstin ekstingsi gsi absor$t absor$ti"i i"itas tas molar molar  alat s$ektro%otometer 'V,V4. 'V,V4.

ε

 melalui "itamin B12 dengan





*& *7*T (*) B*H*) *lat #ang digunakan $ada $raktikum ini adala! s$ektro%otometer 'V,V4. 'V,V4. Tabung Tabung reaksi ;elas beker Tisu 3i$et Mortar kertas saring -orong erlenme#er& Ba!an #ang digunakan $ada $raktikum ini adala! "itamin B12 a
B& 3=>.?('= ?=J* B&1 3re$arasi sam$el (itimbang sam$e B 12 dilarutkan dengan @ ml a
B&2 3engukuran nilai sera$an relati% (in#alakan alat minimal 15 menit sebelum digunakan& (isia$kan larutan blanko a
IV. HASIL PENGAMATAN PENGAMATAN DAN D AN PEMBAHASAN PE MBAHASAN

3ada $raktikum kali ini dilakukan dilakukan identi%ikasi identi%ikasi "itamin "itamin untuk mengeta!ui mengeta!ui kemurnian kemurnian "itamin B12 #ang terkandung dalam sam$el #ang akan dianalisa serta melakukan $eneta$an koe%isien ekstingsi "itamin B12 dengan alat instrumentasi s$ektro%otometer 'V,V4.& .am$el





Tabel I. Hasil Pe!a"a#a s$e%#&'('#'"e#e& UV-VIS

3anjang ge gelombang n nm

.era$an

550 C1 2D@ onsentrasi Vitamin B12 .truktur Vitamin B12

0C@A 252D 10&000

oe%isien ekstingsi 

ε



5955 2200 00@D 11A@C0

Berdasarkan Berdasarkan $raktikum $raktikum #ang dilakukan dilakukan di$erole! di$erole! sera$an $ada $anjang $anjang gelombang gelombang 550 nm C1 nm dan 2D@ nm masing,masi masing,masing ng adala! 0C@AE 0C@AE 252DE 10&000& 10&000& (ari sera$an sera$an diatas di$erole! nilai sera$an relati% #aitu C9A untuk C1/550 dan 0252D untuk C1/2D@& Jika dibandingkan dengan literatur maka !asil #ang di$erole! belum sesuai& (imana sera$an relati% sianokobalamin sianokobalamin berdasarkan berdasarkan re%erensi Farmako$e 4ndonesia 4ndonesia ?disi 4V !al& D2 G D2A adala! 15 G A5 untuk C1/550 dan 1&D5,1&9@ untuk C1/2D@& .e!ingga da$at dikatakan ba!+a "itamin B12 #ang terkandung dalam sam$el )eurobion tidak murni melainkan adan#a kandungan "itamin lain se!ingga !asil #ang di$erole! tidak sesuai dengan #ang terda$at dalam %armako$e& Hal ini disebabkan berdasarkan data #ang di$erole! dari Mer-k ba!+a )eurobion meru$akan obat #ang mengandung sejumla! "itamin selain "itamin B12 #aitu "itamin B1 dan "itamin BC dimana "itamin,"itamin tersebut meru$akan "itamin neurotro$ik #ang #ang da$a da$att ber%u ber%ung ngsi si untu untuk k mem$ mem$er erba baik ikii siste sistem m metab metabol olism ismee tubu tubu!& !& (alam (alam satu satu $il $il )eurobion terkandung ketiga "itamin tersebut dengan dengan kom$osisi #ang tertulis $ada tabel 44&





"itamin B1 "itamin BC "itamin B12

100 mg 200 mg 100 mg

.ianokobalamin memiliki dua $un-ak sera$an dalam s$ektrum 'V,V4.& (ua $un-ak sera$an ini disebabkan ole! $romosi elektron dari $asangan elektron bebas gugus karbonil dan delokalisasi elektron ikatan rangka$ terkonjugasi dari orbital $i ikatan ke orbital $i anti, ikatan& oe%isi oe%isien en ekstin ekstingsi gsi meru$a meru$akan kan konstan konstanta ta #ang #ang tergan tergantun tung g $ada $ada si%at si%at alami alami dari dari sen#a+a substansi dan $anjang gelombang #ang digunakan untuk analisis& )ilain#a da$at ber"ariasi& oe%isien ekstingsi juga meru$akan absor$ti"itas molar #ang menunjukkan besarn#a -a!a#a #ang tersera$ ole! sen#a+a #ang dianalisis& Menurut !ukum 7ambert Beer nilai koe%isien ekstingsi berbanding lurus dengan sera$an& Berdasarkan !asil $er!itungan diketa!ui koe%isien ekstingsi  untuk $anjang gelombang 550 nm C1 nm dan 2D@ masing, masing adala! 5995E 2200 dan 00@D& )ilai koe%isien koe%isien ekstingsi #ang $aling besar terda$at $ada $anjang gelombang 550 nm #ang menunjukkan ba!+a $en#era$an $en#era$an -a!a#a $ada $anjang gelombang ini $aling ban#ak diantara $anjang gelombang C1 nm dan 2D@ nm&

V. KESIMPULAN KESIMPULA N

Berdasarkan Berdasarkan $raktikum #ang di$erole! di$erole! da$at diketa!ui diketa!ui ba!+a "itamin B12 #ang terda$at dalam sam$el )eurobion belum murni dan diketa!ui koe%isien ekstingsi  untuk $anjang gelombang 550 nm C1 nm dan 2D@ nm smasing,masing adala! 5995E 2200 dan 00@D&

VI. DAFTA DA FTAR R PUSTA PUS TAKA KA

Buda"a Buda"ari& ri& 2001& The Merck Index. Encyclopedia od Chemicals, Drugs, and Biologicals. T!irteent! ?dition& !ite House : Mer-k Mer- k I o& 4n-& 3age 11D0& 11D0& (itjen 3>M& 1995& Farmakope 1995& Farmakope Indonesia. ?disi 4V& Jakarta: (e$artemen ese!atan =e$ubik 4ndonesia& Jakarta& Halaman D2 G D2A&





LAMPIRAN

)ilai .era$an , ,

C1/ C1/55 550 0 8 252 252D/ D/0 0C@ C@A A 8 C9 C9A A C1/ C1/2D 2D@ @ 8 25 252D 2D/1 /10& 0&00 000 0 8 02 0252 52D D

3eneta$an koe%isien ekstingsi 7 8 11A@C gr/10 ml 8 11A@C0 ,

,

,

7og 40 / 4 8 & 7&  0C@A 8 & 11A@C0& 1  8 5995 7og 40 / 4 8 & 7&  252D 8 & 11A@C0& 1  8 2200 7og 40 / 4 8 & 7&  10&000 8 & 11A@C0& 1  8 00@D







Ba,asa Ke"+&ia S#&+%#+& G+!+s %&'"'('& Pe&be*aa $aa! !el'"ba! se&a$a *e!a s#a*a& si!i(i%a a#a+ e!!a. Kl' /a ,+b+!%a *e!a &+"+s la"be&# bee&

IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KOEFISIEN EKSTINGSI VITAMIN B 12 DENGAN SPEKTROFOTOMETER UV.docx

Recommend Documents